经兔肝动脉自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化的研究

目的 评价自体骨髓干细胞经肝动脉移植对兔肝硬化模型的治疗作用,了解促肝细胞生长素(pHGF)在干细胞移植治疗中的作用,为干细胞移植的临床应用提供实验研究基础.方法 用皮下注射四氯化碳(CCl4)橄榄油溶液的方法复制兔肝硬化模型.25只肝硬化模型兔根据治疗方法不同分为对照组(5只)、干细胞移植组(10只)和移植+pHGF组(10只).无菌条件下从兔胫骨上端抽取骨髓4～5 ml,采用密度梯度离心法分离骨髓干细胞,在透视下将分离的骨髓干细胞经肝动脉移植于肝脏.术后移植+pHGF组隔日静脉内注射pHGF 2 mg/kg共20 d.然后在移植后4、8、12周分别抽血检测肝功能,12周时取肝脏行病理学检查.分别对3组12周时肝功能指标进行比较,各组间比较用方差分析.结果 在移植骨髓干细胞后,动物肝功能逐渐改善,至移植治疗后12周,各组肝功能与术前比较均有明显改善.干细胞移植组术后12周,兔血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)逐渐降低,由术前(73.0±10.6)、(152.4±22.8)U/L分别降至移植12周后的(48.0 ±1.0)、(86.7±2.1)U/L(F值分别为72.38、78.86,P值均<0.05);白蛋白(ALB)和凝血酶原活动度(PTA)逐渐上升,分别由(27.5±1.8)g/L和28.3%上升至干细胞移植后12周的(33.2±0.5)g/L和44.1%(F值分别为56.37、126.47,P值均<0.05);但12周时干细胞移植组除PTA外,其他上述血清酶改变与对照组相比差异无统计学意义(P值均>0.05).而干细胞移植+pHGF组肝功能指标改变较移植组迅速,术后12周时ALT、AST分别降至(43.3±0.6)、(78.7±4.0)U/L,而ALB、PTA上升至(35.7±0.4)g/L和50.5%,这些指标改变与对照组相比均差异均有统计学意义(F值分别为47.38、23.52、52.27、174.45,P值均<0.05).病理学检查显示干细胞移植组肝细胞形态较规整,无明显细胞坏死和变性,假小叶结构仍存在,但肝组织纤维化程度较对照组明显减轻;干细胞移植+pHGF组肝结构的改善更明显.免疫组织化学染色发现肝组织内散在分布有CD34<'+>肝样细胞,并且这些肝样细胞在不同组数量差异较大,干细胞移植组较对照组多,移植+pHGF组最多.结论 自体骨髓干细胞移植对肝硬化有一定的治疗作用;促肝细胞生长素可促进干细胞在肝脏的归巢与分化,与骨髓干细胞移植有协同治疗作用.     

经肝动脉微球支架自体骨髓干细胞移植治疗兔肝硬化的实验研究

目的探讨自体骨髓干细胞经肝动脉移植治疗兔肝硬化模型的治疗作用,评价微球支架在干细胞移植过程中的协同作用。方法将35只雄性大白兔分为正常对照组及模型对照组、移植Ⅰ组和移植Ⅱ组并制备兔肝硬化模型。将体外分离纯化的骨髓干细胞,经肝动脉移植于移植Ⅰ组大白兔的肝脏,在体外将自制的壳聚糖微球支架和骨髓干细胞混匀后经肝动脉移植于移植Ⅱ组大白兔的肝脏。在移植后1、2、4、8、12周分别检测大白兔的肝功能,12周行肝脏病理学检查。结果在干细胞移植12周后移植Ⅰ组大白兔的血清ALT、AST、总胆红素(TBIL)逐渐降低,白蛋白(ALB)逐渐升高,活化部分凝血激酶时间(APTT)逐渐缩短,到移植术后第12周这些改变与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。而移植Ⅱ组动物肝功能指标改变较移植Ⅰ组迅速,与模型对照组比较有统计学差异(P<0.01或P<0.05)。在移植术后12周时,移植Ⅱ组比同一时期的移植I组大白兔的肝脏功能改善更显著,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。病理学检查显示移植Ⅰ组、移植Ⅱ组肝细胞形态较规整,无明显水肿和变性,假小叶结构仍存在,但肝组织纤维化程度较对照组明显减轻。结论自体骨髓干细胞移植对肝硬化有一定的治疗作用,而微球支架与干细胞移植对肝硬化的治疗具有协同作用。     

同种异体骨髓基质细胞肝内移植治疗急性肝损伤的实验研究

目的 探讨同种异体骨髓基质细胞(BMSCs)移植到D-氨基半乳糖(D-Gal)诱导的兔急性肝损伤模型的治疗效果.材料与方法 BMSCs由雄性白兔的股骨和胫骨的骨髓中提取,分离、培养及传代3周并观察其形态学特征,然后直接肝脏注射移植到D-Gal诱导的同种雄性兔的急性肝损伤模型内.实验组(n=24):为直接肝脏内注射5 ml BMSCs(约2×107个);对照组(n=34):为直接肝脏内注射5ml D-Hanks液.每天观察各组实验兔的行为变化、存活率、肝功能[丙氨酸氨基转移酶(ALT),谷草转氨酶(AST),白蛋白(ALB)和总胆红素(TBIL)]的改变;BMSCs移植后1、2、4周分别处死两组实验兔,观察肝脏组织病理学变化及肝脏坏死程度,参照评分标准.两位组织病理学医师双盲予以各实验动物的肝脏组织标本评分.结果 实验组1周后的存活率高于对照组(95.8%vs 70.6%,P＜0.05),而1～2周后的存活率较对照组未见显著性改善(100%vs82.4%,P＞0.05).肝功能的检测显示:与对照组比较,实验组在细胞移植后血清ALB明显升高(P＜0.05),ALT和AST均有显著性降低(P＜0.05),但两组的TBIL水平的变化并无统计学意义(P＞0.05).组织病理学评分的结果显示:与对照组比较,BMSCs移植到受损肝脏后可显著减轻肝脏坏死程度及刺激肝细胞再生进而发挥强大的抗坏死作用(P＜0.001).结论 同种异体BMSCs移植可加速修复D-Gal诱导的兔严重急性肝损伤.BMSCs直接肝内注射移植为实验动物模型简单实用的移植方式.     

自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化失代偿的临床研究

目的：研究肝动脉插管自体骨髓干细胞移植对肝硬化失代偿和慢性重症肝病的治疗作用。方法：从患者髂后上棘抽取骨髓100~200 m l,分离纯化骨髓源性干细胞,行肝动脉介入将干细胞移植到肝脏。观察移植后的临床症状、术后不良反应、肝功能检测及2年的生存率。结果：自体骨髓干细胞移植后患者症状好转,肝功能明显改善,生存率提高,未发现严重并发症。结论：骨髓干细胞移植对肝硬化失代偿的治疗安全有效,可作为肝硬化失代偿和慢性重症肝病的一种新的治疗方法。     

骨髓间质干细胞移植对肝纤维化模型大鼠治疗效果

目的探讨骨髓间质干细胞(MSCs)对肝纤维化模型大鼠肝功能及肝纤维化的改善情况。方法将39只健康雌性SD大鼠分为对照组(n=14)和肝纤维化模型组(n=25)。对照组给予普通食水喂养;肝纤维化模型组给予四氯化碳液体橄榄油混合液皮下注射及乙醇喂养,建立大鼠肝纤维化模型。建模成功后将存活的大鼠随机分为对照组、模型组和移植组(每组各9只)。取健康SD大鼠骨髓,利用全骨髓贴壁的方法原代培养骨髓MSCs,然后将MSCs通过大鼠尾静脉对肝纤维化模型大鼠进行移植。移植后4周,检测血清白蛋白、转氨酶、胆红素、Ⅳ型胶原;HE和Masson染色观察肝纤维化程度。结果 MSCs移植后4周,移植组和模型组大鼠肝的纤维组织增生较对照组大鼠重,差异有统计学意义(P<0.01);但移植组大鼠肝的纤维组织增生较模型组大鼠显著减轻,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组和移植组的肝功能较对照组差,差异有统计学意义(P<0.01);但与模型组比较,移植组大鼠血清白蛋白显著增高,胆红素、转氨酶、Ⅳ型胶原显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肝纤维化模型大鼠骨髓MSCs移植4周后肝功能改善,肝纤维化程度显著减轻。     

同种异体骨髓基质细胞直接穿刺肝内移植治疗急性肝损伤的病理改变

目的观察同种异体骨髓基质细胞（BMSCs）经直接穿刺移植到急性肝损伤兔肝的病理改变。方法由雄性白兔的股骨和胫骨骨髓中提取BMSCs后分离、培养及传代3周,然后直接肝脏注射移植到D-氨基半乳糖（D-Gal）诱导的同种雄性兔急性肝损伤模型内。实验组（n=24）为直接肝脏内注射5mLBMSCs（约2&#215;10^7个/mL）;对照组（n=34）为直接肝脏内注射5mLD-hanks液。BMSCs移植后1、2、4周分别处死2组实验兔,观察肝脏组织病理学变化及肝脏坏死程度。参照评分标准,2位组织病理学专业人员采用双盲法对各实验动物的肝脏组织标本进行评分。结果与对照组比较,实验组的肝脏坏死程度减轻、肝细胞再生显著;2组组织学评分有统计学意义（P〈0.001）。结论BMSCs直接穿刺移植到D-Gal诱导的兔严重急性肝损伤的肝脏后可显著减轻肝脏坏死程度并刺激肝细胞再生,进而发挥强大的抗坏死作用。     

输注自体骨髓问充质干细胞对小型猪异基因移植肝的保护作用研究

目的 观察经门静脉输注的自体骨髓间充质干细胞(BMSCs)在移植肝脏中的分布情况和对移植肝脏的保护作用. 方法 版纳小型猪(供体)和西藏小型猪(受体)各16只配对行肝移植.受体随机分成对照组和处理组,每组8只.对照组只做原位肝移植,处理组在原位肝移植的基础上于术中经门静脉注射1×10 9个预先经BrdU标记的受体自身BMSCs,术后第3、7、10天静脉采血榆测肝功能,术后检测标记的间充质干细胞在肝脏局部的分布状况,同时检测其在脾、肺组织中的分布状况.结果 BrdU标记的间充质干细胞主要聚集在移植的肝脏中,脾、肺组织中几乎没有分布.术前两组血清谷氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST)比较无明显差异(P＞0.05),术后处理组受体血清中AST和ALT总体水平明显低于对照组(P＜0.01).术后第7天,处理组肝组织轻度淤血,血管周围有少量炎性细胞浸润,肝细胞点状坏死,中性粒细胞浸润.而对照组术后第3天,移植的肝脏中可见汇管区大量炎症细胞聚集、肝细胞浑浊、气球样变性,并出现不同程度的点状、灶状坏死. 结论 肝移植术导致移植肝脏的微环境变化,BrdU标记受体自身BMSCs在肝组织中聚集分布,对移植肝脏有保护作用.     

磁标记干细胞肝移植的MR活体示踪研究进展

肝脏干细胞移植不但可以替代坏死的组织,还可刺激受体组织再生以达自身修复;此外,通过体外基因修饰肝脏干细胞,再移植给相应基因缺陷的受体肝脏以分化为具有正常功能的肝细胞,可以治疗肝脏代谢疾病.目前人骨髓干细胞自体移植技术已应用于临床终末期肝病的治疗,而且取得了较好的疗效.     

门静脉阻断兔肝VX2移植瘤的DSA评价

目的评价DSA在兔肝VX2移植瘤经门静脉阻断后显示肝动脉与门静脉的价值。方法20只新西兰大白兔随机分为移植瘤体生长3周后门静脉阻断组和移植瘤体未行门静脉阻断对照组,2周后分别行兔肝动脉与门静脉DSA检查。结果DSA在肝动脉分支的显示效果上较血管灌注好,实验组肝左外叶肿瘤组织可见少许肝动脉供血。肝左外叶门静脉分支结扎(PBL)者均能被DSA证实。结论DSA可直观地显示兔肝动脉与门静脉的空间解剖细节,在兔肝门静脉阻断效果的评价中起着重要作用。     

骨髓干细胞移植对急性肝功能损伤大鼠治疗的实验研究

目的：研究不同的骨髓干细胞移植途径对急性肝功能损伤大鼠的治疗作用。方法：采用四氯化碳注射方法,建立大鼠急性肝损伤模型,观察门静脉移植和肝实质内移植干细胞两种方式对急性肝功能损伤大鼠的治疗作用。结果：对于药物致急性肝损伤大鼠,干细胞移植后3周,两种方式的移植组血清白蛋白水平均明显高于阴性对照组（P〈0.05）,且肝实质内移植组明显高于门静脉移植组（P〈0.05）;肝实质内移植组血清谷丙转氨酶明显高于门静脉移植组（P〈0.01）。结论：骨髓干细胞移植可以促进急性肝损伤大鼠血清白蛋白恢复;肝实质内移植骨髓干细胞易引起肝脏损害。     

肝静脉造影测压在肝小静脉闭塞病中的应用价值

 目的 探讨肝静脉造影下检测肝静脉楔压(WHVP)、肝静脉自由压(FHVP)和肝静脉压力梯度(HVPG)在诊断肝小静脉闭塞病(hepatic veno-occlusive disease,VOD)中的应用价值. 方法我科从2003年8月～2006年8月共收治6例VOD患者,3例服用过"土三七",2例服用过"不明中药",1例病因不明.病程18 d～5个月.6例均有肝大和大量顽固性腹水,血清学检查肝炎标记物阴性,肝功能异常,心脏多普勒超声及肝静脉、下腔静脉造影检查无明确支持依据.因患者均有大量腹水而行肝穿活检.为明确诊断,对该6例行肝静脉造影及WHVP和FHVP检测,并以此计算出HVPG.结果 6例经肝静脉造影后测压,WHVP值为29.4～39.0 mmHg平均36.0 mmHg;FHVP值为:16.1～22.0 mmHg,平均为19.4 mmHg; HVPG值为:13.2～19.2 mmHg,平均16.4 mmHg.结论 对可疑VOD患者经静脉插管测定WHVP、FHAP和HVPG检测有助于VOD的明确诊断,且经济、方便、可靠性强,值得推广.     

Hemorrhagic hepatic complications of hepatic puncture-biopsies. Role of echography

The authors report 7 serious haemorrhagic complications of transparietal liver biopsies and define the place of ultrasonography in the prevention of certain accidents, in the diagnosis and assessment of hepatic lesions and in follow-up of the subsequent course.     

医源性肝动脉出血的急诊栓塞治疗

目的探讨医源性肝动脉出血急诊肝动脉造影的表现及其栓塞治疗的疗效。方法对25例医源性肝动脉出血患者行急诊肝动脉造影,确定出血动脉后,以明胶海绵、PVA颗粒和弹簧圈进行急诊栓塞治疗,对医源性肝动脉出血急诊造影的表现及栓塞治疗的疗效进行回顾性的分析。结果14例患者肝动脉造影可见对比剂外溢,6例为肝动脉假性动脉瘤,5例为肝动静脉瘘。25例患者栓塞术后出血停止。栓塞治疗术后随访12个月。所有患者术后无再次出血及肝脏坏死及异位栓塞等严重并发症。结论急诊动脉栓塞治疗是治疗医源性肝动脉出血的一种安全、有效的微创方法。     

多排螺旋CT诊断肝血管瘤及肝脏肿瘤的临床价值

目的探讨CT鉴别诊断肝脏血管瘤和肝脏肿瘤在临床应用价值。方法选择68例患者按自身情况划分成Pc(原发性肝癌)组、Ml(肝脏转移瘤)组和Lh(肝血管瘤)组。对病患整个肝脏进行灌注CT检查,对比分析占位病灶实质部分、周边实质区和正常肝脏实质灌注参数(HBF、HBV、MTT、PS、HAF)。结果病变实质区参数,Pc组中HBF和HAF相比其他两组显著较高;Pc组和Lh组进行比较发现Ml组HBV显然要高;Pc组MTT相比其他两组都要短。病变周边实质区参数,Pc组和Ml组HBF相比Lh组都要显著高一些,Pc组和Ml组HAF相比Lh组要低。Ml组PS相比其他两组要更高一些。正常的肝脏实质参数,Pc组病患的MTT相比其他两组更短;Pc组HAF相比另外两个组要显著增高一些。结论使用CT灌注成像获得的参数值针对肝血管瘤和肝脏肿瘤进行鉴别诊断。     

选择性肝动脉栓塞治疗肝海绵状血管瘤

目的;研究经肝动脉栓塞治疗海绵状血管瘤的方法和效果。方法：将导管超选择插入17例肝血管瘤的供血动脉,以碘油或超液态碘油、明胶海棉和（或）钢圈栓塞。结果：所有病例均成功实施了栓塞治疗。17例中有11例分别于术后1－12个月行CT或B超随访。瘤体缩小＞50％者8例,＞30％者2例,1例缩小不明显。全部患者中临床症状者消失者11例,明显减轻者5例,总有效率94％,术后无严重并发症。结论：超选择性肝动脉栓塞是治疗肝海绵状血管瘤的安全、有效的首选方法。     

Compression of the common hepatic duct by the right hepatic artery

Magnetic resonance (MR) cholangiography has been used wildly as preoperative examination before laparoscopic cholecystectomy (LSC). However, cases that suggested the stenotic lesion of extrahepatic bile duct are not so rare in MR cholangiography. When stenosis is found, further examination is needed to avoid the possibility of bile duct cancer. We reported a case in which the stenotic lesion was diagnosed compression of the common hepatic duct by the right hepatic artery by multislice CT (MCT) cholangiography.