接种表达细胞因子基因的重组HIV-1基因组DNA疫苗能增强HIV-1特异性免疫应答

１型人类免疫缺陷症病毒（ＨＩＶ－１）ＤＮＡ疫苗能诱导实验动物产生体液和细胞免疫应答,但这些免疫应答弱且短暂。ＤＮＡ疫苗免疫研究结果证实,白细胞介素２（ＩＬ－２）或粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）基因与ＨＩＶ－１基因共表达可增强抗原特异性抗体应答。 作者以ＨＩＶ－１基因组为载体,通过ＤＮＡ重组技术分别构建了缺失ｔａｔ及ｎｅｆ基因（以消除其免疫抑制作用）但含有ＩＬ－２、ＧＭ－ＣＳＦ及γ干扰素（ＩＦＮ－γ）基因的重组质粒,分别称为ｐＴＸ ＧＥ／ＩＬ－２、ｐＴＸ ＧＥ／ＧＭ－ＣＳＦ及 ｐＴＸ ＧＥ…     

丙肝病毒非结构4区和5区抗原的克隆表达及纯化鉴定

通过分析丙肝病毒（ＨＣＶ）的非结构４区（ＮＳ４）和５区（ＮＳ５）蛋白的氨基酸序列，推测确定抗原决定簇位点。用ＲＴ－ＰＣＲ技术从中国丙肝病人血甭中扩增克隆含抗原决定簇基因的ＮＳ４及ＮＳ５基因，将该丙段基因分别克隆至质粒表达载体ｐＥＴ２８ａ（＋）内，转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３），成功了高儿表达ＮＳ４和ＮＳ５蛋白的工程菌，ＩＰＴＧ诱导后两蛋白在工程菌内的表达量分别约占菌体蛋白的３３％和２８％。经Ｓｅｐ     

半合成新抗生素──抗生素89－07的合成和结构测定

以庆大霉素Ｃ１ａ为母核，采用保护合成法，将其二脱氧链霉胺（２－ＤＯＳ）１－Ｎ位上的１个氢原子用１个乙基取代，得到半合成新抗生素８９－０７。经ＩＲ、ＵＶ、ＭＳ、１Ｈ－ＮＭＲ、１３Ｃ－ＮＭＲ、ＤＥＰＴ、１Ｈ－１Ｈ－ＣＯＳＹ、１３Ｃ－１Ｈ－ＣＯＳＹ等测试证实该抗生素和中间体的结构分别与１－Ｎ－乙基ＧＭＣ１ａ和３．２’，６’－三－Ｎ－乙酰基ＧＭＣ１ａ（Ｐ１）、３，２’，６’－三－Ｎ－乙酰基－１－Ｎ－乙基ＧＭＣ１ａ（Ｐ２）相一致。     

半合成新抗生素——抗生素89—07的合成和结构测定

以庆大霉素Ｃ１８为母核，采用保护合成法，将其二脱氧链霉胺（２－ＤＯＳ）１－Ｎ位上的１个氢原子用１个乙基取代，得到半合成新抗生素８９－０７，经ＩＲ、ＵＶ、ＭＳ、＾１Ｈ－ＮＭＲ、＾１３Ｃ－ＮＭＲ、ＤＥＰＴ、＾１Ｈ－＾１Ｈ－ＣＯＳＹ、＾１３Ｃ－＾１Ｈ－ＣＯＳＹ等测试证实抗生素和中间体的分别与１－Ｎ－乙基ＣＭＣ１ａ和３，２，６，－三－Ｎ－乙酰基ＧＭＣ１ａ（Ｐ１），３，２，６，－三－乙酰基１－Ｎ－乙基ＧＭＣ     

新型大肠杆菌融合表达系统表达水蛭素Ⅲ基因研究

选用大肠杆菌Ｌ－门冬酰胺酶（ＡＳＰｓⅡ）高效表达质粒ｐＫＡ作为融合表达载体,将水蛙素Ⅲ（ＨＶ３）人工合成编码基因插入 ｐＫＡ质粒的 ＡＳＰｓⅡ编码基因 ａｎｓＢ中,使 ＡＳＰｓ Ⅱ１Ｎ端的 ８９个氨基酸残基通过甲硫氨酸残基与 ＨＶ３形成融合蛋白,从而构建成 ＡＳＰｓⅡ－ＨＶ３融合蛋白表达质粒 ｐＫＡＨ,通过基因操作将该质粒的低拷贝数复制原长更换成 ｐＵＣ高拷贝数复制原点,进而构建成ＡＳＰｓⅡ－ＨＶ３融合蛋白高效表达载体 ｐＵＫＡＨ。该质粒在大肠杆菌 ＪＭ１０５宿主细胞中表达后,融合蛋白（１５． ６ ｋＤ）占细菌总蛋白 １０ ５％,该融合蛋白经 ＣＮＢｒ切割释放出活性水蛭素分子,抗凝血活力达约 ２０ ＡＴＵ／ｍｌ培养液,为以后进一步研究打下了基础。     

呋喃苯胺酸对急性呼吸性酸中毒脑脊液“HCO3-”的影响

通过观察犬急性呼吸性酸中毒动脉血和ＣＳＦ酸碱变量及ＣＳＦ主要离子变化，结果表明，两组ＰａＣＯ２和［ＨＣＯ３－］ａ分别升高约为３．９９９ｋＰａ和３ｍｍｏｌ／Ｌ时，ＰＣＳＦＣＯ２升高同血浆相似。然而，Ｉ组（ｉＣＶ这尿）［ＨＣＯ３－］ＣＳＦ和［Ｃｌ－］ＣＳＦ的互逆变量（８．２ｍｍｏｌ／Ｌ）＞Ⅱ组（ｉＣＶ等量生理盐水，５ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０１）。说明速原有抑制ＣＳＦＨＣＯ３－和血浆Ｃｌ－的交换作用，能增强ＣＳＦ的代偿能力，减少ＣＳＦ的生成，ＨＣＯ３－／Ｃｌ－交换对ＣＳＦ酸碱调节有一定作用。     

甘糖酯对充血性心力衰竭患者血清肿瘤坏死因子—α浓度的影响及？…

目的 为探讨甘糖酯（ＰＧＭＳ）在治疗慢性充血心力衰竭（ＣＨＦ）中的作用。方法 将４０例ＣＨＦ患者随机分为两组。ＰＧＭＳ组（２０例）在常规治疗心衰的基础上加用ＰＧＭＳ１００ｍｇ,ｔｉｄ,２ｗ后与常规心衰组（２０例）进行比较。结果：在ＰＧＭＳ组,ＣＨＦ口才血汪肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）浓度降低较常规组显著（Ｐ〈０．０５）,且左室射血分数明显改善（Ｐ〈０．０５）。提法 ＰＧＭＳ在治疗ＣＨＦ过程中,可     

表达结核杆菌不同分泌蛋白的DNA疫苗保护效力的差异

作者用质粒载体ｐＪＷ４３０３构建了分别表达结核杆菌分泌蛋白ＭＰＴ６４、Ａｇ８５Ｂ和ＥＳＡＴ－６的 ＤＮＡ疫苗 ＤＮＡ－６４、 ＤＮＡ－８５Ｂ和ＤＮＡ－Ｅ６。分别用上述ＤＮＡ疫苗免疫Ｃ５７Ｂ１／６小鼠,并以亲代ｐＪＷ４３０３作为阴性对照。免疫后４周用有毒力Ｈ３７ＲＶ株（约１００个活菌）通过气溶胶攻击,４周后取肺匀浆作活菌计数;在免疫后不同时间取血清用ＥＬＩＳＡ测特异性抗体;取部分小鼠淋巴结和脾细胞作淋巴细胞增殖试验及测细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ）应答和γ干扰素（ＩＦＮ－γ）分泌细胞。 结果显示,ＤＮＡ－６…     

7α－溴乙酰胺基头孢烷酸合成工艺的改进

７α－溴乙酰胺基头孢烷酸合成工艺的改进傅海燕，黄敏康（白云山制药股份有限公司，广州５１０５１５）ＩＭＰＲＯＶＥＤＳＹＮＴＨＥＳＩＳＦＯＲ７－（α－ＢＲＯＭＯＡＣＥＴＡＭＩＤＯ）ＣＥＰＨＡＬＯＳＰＯＲＡＮＩＣＡＣＩＤ￥ＦＵＨａｉ－Ｙａｎ；ＨＵＡＮＧＭｉ...     

rhGM-CSF生物活性的测定方法及工作标准品的标定

目的：研究用ＴＦ－１细胞测定ｒｈＧＭ－ＣＳＦ（重组人粒／巨噬细胞集落刺激因子）生物学活性的方法并用ＷＨＯ ｒｈＧＭ－ＣＳＦ国际标准品进行工作标准品和对照品（生白能先灵产品）的联合标定。方法：采用 ＭＴＴ染色法。结果：首次将（４,４）法引入ｒｈＧＭ－ＣＳＦ生物活性的测定,使所标定的工作标准品生物效价为每瓶１．３７×１０６ ＩＵ,所标定的对照品生物效价为每瓶１．７９×１０６ＩＵ,效价的平均可信限率分别为 ４． ９０４％和 ４． ３３３％。结论：（４, ４）法可用于ｒｈＧＭ－ＣＳＦ生物活性的测定,结果便于统计分析。所标定的工作标准品可作为ｒｈＧＭ－ＣＳＦ生物活性测定的工作标准。     

慢性丙型肝炎患者血清TNF/Stnf-R的变化及其临床意义

目的 探讨慢性丙型肝炎（ＨＣＶ）患者血清肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和可生肿瘤坏死因子受体（ＳＴＮＦ－Ｒ）的变化及其临床意义。方法 应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测慢性ＨＣＶ患者血清ＴＮＦ和ＳＴＮＦ－Ｒ水平；同时采用速率法在全自动生化分析仪上测定血清丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）和天冬氨酸转氨酶（ＡＳＴ）的活性。结果 慢性ＨＣＶ患者血清ＴＮＦ和ＳＴＮＦ－Ｒ显著高于下沉脸；血 ＳＴＦ－Ｒ２与ＡＳＴ、ＡＬＴ显     

联产人尿激肽释放酶的纯化工艺

为解决联产工艺人尿激肽释放酶（ＨＵＫＮ）的纯化，用ＣＭ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ，ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ和Ａｐｒｏｔｉｎｉｎ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－４Ｂ亲和层析柱纯化ＨＵＫＮ，可得到ＨＰＬＣ单峰，比活性２９３．９ＥＵ／ｍｇ的产品，收率为４８．６％，本工艺简单，容易放大，能适合大规模生产的需要。     

比较粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子与粒细胞集落刺激因子对骨髓抑制的疗效

目的：比较粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）与粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）治疗因化学治疗（化疗）致骨髓抑制的疗效。方法：３９例恶性肿瘤病人随机分ＧＭ－ＣＳＦ组１８例（男性１２例，女性６例，中位年龄４２ａ）与Ｇ－ＣＳＦ组２１例（男性１３例，女性８例，中位年龄５３ａ）。因化疗后引起骨髓抑制，分别应用ＧＭ－ＣＳＦ１５０μｇ／ｄ与Ｇ－ＣＳＦ１００μｇ／ｄ，ｓｃ，ｑｄ×（２￣６）ｄ。结果：２组     

GM—CSF工程菌构建及鉴定

采用ＰＣＲ技术，从细胞中克隆粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）并在５′端设计上凝血酶切位点５个组氨酸密码子，起始密码子及ＥＣＯＲＩ酶切点位，在３′端设计上ＢａｍＨＩ酶切位点，将扩增产物酶切后克隆到ＰＢＶ２２０质粒的ＥＣＯＲＩ－ＨｉｎｄⅢ酶切位点，转化大肠杆菌ＤＨ５α筛选阳性重组子（Ｐ＾ＧＭ０９／ＤＨ５α）经细菌形态，菌落形态功生化鉴别均符合要求，在Ｅ．Ｃｏｌｉ中获得高效表达，表达量占体总     

用夹心酶联免疫法研究hGM－CSF在大鼠体内的药物代谢动力学

用灵敏的夹心酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）建立了检测重组人ｈＧＭ－ＣＳＦ药代动力学的方法。此方法ｈＧＭ～ＣＳＦ在１２．５～０．３９ｎｇ·ｍｌ￣（－１）范围内，检测呈线性相关。最低检测灵敏度为０．４ｎｇ·ｍｌ￣（－１）。本方法不受血清中潜在干扰因素的影响，检测具高度特异性。大鼠ｓｃｈＧＭ－ＣＳＦ５０，１００，２００μｇ·ｋｇ￣（－１）后１５ｍｉｎ，血中即有较高浓度的ｈＧＭ－ＣＳＦ，１ｈ左右达峰浓度，以后快速下降。皮下给药，尿中可检测到原型ｈＧＭ－ＣＳＦ，但累积排泄率较低。本研究为临床合理用药提供依据。     

血清胰岛素与糖尿病合并高血压的关系

对７６例非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）合并高血压患者及７６例ＮＩＤＤＭ血压正常者检测了空腹血清胰岛素（ＦＩＮＳ）、Ｃ－肽（Ｃ－Ｐ）、血糖（ＦＢＧ）、胰高血糖素（ＧＲ）、甘油三酯（ＴＧ）、总胆固醇（ＴＣＨ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ）。结果发现：１．高血压组ＦＩＮＳ、Ｃ－Ｐ、年龄、体重指数（ＢＭＩ）、ＴＣＨ显著高于对照组；而胰岛素敏感指数（ＦＢＧ／ＦＮＳ）、ＨＤＬ显著低于对照组。２．全部患者相     

4－羟基－4＇－氯二苯甲酮合成工艺改进

４－羟基－４＇－氯二苯甲酮合成工艺改进申永存，邹淑静（武汉化工学院制药教研室，武汉４３００７４）ＩＭＰＲＤＶＥＤＳＹＮＴＨＥＳＩＳＯＦ４－ＨＹＤＲＯＸＹ－４＇－ＣＨＬＯＲＯＢＥＮＺＯＰＨＥＮＯＮＥ￥ＳＨＥＮＹｏｎｇ－Ｃｕｎ；ＺＯＵＳｈｕ－Ｊｉｎｇ（Ｗ...     

比较粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子与粒细胞集落刺激因子对骨髓抑制的疗效

目的：比较粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）与粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）治疗因化学治疗（化疗）致骨髓抑制的疗效。方法：３９例恶性肿瘤病人随机分ＧＭ－ＣＳＦ组１８例（男性１２例，女性６例，中位年龄４２ａ）与Ｇ－ＣＳＦ组２１例（男性１３例，女性８例，中位年龄５３ａ）。因化疗后引起骨髓抑制，分别应用ＧＭ－ＣＳＦ１５０μｇ／ｄ与Ｇ－ＣＳＦ１００μｇ／ｄ，ｓｃ，ｑｄ×（２～６）ｄ。结果：２组外周血白细胞总数及中性粒细胞计数与用药前比较均上升（Ｐ＜０．０１），２组间比较无显著差异（Ｐ＞０．０５）。不良反应均少而轻。结论：ＧＭ－ＣＳＦ与Ｇ－ＣＳＦ治疗化疗所致的骨髓抑制，效果相似。     

庚基毒扁豆碱的合成

庚基毒扁豆碱的合成ＳＹＮＴＨＥＳＩＳＯＦＨＥＰＴＹＬＰＨＹＳＯＳＴＩＧＭＩＮＥ王明亮傅辛福（南京海军医学专科学校药检系，江苏２１００９９）ＷＡＮＧＭｉｎｇ－Ｌｉａｎｇ，ＦＵＸｉｎ－Ｆｕ（Ｄｅｐｔ．ｏｆＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，ＮａｖａｌＭｅｄｉｃａｌＣ...     

用裸RNA免疫小鼠产生抗天然HIV-1包膜糖蛋白单克隆抗体

作者介绍了使用西门利克森林病毒（ＳＦＶ）这一新型表达系统产生具有天然构型的１型人类免疫缺陷症病毒（ＨＩＶ－１）包膜（Ｅｎｖ）糖蛋白，以及用裸ＳＦＶ－ｇｐ１６０ＲＮＡ免疫小鼠制备抗Ｅｎｖ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）和对１２ＨＺ杂交瘤细胞系进行鉴定的结果。用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增全长ＨＩＶ－１ＨＸＢ２ｅｎｖ基因并将其插入ｐＳＦＶ－１载体的ＢａｍＨＩ位点，构建表达载体ＰＳＦＶ－ｇｐ１６０．纯比后采用电穿孔技术将ＳＦＶ－ｇｐｌ６０ＲＮＡ转染ＢＨＫ－２１细胞。以蛋白印迹法、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及免疫荧光法检测Ｈ…