苯噻唑力复霉素作用机理的初步研究

本文报告苯噻唑力复霉素对细菌生物大分子合成及超微结构的影响。该药可明显抑制³H-尿嘧啶核苷掺入金黄色葡萄球菌209 p和大肠杆菌2281的RNA;对²H-亮氨酸掺入细菌蛋白质仅有轻微抑制;对³H-胸嘧啶核苷掺入细菌DNA无抑制作用。说明其作用机理主要是抑制细菌RNA合成。掺入试验还表明金黄色葡萄球菌对苯噻唑力复霉素有比大肠杆菌更高的敏感性。10倍于MIC浓度的苯噻唑力复霉素能使上述两种细菌超微结构明显改变。胞质失去完整结构,出现空泡,核糖体消失,但胞壁仍保存。     

三尖杉酯碱的代谢

本文报告³H-三尖杉酯碱在正常及肿瘤鼠体内的吸收、分布和排泄。静脉注射³H-三尖杉酯碱后,大鼠血中放射性迅速降低,快、慢两相的生物半衰期分别为3.5分钟和50分钟。给大鼠静脉注射³H-三尖杉酯硷,注射后15分钟时,药物在各组织中的分布以肾脏为最高,肝、骨髓、肺、心脏、胃肠、脾、肌肉次之,睾丸、血及脑较低。两小时后各组织中的药物浓度均迅速下降,但骨髓的下降较慢,在所有组织中药物浓度居于首位。24小时后则在所测组织中药物浓度均降到相当低的水平。³H-三尖杉酯碱在肿瘤小鼠体内的分布情况与正常大鼠的分布趋势大致相仿。³H-三尖杉酯碱在静脉注射后24小时自大鼠体内排出的总放射性,在尿相当于注射剂量的30.2%,在粪相当于16.6%,其中原型药共占14.5%。此外胆汁也是一条重要排泄途径。静脉注射后24小时可自胆汁排出剂量的24.5%,其中原型药占17.1%。该硷口服给药可迅速吸收入血,但吸收不完全。     

17β-雌二醇对人的类成骨细胞株TE85和U2功能的调节

目的：以人的类成骨细胞株TE85和U2为细胞模型，观察雌激素对细胞功能的影响。方法：³H-胸腺嘧啶参入法测细胞增殖；ELISA法测细胞因子IL-6含量；精氨酸转化法测iNOS活性。结果：IL-1(20 U.mL^-1)和TNFα(50 U.mL^-1)刺激细胞分泌IL-6，并抑制细胞增殖。在TE85细胞，17β-雌二醇(E₂)可抑制IL-6分泌并能对抗IL-1和TNFα对细胞增殖的影响。NOS抑制剂L-NMMA使细胞³H-胸腺嘧啶的参入降低，E₂(1 nmol.L^-1)可对抗L-NMMA的抑制作用。结论：E₂通过减少IL-6分泌和影响iNOS活性而调节细胞功能。     

在人的类成骨细胞TE85中雌激素对活性维生素D作用的影响

目的　观察雌激素对活性维生素D ［1,25(OH)₂D₃］调节人的类成骨细胞TE85作用的影响。方法　以TE85为成骨细胞模型,³H-胸腺嘧啶参入法测细胞增殖,³H-脯氨酸参入法测细胞胶原合成,放射免疫法测骨钙素（BGP）含量,对硝基苯酚法测碱性磷酸酶（ALP）活性。结果　单独以0.5～5 nmol.L^-1 1,25(OH)₂D₃处理细胞96 h,³H-胸腺嘧啶参入被抑制,作用呈剂量依赖性。5 nmol.L^-1 1,25(OH)₂D₃可使细胞ALP活性增加29.7％。 雌二醇（E₂）可取消1,25(OH)₂D₃对细胞增殖的抑制作用。两药合用时能促进细胞胶原、骨钙素及ALP的合成。结论　1,25(OH)₂D₃有促进成骨细胞骨形成的作用。1,25(OH)₂D₃与E₂联合应用时,其促进成骨的作用增强。     

氟尿嘧啶引起反复发作的室上性心动过速1例

<正>氟尿嘧啶(fluorouracil,FU)属于细胞周期特异性抗代谢类药物,主要作用于细胞分裂的S期。其在肝脏转变为5-氟-2-脱氧尿嘧啶核苷酸(Fd UMP),抑制胸苷酸核苷合成酶的活性,使脱氧胸腺嘧啶核苷酸的生成减少,抑制DNA的合成;还可转变为三磷酸氟尿嘧啶核苷(FUTP),掺入RNA中,干扰RNA功能,导致肿瘤细胞凋亡。FU广泛应用于消化道肿瘤、绒毛膜上皮癌、乳腺癌、卵巢癌、皮肤癌等。心脏毒性是其较严重不     

17β-雌二醇长时程作用促进成骨细胞HOS TE85 45Ca摄取及间质矿化

目的研究17β-雌二醇(17β-estradiol,E₂)对HOS TE85细胞骨形成的长时程效应。方法³H-胸腺嘧啶参入法(³H-TdR)测细胞增殖;⁴⁵Ca沉积法测细胞钙摄取;茜素红染色法测间质矿化。结果E₂(0.1～10 nmol·L^-1)作用14 d剂量依赖地刺激细胞³H-TdR参入、增加⁴⁵Ca摄取并增加茜素红染色面积。ICI182,780(1.0 nmol·L^-1)能部分抑制E₂作用,使其³H-TdR参入分别减少了36.56%,19.6%和15.4%,⁴⁵Ca的摄入则分别减少了22.27%,37.28%和40.1%,茜素红染色面积减少。结论E₂通过增加细胞数量、增加钙摄入而促进骨间质生成和矿化。     

三尖杉酯碱对小鼠白血病L-1210细胞和正常骨髓干细胞的影响

用放射自显影技术观察了三尖杉酯碱对小鼠白血病L-1210细胞周期的影响。氚标记的胸腺嘧啶脱氧核苷脉冲标记试验证明,接种后第6天的L-1210细胞的一代周期时间(T_C)为15.8小时,其S期(T_S),G₁期(T_G1),G₂期(T_G3)及M期时间(T_M)分别为10.7,2.0,2.7,0.4小时。腹腔注射三尖杉酯碱30μg/只一次,L-1210细胞的有丝分裂指数(MI)明显降低,其标记指数(LI)及每个细胞的标记颗粒数也明显减少,由S期向G₂及M期移行时间延长。鉴于三尖杉酯碱的限制性毒性为骨髓抑制,我们用脾集落形成试验(CFU-S)研究了三尖杉酯碱对CFW纯种小鼠骨髓干细胞的影响。实验表明,三尖杉酯碱的剂量小于0.5mg/kg时,对骨髓干细胞无明显影响。当剂量高于此剂量时,三尖杉酯碱对骨髓干细胞的杀伤呈剂量依赖性。实验证明,人参总皂甙对三尖杉酯碱的骨髓毒性有一定保护作用。     

三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱诱导人早幼粒白血病细胞的程序性死亡

体外实验证明2×1O^-7 mol·L^-1 三尖杉酯碱和 1O^-7 mol·L^-1高三尖杉酯碱与HL-60细胞作用 4 h，可诱导该细胞产生程序性死亡。提取细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳呈现典型的DNA 梯，同时出现细胞核染色体断裂、核固缩及细胞空泡样变等形态变化。并且在一定范围内具有作用时间和浓度依赖性，二者诱导HL-60细胞程序性死亡作用的强弱与其细胞毒作用平行。     

雌激素促进人的类成骨细胞TE85成骨作用的受体机制

目的：研究雌激素促进人的类成骨细胞株TE85细胞骨形成的作用。方法：用³H-胸腺嘧啶、³H-脯氨酸参入法分别测定细胞的增殖和胶原合成; 紫外分光光度法测定细胞内骨碱性磷酸酶（ALP）活性; 放免法测定细胞内骨钙素（BGP）含量; 放射配基法测定细胞核雌激素受体结合。结果：雌激素（E₂, 0.01～1.0 nmol.L^-1）可浓度依赖地刺激TE85细胞的³H-胸腺嘧啶和³H-脯氨酸的参入量; 在相同的时间点和剂量下,可增加成骨细胞内ALP活性和BGP的含量。结论：E₂通过增加成骨细胞数量、促进细胞胶原蛋白及ALP和BGP的合成而促进成骨作用,这些作用是通过雌激素受体介导的。     

降钙素基因相关肽抑制内皮素促血管平滑肌细胞增殖作用

本工作应用培养的自发性高血压大鼠主动脉平滑肌细胞.通过~3H-胸腺嘧啶核苷及~3H-亮氨酸参入的方法,观察到降钙素基因相关肽明显抑制培养的血管平滑肌细胞的增殖和内皮素促血管平滑肌细胞增值作用.提示降钙素基因相关肽可能是机体天然存在的内皮素拮抗剂。     

刺参酸性粘多糖抑制小鼠肿瘤细胞DNA合成及其代谢研究

刺参酸性粘多糖(SJAMP)明显抑制小鼠S180及乳腺癌细胞DNA的合成,对荷瘤小鼠正常肝细胞DNA的合成则具促进作用。以~(35)S-SJAMP进行了小鼠体内的吸收、分布、排泄及药物动力学研究。     

多相脂质体139抑制DNA、RNA、蛋白质生物合成机制的初步研究

多相脂质体139能够明显抑制癌细胞 DNA 合成,其抑制~3H—TdR 掺入艾氏腹水癌细咆 DNA 合成的曲线为缓慢递增型,表现为可逆性抑制并具有浓度依赖性。药物剂量为1.0mg/ml 时对 RNA 合成呈现轻度抑制并导致癌细胞核酸含量减少。“139”对S—180鼠肿瘤细胞蛋白质合成作用显著,最高抑制率为67.8%。对 RRL 蛋白质合成抑制率为46.8%,这种抑制作用是在延迟了十分钟后表现出来的,说明反应体系中聚核糖核蛋白体上已经开始合成肽链的核糖核蛋白体仍可继续完成肽链的合成,而新的核糖核蛋白体重新由其亚基组合时则受到一定抑制。“139”对肽酰—~3H—嘌吟霉素结合反应并无抑制作用,故不是转肽抑制剂.     

Regulation of pyrimidine biosynthesis in cultured L1210 cells by 3-deazauridine

The effect of 3-deazauridine on the synthesis of uracil nucleotides by de novo and salvage pathways was investigated in intact cultured L1210 cells. De novo pyrimidine biosynthesis, as measured by sodium [14C]bicarbonate incorporation into uracil nucleotides, was inhibited 40-85% at intracellular 3-deazauracil nucleotide concentrations of 1-6 nmoles/10(6) cells. The inhibition was not due to an increase in the size of the uracil nucleotide pool since this pool was only 97-66% of control level at 3-deazauracil nucleotide concentrations of 1-6 nmoles/10(6) cells. Furthermore, intracellular 3-deazauracil nucleotide concentrations of 0.5 to 5.2 nmoles/10(6) cells inhibited the salvage of [14C]uridine by 25-75%. The data indicate that 3-deazauridine may potentiate its own inhibition of CTP synthetase by reducing the concentration of competing uracil nucleotides by inhibiting de novo pyrimidine biosynthesis and pyrimidine salvage. It is postulated that the biochemical mechanism by which 3-deazauridine inhibits uracil nucleotide synthesis is by acting as a fraudulent allosteric regulator of carbamyl phosphate synthetase II and uridine/cytidine kinase.     

鸦胆子抗肿瘤的研究——15.油酸对艾氏腹水癌细胞 DNA 合成影响的研究

本文利用氚—胸腺嘧啶核苷(~3H—TdR)掺入法研究了油酸对小鼠艾氏腹水癌细胞 DNA 合成的影响,其最高抑制强度为66.7%,与阿糖胞苷等药物比较,作用强度为阿糖胞苷的75.43%,揭示了油酸能够干扰(~3H—TdR)进入癌细胞影响 DNA 的合成     

乙双吗啉(AT-1727)对S180细胞动力学影响的研究

以放射自显影方法研究了AT-1727对小鼠S₁₈₀(腹水型)细胞动力学的影响。腹腔注射AT-1727 50 mg/kg后标记指数由未给药时的31.1%逐时下降,24小时后降到14.5%,对秋水仙碱阻断后的标记有丝分裂指数也有明显抑制,说明药物有减少S期细胞和延缓S和/或G₂期细胞进入M期的作用。AT-1727可使分裂细胞受损伤,表现为染色体凝聚、粘连,分裂被阻于中期。药物有抑制细胞对DNA前体物的掺入的作用,对G₀期细胞却无明显损伤作用。说明该药为一细胞周期特异性药物。     

三尖杉酯碱抑制蛋白质生物合成机制的初步研究

本文研究了三尖杉酯碱对珠蛋白的合成、合成珠蛋白肽链的完整性及肽酰—嘌呤霉素结合反应的影响。观察到:在该药作用下,珠蛋白的合成在延迟了几分钟　后才开始受到抑制;所合成的珠蛋白有完整肽链;肽酰—嘌岭霉素结合物的形成不受抑制。这些结果表明,三尖杉酯碱的作用环节可确定在第一个肽键形成之前(包括该环节),这为进一步研究打下了基础。     

The effect of external deoxyribonucleosides on deoxyribonucleoside triphosphate concentrations in human lymphocytes.

The effects of deoxyribonucleosides on the intracellular levels of deoxyribonucleoside triphosphates (dNTP) and on the rate of labelled thymidine incorporated into DNA of human phytohaemag-glutinin-stimulated lymphocytes have been studied. Thymidine (10^?2–10^?6M) expanded the dTTP and reduced dATP and dCTP levels. Deoxycytidine (10^?3M) expanded the dCTP level and caused inhibition of [³H] thymidine incorporation into DNA but had no detectable effect on the other dNTP concentrations. Deoxyadenosine (10^?3 M) expanded the dATP level, and reduced the other dNTP levels and deoxyguanosine (10^?4M) expanded the dGTP level and reduced the dCTP level; both inhibited [³H] thymidine incorporation into DNA. The sensitivity of these cells to the addition of deoxynucleosides to their culture medium indicates that the plasma and tissue levels of nucleosides may profoundly influence DNA synthesis by human cells in vivo.     

维生素E琥珀酸酯抑制人胃癌细胞DNA合成

目的　研究维生素E琥珀酸酯 (VES)对人胃癌细胞(SGC 790 1)生长以及DNA合成的影响。方法　以体外培养的人胃癌细胞 (SGC 790 1)作为研究对象 ,用活细胞计数方法绘制生长曲线。Giemsa染色方法计数细胞形成集落数。用流式细胞仪检测VES对SGC 790 1细胞周期的影响。并用3H TdR参入方法研究VES对SGC 790 1细胞DNA合成的影响。结果　VES可抑制SGC 790 1细胞的生长和集落形成 :5mg·L-1、10mg·L-1和 2 0mg·L-1VES处理SGC 790 1细胞 7d后 ,细胞生长抑制率分别为 41 2 %、98 3%和 10 0 % ;同样剂量的VES处理SGC 790 1细胞 2 4和48h后 ,集落形成抑制率分别为 6 7%、5 0 4%、87 2 %和2 4 7%、73 4%、10 0 %。细胞周期分析显示VES作用细胞48h后 ,G2 M期细胞比例降低 ,并呈一定的剂量效应关系 ;同时S期细胞比例升高。在培养 2 4和 48h后VES对SGC 790 1细胞3H TdR参入均有明显抑制作用 ,且呈剂量效应关系。结论　VES在体外可通过抑制细胞DNA合成来抑制人胃癌细胞生长     

Cellular pharmacokinetics and pharmacodynamics of the deoxycytidine analog 2'-C-cyano-2'-deoxy-1-beta-D-arabino-pentofuranosylcytosine (CNDAC)

The pharmacokinetics and pharmacodynamics of the novel clinical candidate 2'-C-cyano-2'-deoxy-1-beta-D-arabino-pentofuranosylcytosine (CNDAC) were investigated in human lymphoblastoid CCRF-CEM cells and human myeloblastic leukemia ML-1 cells. Formation of CNDAC 5'-mono-, di-, and triphosphate (CNDACTP) was concentration-dependent; nucleotide accumulation was greater in the lymphoid cells than in the myeloid cells. The nucleotides were eliminated with linear kinetics from both lines, but were retained more effectively by the ML-1 cells. DNA synthesis was selectively inhibited by a 4-hr treatment with CNDAC in CCRF-CEM and ML-1 cells; the IC(50) values were 1 and 0.8 microM, respectively. Evaluation of the polymerization reaction of a primer on an M13mp19(+) template by human DNA polymerase alpha indicated that CNDACTP was incorporated effectively (K(m) = 0.22 microM) opposite a complementary dGMP in the template strand. CNDACTP competed with the normal substrate, dCTP, for incorporation, and the two nucleotides showed similar substrate efficiencies (V(max)/K(m): dCTP = 0.91; CNDACTP = 0.77). Primer extension was potently inhibited by CNDAC triphosphate (K(i) = 23 nM); once the analog had been incorporated, further extension was not observed in vitro, suggesting that primers containing a 3'-terminal nucleotide analog were high K(m) substrates for polymerase alpha. Thus, the ability of human leukemia cells to effectively accumulate and retain CNDACTP, coupled with the favorable kinetics of competition for incorporation into DNA, and the relatively strong ability of the analog to terminate further extension, are likely to contribute to the cytotoxic action of CNDAC.