抗白介素-13单克隆抗体生物学活性测定方法的建立

目的：建立抗白介素-13单克隆抗体(抗IL-13单抗)的生物学活性检测方法。方法：利用 L-BEAS-2B细胞系，通过荧光素酶检测系统进行抗IL-13单抗的生物学活性检测，通过抗IL-13单抗参比品与样品对比以平行线分析的方法计算样品相对百分效价，并对该方法的精密性和准确性进行验证。 结果：抗IL-13单抗在该方法中存在量效关系，在半对数坐标纸上呈平行的直线分布。6批抗IL-13单抗样品经3次测定，相对百分效价平均值在(91.10±1.10)%~(105.27±7.17)%之间，RSD均小于12%； 1批样品经9次测定平均相对百分效价为(110.77±7.01)%，板间和日间RSD均小于7%；2批回收率样品经3次测定，回收率分别为(96.17±8.50)%和(91.53±15.46)%。结论：研究建立的抗IL-13单抗生物学活性检测方法准确性高，精密度及重复性好，可作为抗IL-13单抗生物学活性的常规检测方法。     

抗白介素-13单克隆抗体生物学活性测定方法的建立

目的:建立抗白介素-13单克隆抗体(抗IL-13单抗)的生物学活性检测方法.方法:利用L-BEAS-2B细胞系,通过荧光素酶检测系统进行抗IL-13单抗的生物学活性检测,通过抗IL-13单抗参比品与样品对比以平行线分析的方法计算样品相对百分效价,并对该方法的精密性和准确性进行验证.结果:抗IL-13单-抗在该方法中存在...     

基于报告基因的抗CD3×GPRC5D双特异性抗体生物学活性测定方法建立

目的:建立抗CD3×GPRC5D双特异性抗体(bispecific antibody, BsAb)生物学活性的报告基因测定方法。方法:构建Jurkat/NFAT-Luc转基因细胞株作为效应细胞,MM.1R细胞系作为靶细胞,建立和优化抗CD3×GPRC5D双特异性抗体生物学活性检测方法并进行方法学验证。分别用优化后的报告基因法和PBMC杀伤试验评价不同类型的抗CD3×GPRC5D双特异性抗体生物学活性。结果:报告基因法优化后确定靶细胞为MM.1R细胞,细胞铺板密度为2×10⁴个·孔^-1,效靶比1∶1,抗体起始浓度为20μg·mL^-1,2倍稀释1次后,再6倍梯度稀释,共10个浓度点,诱导时间6 h。方法验证结果说明该方法具有良好的专属性,制备50%,75%,100%,150%和200%理论效价样品,进行准确性、精密度和线性验证,结果显示生物学活性回收率在97.85%～106.51%,变异系数均<10%;相对效价理论值与实测值直线回归分析相关系数为0.997 8。同时,该方法适用于各类抗CD3×GPRC5D双特异性抗体,...     

人源化抗CD20单克隆抗体Obinutuzumab

虽然在过去的10年里,抗CD20单克隆抗体,特别是利妥昔单抗（rituximab）的出现,极大地改善了B细胞恶性淋巴瘤的治疗效果,但该病的短期复发率仍然很高。Obinutuzumab（曾用名：afutuzumab;     

抗EpCAM+CD3双特异性抗体细胞生物学活性报告基因测定方法的建立和验证

目的:建立基于细胞的抗EpCAM+CD3双特异性抗体(bispecific antibody,BsAb)生物学活性报告基因测定方法(reporter gene assay,RGA).方法:构建稳定表达萤光素酶(luciferase,Luc)的HcT116-Luc细胞为靶细胞,以HuT78细胞为效应细胞,通过对样品浓度、...     

利用实验设计优化和建立抗CD38单克隆抗体ADCP生物学活性测定方法

利用实验设计(design of experiment,DoE)方法建立抗CD38单抗(monoclonal antibody,mAb)的抗体依赖性细胞吞噬作用(antibody-dependent cell-mediated phagocytosis,ADCP)生物学活性检测方法。以Jurkat/NFAT/CD32a-FcεRIγ转基因细胞系作为效应细胞,Daudi细胞系作为靶细胞,通过荧光素酶检测系统(BrightGlo^TMLucifer‐ase Assay system)检测抗CD38单抗的ADCP生物学活性,并运用DoE方法进行实验参数优化。结果显示,抗CD38单抗在该方法中存在量效关系,且符合四参数方程:y=(A-D)/[1+(x/C)~B]+D,方法经统计学实验设计对多个实验参数进行筛选和优化,确定抗体工作浓度为800～20.81 ng·mL^-1,靶细胞和效应细胞的接种量分别为每孔7.5×10~4和2.5×10~4个,诱导时间为6 h。该方法具有良好的专属性;5个不同组回收率样本经3次检测,相对效价分别为(59.97±4.74)%...     

人源化抗CD20单克隆抗体类抗肿瘤药Veltuzumab

CD20即人B淋巴细胞表面限制性分化抗原,是一种相对分子质量为3.5×10^4的跨膜蛋白,可调节细胞周期起始和分化阶段的早期过程,并可能发挥钙离子通道作用。CD20在胚胎干细胞和祖B细胞中是测不到的,仅表达于成熟B细胞表面,且在B细胞最终分化成浆细胞时停止表达,因此有助于经抗CD20单抗治疗的B细胞恢复活性,     

抗CD3单克隆抗体激活的杀伤细胞抗瘤活性的研究

本观察了经抗人CD3单克隆抗体刺激后的人外周血单个核细胞(PBMC)的增殖及抗瘤活性。结果显示,抗CD3单抗具有促PBMC增殖的作用．其最佳浓度是10～20ng／ml。经抗CD3单抗刺激后.PBMC在含有rTL-250U／ml的培养液中培养12-13天．细胞数量增加38～46倍。抗CD3单抗激活的杀伤细胞(CD3AK)溶解肿瘤细胞的能力明显高于LAK细胞(P<0.01)。     

重组人CD11α单克隆抗体生物学活性测定方法的优化

用竞争性荧光免疫抑制细胞实验法对重组人CD11α单克隆抗体注射剂进行生物学活性测定,对LFA1转染的293细胞的培养、抗体包被时间及活性测定过程中样品的制备等条件进行了优化,建立了规范可行的操作方法。3批样品的生物学活性分别为:1.03×104U/mg蛋白,0.98×104U/mg蛋白及0.97×104U/mg蛋白,5次测定的RSD分别为4.554、5.039及1.443。     

靶向CD20的单克隆抗体——Ofatumumab

Genmab制药公司与葛兰素史克公司（Glaxo-SmithKline，GSK）于2007年11月宣布启动其共同开发的新药——ofatumumab（曾用代号为HuMax-CD20）用于治疗类风湿性关节炎的Ⅲ期临床实验研究计划。     

抗CD20+单克隆抗体联合化疗治疗B细胞恶性淋巴瘤6例

我院自 2 0 0 1年 10月至 2 0 0 3年 5月 ,使用抗CD2 0 + 单克隆抗体 (商品名 :美罗华 )联合化疗治疗B细胞恶性淋巴瘤 5例及急性淋巴细胞白血病 (L3) 1例 ,现将结果报告如下。1　资料与方法1 1　病例选择　 6例中 ,男 4例 ,女 2例 ;年龄 3 5～ 72岁 ,平均5 7.2岁 ;病程 0 .5～ 2年。诊断标准和疗效标准参照文献[1 ] 。病例的选择均为病理组织学检查证实为B细胞恶性淋巴瘤或骨髓细胞学及免疫组化证实为急性淋巴细胞性白血病 (B细胞性 ) ,且均为CD2 0 + 的初治患者。1 2　治疗方法　抗CD2 0+ 单克隆抗体 3 75mg m2 静脉滴注 ,有两种方法 ,…     

全人源化靶向抗CD20单克隆抗体ofatumumab

［摘要］通过查阅最新国际相关文献并加以对比分析,论述美国食品药品管理局（FDA）最新审批的新药全人源化靶向抗CD20单克隆抗体ofatumumab的临床研究、作用机制、药动学、不良反应及药物相互作用等。ofatumumab可用于氟达拉滨和阿仑珠单抗治疗无效的顽固性慢性淋巴细胞白血病,且特异性地杀灭B淋巴瘤细胞,而对其他正常组织无不良影响。应用过程中不良反应少且轻,对肾功损伤的患者不必调整剂量。ofatumumab具有广阔的临床应用前景。     

抗CD20单克隆抗体联合化疗及自体造血干细胞移植治疗恶性淋巴瘤

非霍奇金淋巴瘤(NHL)是常见的恶性肿瘤之一。抗CD20单克隆抗体的出现大大提高了复发或难治性CD20阳性B细胞淋巴瘤的缓解率和生存时间。我们运用抗CD20单克隆抗体联合化疗及自体造血干细胞移植治疗2例滤泡细胞性B细胞恶性淋巴瘤患者,现报道如下。     

抗CD20单克隆抗体治疗特发性膜性肾病的研究进展

抗CD20单克隆抗体最初被用于治疗B细胞恶性肿瘤,因其可以削减B细胞数量从而抑制自身抗体的产生而被用于治疗自身免疫性疾病.特发性膜性肾病的传统免疫抑制治疗方案有严重的不良反应,且患者复发率较高,抗磷脂酶A2受体抗体等肾源性自身抗体的发现,为干预抗原-抗体免疫复合物的形成提供了针对性措施.本文就抗CD20单克隆抗体在特发...     

抗TIGIT单克隆抗体的制备及体外生物学活性的初步研究

T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域蛋白(TIGIT)通过多种机制抑制固有和适应性免疫,是肿瘤免疫治疗的新型靶点。本研究利用重组人源TIGIT胞外区蛋白免疫BALB/c小鼠(本研究中的小鼠按照国际实验动物护理和使用准则进行使用,并经委托单位京天成生物技术(北京)有限公司实验动物伦理委员会批准),分离并提取小鼠脾淋巴细胞常规融合,成功筛选得到抗TIGIT单克隆抗体c7D3,并初步研究了其生物学活性。结果表明,抗体c7D3能高亲和地结合TIGIT,并能有效阻断TIGIT与配体的结合。细胞功能实验证实, c7D3能激活T细胞,在TIGIT/CD155报告基因实验中促进荧光素酶表达,提高人外周血单个核细胞分泌细胞因子的能力。本研究表明,抗体c7D3具有高亲和力和良好的生物学活性,有望开发成为新的肿瘤免疫治疗的抗体药物。     

食蟹猴静脉注射抗CD20功能人源化单克隆抗体SM09重复给药毒性研究

目的:评价食蟹猴静脉重复给药抗CD20功能人源化单克隆抗体SM09的安全性。方法:将食蟹猴随机分为溶媒对照组,SM09低、高剂量组(25,50 mg.kg-1),每组6只,静脉注射给药,每周1次,连续8周,恢复期12周,进行各项毒理学指标检测。结果:除个别动物偶见呕吐外,体重、进食量、体温、尿、心电图、骨髓细胞计数等均未显示与供试品相关的改变。SM09给药后能够诱导动物产生快速深度的外周血B细胞清除,至恢复期结束,多数动物外周血中B细胞水平恢复正常。给药4周,动物血液白细胞及淋巴细胞下降,之后逐渐回升。给药结束时动物补体C4水平略有降低。组织病理学检查结果除药理学作用相关的改变外,未见其他与供试品相关的改变。结论:食蟹猴连续静脉注射SM09,总体上具有良好的剂量耐受性,除观察到与药理作用相关的效应外,未见其他毒性反应。     

抗CD22单克隆抗体Epratuzumab

单克隆抗体疗法目前已成为治疗B细胞恶性肿瘤和自身免疫性疾病[如非霍奇金淋巴瘤（NHL）、Sjsgren综合征和系统性红斑狼疮（SLE）]的一项重大突破,而B细胞特异性免疫球蛋白CD22也已被鉴定为治疗这些疾病的靶标。分子质量为13．5万的CD22是一种跨膜唾液酸糖蛋白,属免疫球蛋白超家族成员,仅表达于分化成熟期B细胞的表面,对B细胞的生长、存活和功能起重要作用。研究显示,CD22在99％的NHL细胞中均有表达,     

抗PD-1单抗生物学活性测定方法的联合验证

针对抗PD-1单抗的报告基因活性测定法开展实验室间的联合验证,以研究该方法多实验室间的可应用和可转移性。本文采用两种协作方案,分别对该方法的检测内、检测间和实验室间精密度以及线性和准确性进行了研究。结果显示:该方法的检测内精密度的95%可置信区间为(1.72～16.89)%,检测间精密度为(2.63～17.67)%,实验室间精密度为(9.00～14.26)%;线性的相关系数均大于0.99,对于不同效价水平准确性的95%可置信区间, 50%为(91.83～104.40)%, 75%为(90.40～101.40)%, 100%为(94.71～105.60)%, 125%为(94.00～102.00)%, 150%为(96.73～104.30)%。联合验证结果证明,该针对抗PD-1单抗的报告基因测活法,其精密度、线性和准确性均良好,可应用于不同实验室抗PD-1单抗的放行检测及稳定性分析。     

抗CD80单克隆抗体Galiximab

Galiximab（IDEC-144）是一种猴源性的、抗CD80（B7—1）IgG1的单克隆抗体，包含短尾猴IgG，的可变区和人IgG1的恒定区。本品由美国BiogenIdec公司研制，并在研制中使用了一项名为PRIMATIZED的抗体技术以降低免疫原性。