人类解旋酶样转录因子介导辐射凋亡细胞DNA修复蛋白的降解

目的 探讨人类解旋酶样转录因子(HLTF)转染对辐射诱导细胞凋亡时DNA修复相关蛋白水平的影响。方法 将野生型和RING结构域突变型 HLTF 分别转染人肺癌细胞A549,⁶⁰Co γ射线15 Gy照射诱导细胞凋亡, 用Western blot 检测HRAD17和HRAD52蛋白水平的变化,免疫共沉淀检测特定复合物的存在。结果 γ射线诱导细胞凋亡时, 野生型 HLTF 转染组与对照组相比,DNA修复蛋白HRAD17和HRAD52水平明显降低,而RING结构域突变组与对照组相比则没有明显变化;辐射诱导细胞凋亡时,HLTF可与HRAD17和HRAD52形成复合物。结论 HLTF可介导辐射诱导的凋亡细胞中HRAD17和HRAD52的降解, 其机制可能是通过蛋白质复合物的相互作用使DNA修复蛋白泛素化而降解。     

β辐射致大鼠血管平滑肌细胞凋亡的研究

目的 观察放射性核素^188Re辐射对平滑肌细胞凋亡的影响及其机制，探讨辐射所致平滑肌细胞凋亡在预防再狭窄中的作用。方法 ^188Re进行培养平滑肌细胞的内辐射。通过台盼蓝染色计数、流式细胞术、JAM法DNA碎裂量测定、透射电镜及免疫细胞化学检测等方法，研究辐射后平滑肌细胞的存活率、细胞凋亡率、DNA断裂量、细胞超微结构改变及相关基因表达。结果 放射性浓度＜2.96GBq/L辐射，平滑肌细胞存活率、细胞凋亡率、DNA断裂量及细胞超微结构等未发生明显改变；高剂量辐射下（放射性浓度＞2.96GBq/L），平滑肌细胞存活率显著下降，细胞凋亡率明显上升，细胞DNA断裂量增加，细胞超微结构明显破坏。辐射诱导细胞凋亡过程中，p53、bax表达上调，bcl-2/bax比值下调。结论 能够明显抑制平滑肌细胞增殖的低剂量辐射对细胞存活及细胞凋亡无明显影响，未见细胞超微结构改变及DNA的严重破坏；吸收剂量大于20Gy可导致平滑肌细胞大量凋亡；相关基因p53、bcl-2及bax参与调控辐射诱导细胞凋亡过程。低剂量及低剂量率辐射既能有效抑制细胞增殖，又不明显损伤细胞存活，是临床血管内放射治疗预防再狭窄的理想方法。     

Fas系统与辐射所致细胞凋亡

Ｆａｓ系统在辐射所致的细胞凋亡中起重要作用，其作用过程可能是：ＤＮＡ损伤激活Ｆａｓ系统的表达；Ｆａｓ与ＦａｓＬ结合启动凋亡信号并传递；通过神经鞘磷脂酶的活化，洋生神经酰胺，激活一系列蛋白激酶，启动胞内磷酸化过程，导致ＤＮＡ降解和细胞凋亡，癌基因参与正负调控，使Ｆａｓ系统在生理和病理活动中起调节作用。     

心肌缺血再灌注时细胞凋亡及Bcl-2基因家族产物的调控作用

心肌缺血后及时再灌注可减少心肌缺血损伤,但再灌注引起的钙超载和氧自由基的产生及炎症反应也可导致细胞死亡而损伤心肌。而细胞凋亡被发现是心肌缺血及再灌注(Myocardial ischemia and reperfusion,MIR)过程中心肌细胞死亡的重要形式之一。与坏死不同,凋亡是在细胞和胞外因子的严格控制下的一种有步骤有活性的生理性的自行消亡过程。凋亡细胞最终为临近细胞吞噬,不引起炎症反应。1 心肌缺血再灌注中的细胞凋亡现象 目前MIR模型可采用活体冠状动脉结扎,离体心脏灌流或在细胞培养中模拟缺氧-复氧环境的方法复制。也有应用药物注射法模拟体内MIR模型的报告。凋亡在持续缺血或再灌注期间均可出现,且与缺血程度、模型制造方法、缺血时间长短有关,一般缺血30～45min后的再灌注中凋亡显著。马中富等观察到冠脉病变支数越多,心肌细胞的凋亡现象越明显。 电镜直接观察,电泳检测DNA梯状条带(ladder pattern)可鉴别凋亡细胞,TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end label-     

溶解态的凋亡因子Bax通过MFN2／MFN2刺激线粒体融合

【动态】美国加州大学戴维斯分校的科学家报道细胞凋亡因子Bax也参与调控线粒体的活动。线粒体不断的分开、融合。控制线粒体分裂的蛋白也促进细胞凋亡，相反，控制线粒体融合的蛋白保护细胞免于死亡。当心脏病发作或中风时由于缺氧常会造成细胞死亡。人和老鼠的细胞都有MFN1和MFN2两种蛋白控制线粒体外膜融合，     

Fas系统与辐射所致细胞凋亡

Ｆａｓ系统在辐射所致的细胞凋亡中起重要作用，其作用过程可能是：ＤＮＡ损伤激活Ｆａｓ系统的表达；Ｆａｓ与ＦａｓＬ结合启动凋亡信号并传递：通过神经鞘磷脂酶的活化，产生神经酰胺，激活一系列蛋白激酶，启动胞内磷酸化过程，导致ＤＮＡ降解和细胞凋亡，癌基因参与正负调控，使Ｆａｓ系统在生理和病理活动中起调节作用     

胚胎发育的软骨细胞凋亡

细胞凋亡 (apoptosis)是一种独特的细胞死亡模式 ,在形态上表现为胞核染色质固缩、分离及降解 ,胞质凝缩 ,最后细胞裂解 ,但裂解产物被细胞膜包裹形成凋亡小体 ,凋亡小体被周围细胞摄取并在它们的溶酶体内消化 ,所以不会引起炎症反应。凋亡在生物化学上表现为核小体连接处的DNA双链被切断 ,结果形成许多 180bp～ 2 0 0bp及其倍数的寡核苷酸片段 ,电泳时出现梯形DNA条带 (DNAladder)。在生物体的生长发育及正常组织的平衡稳定中起重要作用 ,但它也出现于许多病理状态下 ,参与了许多疾病的发生与发展过程〔1〕。现就软骨胚胎发育及软骨细…     

Hp/DNA双参数分析放射损伤小鼠骨髓细胞周期、凋亡和Hp

目的：建立结合珠蛋白(Hp)／DNA双参数流式细胞技术，以探讨放射损伤小鼠骨髓细胞中Hp含量与细胞周期和凋亡的关系。方法：小鼠骨髓细胞经70％乙醇固定后，Triton-X100破膜，间接免疫荧光技术标记Hp，PI标记DNA，上流式细胞仪测试。用ModFit软件设双门法分析Hp^ 和Hp^-细胞的细胞周期和凋亡，CELLQuest软件分析Hp^ 细胞比例。结果：γ射线照射后6h小鼠骨髓有核细胞中Hp^ 细胞的比例明显高于未照射对照组，骨髓细胞的凋亡来自于Hp^-细胞，Hp^ 细胞未见凋亡，Hp^-细胞发生的G2/M阻滞比Hp6 细胞严重。这些信息是单用Westem印迹法或单纯DNA分析所不能提示的。结论：Hp/DNA双参数流式细胞技术可用于分析Hp与细胞周期和凋亡的关系，是一种快速、客观的分析方法。     

人脑挫裂伤后神经细胞凋亡及其与caspase-3基因表达的关系

目的观察人脑急性创伤性脑损伤后神经细胞凋亡及其与caspase-3基因表达的关系。方法术中采集12例重型颅脑损伤患者挫裂伤脑组织和脑叶切除组织标本15个，分别应用凋亡细胞原位末端标记法（TUNEL）、DNA琼脂糖凝胶电泳、透射电镜等检测神经细胞凋亡的变化，采用免疫组织化学技术检测caspase-3蛋白的表达，并借助caspase-3荧光分析试剂盒检测caspase-3蛋白酶活性的变化。结果12个挫裂伤脑组织标本中10个透射电镜发现有散在分布、数量不等的凋亡神经细胞；TUNEL染色11个出现阳性凋亡神经细胞；5个DNA出现凋亡特异性的“梯状”电泳带；9个出现caspase-3蛋白超表达；11个caspase-3蛋白酶活性明显增高；凋亡出现时间从伤后4h直到216h，高峰在23-72h。结论急性创伤性脑损伤患者存在神经细胞凋亡，并且具有时间和空间依赖性。caspase-3的超表达与激活参与了人脑创伤性脑损伤后的细胞凋亡过程。     

三氧化二砷对白血病细胞DNA损伤及凋亡相关基因表达的影响

目的：研究三氧化二砷（As2O3)对HL－60，K562和NB4细胞DNA的损伤及凋亡相关基因的调控。方法：用荧光显微技术，单细胞彗星电泳观察As2O3对HL－60，K562及NB4细胞DNA的损伤，用流式细胞术测定As2O3对HL－60，K562及NB4细胞凋亡相关基因Bcl-2和p53的表达，结果：As2O3诱导HL－60，K562和NB4细胞的凋亡时造成了DNA损伤；显著下调三种细胞内Bcl-2蛋白的表达，且Bcl-2下调程度与凋亡有密切关系，上调了p53蛋白的表达。结论：As2O3诱导细胞凋亡时发生了DNA的损伤，诱导凋亡主要是通过下调Bcl-2和上调p53来实现。