氧化槐定碱、槐定碱尾静脉注射对小鼠的急性毒性研究

目的观察氧化槐定碱、槐定碱对昆明小鼠的急性毒性反应。方法通过向昆明小鼠尾静脉注射不同浓度的氧化槐定碱、槐定碱溶液,观察并记录野靛碱、N-甲基金雀花碱、鹰爪豆碱对小鼠的毒性反应。测定氧化槐定碱、槐定碱对小鼠的致死剂量(LD50)。结果昆明小鼠对氧化槐定碱、槐定碱的半数致死剂量(即Prob=0.50时)分别为0.265g/kg、0.058g/kg。结论氧化槐定碱、槐定碱对小鼠有一定的毒性,氧化槐定碱毒性小于槐定碱。     

槐定碱通过靶向MAPKAPK2抑制人结直肠癌的发展

目的研究槐定碱对人结直肠癌发生发展的影响及其分子机制。方法利用CCK8,流式细胞术和免疫荧光等实验方法,阐明槐定碱对结直肠癌细胞(增殖,自噬,凋亡和周期的影响。通过PharmMapper和KEGG databXase等网络药理学方法,发现槐定碱的潜在靶标。并利用CETSA,DARTS分析和蛋白质免疫印迹实验研究槐定碱对其靶标的影响。结果槐定碱能显著抑制结直肠癌细胞增殖和形成集落的能力。槐定碱在浓度为0～160μmol·L~(-1)范围内,呈剂量依赖调节细胞自噬、凋亡和周期的相关蛋白。槐定碱80～160μmol·L~(-1)处理的细胞进行流式细胞术检测,结果显示,槐定碱引起细胞G2/M期阻滞并促进细胞凋亡;细胞内LC3的免疫荧光显示,LC3明显上调,表明槐定碱促进结直肠癌的自噬。过表达MAPKAPK2能显著恢复槐定碱引起的细胞阻滞及自噬、凋亡的促进作用;siRNA敲低MAPKAPK2显示与槐定碱相似的作用,且同时敲低MAPKAPK2和槐定碱处理后作用更加显著。通过临床数据分析,MAPKAPK2的高表达伴随着病人的预后不良。结论槐定碱通过靶向MAPKAPK2促进细胞自噬、凋亡和周期阻滞,从而抑制结直肠癌的发生与发展。     

槐定碱结构改造及其抗肿瘤活性

目的:对槐定碱进行结构改造,合成新型槐定碱衍生物,研究其抗肿瘤活性。方法:以槐定碱为原料,合成了8个14位取代槐定碱衍生物,其结构经1H-NMR,MS证实。经MTT法筛选了衍生物对肝癌、肺癌、结肠癌、胃癌、神经胶质瘤、脑胶质瘤、宫颈癌以及黑色素瘤的抗癌活性。结果:合成的8个槐定碱衍生物中有6个是14位不同构型的槐定碱衍生物。实验显示14位为氯取代的化合物①、②、③和⑧对大部分肿瘤细胞的抑制活性均明显高于槐定碱。结论:在槐定碱14位引入氯原子取代可提高槐定碱的抗肿瘤活性。     

槐定碱滴丸体外溶出度测定

目的:建立测定槐定碱滴丸中槐定碱溶出度的方法。方法:选用小杯法,以0.1mol·L-1盐酸为溶出介质,转速为50r·min-1,用高效液相色谱法测定槐定碱的溶出度,绘制溶出曲线,计算溶出参数T50、Td、m,并用相似因子法进行评价。结果:槐定碱的检测浓度在6.25～100μg·ml-1(r=0.9997)范围内与其峰面积积分值呈良好的线性关系;槐定碱的平均回收率为98.79%(RSD=2.43%),3批样品溶出度相似。结论:本方法简便、准确、可靠,可用于测定槐定碱滴丸中主要组分的溶出度。     

槐定碱微球的质量评价

目的:为确保制剂的质量、疗效和使用的安全性,在确定了槐定碱微球的最佳处方和工艺后,对微球的形态、粒径、红外以及体外释药等方面的制剂学性质进行考察和评价.方法:用乳化交联法制备槐定碱微球,用光学显微镜、扫描电镜、高效液相色谱仪、红外光谱法、差示扫描量热测定法等检测手段对槐定碱微球的理化性质进行考察.结果:槐定碱微球外观圆...     

槐定碱和氧化槐定碱对心脑血管疾病药理作用的研究进展

槐定碱和氧化槐定碱是中药苦豆子中的主要活性成分,可能通过抗氧化、抗炎、抗细胞凋亡、调节钙循环等途径,表现出对心力衰竭、心肌梗死、脑缺血、脑缺血再灌注损伤等心脑血管疾病的良好防治效果。综述近年来槐定碱和氧化槐定碱对心脑血管疾病的防治作用及其作用机制的研究进展,为临床应用槐定碱和氧化槐定碱治疗心脑血管疾病提供参考。     

HPLC、TLC检测砂生槐种子中的生物碱

目的：建立一种快速，有效的方法测定砂生槐种子中生物碱的种类和含量。方法：用TLC快速分离定性总生物碱，并结合HPLC进行精确定量。TLC采用Merck Silica gel 60 F254薄层层析板，氯仿-甲醇-浓氨水（5：0．6：0．1）为展开系统对总碱中主要成份进行定性分析；而后用HPLC法对其中苦参碱，氧化苦参碱和槐果碱的含量进行测定。色谱柱为VP—ODS（5μm，150mm×4．6mm）柱，流动相为乙腈（A），含0．035％三乙胺的0．02mol·L^-1醋酸铵溶液（B）进行梯度洗脱，检测波长210nm，流速1．0mL·min^-1，进样量20μL。结果：TLC分析结果表明生物碱中含有苦参碱，氧化苦参碱，槐果碱，槐定碱和金雀花碱等。HPLC测定时氧化苦参碱，苦参碱，槐果碱分别在3．0—97．0、2．5—80．0和1．6～50．7mg·L^-1范围内呈线性相关，r分别为0．9996，0．9999，0．9999。结论：沙生槐种子中含有苦参碱，氧化苦参碱，槐果碱，槐定碱和金雀花碱，其中氧化苦参碱，苦参碱，槐果碱含量约为21％，9％，0．9％，本文建立的方法能快速准确的测定沙生槐总碱中氧化苦参碱，苦参碱，槐果碱的含量。     

氧化槐定碱对小鼠中枢的抑制作用

目的 :探讨氧化槐定碱对中枢神经系统的影响。方法 :采用行为药理学方法观察并测定氧化槐定碱对阈剂量和阈下剂量戊巴比妥催眠作用的影响 ,对小鼠外观活动和自身活动的影响及对戊四氮惊厥的影响。结果 :ip氧化槐定碱 2 5 0、5 0 0、10 0 0mg·kg-1,小鼠自发活动抑制率分别为 4 2 6%、5 7 2 %、76 3 % ,戊巴比妥钠催眠后入睡时间分别缩短 3 8 4 %、4 9 0 %、3 9 7% ,而睡眠时间分别延长 172 %、13 8%、3 89% ,并能明显加强阈下剂量戊巴比妥钠的催眠作用。氧化槐定碱 5 0 0、10 0 0mg·kg-1不能对抗戊四氮引起的惊厥。结论 :氧化槐定碱具有镇静、催眠等中枢抑制作用     

槐定碱在小鼠体内药物代谢动力学的研究

目的研究槐定碱在小鼠体内的药物代谢动力学。方法小鼠采用等剂量(2 mg·kg-1)静脉、灌胃给药后采用LC-MS/MS法测定不同时间的血药浓度。结果灌胃给药后槐定碱的AUC0¹8 h、Cmax、tmax分别为1 256.2 ng·h·mL-1、756.3 ng·mL-1、1 h,绝对生物利用度为41.8%;静脉给药后槐定碱的AUC018 h、Cmax、tmax分别为1 256.2 ng·h·mL-1、756.3 ng·mL-1、1 h,绝对生物利用度为41.8%;静脉给药后槐定碱的AUC0¹8 h为3 005.3 ng·h·mL-1。结论槐定碱在小鼠体内的药动学行为均符合二室模型,小鼠灌胃给药后绝对生物利用度低。     

复方苦参注射液中苦参碱及槐定碱的含量测定

目的：建立薄层色谱扫描法测定复方苦参注射液中苦参碱及槐定碱的含量。方法：样品直接点于硅胶G薄层板上，以环己烷－醋酸乙酯－二乙胺（8：9：0．6）为展开剂，分离本品中的苦参碱和槐定碱，以碘化铋钾试液和5％亚硝酸钠溶液为显色剂，采用双波长反射法锯齿扫描测定其含量，λS=500nm,λR=650nm，结果：苦参碱在2．01－12．06μg,槐定碱在0．99－5．94μg范围内呈良好的线性关系，回归方程分别为Y苦参碱＝5266．95X＋16215．95,r=0.9991和Y槐定碱＝8244.04X 1122.18,r=0.9993；加样回收率分别为98．91％，RSD苦参碱＝0．85％和98．96％，RSD槐定碱＝0．88％，结论：本法简便，快速，专属性强，重现性好，可用于测定复方苦参注射液的含量。     

氯胺酮对哮喘大鼠气管平滑肌细胞ATP敏感钾电流的影响

目的　研究氯胺酮对哮喘大鼠单一气管平滑肌细胞ATP敏感钾电流 (IKATP)的作用。方法　急性分离哮喘大鼠气管 ,利用膜片钳制技术全细胞记录法观察氯胺酮对哮喘大鼠单一气管平滑肌细胞IKATP的作用。结果　氯胺酮开放气管平滑肌细胞ATP敏感钾通道 (KATP通道 ) ,且具有剂量依赖关系。指令电位在 + 50mV时 ,4种浓度氯胺酮 (1×10 - 7,1× 10 - 6 ,1× 10 - 5 ,1× 10 - 4mol·L- 1)可使IKATP 由53 72± 15 60 pA/pF增加到给药后的 63 86± 19 3 3 pA/pF(n =8,P <0 0 5) ,69 98± 18 44pA/pF(P <0 0 1) ,75 64±19 64pA/ pF (P <0 0 1)和 78 3 7± 19 40pA/ pF (P <0 0 1)。其开放率分别为 118 73 %± 2 2 0 1% (P <0 0 5) ,13 5 18%± 2 7 79% (P <0 0 5) ,14 7 0 7%± 3 3 2 5% (P <0 0 5)和 153 62 %± 3 7 59% (P <0 0 5)。其它指令电位下的IKATP改变也符合此趋势。结论　氯胺酮剂量依赖性的开放哮喘大鼠单一气管平滑肌细胞ATP敏感钾通道 ,这可能是其舒张气管平滑肌的机制之一     

miR-218-5p靶向B细胞淋巴瘤因子3表达影响白血病K562细胞的增殖和凋亡

目的 探讨微小RNA-218-5p(miR-218-5p)靶向B细胞淋巴瘤因子3(BCL3)基因对白血病细胞增殖和凋亡的影响.方法 反转录及荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测正常人骨髓细胞和白血病骨髓细胞中miR-218-5p和BCL3的表达水平.以白血病细胞K562...     

洛美沙星颗粒剂在健康人体内的药动学研究

本文采用高效液相色谱法，对盐酸洛美沙星颗粒剂在健康人体内的药动学进行了试验研究。10名男性健康志愿者，单剂量口服盐酸洛美沙星颗粒剂各400mg，尔后经时采集静脉血，测定血药浓度，药－时数据经PKBP－N1程序处理，得盐酸洛美沙星的药动学参数为：Lagtime0．058±0．033h，Tmax0．74±0．33h，Cmax4．24±0．78μg／ml，t1／2x0．94±0．82h，t1／2β7．77±1．13h，VC87．02±34．10L，K120．268±0．26，K21　0．863±0．16，K10　0．189±0．076。     

阿莫西林胶囊的人体药代动力学及相对生物利用度研究

目的　研究阿莫西林胶囊的人体药代动力学和相对生物利用度。　方法　采用微生物法测定１０ 名健康志愿者单剂量口服２５０ ｍｇ 阿莫西林胶囊和对照品的血药浓度,计算药动学参数和相对生物利用度,并进行统计分析。结果　阿莫西林胶囊的试验品和对照品血药浓度—时间曲线符合一级吸收一房室开放模型,主要药动学参数如下： Ｔ１２ Ｋａ 分别为（１４５ ±０２８） 和（１４４ ±０４４） ｈ , Ｔｍａｘ 分别为（０４９ ±０１９） 和（０４９ ±０２１） ｈ , Ｃｍａｘ 分别为（３６５ ±０４１） 和（３６０±０２７） ｍｇ· Ｌ－ １ ; Ａ Ｕ Ｃ０ ～∞分别为（１０５２ ±１１５） 和（１１２４±１７８） ｍｇ·ｈ － １· Ｌ－ １ 。两种制剂的 Ｔｍａｘ 、 Ｃｍａｘ 和 Ａ Ｕ Ｃ０ ～∞经方差分析差异均无显著性（ Ｐ＞ ００５） 。试验品的相对生物利用度９４９５ ％ ±１０８４ ％ 和９３３６ ％ ±１１００ ％ 。结论　两药生物等效     

超声造影定量参数联合血清微小 RNA-139-5p、微小 RNA-15a检测在卵巢浆液性囊腺癌病人中应用价值

目的 分析超声造影定量参数联合血清微小RNA-139-5p(miR-139-5p)、微小RNA-15a(miR-15a)检测在卵巢浆液性囊腺癌病人中应用价值及意义.方法 选取2017年6月至2019年9月重庆市北碚区中医院收治的92例卵巢浆液性囊腺癌病人为腺癌组及92例卵巢浆液性囊腺瘤病人为腺瘤组.行超声造影检查与血清miR-139-5p、miR-15a水平检测,观察超声造影定量参数(始增时间、达峰时间、增强强度)、血清miR-139-5p、miR-15a水平两组间差异,多因素logistic回归分析各指标与卵巢浆液性囊腺癌的相关性,ROC曲线评估其对卵巢浆液性囊腺癌的诊断效能,Pearson相关分析各指标与淋巴结转移的关系.结果 腺癌组超声造影始增时间、达峰时间、血清miR-15a水平分别为(14.16±2.51)s、(22.28±4.64)s、(0.04±0.02),均低于腺瘤组的(17.48±3.09)s、(29.30±4.97)s、(0.11±0.06)(P<0.05),超声造影增强强度与血清miR-139-5p水平分别为(89.24±12.83)dB、(8.76±2.90),均高于腺瘤组的(73.38±10.74)dB、(4.09±2.52)(P<0.05);logistic回归分析显示,超声造影始增时间、达峰时间、增强强度、血清miR-139-5p、miR-15a均与卵巢浆液性囊腺癌具有相关性(P<0.05);ROC曲线显示,超声造影定量参数与血清指标联合诊断卵巢浆液性囊腺癌的AUC为0.896,高于各单一指标,其诊断敏感度为90.22％,特异度为78.26％;有淋巴结转移卵巢浆液性囊腺癌病人超声造影始增时间、达峰时间、血清miR-15a水平分别为(12.53±2.92)s、(19.84±3.69)s、(0.02±0.01),均低于无淋巴结转移病人的(15.59±2.24)s、(24.42±4.87)s、(0.06±0.03),超声造影增强强度、血清miR-139-5p水平分别为(97.35±14.06)dB、(10.14±3.08),均高于无淋巴结转移病人(82.12±11.63)dB、(7.55±2.86)(P<0.05);Pearson相关性分析显示超声造影始增时间、达峰时间及血清miR-15a水平与卵巢浆液性囊腺癌病人淋巴结转移呈负相关,超声造影增强强度及血清miR-139-5p水平与卵巢浆液性囊腺癌病人淋巴结转移呈正相关(P<0.05).结论 应用超声造影定量参数联合血清miR-139-5p、miR-15a检测可显著提升卵巢浆液性囊腺癌早期诊断效能,且其水平与淋巴结转移密切相关,可为临床诊治提供可靠依据.     

家兔静注水杨醛-N'-(2-呋喃硫羰基)腙铜配合物的药物动力学

目的：研究水杨醛－Ｎ′－（２－呋喃硫羰基）腙铜配合物（ＣＳＦＣ）在兔体内的药物动力学。方法：１０只家兔静脉注射ＣＳＦＣ５ｍｇ·ｋｇ－１，用反相ＨＰＬＣ法测定血清药物浓度。结果：ＣＳＦＣ的血药浓度－时间曲线符合二室开放模型，主要药动学参数为：Ｔ１２α＝３．４±１．７ｍｉｎ，Ｔ１２β＝６５．５±１４．６ｍｉｎ，Ｋ１２＝０．１１８３±０．０６６９ｍｉｎ－１，Ｋ２１＝０．０２２８±０．００６５ｍｉｎ－１，Ｋ１０＝０．１２０２±０．０４０７ｍｉｎ－１，Ｖ０＝０．３０５±０．１８４Ｌ·ｋｇ－１，ＣＬ＝１．８９６±０．４７０Ｌ·ｋｇ－１·ｈ－１，ＡＵＣ＝１７０．１±５７．０ｍｇ·ｍｉｎ－１·Ｌ－１。结论：ＣＳＦＣ在兔体内分布迅速而广泛，消除也较快。家兔静注５ｍｇ·ｋｇ－１，可维持抗结核杆菌有效血浓度６ｈ。     

芸香甙的药代动力学研究

目的研究芸香甙在兔体内的药代动力学。方法家兔一次静注芸香甙５ｍｇ·ｋｇ－１后，利用荧光分光光度法测定不同时间的血药浓度。应用３Ｐ８７药动学软件程序对数据进行计算机处理。结果芸香甙的药时（Ｃ－Ｔ）方程为：Ｃ＝８５．９７８９ｅ－０．９０４４Ｔ＋３４．５１０５ｅ－０．０５８７Ｔ＋４．３８３８ｅ－０．００４６Ｔ。芸香甙的主要药代动力学参数如下：Ｔ１／２ａ：（０．７６０９±０．１０６６）ｍｉｎ，Ｔ１／２ｂ：（１２．５６６７±３．７１３９）ｍｉｎ，Ｔ１／２ｃ：（１６２．５６５１±５０．６０３５）ｍｉｎ，Ｋ１２：（０．５１２３±０．１３１６）ｍｉｎ－１，Ｋ２１：（０．３２９８±０．０７３７）ｍｉｎ－１，Ｋ１３：（０．０７３９±０．０１８２）ｍｉｎ－１，Ｋ３１：（０．０１００±０．００３７）ｍｉｎ－１，Ｋ１０：（０．０７７４±０．０１６０）ｍｉｎ－１，Ｖｃ：（０．０４０４±０．００４４）Ｌ·ｋｇ－１，ＡＵＣ：（１６７９．７５８３±４８０．６０４５）ｍｇ·Ｌ－１·ｍｉｎ－１，ＣＬ（ｓ）：（０．００３１±０．０００８）Ｌ·ｋｇ－１·ｍｉｎ－１。结论芸香甙在兔体内的Ｃ－Ｔ变化符合三室开放模型；芸香甙在体内的分布、消除迅速。     

Retrospective and Prospective Analyses of the Treatment of Overanticoagulated Patients

Study Objective . To compare withholding warfarin therapy with low-dose (2.5 mg) oral vitamin K therapy in excessively anticoagulated patients without bleeding complications. Design . Prospective and retrospective studies. Setting . Anticoagulation clinic at a Veterans Affairs institution. Patients . Twenty-eight men were matched according to initial international normalized ratio (INR) and INR goal ranges. Interventions . The retrospective arm of the study consisted of chart reviews of overanticoagulated patients whose warfarin doses were held until therapeutic INR values were reached. The prospective arm included overanticoagulated patients who were administered a single 2.5-mg dose of oral vitamin K. Measurements and Main Results . Mean days to therapeutic INR values were 2.3 ± 0.6 and 1.4 ± 0.6 (p=0.001), and mean reduction in INR 1 day after treatment intervention was 1.32 ± 0.79 and 3.46 ± 1.31 (p<001) U for the withholding and vitamin K groups, respectively. Conclusion . Compared with withholding the warfarin dose, administration of 2.5 mg of oral vitamin K to excessively anticoagulated patients receiving warfarin significantly reduced the time required to reach a therapeutic INR as well as final INR.     

褪黑素对人前列腺癌PC_3细胞的增殖抑制作用

目的　体外研究褪黑素 (melatonin ,MLT)对人前列腺癌PC3细胞的增殖抑制作用及与 5 Fu联合用药的的影响。方法　用细胞计数法绘制细胞生长曲线、MTT比色法测定细胞活力、改良对硝基酚法测定酸性磷酸酶 (ACP)、改良二苯胺法测细胞内DNA含量及考马斯亮蓝法测定蛋白含量 ,并观察与 5 Fu联合用药对PC3细胞的影响。结果　MLT对PC3、CoLo2 0 5、K562和HeLa细胞的IC50 分别为 (1 2 0±0 30 )、(1 2 7± 0 1 2 )、(1 60± 0 1 6)和 (2 2 5± 0 1 1 )mmol·L- 1 ,MLT对上述细胞增殖的抑制呈时间和浓度依赖性 ,MLT减少PC3细胞的蛋白、DNA含量和降低酸性磷酸酶活性 ,MLT与 5 Fu 0 5mg·L- 1 联合用药有协同作用。结论　MLT对体外培养的肿瘤细胞的增殖有抑制作用 ,与 5 Fu联合用药有协同作用     

Sulfation of R(--)-apomorphine in the human liver and duodenum,and its inhibition by mefenamic acid,salicylic acid and quercetin

1. The aims were to study the sulfation of R-(--)-apomorphine (hereafter apomorphine) in the human liver and duodenum, and to study the rate of inhibition of apomorphine sulphation by mefenamic acid, salicylic acid and quercetin also in the human liver and duodenum. 2. A rapid and sensitive method was developed to measure the sulfation rate of apomorphine in the human liver and duodenum. The method was based on the use of 0.4 µM 3'-phosphoadenosine-5'-phosphosulfate- [35 S] (PAPS) and 50µM apomorphine. The unreacted PAPS was precipitated with barium hydroxide, barium acetate and zinc sulfate. 3. The rate of apomorphine sulfation (mean ± SD and median) was 261 ± 82 and 242 pmol?min -1?mg -1, respectively (liver), and 433 ± 157 and 443 pmol?min -1?mg -1, respectively (duodenum). The apomorphine sulfation rate was higher in the duodenum than in the liver (p = 0.0005). 4. Apomorphine sulfation was correlated with SULT1A1 activity in the liver (r 2 = 0.363, p = 0.005) and duodenum (r 2 = 0.494, p = 0.0005), but it did not correlate with SULT1A3 activity both in the liver and duodenum. 5. The K m estimate of apomorphine sulfation rate was 20 ± 3.6 (liver) and 6.5 ± 0.2 µM (duodenum, p = 0.024), and the V max estimate was 248 ± 99 (liver) and 636 ± 104 pmol?min -1?mg -1 (duodenum, p = 0.018). 6. Mefenamic acid, salicylic acid and quercetin were potent inhibitors of apomorphine sulfation rate in the liver, and the IC 50 estimates were 16 ± 0.2 nM, 54 ± 8.6 µM and 18 ± 2.8 nM, respectively. These compounds were poor inhibitors of apomorphine sulfation in the duodenum. 7. Apomorphine is sulfated by the human liver and duodenum, the highest activity being associated with the duodenum. The K m of apomorphine sulfotransferase is in the order of µM both in the liver and duodenum. The non-steroidal anti-inflammatory drug mefenamic acid and the natural flavonoid quercetin inhibit the hepatic sulfation of apomorphine with an IC 50 in the order of nM.