焦磷酸测序技术检测SLCO1B1基因多态性方法的建立

目的:建立SLCO1B1A388G和T521C单核苷酸多态位点的焦磷酸测序方法,分析中国健康人群中分布频率。方法:制备300例健康人外周血gDNA,应用PyroMark ID焦磷酸测序仪进行多态位点分型分析。并通过重复性检验和毛细管电泳测序验证方法正确性。结果:建立了SL-CO1B1A388G和T521C多态性分析的焦磷酸测序新方法,经毛细管电泳测序验证和重复性验证,结果准确可靠。在300例标本中,388A、388G、521T、521C等位基因频率分别为28%、72%、89.5%和10.5%,符合Hardy-Weinberg平衡。结论:焦磷酸测序方法可准确、高通量、快速检测SLCO1B1A388G和T521C单核苷酸多态性,特别适宜大样本量的临床及科研批量检测需要。     

浅谈基因检测在乳腺癌中的应用

伴随着人类基因组的斐然成果,在循证医学的浪潮推动下,基因组学、RNA组学和表达组学等各种生命科学组学与医学领域交融,转化,率先在肿瘤个体化治疗领域进入了NCCN肿瘤临床治疗规范。在一系列转化应用中,基因检测用于肿瘤转化医学靶向治疗和个体化化疗,不仅是肿瘤医药学领域里程碑式的革命,也开辟了肿瘤药物基因组学个体化治疗的新时代。本文主要简单介绍基因检测在乳腺癌中的应用。     

CYP1B1、NQO1基因多态性与肺癌易感性关系的研究

目的研究内蒙古地区蒙古族与汉族人群的CYP1B1和NQO1基因多态性及吸烟状况与肺癌易感性的关系。方法采用PCR-RFLP技术对CYP1B1基因L432V位点和NQO1基因C609T位点多态性进行检测。结果 (1)CYP1B1基因L432V位点基因型分布频率在蒙古族和汉族健康人群中差异无统计学意义(χ2=1.220,P> 0.05);NQO1基因C609T位点基因型分布频率在蒙古族和汉族健康人群中差异无统计学意义(χ2=0.221,P> 0.05)。(2)在蒙古族和汉族人群中,NQO1 C/T和T/T基因型有明显增加患肺癌风险性的作用(汉族人群OR:1.461,2.278,P <0.05;蒙古族人群OR:1.493,2.040,P <0.05),而CYP1B1 C/G和G/G基因型无明显增加患肺癌风险性的作用(汉族人群OR:1.271,1.614,P> 0.05;蒙古族人群OR:0.970,1.758,P> 0.05)。(3)在汉族人群中,携带CYP1B1 C/G+G/G基因型的吸烟者患肺癌的危险性高于携带C/C的非吸烟者(OR:2.152,P <0.05);携带NQO1 C/C、C/T+T/T基因型的吸烟者患肺癌的危险性高于携带C/C的非吸烟者(OR:2.172,2.613,P <0.05)。在蒙古族人群中,携带CYP1B1 C/C、C/G+G/G基因型的吸烟者患肺癌的危险性高于携带C/C的非吸烟者(OR:1.409,1.765,P <0.05);携带NQO1 C/C、C/T+T/T基因型的吸烟者患肺癌的危险性高于携带C/C的非吸烟者(OR:2.479,2.729,P <0.05)。结论 (1)CYP1B1基因L432V位点基因型以及NQO1基因C609T位点基因型在内蒙古地区蒙古族和汉族健康人群中的分布不具有种族差异。(2)NQO1 C/T和T/T基因型显著增加内蒙古地区蒙古族和汉族患肺癌的易感性。(3)在蒙古族和汉族人群中,CYP1B1 C/G+G/G基因型以及NQO1 C/T+T/T基因型显著增加吸烟者患肺癌的易感性。     

1-磷酸鞘氨醇受体的研究进展

1-磷酸鞘氨醇S1P(Sphingosine 1-phosphate,S1P)是调节细胞内外多种生物学功能的重要信号分子之一,作用于S1P受体后,在很多生理和病理过程中发挥重要的调节作用。Sphk-S1P-S1PR信号通路及其在炎症、肿瘤、动脉粥样硬化、自体免疫系统疾病、神经系统疾病等多种疾病中的作用已成为目前研究的热点之一。越来越多的S1P受体调节剂被研发。     

6种药物对有机阴离子转运多肽OATP1B1及其基因多态性A388G、T521C转运作用的影响

目的 研究6种药物对有机阴离子转运多肽OATP1B1及其基因多态性A388G、T521C转运作用的影响。方法 体外培养稳定高表达OATP1B1和OATP1B1基因多态性A388G、T521C的人胚肾细胞（HEK293）株,高表达空白载体（Mock）的HEK293细胞为空白对照,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测各转运体细胞中mRNA表达;放射性标记化合物³Hestrone sulfate作为转运底物、利福平作为阳性抑制剂验证各高表达细胞的转运活性;测定30 μmol·L^-1的达比加群、辛伐他汀、替格瑞洛、卡培他滨、多西他赛、依那普利对各细胞³H-estrone sulfate摄入活性的抑制作用,并依据抑制试验结果,进一步测定辛伐他汀、替格瑞洛、多西他赛对转运体细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）。结果 HEK293细胞内导入的各种转运体基因都呈现良好的复制表达;OATP1B1、OATP1B1/A388G、OATP1B1/T521C对底物³H-estrone sulfate（5 μmol·L^-1）的转运活性分别为Mock细胞的39、49和48倍,30 μmol·L^-1利福平添加后,可将细胞的转运活性抑制到50%以下;辛伐他汀、替格瑞洛、多西他赛对OATP1B1的抑制作用较强,30 μmol·L^-1给药的转运活性分别为对照组的（40.09±1.95）%、（33.82±0.61）%、（45.08±0.22）%;辛伐他汀对OATP1B1、OATP1B1/A388G、OATP1B1/T521C的IC₅₀分别为14.2、＞100、＞100 μmol·L^-1,替格瑞洛的IC₅₀分别为19.1、68.4、＞100 μmol·L^-1,多西他赛的IC₅₀分别为17.6、22.9、19.3 μmol·L^-1。结论 OATP1B1基因多态性在一定程度上改变了抑制剂对转运体活性的影响程度。     

结肠癌组织中KISS-1和KAI-1蛋白的表达

目的 检测结肠癌组织中KISS-1和KAI-1蛋白的表达,探讨其临床病理意义.方法 应用免疫组化SP法分别检测49例结肠癌组织及49例配对远离结肠癌手术切缘的正常组织中KISS-1和KAI-1蛋白的表达.结果 结肠癌组织及配对正常组织中KISS-1蛋白阳性表达率分别为34.69%和87.75%,差异有统计学意义（P＜0.05）;KAI-1蛋白阳性表达率分别为32.65%和95.92%,差异有统计学意义（P＜0.05）;二者在结肠癌组织中的表达均与浸润深度及淋巴结转移相关,且二者的表达呈正相关关系.结论 KISS-1和KAI-1的表达与结肠癌的发生发展、浸润转移有关,联合检测二者结肠癌组织中的表达可为结肠癌早期诊断及治疗提供临床参考.     

人谷胱甘肽S-转移酶P1基因及其人群多态性

人类细胞质谷胱甘肽Ｓ转移酶(ｈＧＳＴｓ)超基因家族主要包括4个家族:Ａ、Ｍ、Ｔ、Ｐ(按旧命名系统分别为α、μ、θ、π)[1],其中ＧＳＴＭ1以及ＧＳＴＴ1的人群多态性以及与疾病易感性关系的研究开展较早,也有了一定的积累[2～4]。ＧＳＴＰ1的人群多态性问题则是近年来才引起医学界的注意。ｈＧＳＴＰ1是ｈＧＳＴｓ家族中酸性同工酶Ｐ1(有些文献中命名为ＧＳＴπ)的编码基因。1989年Ｂｏａｒｄ等人分离了人类ＧＳＴＰ1基因的ｃＤＮＡ克隆,将其定位于染色体的11ｑ13,并首次报道了ＧＳＴＰ1基因的外显子5(ＩＣｅ105→Ｖａｌ)和外显子6(Ａｌａ…     

代谢酶的基因多态性与慢性苯中毒遗传易感性的病例—对照研究

目的 苯的慢性毒性主要来源于其在体内的中间代谢产物，即参与苯代谢的主要酶。本研究的目的在于探讨毒物代谢酶基因多态性与慢性苯中毒遗传易感性之间的关系。     

Plk1在胰腺癌细胞中的表达及其临床意义

目的探讨胰腺癌细胞系中Plk1表达的意义。方法以胰腺癌细胞株(AsPC-1、PANC1、BxPC3)和正常胰腺细胞株(HPDE6C7,一种永生但非转化的胰腺上皮细胞来源的细胞株)为研究对象,应用RT-PCR检测Plk1 mRNA的表达,用Western blot检测Plk1蛋白的表达。结果 Plk1 mRNA和Plk1蛋白在胰腺癌细胞中均有高表达,而在正常胰腺细胞株中几乎不表达。结论 Plk1在胰腺癌细胞中的表达具有一定肿瘤特异性,有可能成为胰腺癌治疗的新靶标。     

海南州首例甲型H1N1流感病例的发现与处置

<正>2009年3月在墨西哥等国家发生的甲型H1N1流感疫情蔓延迅速,已成为全球高度关注的重大公共卫生事件。6月11日世界卫生组织将这次流感流行的警告级别提高到6级[1],2009年5月10日,四川省报告1例甲型H1N1流感疑似病例,被国家确诊为中国内地首例甲型H1N1流感病例[2],2009年9月5日青海省首次确诊为甲型H1N1流感病例[3],2009年9月24日,海南州首次确诊为甲型H1N1流感病例。     

用EXCEL实现灰色数列模型GM(1,1)的预测

在编制好的 GM( 1,1)电子表格中输入已知时刻的实际数 ,就可以得到所需的目标时刻的预测值 ,并且可以得到对此模型预测的精确度检验结果。为灰色数列模型 GM( 1,1)的预测提供一种操作简便、精确度高的行之有效的方法 ,充分发挥了 EXCEL电子表格的动态功能 ,具有简单易行的特点 ,有较大的推广应用价值。     

甲流期间469例发热病例血常规分析

目的:了解发热病人的血常规特点,做好甲流期间感染性疾病的预诊断。方法:选取我门诊2009年5月～12月期间发热分诊处接诊的病例469例,分析其体温和血常规的关系。结果:血常规分析显示,甲流期间发热患者随着体温逐渐升高,中性粒细胞百分比(NC)增高的比例显著升高,白细胞计数(WBC)和淋巴细胞百分比(LC)变化无统计学意义。结论:甲流期间,发热患者体温越高,细菌感染的趋势越大,而WBC和LC变化无特异性。     

甲型H1N1流感简介

甲型H1N1流感是一种新型流感病毒,且能够传染人,通过呼吸道传播,临床主要表现为流感样症状,多数患者症状比较轻。病毒对奥司他韦和扎那米韦敏感,早发现、早诊断是防控与治疗的关键。     

PLK1抑制剂的设计、合成及抗肿瘤活性研究

目的 设计合成一类新型PLK1抑制剂,并测试其对PLK1激酶的抑制活性,探讨初步构效关系,为后续相关研究提供参考。方法 以化合物HBST145为基础,通过生物电子等排等方法,设计、合成新型PLK1抑制剂,分别采用均相时间分辨荧光法和CCK-8法测定化合物对PLK1激酶的抑制活性以及抗肿瘤细胞增殖活性。结果与结论共合成了10个新化合物,其结构均经ESI-MS和¹H-NMR确证。抑酶活性结果表明化合物5a～5d、5j对PLK1抑制活性的IC₅₀值分别为2.58、3.09、7.08、3.61、8.99 nmol·L^-1,活性优于化合物HBST145。目标化合物5a～5j对HL-60和THP-1细胞的抗增殖活性均明显提高,其中化合物5d的抗细胞增殖活性较好,可作为优选化合物进行深入研究。     

二价金属离子转运体DMT1研究进展

二价金属离子转运体（divalent metal-ion transporter-1,DMT1）是一种在哺乳动物广泛表达的金属离子转运体,参与机体内多种金属离子的转运。相关研究已证实,金属离子、氧化还原物质、炎性反应介质等因素均可影响DMT1基因的表达。新近的研究推测基因突变可能是DMT1参与低色素性小红细胞贫血的重要机制,DMT1还可能与脑内神经元变性有关。深入研究DMT1将为了解金属离子代谢及其相关疾病的发病机制提供重要的研究资料。     

黄金方对流感病毒FM1株感染小鼠肺组织病毒载量及免疫功能的影响

目的:观察黄金方对甲型H1N1流感病毒FM1株感染小鼠肺组织病毒载量I,FN-γ及血清CD 4+/CD 8+比值的影响。方法:采用滴鼻感染流感病毒FM1株建立小鼠肺炎模型,治疗4 d后采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测肺组织中相对病毒载量,采用双抗体夹心ELISA法测定血清中CD4+和CD 8+含量及肺组织IFN-γ含量。结果:黄金方大、中、小剂量组(6,3,1.5 g.kg-1)均可明显降低感染流感病毒FM1株小鼠肺组织病毒载量,与模型对照组比较有显著性差异(P<0.01,P<0.05),大、中剂量组可明显提高肺组织中IFN-γ水平(与模型对照组比较,P<0.01),中、小剂量组可提高血清CD4+/CD8+比值,与模型对照组比较差异显著(P<0.05)。结论:黄金方在体内对H1N1流感病毒FM1株感染有较好的治疗作用,其治疗作用可能是通过调节免疫功能来实现的。     

影像检查在孕妇甲型H1N1流感重症肺炎中的诊断价值

甲型H1N1流感是一种急性呼吸道传染病,如果治疗不及时,部分患者病情可迅速发展,重症及危重症病例可并发严重肺炎,甚至死亡[1].高危人群包括妊娠期妇女.本文回顾性分析我院收治的15 例妊娠期甲型H1N1流感并发重症肺炎患者的胸部影像表现,以进一步探讨该类患者影像学特点.