棘刺锚参抗肿瘤因子抗肿瘤作用的实验研究

目的 研究棘刺锚参抗肿瘤因子(Protankyra Bidentata anti-tumor factor,PBATF)在动物水平的抗肿瘤作用.方法 采用小鼠H22肝癌模型、大鼠Walker-256癌肉瘤模型、人体LAX肺腺癌模型、人体QGY肝癌模型,分别测定PBATF对不同肿瘤生长的抑制效应.各种模型分别设PBATF高(5 mg/kg)、中(1 mg/ks)、低(0.5 mg/kg)剂量组、阳性对照组(CTX)和阴性对照组.试验组及阳性对照组昆明种小鼠或Wiser大鼠每组均10只,裸小鼠每组均6只,阴性对照组每次各为2组.腹腔注射给药,每天1次,连续7～10 d.采用常规方法测定PBATF腹腔注射的LD50.结果 PBATF对大鼠Walker-256癌肉瘤的抑瘤率,高剂量组62.63%、中剂量组52.31%、低剂量37.49%.PBATF对人体LAX肺腺癌的抑瘤率,高剂量组56.02%、中剂量组50.60%、低剂量组40.36%.PBATF对人体QGY肝癌的抑瘤率,高剂量组52.07%、中剂量组45.56%、低剂量组33.14%.PBATF对小鼠H22肝癌的抑瘤率,高剂量组59.25%、中剂量组57.74%、低剂量组45.28%.PBATF腹腔注射给药,小鼠的LD50为1.973 g/kg.结论 获得了高纯度的PBATF,能够显著抑制体内外肿瘤生长.     

子宫内膜异位症裸鼠模型的建立及内皮抑素治疗的实验研究

目的 建立人子宫内膜异位症(EMS)裸鼠皮下种植及腹腔注射模型,探讨内皮抑素在EMS治疗中的作用.方法 将4例确诊为EMS并行子宫切除患者的子宫内膜标本植入30只BALB/c雌性裸鼠体内,建立EMS裸鼠模型.其中皮下种植组20只,腹腔注射组10只,2周后比较两组的成模成功率.将皮下种植组成模裸鼠按随机数字表分为对照组(7只)与实验组(8只).实验组以2mg/(1kg·d)的剂量局部注射内皮抑索,对照组局部注射同体积PBS.注射后14d处死,采用免疫组化法检测裸鼠异位内膜中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达水平.结果 腹腔注射组7只成模,皮下种植组15只成模,两组成模成功率分别为70%和75%(P>0.05).实验组异位病灶VEGF表达水平(0.73±0.13)较对照组(1.09±0.12)明显降低(P<0.05).结论 内皮抑素可通过抑制血管生成和降低VEGF的表达发挥治疗EMS的作用.     

荷人胃癌皮下移植瘤及细胞免疫功能重建的裸鼠模型构建及其特征

目的 探讨荷人胃癌皮下移植瘤及细胞免疫功能重建的裸鼠模型构建方法及其特征.方法 10只裸鼠随机分为2组,实验组(n=5)腹腔注射人外周血T淋巴细胞(HuPBTL)并皮下接种人胃癌细胞,对照组(n=5)仅皮下接种人胃癌细胞.观察肿瘤潜伏期、成瘤率和肿瘤体积,流式细胞仪检测裸鼠外周血中人T细胞,MTT法检测实验组鼠脾T细胞体外杀伤作用.皮下瘤行病理组织学检查.结果 两组肿瘤潜伏期无统计学差异(P＞0.05),成瘤率均为100%.第3周末,两组肿瘤体积相比无统计学差异(P＞0.05);实验组鼠外周血中人CD3 、CD4 和CD8 T细胞分别为46.86%±9.14%、31.68%±10.17%和17.91%±1.38%,而对照组鼠外周血中则无人T细胞;当效靶比为20∶1和40∶1时,实验组鼠脾T细胞的特异性杀伤率分别为15.37%±1.58%和19.86%±2.86%,且随着效靶比增高而增强(P＜0.05).两组荷瘤鼠均无肝、肺转移;胃癌细胞保持亲代细胞的形态学特征.结论 采用腹腔注射HuPBTL和皮下接种人胃癌细胞的方法成功构建了人胃癌-HuPBTL-裸鼠模型,能模拟具有一定细胞免疫功能的胃癌患者的荷瘤状态.     

携抗癌药骨水泥对肿瘤模型的治疗效应

目的确定丝裂霉素、长春新碱和5-F尿嘧啶掺入骨水泥后经皮介入治疗小鼠移植瘤的抗肿瘤效应。方法60只昆明种小鼠,体重17~18 g。S180肉瘤细胞1×106在每只小鼠皮下注射,7 d后随机分4组,每组15只;3组为治疗组,每一组各以上述一种抗癌药骨水泥0.5 ml瘤块内注入;另1组为对照组,仅注入单纯骨水泥0.5 ml。每组10只荷瘤小鼠记录肿瘤大小变化,余5只作病理检查。结果3组治疗组中,肿瘤体积在1~10 d内逐日缩小或不增大;而对照组中肿瘤体积持续增大。病理检查见治疗组水泥块周边肿瘤组织片状坏死。结论3种抗癌药骨水泥经皮介入治疗S180肿瘤具有显著抗肿瘤效应。     

咖啡酸苯乙酯对人大肠癌HCT116细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的观察咖啡酸苯乙酯（CAPE）对人大肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法以大肠癌细胞株HCT116为研究对象,对20只BAL13／c裸鼠建立人大肠癌皮下移植瘤模型,随机分为对照组和治疗组各10只。治疗组以CAPE5mg／d,观察两组第7、14、21、28天皮下移植瘤生长情况及裸鼠体重的变化;治疗结束时取肿瘤组织及心、肝、肺、肾、肠等行病理组织学检查,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡。结果CAPE对HCT116裸鼠移植瘤的生长有明显抑制作用,与对照组相比,瘤体重量明显降低、体积减小（P〈0．01）,坏死面积显著增加,凋亡指数明显升高,但对裸鼠体重无明显影响,心、肝、肺、肾、肠等组织未见明显病理学改变。结论CAPE具有抑制人大肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用,可能与其诱导细胞凋亡有关。     

新型肺癌分子探针^18F-氟丙酰-Lladtthhrpwt的合成及其小动物PET显像

目的制备^18F-氟丙酰．Lladtthhrpwt（18F-FP-ZS-6）,并观察其在荷人肺腺癌NCI-H1299裸鼠体内分布。方法利用噬菌体随机展示肽库筛选实验得到多肽Lladtthhrpwt（zs-6）,基于氟多功能化学合成模块PET．MF-2V-IT-I合成常用辅助基团18F-2-氟丙酸对硝基苯酯（NFP）,再与多肽zs-6反应得到18F．FP-ZS-6。将纯化后的18F-FP-ZS-6通过尾静脉注入荷人肺腺癌NCI-H1299裸鼠体内,进行microPET显像。结果成功制备18F-FP-ZS-6。其衰减校正后总产率为（5-2）％（n=3）,放化纯〉95％。Micr0PET显示18F-FP-ZS-6在荷瘤裸鼠肿瘤与腹部呈高摄取,在注射后5、15、25、35、45、55、65、75和85min时,肿瘤摄取值分别为0．329、0．350、0．405、0．433、0．420、0．415、0．402、0．403、0．390％ID／g;在注射后35min达最高,随后缓慢减少。结论成功制备18F-FP-ZS-6,其在荷人肺腺癌裸鼠肿瘤中有-定聚集．有可能作为人肺腺癌显像剂。     

干扰素α-1b对裸鼠HepG-2瘤形成的抑制作用

目的比较干扰素α-1b(IFNα-1b)与聚乙二醇化干扰素α-1b(PEGIFNα-1b)抑制荷HepG-2裸鼠肿瘤形成的效果。方法取对数生长期的人肝癌HepG-2细胞接种于BALB/c雄性裸鼠背部皮下制备荷瘤动物模型。接种后14d按肿瘤大小将荷HepG-2瘤鼠随机分为溶剂对照组、PEGIFNα-1b组和IFNα-1b组3组,均连续5周皮下注射,每周1次。用电子数显卡尺测量肿瘤体积,第5周末全身麻醉处死裸鼠后测量体重、肿瘤体积和重量。结果观察期内PEGIFNα-1b和IFNα-1b对肿瘤的抑制率分别达56%和42%,未见其对荷瘤鼠体重有明显影响。结论PEGIFNα-1b对裸鼠体内HepG-2肿瘤生长有明显的抑制作用。     

6-硫代鸟嘌呤对鼠纤维肉瘤的辐射增敏作用

为探索6-硫代鸟嘌呤(6-TG)在体内较易达到的浓度时能否增加肿瘤抑制率,作者利用甲基胆蒽诱导BALB/c(H-2_d)雄鼠产生的纤维肉瘤(Meth-A瘤)及辐射诱导C3H/He雄性小鼠的纤维肉瘤(RIF瘤)来研究6-TG的辐射增敏作用.用PBS(磷酸缓冲液)洗涤从供体小鼠腹水中获得的单细胞悬液,离心,重悬浮,10~6个细胞予以鼠股部肌肉转种.当肿瘤平均直径达8mm即可实验,随后每周二次测量其大小,实验后90天肿瘤未被触及者视为局部肿瘤抑制.将6-TG悬于PBS液,并配成3mg/ml腹腔注射,对照组给予PBS液.     

不同结构α干扰素对裸鼠体内人肾腺癌形成的影响

目的比较国产长效干扰素PEG IFN α-1b与原型IFNα-1b及进口PEG IFN α-2b对荷瘤裸鼠的治疗效果。方法以对数生长期的人肾腺癌ACHN细胞接种于雄性BALB/c裸鼠体内制备荷瘤小鼠模型,接种后4周按肿瘤大小将ACHN荷瘤鼠随机分为溶剂对照、PEG IFN α-1b、PEG IFN α-2b和IFN α-1b4个组。溶剂或受试药均连续5周皮下注射给药,给药后每周1次测量动物体重及肿瘤体积。给药后第5周末将动物全身麻醉后处死,称量肿瘤重量,并计算肿瘤抑制率。结果显示第5周末PEG IFN α-1b、PEG IFN α-2b和IFN α-1b组的肿瘤抑制率分别为37.68%、44.31%、48.10%,与溶剂对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论3种α干扰素对裸鼠体内ACHN肿瘤生长均有明显地抑制作用。     

反义血管内皮生长因子C转染对人胃癌细胞SCC-7901成瘤性和脉管生成的影响

目的观察反义血管内皮生长因子C(antiVEGF-C)基因转染对人胃癌细胞系SGC-7901成瘤性和脉管生成的影响,探讨VEGF-C在脉管新生和胃癌转移中的作用。方法30只BALB/c裸鼠随机分为转染antiVEGF-C组、转染空白质粒组及未转染质粒组(n=10),采用皮下注射分别转染antiVEGF-C基因、转染空白质粒及未转染质粒的SGC-7901细胞悬液0.2ml(1×107/ml),每2d注射1次,连续3次,观察裸鼠皮下肿瘤的生成速度,并对肿瘤组织中的微淋巴管及微血管密度进行检测。结果转染antiVEGF-C组裸鼠肿瘤生长速度明显减慢且瘤体较小。注射后第1、2、3周,转染antiVEGF-C组肿瘤组织中微淋巴管密度分别为4.0±2.2、6.0±3.1、9.0±2.7每高倍视野(/HF),转染空白质粒组分别为6.0±8.7、9.0±3.5、18.0±7.2/HF,未转染质粒组分别为7.0±4.9、9.0±6.4、19.0±6.5/HF,转染antiVEGF-C组肿瘤组织中微血管密度分别为3.0±2.4、5.0±2.1、8.0±1.7/HF,转染空白质粒组分别为4.0±1.8、6.0±2.7、10.0±1...     

小鼠不同肿瘤模型对放化疗敏感性的研究

目的 建立人食管癌及小鼠不同移植瘤模型,比较放、化疗对小鼠的不同肿瘤模型的抑制作用。 方法 动物模型建立24 h后,将不同肿瘤细胞（淋巴瘤、肉瘤S180、肝癌H22、白血病L1210）的荷瘤IRM-2近交系小鼠随机分为对照组、照射组、环磷酰胺组,每组10只。环磷酰胺组于接种隔日腹腔注射环磷酰胺（25 mg/kg）1次,0.2 ml/只,共4次。照射组于接种后第4天进行全身1 Gy照射,每日1次,连续5 d。将食管癌EC901荷瘤裸鼠随机分为对照组、照射组、5-氟尿嘧啶组,每组5只。照射组于接种后第4天和第8天对肿瘤局部进行2 Gy照射,5-氟尿嘧啶组于接种后隔日腹腔注射5-氟尿嘧啶（25 mg/kg）1次,0.2 ml/只,共4次。所有小鼠于第12天处死,解剖瘤块称重,计算抑瘤率。 结果 裸鼠及IRM-2近交系小鼠皮下移植瘤模型的成瘤率均为100%,放疗对淋巴瘤、肉瘤S180、肝癌H22、白血病L1210荷瘤小鼠的肿瘤有显著的抑制作用,抑瘤率分别为34.57%、32.69%、31.31%和18.32%,与对照组比较差异有统计学意义（t=4.130、3.222、3.581和2.713,P分别为 < 0.01、 < 0.01、 < 0.01、 < 0.05）。放疗对食管癌EC901的抑瘤率为22.99%,但与对照组比较差异无统计学意义（t=1.235,P > 0.05）。化疗对淋巴瘤、肉瘤S180、肝癌H22、白血病L1210、食管癌EC901荷瘤小鼠的抑瘤率分别为74.47%、72.59%、69.12%、77.53%和56.32%,与对照组比较差异有统计学意义（t=12.694、12.208、7.223、11.964和5.266,P均 < 0.01）。 结论 放、化疗对小鼠的不同肿瘤模型均有抑制作用。由于小鼠的品系和瘤源不同,对放、化疗的敏感性也存在差异。     

原位裸小鼠肝癌模型的建立及高场MR成像的实验研究

目的:直接注射法制作裸小鼠肝癌模型,小动物专用高场MR(7.0T)观察其表现.方法:抽取H22肝癌荷瘤鼠腹水,直接注射法种植于20只裸小鼠肝脏,术前及术后不同时间应用MR对种植肿瘤进行观察,并与病理切片对照分析.结果:20只模型小鼠肝脏均可见肿瘤病灶,移植成功率100％,3d后MR检查可见单发肿瘤病灶,直径约(0.6±...     

磁共振弥散加权成像在125Ⅰ粒子组织间植入治疗胰腺癌疗效评估中的应用

目的探讨磁共振（MRI）弥散加权（DWI）成像对¹²⁵Ⅰ粒子组织间植入治疗人胰腺癌裸鼠移植瘤疗效的评估价值。方法将人胰腺癌SWI990细胞株接种于BABL/C裸鼠右下肢旁腹股沟区偏背侧皮下,待瘤体长至8～10 mm进行干预,共有16只裸鼠的成瘤大小适用于实验,分为实验组8只,植入¹²⁵Ⅰ粒子,和对照组8只,植入空载粒子。粒子植入前及治疗后2周和2个月时分别行MRI常规扫描及DWI成像。取瘤体标本行组织病理学检查。结果实验组肿瘤细胞坏死明显,而对照组肿瘤细胞无明显或有少许坏死。裸鼠心、肝、肺、肾及脾脏等组织无明显放射炎症表现。常规MRI成像评价¹²⁵Ⅰ粒子治疗胰腺癌疗效的价值有限。DWI显示实验组内整个肿瘤组织的表观弥散系数（ADC）值在治疗前为（0.001 15±0.000 13）mm²/s,治疗后2周为（0.00I 29±0.000 038）mm²/s,治疗后2个月为（0.002 08±0.000 14）mm²/s,与治疗前相比差异有统计学意义（P<0.05）。实验组肿瘤实质区的ADC值亦较治疗前及对照组增高,但低于坏死区ADC值。结论 ¹²⁵Ⅰ粒子组织间植入治疗人胰腺癌裸鼠移植瘤可导致肿瘤坏死.并对周围脏器是安全的。用常规MRI及DWI成像观察裸鼠皮下移植瘤可行。DWI对疗效评估有重要价值。     

^99Tc^m标记RGD环肽在荷肺腺癌裸鼠中的显像研究

目的制备^99Tc^m标记的含RGD序列的^99Tc^m-联肼尼克酰胺（HYNIC）-c（RGDfK）环肽单体,评价其在整合素表达阳性的肺腺癌严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠肿瘤模型中的生物学分布,并进行显像研究。方法（1）以HYNIC为双功能螯合剂,以三羟甲基甘氨酸（tricine）和乙二胺二乙酸为协同配体,采用二步法制备^99Tc^m标记HYNIC—c（RGDfK）,进行细胞结合实验,测定标记物生物学活性;（2）将荷A549肺腺癌模型小鼠分为7组[第7组作为竞争性抑制组,注射显像剂前0．5h先注射HYNIC-c（CRDGfk）100μg],每组5只,经尾静脉注射7．4MBq的^99Tc^m-HYNIC-c（RGDfK）,于注射后0．5,1,2,4,8,12h处死,计算荷A549肺腺癌小鼠模型各脏器％ID／g,同时采用ROI技术研究^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）在小鼠体内的生物学分布,计算不同时间点的T／NT比值（NT选取肌肉）;（3）取6只荷瘤裸鼠,其中3只为竞争性抑制组,经尾静脉注射7．4MBq的^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）,于注射后0．5,1,2,4,8,12h进行静态1显像。结果^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）的标记率〉90％,放化纯〉95％。^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）与A549肺腺癌细胞特异性结合率最高为36．14％,体内分布实验显示^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）在肾的摄取率始终高于20％ID／g,注射后0．5h肿瘤％ID／g为10．52±1．48,8h为17．26±2．81,12h为8．93±0．90,竞争性抑制组注射后0．5h为2．29±0．85。通过ROI技术测得T／NT在8h达6．87。注射后1h肿瘤可显影,4～8h显影更清晰。结论^99Tc^m标记HYNIC—c（RGDfK）易于制备,具有良好的靶向性。     

131I-17-AAG对荷H460人非小细胞肺癌裸鼠的抗癌效应

目的 观察131I标记17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-KAG)对荷H460人非小细胞肺癌裸鼠移植瘤的抑癌效应.方法 过氧化氢法制备131I-17AAG.建立荷H460人非小细胞肺癌BALB/c裸鼠模型,28只荷瘤裸鼠按随机数字表法分为7组(n=4),瘤内和尾静脉注药各3组,剂量依次为5.5 MBq×2(间隔8 d)、11.0 MSq和5.5 MBq及空白对照组.另设Na131I瘤内给药对照组.8组分别于注药后2,6,24 h及2,3,7,10,16 d各取2只鼠行γ显像.观察肿瘤生长情况,16 d后处死全部小鼠,计算抑瘤率,并做光学显微镜、电镜及免疫组织化学检测.计量数据以x±s表示,采用SPSS 13.0软件进行统计分析.结果 SPECT显像证实131I-17-AAG靶向定位好,能较长时间聚集在瘤体内;各治疗组存在不同程度抑瘤效应,以瘤内间隔给药(5.5 MBq×2)组疗效最好,抑瘤率高达(86.77±4.57)%,尾静脉给药5.5 MBq×2组和11.0 MBq组间差异无统计学意义(q=1.67,P>0.05),余各组间抑瘤率差异均有统计学意义(q=3.16～24.34,P均<0.05);形态学显示抑瘤效应越好,瘤组织破坏越明显;免疫组织化学显示瘤内及尾静脉注药组热休克蛋白90(HSP90)a阳性率[分别为(26.01±3.71)%、(61.57±5.98)%]均较空白对照组[(84.13±5.71)%]下降(t值分别为20.91和6.68,P均<0.05).结论 131I-17-AAG能有效抑制裸鼠非小细胞肺癌的生长,以瘤内注药及间隔给药抑癌效应最佳.     

^99Tc^m-精氨酸-谷氨酸-苏氨酸在荷人肺癌H1299裸鼠体内分布和显像

目的通过研究^99Tc^m-精氨酸-谷氨酸-苏氨酸（RET）在荷人肺癌H1299裸鼠体内的分布及显像,探讨其用于肺癌显像的可行性。方法采用^99Tc^m-直接法标记RET,再行^99Tc^m-RET与NSCLC细胞H1299的结合实验。荷人肺癌H1299裸鼠尾静脉注射^99Tc^m-RET后,行不同时间（15、30min,1、2．4、8、24、48h组各4只鼠）体内分布实验,分别测定组织放射性摄取（％ID／g）;另取荷瘤鼠3只,注射4．81MBq^99Tc^m-RET后于0．5、1、2、4．5、5、6h行γ显像。结果^99Tc^m-直接标记RET的标记率为（93．15±2．02）％,与H1299细胞的最高结合率为（3．56±0．37）％。荷瘤裸鼠尾静脉注射^99Tc^m-RET后4h肿瘤放射性摄取达（4．96±1．05）％ID／g,肝脏、脾脏有较多放射性摄取[（15．89±1．84）％ID／g和（10．83±1．66）％ID／g];而心脏和血液的放射性摄取较少,相应的T／NT分别为5．70±0．21和12．40±0．11。注射^99Tc^m-RET后4．5～6．0h肿瘤显影清晰。结论^99Tc^m-RET具有亲肺癌的特性,有可能成为一种亲肺癌显像剂。     

大蒜素对慢性气道炎症大鼠上皮细胞中NRF2与γ-GCS表达的影响

目的研究大蒜素对慢性气道炎症大鼠上皮细胞中NRF2与γ-GCS表达的影响。方法将30只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和大蒜素治疗组,每组10只。模型组及大蒜素治疗组用两次气管内滴入脂多糖和每日熏香烟法制成大鼠慢性气道炎症模型,大蒜素治疗组在模型制作成功后腹腔注射大蒜素注射液。通过肺组织HE观察气道炎症改变,支气管肺泡灌洗（BALF）细胞记数并分类,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测NRF2mRNA及γ-GCSmRNA表达,检测肺组织GSH、ROS、T-AOC含量。结果大蒜素治疗组气道炎症浸润较模型组明显减轻,大蒜素治疗组BALF中中性粒细胞数目较模型组降低（P〈0.05）;模型组的γ-GCSmRNA及NRF2mRNA表达高于大蒜素治疗组（P〈0.01）;大蒜素治疗组中GSH含量较模型组减少,ROS含量降低,T-AOC上升（P〈0.01）。结论大蒜素可抑制被动吸烟大鼠肺部炎症。     

甘肃棘豆体内生物碱部位活性的研究

目的研究甘肃棘豆生物碱部位对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及对免疫功能的影响。方法将接种S180肿瘤后的小鼠随机分为5组,灌胃10d,停药后24h处死动物,称体重,剥除肿瘤称瘤重,同时解剖小鼠,称脾重、胸腺重,计算脾指数、胸腺指数,用MTT法测定脾细胞增殖率。结果甘肃棘豆生物碱部位具有抗肿瘤作用,以中剂量组作用较明显,与阴性对照组相比有统计学意义（P〈0.05）,但是与阳性对照组相比,抑瘤效果较弱。该药还可以增加小鼠脾指数、胸腺指数,脾细胞增殖率与对照组相比亦有统计学意义（P〈0.05）。结论甘肃棘豆生物碱部位具有抗肿瘤及免疫增强作用。