分泌磷酸蛋白1对肺腺癌A549细胞生物学特性的影响

目的　探讨分泌磷酸蛋白1（SPP1）在肺腺癌（LUAD）中的表达情况及对LUAD细胞生物学功能的影响。方法　通过UALCAN、GEPIA数据库分析SPP1 mRNA在LUAD中的表达情况,GEPIA、K-M数据库分析SPP1 mRNA表达与预后的关系;通过实时荧光定量PCR（qPCR）和Western blot检测SPP1在LUAD组织及细胞系中表达情况。构建SPP1干扰序列并将其转染入A549细胞中,设为Blank组（不转染）、NC组（转染NC序列）、siSPP1组（转染siSPP1序列）。Western blot检测细胞中SPP1沉默效果;CCK-8、EdU、细胞克隆形成实验检测siSPP1对LUAD细胞增殖能力的影响;TUNEL实验检测siSPP1对LUAD细胞凋亡的影响;Transwell和划痕实验检测siSPP1对LUAD细胞侵袭和迁移能力的影响。结果　生物信息数据库分析显示,SPP1 mRNA在LUAD中高表达（P＜0.05）,且SPP1 mRNA高表达者累积生存率较低（P＜0.05）;LUAD组织及A549细胞中SPP1均高表达（P＜0.05）;沉默SPP1表达能够抑制A549细胞的增殖、侵袭和迁移能力,诱导细胞凋亡（P＜0.05）。结论　SPP1可作为肺腺癌诊治的潜在靶点,其可能通过调控细胞增殖、迁移及侵袭等特性影响肺腺癌的发生、发展。     

长链非编码RNA BCYRN1对肺腺癌细胞生物学行为的影响

摘要：目的　探究长链非编码RNA（lncRNA）脑胞质RNA1（BCYRN1）在肺腺癌细胞中的表达及对细胞周期、凋亡、侵袭和迁移能力的影响。分析BCYRN1表达与肺腺癌患者临床病理特征及预后的关系。方法　分别培养正常肺上皮细胞BEAS-2B和肺腺癌细胞A549、H1299,采用实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测BCYRN1在正常细胞和肺腺癌细胞中的表达水平;分别将BCYRN1敲低及对照质粒转染入H1299肺腺癌细胞,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡的变化;通过划痕实验、Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力的变化。结合癌症基因组图谱（TCGA）数据库,分析BCYRN1表达与肺腺癌患者临床病理特征的相关性。利用癌症阵列的lncRNA（lnCAR）数据库中lncRNAs表达数据,采用Cox回归分析BCYRN1表达与患者预后的关系。结果　BCYRN1在肺腺癌细胞中的表达水平显著高于肺正常上皮细胞（P＜0.05）;流式细胞分析提示BCYRN1敲低组的细胞出现S期阻滞,细胞凋亡率增加;划痕实验和Transwell实验显示BCYRN1敲低组H1299细胞侵袭和迁移能力减弱。生物信息学分析显示BCYRN1的表达与患者的N分期和肿瘤分期相关（P＜0.05）,BCYRN1高表达患者总生存期显著缩短。结论　LncRNA BCYRN1在肺腺癌细胞中高表达,下调BCYRN1可抑制肺腺癌细胞的侵袭和迁移能力,并使细胞周期发生阻滞。其高表达与肺腺癌患者N分期和肿瘤分期相关,BCYRN1高表达患者预后较差。     

敲低 Ⅰ型胶原 α1链基因抑制鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究

目的 研究Ⅰ型胶原α1链(COL1A1)基因对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响.方法 该研究于2017年9月至2018年12月完成,实时定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测COL1A1在鼻咽癌(C666-1、CNE1、CNE2)细胞系中的表达量;CNE1细胞分m为对照组、阴性对照(si-NC组)、敲低COL1A1(si-COL1A1)组,通过Lipofectamine 2000将siRNA COL1A1质粒转染至鼻咽癌CNE1细胞中,对照组细胞正常培养,si-NC组细胞转染阴性对照;qPCR和Western blotting检测转染效果,噻唑蓝(MTT)、Transwell实验分别检测细胞增殖、侵袭、迁移;Western blotting检测钙黏蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、钙黏蛋白N(N-cadherin)水平.结果 COL1A1 mRNA[(3.565±0.341)(4.253±0.410)(3.968±0.378)]和蛋白表达量[(2.214±0.216)(3.152±0.305)(2.519±0.221)]在鼻咽癌(C666-1、CNE1、CNE2)细胞系中表达量增加(P<0.05);CNE1细胞转染siRNA COL1A1质粒能显著下调COL1A1 mRNA(0.352±0.045)和蛋白表达量(0.245±0.232)(P<0.05);敲低COL1A1的表达量抑制CNE1细胞增殖(0.536±0.059)(0.665±0.067)(0.893±0.081)(P<0.05),降低其侵袭(52.895±5.635)、迁移(113.254±13.279)能力(P<0.05),上调E-cadherin蛋白水平(2.152±0.223)(P<0.05),下调Vimentin(0.362±0.045)、N-cadherin(0.423±0.043)蛋白水平(P<0.05).结论 COL1A1可能通过抑制上皮细胞间充质化(EMT)促进鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移.     

尼克酰胺-N-甲基转移酶在肺腺癌间质中的表达及其生物学功能 #br#

目的 探讨尼克酰胺-N-甲基转移酶（NNMT）在肺腺癌间质中的表达水平及过表达NNMT对肺腺癌细胞 生物学功能的影响。方法 （1）收集150例肺腺癌患者手术切除的组织标本。免疫组织化学染色检测癌组织和间质 细胞中 NNMT 的表达水平,并分析其表达与患者临床病理特征及预后间的关系。（2）分别转染过表达 NNMT 质粒 （NNMT组）和对照质粒（control组）构建稳定表达NNMT的肺成纤维细胞系HFL-1,采用荧光定量PCR（qPCR）、细胞 免疫荧光、蛋白质印迹法（Western blot）检测NNMT表达水平。（3）收集过表达NNMT及control组HFL-1细胞的培养 上清,分别和肺腺癌A549、PC9细胞进行共培养,通过细胞增殖实验、平板克隆形成实验、Transwell侵袭实验以及划 痕愈合实验比较2种培养液对A549、PC9细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力的影响。结果 （1）免疫组化染色显 示,150例患者组织标本中65例癌细胞中NNMT呈高表达,83例间质细胞中NNMT呈高表达。有淋巴结转移和病理 分期Ⅲ~Ⅳ期患者肿瘤间质细胞中NNMT高表达比例较高,且肿瘤间质中高表达NNMT患者的总生存率明显低于低 表达者。（2）成功构建了稳定过表达 NNMT 的 HFL-1 细胞,Western blot、qPCR、细胞免疫荧光染色均提示 NNMT 组 NNMT表达高于control组。（3）细胞共培养结果显示,与control组相比,表达NNMT的肺成纤维细胞系的培养液可以 显著促进A549和PC9细胞的增殖、克隆形成、迁移以及侵袭。结论 肿瘤间质表达的NNMT与肺腺癌的恶性进展密 切相关,可能是肿瘤靶向生物治疗的潜在靶点。     

m6A识别蛋白HuR调控lncRNA TRG-AS1抑制结直肠癌生长的机制研究

目的 探讨N6-甲基腺苷（m6A）识别蛋白人类抗原R(HuR)调控长链非编码RNA T细胞受体γ位点反义RNA 1(lncRNA TRG-AS1)对结直肠癌（CRC）生长的影响。方法 比色法检测CRC患者的癌组织、癌旁组织及正常结肠上皮细胞NCM460及CRC细胞HCT116、SW480、LOVO中m6A含量;实时荧光定量PCR(qPCR)检测TRG-AS1表达;Western blot检测HuR蛋白表达。将HCT116细胞分为Ct组、OE-NC组、OE-HuR组、si-NC组、si-HuR组、siHuR+pcDNA组、si-HuR+pcDNA-TRG-AS1组,CCK-8法检测细胞增殖;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;划痕愈合实验检测细胞迁移;Transwell检测细胞侵袭;裸鼠体内移植瘤实验观察肿瘤生长情况;采用甲基化RNA免疫共沉淀（MeRIP）检测TRG-AS1上是否存在m6A位点;RNA pull-down实验和RNA免疫共沉淀（RIP）检测TRG-AS1与HuR蛋白的相互作用。结果 在CRC组织和细胞中,HuR蛋白、TRG-AS1高表达,m6A含...     

miR-145-5p通过靶向ABCE1表达影响人肺腺癌A549细胞的增殖和迁移

目的探讨microRNA (miR)-145-5p在肺腺癌组织中的表达情况及其对人肺腺癌A549细胞增殖和迁移的影响及机制。方法检测人肺腺癌组织和A549细胞中miR-145-5p的基因表达。生物信息数据库预测、双荧光素酶报告基因实验验证miR-145-5p和ABCE1的靶控关系;转染miR-145-5p的模拟物、抑制物和对照物入A549细胞,PCR法测定转染后miR-145-5p和ABCE1 mRNA的表达。MTT和划痕愈合实验检测转染前后A549细胞的增殖和迁移能力。结果在肺腺癌组织和A549细胞系中miR-145-5p表达明显下降(P<0.05)。生物信息数据库和双荧光素酶报告基因实验证实,ABCE1是miR-145-5p的靶基因。与未转染和转染miR-145-5p对照物的A549细胞相比,转染模拟物48 h后可显著增加miR-145-5p的表达,抑制ABCE1 mRNA表达,同时,细胞增殖和迁移能力受到抑制(P<0.05);而转染抑制后可显著降低miR-145-5p的表达,增加ABCE1 mRNA表达,同时,细胞增殖和迁移能力明显增强(P<0.05)。结论在癌组织中表达明显降低的miR-145-5p,能够通过负性调节ABCE1的表达,抑制人肺腺癌A549细胞增殖和迁移,为肺癌治疗提供新的靶点。     

YY1基因在肺癌组织中的表达及其对肺癌细胞功能的影响

目的 检测转录因子YY1在肺癌组织中的表达情况,并分析其对肺癌细胞的增殖、迁移及侵袭的影响。方法 应用Taqman探针实时荧光定量PCR方法检测235例肺癌组织以及62例配对癌旁组织中YY1 mRNA的表达,并分析其表达与患者临床病理特征的关系。应用Lipofectamine 3000试剂在肺癌细胞系转染YY1过表达质粒及对照质粒。噻唑蓝（MTT）分别检测对照组和YY1过表达组在24、48及72 h对A549和H1299细胞增殖的影响。划痕实验和Transwell实验检测YY1过表达对肺癌细胞的迁移和侵袭能力的影响。结果 与癌旁组织（5.80±0.58）相比,YY1 mRNA在肺癌组织（5.07±0.58）中表达下调（P<0.01）,且YY1 mRNA的表达在不同性别、吸烟状态、病理类型及临床分期中存在差异（P<0.05）。YY1过表达组H1299细胞增殖能力在48h和72h均低于对照组（P<0.01）,A549细胞在72h低于对照组（P<0.05）。划痕实验和Transwell实验结果显示转染过表达YY1质粒后,肺癌细胞的侵袭能力及迁移能力明显下降（P<0.05）。结论 YY1在肺癌组织中低表达,上调 YY1的表达可抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

COL3A1在头颈鳞癌中的表达研究

目的:数据库筛选出头颈鳞癌特异性表达基因COL3 A1(Collagen Ⅲ alpha-1),检测COL3A1在正常细胞株与头颈鳞癌细胞株中的表达情况,并探讨其意义.方法:通过GEPIA线上分析TCGA数据库获得差异表达基因.从正常口腔成纤维细胞株hMOF与头颈鳞癌细胞株KB与CAL-27中提取mRNA并反转录合成cDNA,使用RT-qPCR技术扩增检测,分析CT值以阐明差异表达基因表达水平与各细胞株之间的关系.结果:GEPIA线上分析健康人样本44例、头颈鳞癌患者样本519例,筛选出差异表达基因COL3A1在头颈鳞癌患者样本中显著高表达;采用口腔鳞癌细胞株进行实验验证,确定COL3A1与TGF-β1在头颈鳞癌细胞株中也呈现高表达,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:经数据挖掘预测以及细胞株验证COL3A1有可能成为头颈鳞癌检测的潜在生物标记物.     

大豆苷元对人非小细胞肺癌A549、H1299细胞增殖、迁移能力的影响及机制

目的探究大豆苷元(daidzein,Daid)对非小细胞性肺癌细胞株A549和H1299增殖、迁移能力的影响及可能机制。方法以A549和H1299为研究对象,CCK-8法检测Daid(0,5,10,25,50,100,200μmol·L^-1)抑制A549和H1299两种细胞的增殖情况。划痕和Transwell小室实验检测Daid对肺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。Western blot检测Cleaved Caspase-3和LC3Ⅱ/Ⅰ等的蛋白表达。结果与对照组相比,Daid在体外可明显抑制肺癌细胞的增殖,且抑制作用呈浓度依赖关系。Daid(100μmol·L^-1)可明显降低人肺癌细胞A549和H1299的迁移侵袭能力。Western blot结果显示,Daid(100μmol·L^-1)预处理后,两种肺癌细胞的Cleaved Caspase-3及LC3Ⅱ/Ⅰ表达升高。结论Daid可抑制人非小细胞肺癌A549和H1299细胞的增殖,使上述细胞的迁移侵袭能力明显下降,其机制可能与Daid诱导细胞凋亡及自噬有关。     

EBF1-shRNA对肺腺癌A549细胞体内外增殖能力的影响

目的 研究EBF1基因下调对肺腺癌A549细胞体内外增殖的影响,并初步探讨其机制。方法 通过免疫组化和RT-PCR检测EBF1在肺癌组织和肺癌细胞系中的表达情况。根据本实验室设计的针对EBF1的小干扰RNA(shRNA)序列,选择一条已经证实最有效的序列作为靶序列和一条随机序列作为阴性对照,构建重组逆转录病毒shRNA表达载体并将其转染入A549细胞中;应用RT-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测对EBF1基因的沉默效果;应用MTT比色法及BrdU染色法实验检测EBF1-shRNA对A549细胞体外增殖的影响;利用Transwell实验及划痕实验检测EBF1-shRNA对A549细胞体外侵袭及迁移能力的影响;利用流式细胞仪分析各组细胞的细胞周期;通过裸鼠腋窝皮下接种各组细胞,观察EBF1-shRNA对A549细胞在裸鼠体内的致瘤能力的影响;Western blot检测CDK6、P21、P27蛋白表达。结果 EBF1在癌旁组织及肺癌组织中的基质细胞中不表达,在NSCLC及SCLC癌细胞细胞核中表达。EBF1-shRNA有效地沉默了EBF1基因mRNA和蛋白的表达;沉默EBF1基因的表达能够抑制A549细胞的体内外增殖能力,使实验组细胞的细胞周期阻滞于G 1 期;沉默EBF1基因的表达后,实验组细胞中CDK6蛋白表达降低,P21、P27蛋白增加。结论 EBF1-shRNA通过使细胞周期阻滞于G 1 期来抑制肺腺癌A549的体内外增殖能力,这种抑制作用涉及CDK6表达下降以及P21/P27的表达上调。     

NUF2基因表达与肺腺癌免疫浸润及临床预后的相关性分析

目的： 研究NUF2与肺腺癌（lung adenocarcinoma，LUAD）免疫细胞浸润及预后的关系。方法： 采用Oncomine数据库分析NUF2在LUAD和肺鳞癌（lung squamous cell carcinoma，LUSC）组织中的表达水平；用GEPIA和PrognoScan数据库评估NUF2对LUAD和LUSC患者预后的影响；采用TIMER数据库分析LUAD中NUF2表达和免疫细胞浸润水平的相关性；采用LinkedOmics数据库进行NUF2相关差异表达基因的GO功能注释和KEGG通路分析。RT-qPCR和Western Blot检测NUF2在肺腺癌细胞中的表达，并采用集落形成实验研究NUF2对肺腺癌细胞增殖的影响。结果： NUF2在LUAD和LUSC组织中的表达水平显著高于正常组织（P<0.01）。NUF2高表达与LUAD患者的总生存率和无疾病生存率负相关（P<0.05），但与LUSC患者的总生存率无相关性。NUF2表达与LUAD组织中B细胞、CD4⁺ T细胞、巨噬细胞和树突状细胞的浸润水平显著负相关（P<0.01）。NUF2相关基因富集在氧化磷酸化等通路，参与的生物学过程有细胞周期检查点和DNA重组等。NUF2在人肺腺癌细胞中高表达，且敲减NUF2可抑制肺腺癌细胞集落形成（P<0.01）。结论： NUF2高表达与LUAD免疫细胞浸润水平降低和不良预后相关，有望成为LUAD潜在的预后标志物和免疫相关治疗靶点。     

柔性脂质体在经皮给药系统中的研究进展

目的 采用响应面法优化北豆根脂肪油的提取工艺，分析其成分组成，并研究北豆根脂肪油的体外抗氧化活性。方法 以北豆根脂肪油提取率为指标，在单因素试验基础上，采用响应面法考察提取温度、提取时间、料液比对提取工艺的影响；采用气相色谱-质谱联用法 (GC-MS) 分析脂肪油的组成；运用清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基实验，评价北豆根脂肪油的体外抗氧化活性。结果 经响应面优化，确定最佳提取工艺为提取温度温度90 ℃，回流提取3次，每次2.3 h，料液比为1:21。在这些条件下，提取率为1.820 %；采用GC-MS从北豆根脂肪油中鉴定出32 个成分；北豆根脂肪油总抗氧化活性随着浓度的增加而逐渐升高，在浓度达到0.833 mg/mL后对DPPH自由基清除率的增幅变缓，当浓度为1.333mg/mL时，清除率为70.1%。结论 优化的工艺方便、稳定、可行，可为后续研究提供依据，北豆根脂肪油中含有多种重要脂肪油成分, 并具有一定的体外抗氧化能力。     

CLEC5A抑制肝胆管细胞癌增殖和转移的作用研究

目的　探究C型凝集素结构域家族5成员A（CLEC5A）在肝胆管细胞癌（ICC）组织中的表达特点,并分析其对ICC细胞株RBE增殖、凋亡、迁移以及侵袭特性的影响。方法　免疫组化染色法检测25例ICC患者癌组织及配对癌旁组织中CLEC5A的表达水平;构建慢病毒介导CLEC5A过表达RBE细胞株,采用实时荧光定量PCR检测细胞内CLEC5A表达水平,CCK-8法检测CLEC5A对RBE细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测RBE细胞凋亡和细胞周期,Transwell法检测细胞迁移及侵袭能力。结果　CLEC5A在ICC癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织（P＜0.05）。过表达CLEC5A可以抑制RBE细胞的增殖、迁移及侵袭能力,诱导细胞凋亡并引起G2/M期阻滞（P＜0.05）。结论　CLEC5A是一个潜在的ICC抑癌基因,它可能通过调控细胞增殖、迁移及侵袭特性影响ICC发生发展。     

Increased expression of TTC21A in lung adenocarcinoma infers favorable prognosis and high immune infiltrating level

BackgroundLung adenocarcinoma (LUAD) is a crucial pathological type of lung cancer. Immune-infiltration of the tumor microenvironment positively associated with overall survival in LUAD. TTC21A is a gene has not reported in cancer, and the mechanism behind it is still unclear. Our study assesses TTC21A role in LUAD, via TCGA data.MethodsGEPIA was utilized to analyze the expression of TTC21A in LUAD. We evaluated the influence of TTC21A on survival of LUAD patients by survival module. Then, data sets of LUAD were downloaded from TCGA. The correlations between clinical information and TTC21A expression were analyzed using logistic regression. Clinicopathologic characteristics associated with overall survival in TCGA patients using Cox regression. In addition, we explored the correlation between TTC21A and cancer immune infiltrates using CIBERSORT and “Correlation” module of GEPIA.ResultsThe univariate analysis using logistic regression, wherein TTC21A expression served as a categorical dependent variable (with a median expression value of 2.5), indicated that increased TTC21A expression is significantly correlated with pathological stage, tumor status and lymph nodes. Moreover, multivariate analysis revealed that the up-regulated TTC21A expression, negative results of pathological stage and distant metastasis are independent prognostic factors for good prognosis. Specifically, a positive correlation between increased TTC21A expression and immune infiltrating level of B cells, Neutrophils, Mast cells and T cells was established using CIBERSORT analysis. Furthermore, we confirmed it in “correlation” module of GEPIA.ConclusionTogether with all these findings, increased TTC21A expression correlates with favorable prognosis and increased proportion of immune cells, such as B cells, Neutrophils, Mast cells and T cells in LUAD. These conclusions indicate that TTC21A could serve as a potential biomarker to assess prognosis and immune infiltration level in LUAD.     

基于公共数据库分析FABP5在肾透明细胞癌中表达及预后的意义

摘要： 目的 探讨脂肪酸结合蛋白5 （FABP5） 基因在肾透明细胞癌中的表达及预后意义。方法 提取Oncomine 和GEO数据库中有关FABP5的信息并进行表达情况分析, 通过DAVID数据库对差异基因进行功能注释, 采用 GEPIA进行预后分析。结果 Oncomine数据库中共找到445项FABP5在不同肿瘤类型中的研究数据集, 表达差异有统计学意义的结果中表达增高的有32项 （肾癌5项）, 表达降低的有24项 （肾癌0项）。肾癌中有4项涉及肾透明细胞癌和正常组织中FABP5的表达研究数据集。综合比较这4项数据集发现, FABP5在肾透明细胞癌中的表达量高于正常组织 （P＜0.05）。GEO数据库中GSE66271芯片数据分析结果发现差异基因FABP5在肾透明细胞癌中的表达量显著高于正常组织 （P＜0.01）。DAVID功能分析发现这些差异基因主要集中于影响细胞的转运蛋白活性和蛋白质的消化和吸收代谢功能。使用GEPIA分析来自TCGA数据库和GTEx项目的516例患者预后发现FABP5高表达的患者总体死亡率较高, 低表达FABP5的患者预后较好 （P=0.001 1）。结论 FABP5在肾透明细胞癌组织中呈现高表达,并与肾透明细胞癌预后差相关, 其有望成为抗肾透明细胞癌药物的重要治疗靶点。     

miR-124靶向趋化素样因子超家族成员6对胶质瘤细胞的影响

目的　探究微小RNA（miR）-124靶向调控趋化素样因子超家族成员6（CMTM6）对胶质瘤细胞的侵袭、迁移的影响。方法　实时荧光定量PCR（qPCR）法检测OLN93、SHG-44、U87、U251、A172细胞中miR-124、CMTM6 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹实验检测OLN93、SHG-44、U87、U251、A172细胞中CMTM6蛋白表达水平。miRTarBase预测miR-124与CMTM6的结合位点,实验设mimic NC组、miR-124 mimic组、miR-124 mimic+pcDNA组、miR-124 mimic+CMTM6组,分别转染miR-124 mimic NC、miR-124 mimic、pcDNA、pcDNA+CMTM6于各组细胞中。qPCR法检测各组细胞中miR-124、CMTM6 mRNA表达水平;CCK-8检测细胞增殖情况;Transwell检测细胞侵袭、迁移情况;划痕实验检测细胞迁移情况;蛋白免疫印迹实验检测细胞中CMTM6、细胞表面程序性死亡蛋白配体1（PD-L1）蛋白表达水平。结果　与OLN93相比,SHG-44、U87、U251、A172细胞中miR-124表达水平降低（P＜0.05）,CMTM6 mRNA和蛋白表达水平升高（P＜0.05）,选择U251细胞进行后续实验。miRTarBase预测发现miR-124与CMTM6存在结合位点,并经双荧光素酶报告基因实验验证。与mimic NC组和miR-124 mimic+CMTM6组相比,miR-124 mimic组和miR-124 mimic+pcDNA组细胞中miR-124表达水平升高（P＜0.05）,CMTM6 mRNA表达水平降低。培养24、48、72、96 h时细胞OD450降低,侵袭、迁移细胞数量减少,CMTM6、PD-L1蛋白表达水平降低（P＜0.05）。结论　上调miR-124表达可靶向下调CMTM6的表达,从而抑制胶质瘤细胞的侵袭、迁移。     

IL-6、GATA6在大鼠肺动脉平滑肌细胞中的表达及对 细胞增殖的影响

目的　探讨白细胞介素（IL）-6、转录因子GATA6在血小板源性生长因子-BB（PDGF-BB）诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）增殖中的表达及作用。方法　从8周龄SD大鼠中分离肺动脉,采用Ⅰ型胶原酶消化法原代培养PASMCs;采用倒置显微镜观察和免疫荧光染色鉴定细胞;采用CCK-8检测不同剂量（0、15、30、45、60、75 μg/L）PDGF-BB分别作用12、24、48 h对PASMCs增殖能力的影响;采用流式细胞术检测30 μg/L PDGF-BB诱导细胞增殖48 h的细胞周期;应用qPCR和Western blot技术检测30 μg/L PDGF-BB诱导细胞增殖12、24、48 h后IL-6和GATA6 mRNA及蛋白的表达水平。结果　15~60 μg/L的PDGF-BB诱导24 h、48 h后PASMCs增殖显著,其中以30 μg/L诱导48 h效果最佳（P＜0.05）;流式周期结果表明,PDGF-BB组G1期的百分比较对照组降低,而S期和G2期百分比增高（P＜0.01）。PDGF-BB能够诱导细胞增加IL-6 mRNA和蛋白的分泌并降低GATA6 mRNA和蛋白表达水平。相关性分析提示PASMCs的增殖与IL-6 mRNA表达呈正相关,与GATA6 mRNA表达呈负相关（r分别为0.538和-0.647,均P＜0.05）;IL-6与GATA6的表达呈负相关（r=-0.705,P＜0.01）。结论　PDGF-BB诱导体外培养的PASMCs增殖;IL-6、GATA6参与了PDGF-BB诱导PASMCs增殖的发生和发展;PASMC增殖与IL-6 mRNA表达上调和GATA6 mRNA表达下调有关。