乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA检测方法及临床应用研究进展

近年来,随着乙型肝炎的研究不断深入,乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)共价闭合环状DNA(covalently c1osed circular DNA,cccDNA)引起了广泛的关注.它被认为是HBV在细胞内开始复制并建立感染的重要标志和抗病毒后乙型肝炎复发的主要原因[1],这些特性使得cccDNA成为了乙型肝炎研究中的一个关键点,清除cccDNA已成为目前抗HBV药物研究的一个重要目标[2-3].     

乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA检测方法及临床应用研究进展

近年来,随着乙型肝炎的研究不断深入,乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)共价闭合环状DNA(covalently c1osed circular DNA,cccDNA)引起了广泛的关注.它被认为是HBV在细胞内开始复制并建立感染的重要标志和抗病毒后乙型肝炎复发的主要原因[1],这些特性使得cccDNA成为了乙型肝炎研究中的一个关键点,清除cccDNA已成为目前抗HBV药物研究的一个重要目标[2-3].     

抗病毒治疗慢性乙型肝炎患者肝细胞cccDNA水平的研究

<正>乙型肝炎病毒(HBV)感染呈世界性流行。HBV cccDNA是HBV复制的原始模板,目前抗病毒治疗药物无法直接清除肝细胞内cccDNA,导致其持续存在肝细胞核内,成为肝炎迁移不愈和复发的根源[1]。本研究对接受抗病毒治疗后的慢性乙型肝炎患者肝细胞cccDNA水平进行检测,现报告如下。1资料和方法1.1病例选择:2012年6月至2013年12月于我院就诊的46例接受单独核苷类药物(阿德福韦酯     

聚乙二醇干扰素α-2a抗病毒过程中cccDNA的变化

目的探讨聚乙二醇干扰素α-2a对慢性乙型肝炎患者肝组织中共价闭合环状DNA(cccDNA)的影响。方法将76例慢性乙型肝炎患者分为对照组和治疗组,对照组应用普通干扰素,治疗组给予聚乙二醇干扰素α-2a治疗48周,观察肝组织中乙肝病毒(HBV)cccDNA检出率和含量,肝组织和血清HBV DNA病毒含量及血清ALT、AST和总胆红素(TBIL)的含量。结果 2组治疗后HBV cccDNA检出率和含量均明显降低(P<0.05),肝组织和血清HBV DNA病毒含量及血清ALT、AST和TBIL的含量均明显降低(P<0.05),治疗组治疗后降低量更显著(P<0.05)。结论聚乙二醇干扰素α-2a对慢性乙型肝炎患者肝组织中cccDNA的清除疗效显著优于普通干扰素。     

核苷类似物抗乙型肝炎病毒耐药相关问题

<正>病毒性肝炎是一个全球性的健康问题[1]。HBV进入肝细胞后形成环状闭合DNA(cccDNA),是HBV前基因组RNA复制的原始模板,其在体内虽含量很少但是半衰期长,现有的抗病毒药对其效果很小,很难从体内清除。核苷(酸)类似物的引进,为慢性乙型肝炎的治疗取得了巨大进展。国内已批准用于慢性乙型肝炎抗病毒治疗的核苷类似物有4种,包括拉米夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦和替比夫定。此     

乙型肝炎病毒前S1抗原检测的临床意义

病毒性肝炎在我国发病率较高,特别是乙型肝炎一直危害着人类健康,在乙型肝炎的诊断中,习惯以HBeAg是否阳性来判断乙型肝炎患者体内乙型肝炎病毒(HBV)的复制及传染性的强弱.但随着HBeAg变异株的出现,乙型肝炎前S1抗原(Pre S1 Ag)成为HBV感染、复制和乙型肝炎患者诊断、治疗和预后评估的一个重要标志.为了进一步探讨Pre S1 Ag与乙型肝炎标志物(HBV M)、HBV DNA的关系,现就251例乙型肝炎病毒感染者的Pre S1 Ag、HBV M和HBV DNA的检测结果分析如下.     

肝组织cccDNA的检测在干扰素治疗慢性乙型肝炎患者中的应用

目的探讨肝组织HBV cccDNA的检测在干扰素治疗慢性乙型肝炎患者预后评价中的应用。方法定量检测36例干扰素治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者治疗前和治疗24周的肝组织cccDNA的水平,观察cccDNA与HBV DNA、HBsAg的关系及HBeAg血清转换组与未转换组cccDNA的变化。结果肝组织cccDNA与血清HBsAg滴度正相关(r=0.625,P<0.05)。停药后随访24周,已发生HBeAg血清学转换的12例患者,其cccDNA与病毒反跳患者相比无统计学差异,但治疗24周时cccDNA与明显低于病毒反跳者。结论 cccDNA的含量与HBsAg的含量相关,cccDNA的动态监测可以预测HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者干扰素抗病毒疗效。     

慢性乙型肝炎患者肝组织中HBV cccDNA定量检测与基因型的相关性分析

目的探讨广东博罗地区慢性乙型肝炎患者肝组织中HBV cccDNA定量检测及其与患者的基因型的相关性。方法对305例患者进行随机分为4组,保证各组之间具有可比性,并对各HBV cccDNA含量的高低并没有明显的相关关系。结果研究为慢性乙型肝炎患者的诊治提供了参考,具有重要的临床意组患者的基因型和肝组织中HBV cccDNA含量进行测定,并分析其相关性。结论表明慢性乙型肝炎患者的HBV基因型和HBV cccDNA含量差异无统计学意义。     

乙肝E抗原阳性产妇卵巢组织中HBV cccDNA阳性的相关因素分析

目的检测人卵巢组织中HBV cccDNA,寻找人卵细胞为HBV靶细胞的证据。方法使用RT-PCR法测定33例慢性乙肝剖宫产手术产妇的卵巢组织HBV DNA、HBV cccDNA含量;同时检测孕妇的肝功能、HBV标志物与HBV DNA定量。结果产妇卵巢组织的HBV cccDNA与血清HBV DNA定量存在明显正相关性。其正相关因素为外周血HBsAg和HBV DNA定量(r=0.335),负相关因素为孕妇谷丙转氨酶水平(ALT,r=-0.360)及谷草转氨酶水平(AST,r=-0.347)。结论卵巢组织是HBV的靶器官,并可在其中复制。卵巢组织HBV cccDNA的存在与外周血HBV DNA载量、卵巢组织的HBV DNA载量和ALT、AST水平密切相关。     

Analysis of the factors correlated to HBV cccDNA in human ovarian in pregnant women with hepatitis B E antigen positive

目的 检测人卵巢组织中HBV cccDNA,寻找人卵细胞为HBV靶细胞的证据.方法 使用RT-PCR法测定33例慢性乙肝剖宫产手术产妇的卵巢组织HBV DNA、HBV cccDNA含量；同时检测孕妇的肝功能、HBV标志物与HBV DNA定量.结果 产妇卵巢组织的HBV cccDNA与血清HBV DNA定量存在明显正相关性.其正相关因素为外周血HBsAg和HBV DNA定量(r=0.335),负相关因素为孕妇谷丙转氨酶水平(ALT,r=-0.360)及谷草转氨酶水平(AST,r=-0.347).结论 卵巢组织是HBV的靶器官,并可在其中复制.卵巢组织HBV cccDNA的存在与外周血HBV DNA载量、卵巢组织的HBV DNA载量和ALT、AST水平密切相关.     

乙肝五项与乙肝DNA联合检测在慢性肝炎中的应用综述

慢性肝炎病毒(HBV)感染的检测主要包括血清学和病毒学两部分,血清学检测指标主要有病毒表达产物及其抗原抗体系统,即血HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc五项标志物,病毒学检测指标主要有血清HBV DNA和肝组织中共价闭合环DNA(cccDNA)等。HBV DNA是反映HBV复制活动和传染性最直接的指标,在确定慢性HBV感染自然史、监测抗病毒药物疗效以及评估急慢性乙型肝炎(乙肝)。     

乙型肝炎病毒表面抗原定量检测的临床应用

血清或其他体液中检测到乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)是人体感染乙型肝炎病毒(HBV)最可靠的标志.血清HBsAg水平可随着慢性乙型肝炎的自然病程而变化,并与肝组织中HBV共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)水平相关,HBsAg水平还可作为评估干扰素和核苷(酸)类似物抗病毒疗效的一项指标.本文综述HBsAg定量...     

慢性乙型肝炎抗病毒治疗的现状

慢性乙型肝炎(CHB)的治疗仍是医学界世界性的科研难题,目前尚无特效药物及治疗方法。对CHB发病机制的研究表明,共价闭合环状DNA(cccDNA)在慢性HBV感染的过程中起关键作用,而慢性感染是病毒、肝细胞和机体免疫系统之间处于相互作用的动态过程。因此抗病毒治疗一直受到重视并成为共识,包括药物治疗和目前尚限于体外试验的基因治疗,介绍如下。     

妊娠合并慢性乙型肝炎血清HBV pgRNA、PreS1抗原表达与肝内胆汁淤积症的相关性分析

目的 探究妊娠合并慢性乙型肝炎病人血清乙型肝炎病毒(HBV)前基因组RNA(HBV pgRNA)、前S1抗原(PreS1Ag)水平变化及与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发生的相关性。方法 选取2017年6月至2020年6月在雅安市人民医院进行孕期检查的慢性乙型肝炎孕妇279例作为研究对象,根据入组病人是否患有ICP分为合并ICP组43例、未合并ICP组236例。比较两组病人血清中HBV pgRNA、PreS1 Ag水平,并分析两组血清HBV pgRNA、PreS1 Ag表达与HBV DNA表达水平相关性;比较两组病人妊娠结局,并分析合并ICP组病人血清HBV pgRNA表达水平及PreS1 Ag阳性表达率与妊娠结局的关系。受试者操作特征(ROC)曲线分析血清HBV pgRNA、PreS1 Ag光密度[D(λ)]值诊断慢性乙型肝炎孕妇合并ICP的效能。结果 合并ICP组慢性乙型肝炎病人血清HBV表面抗原(HbsAg)水平[(3.71±0.92)log IU/mL]、HBV e抗原(HbeAg)阳性率[65.12%(28/43)]、HBV DNA含量[(8.03±1.69)log copi...     

前S1蛋白在乙型肝炎诊断中的作用

目的了解前S1(PreS1)蛋白与乙型肝炎病毒复制的关系及诊断乙型肝炎的价值。方法采用酶联免疫(ELISA)方法对1 500例携带乙型肝炎不同标志物的慢性乙型肝炎患者血清进行前S1蛋白和乙肝标志物(HBV-M)的测定及HBV DNA的检测,并对比分析。检测40例不同病程急性乙型肝炎患者血清,分析PreS1和HBV DNA与丙氨酸氨基转移酶(ALT)间的关系。结果乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAg)阳性组PreS1和HBV DNA的阳性率分别为88%和90%,无统计学意义(P>0.05)。HBsAg、HBeAb、HBcAb组中PreS1和HBV DNA阳性率分别为37%和35%,说明两者检出率高度一致。急性乙型肝炎患者PreS1与ALT的关系相比符合率高(P>0.05),HBV DNA与ALT相比符合率低P<0.05。结论PreS1能够敏感地反映乙型肝炎病毒的复制情况,尤其是反映HBeAg阴性的乙型肝炎患者是否有病毒复制,在急性乙型肝炎患者中PreS1先于HBV DNA阴转,提示疾病的预后良好。     

乙型肝炎药物临床治疗的现状及研究进展

乙型肝炎病毒(HBV)感染依然是全球需要关注并解决的问题,目前其临床治疗方法无法彻底消除HBV共价闭合环状脱氧核糖核酸(HBV cccDNA)以达到彻底治愈乙型肝炎的目的。基于现代科学研究进展,HBV与宿主之间的相互作用关系逐渐明朗,一些靶向于HBV生命周期各环节的药物正在被开发利用。乙型肝炎的治疗途径主要是直接抗病毒治疗和免疫疗法2种。文中综述乙型肝炎药物临床治疗的现状文献,并分析了其研究进展。     

国产恩替卡韦分散片抗乙型肝炎病毒疗效观察

慢性乙型肝炎患者需要长时间进行抗病毒治疗,恩替卡韦分散片为国产新一代鸟嘌呤核苷类似物,对乙肝病毒(HBV)多聚酶具有抑制作用,对组织学改善及HBV DNA的下降幅度和ALT复常率血清学转换等方面,均有明显作用[1].本研究采用药物治疗慢性乙型肝炎患者,报道如下.     

HBV-M量化指标HBV DNA及PreS1抗原相关性分析及临床意义

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物定量与HBV DNA定量及乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S1(PreS1)的关系.结果用时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)对乙型肝炎五项定量分析.用荧光定量(FQ)-聚合酶链反应(PCR)技术对HBV DNA定量分析.用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定PreS1.结果HBVDNA拷贝数与乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)值呈正相关(相关系数分别是r=0.272、P＜0.05;r=0.0054,P＜0.01),与乙型肝炎核心抗体(HBcAb)值呈负相关(r=-0.273,P＜0.01);HBeAb( )组的HBV DNA平均拷贝数明显高于HBeAb( )组;PreS1在HBeAg( )组阳性率高于抗HBe( )组.结论HBeAg与HBV DNA有相关性,是病毒复制的指标,两者与PreS1具有伴随关系;HBsAg是HBV外膜的组成部分,它的高表达与HBV复制呈正相关.     

慢性乙型肝炎患者HBV DNA水平的影响因素分析

乙型肝炎病毒(HBV)的持续性复制在慢性乙型肝炎(乙肝)的发展过程中起着重要的作用。它可以引起肝脏的氧化应激和炎症反应水平增高,从而增加肝纤维化、肝硬化及肝癌的风险[1]。HBV的生物学活性及复制水平受到宿主各种因素的制约,而血清HBV DNA水平在一定程度上反映了HBV的生物学活性和复制水平[2]。高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)具有抗炎等生物学活性,同时可能作为宿主非特异性免疫反应的一部分影响HBV的生物学活性和复制水平[3]。本研究旨在探讨HBV与HDL-C可能存在的关系。     

肝癌患者血清乙肝病毒e抗原与肝细胞HBV cccDNA水平的相关性

目的 探讨肝细胞癌（HCC）感染乙型肝炎病毒（HBV）患者乙肝病毒e抗原（HBeAg）与患者癌及癌旁组织内HBV DNA、cccDNA水平的关系。方法 收集2012～2015年解放军第105医院96例接受肝癌切除术HBV相关HCC患者血清及其癌和癌旁组织,用荧光探针法检测HBV DNA和cccDNA水平,化学发光法检测血清HBeAg水平,比较不同感染阶段HCC患者血清及组织HBV DNA水平及cccDNA的差异,分析HBeAg与肝细胞HBV DNA及cccDNA的关系,并使用血清学指标构建HBV DNA及cccDNA回归模型。结果 HBeAg（+）/HBeAb（-）组血清HBV DNA、癌旁组织HBV DNA及cccDNA水平高于HBeAg（-）/HBeAb（+）组,差异均有统计学意义（P<0.05）。肝癌患者HBeAg与癌旁组织HBV DNA（r=0.476,P<0.05）和cccDNA（r=0.549,P<0.05）存在相关性。不同TNM分期HCC患者HBeAg与癌旁组织内HBV DNA及cccDNA均相关（P<0.05）。使用血清学指标构建的回归模型预测癌旁组织HBV DNA及cccDNA的变化R²值分别为0.549及0.542（P<0.05）。结论 肝癌患者血清HBeAg与癌旁组织中HBV DNA及cccDNA存在相关性,且不受分期影响,血清学指标回归模型可用于肝癌患者组织HBV DNA及cccDNA的辅助监测。