超高效液相色谱-质谱用于2型糖尿病大鼠粪样代谢物指纹图谱研究

目的研究Wistar大鼠对照组、高脂组及2型糖尿病(DM-2)模型组的粪样代谢物谱变化,从代谢组学的角度区分2型糖尿病(DM-2)模型。方法采用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)技术对对照组、高脂组及2型糖尿病(DM-2)模型组的大鼠粪样代谢物谱进行分析测定。采用主成分分析(PCA)模型对对照组、高脂组及2型糖尿病(DM-2)模型组的大鼠进行分类。结果对照组、高脂组及2型糖尿病(DM-2)模型组的大鼠粪样代谢物谱存在明显差别。发现了3个潜在的生物标记物。结论粪样代谢物指纹图谱的研究可成功用于2型糖尿病模型的鉴别,为临床诊断提供依据。     

沙蓬粗寡糖对GK大鼠肝、肾保护作用及机制探讨

2型糖尿病（T2DM）导致的肝、肾损伤是糖尿病常见并发症,也是糖尿病死亡的主要原因之一[1-2],因此,预防及延缓T2DM并发症发生发展的研究及药物的开发备受人们关注。GK大鼠是自发性非肥胖型糖尿病动物模型[3],与人类T2DM病程特点尤为相似[4]。本实验应用沙蓬粗寡糖（AOS）对GK大鼠进行干预,观察其对肝、肾的保护作用,为沙蓬进一步开发应用提供研究基础。     

用高脂乳剂建立2型糖尿病大鼠模型及其血糖稳定性的研究

糖尿病是最常见的内分泌代谢紊乱性疾病之一，其中2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）的发病率占糖尿病90％以上。该病发病率急剧增加，仅次于心血管病和恶性肿瘤。因此，建立较为理想的T2DM大鼠模型有助于进行糖尿病及相关并发症的研究。本研究采用高脂乳剂给Wistar大鼠灌胃，使其先产生胰岛素抵抗，再结合两次给药法腹腔注射四氧嘧啶（alloxan），在短时间内成功制备了T2DM大鼠模型，并连续监测该模型大鼠动态血糖的变化规律。     

地黄寡糖在2型糖尿病大鼠模型上的降血糖作用及机制

目的研究地黄寡糖(ROS)在2型糖尿病(T2DM)动物模型和正常大鼠高血糖模型上对血糖的影响及机制。方法采用长期高脂肪饲料饲养加小剂量链脲佐菌素(STZ,30mg·kg-1,ip)诱导♀大鼠2型糖尿病动物模型;采用葡萄糖(2·5g·kg-1,ip)和肾上腺素(300μg·kg-1,ip)诱导正常♂大鼠高血糖模型。动物分为正常对照组、2型糖尿病模型组或高血糖模型组、ROS给药组及阳性对照二甲双胍组,以上各组均为灌胃给药。结果与2型糖尿病模型组比较,ROS高、低剂量组均可降低糖尿病大鼠的血糖值,以高剂量组最为明显;ROS对血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量有降低趋势,对高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量有升高趋势;ROS可使肝脏葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性降低,使肝糖原和胰岛素含量呈增加趋势;对正常大鼠肾上腺素性高血糖模型,ROS给药6d后,血糖峰值比高血糖模型组低。结论ROS灌胃给药对2型糖尿病大鼠的血糖有降低作用,其机制与降低肝葡萄糖-6-磷酸酶的活性有关,也可能与增加大鼠肝糖原合成和促进胰岛素分泌有关。ROS亦有降低大鼠肾上腺素性高血糖的作用。     

蛇葡萄素对2型糖尿病大鼠NO/NOS水平及抗氧化能力的影响

目的 研究蛇葡萄素对2型糖尿病大鼠的降糖作用及NO/NOS水平和抗氧化能力的影响.方法采用高糖高脂饲料饲养大鼠1个月,再一次性腹腔注射小剂量链脲佐茵素,建立2型糖尿病大鼠模型.观察高、低剂量蛇葡萄素对糖尿病大鼠的降糖作用,并检测各组动物血清NO/NOS及肾脏组织SOD,MDA,GSH-Px含量.结果高、低剂量蛇葡萄素均能降低2型糖尿病大鼠的血糖水平,抑制糖尿病大鼠血浆NO、iNOS水平,降低肾脏组织MDA含量,提高SOD,GSH-Px活性.与模型组比较差异显著(P<0.05或0.01).结论 蛇葡萄素能够降低2型糖尿病大鼠血糖,增强糖尿病大鼠机体抗氧化作用及抑制糖尿病大鼠血清NO/iNOS水平.     

甲壳低聚糖硒对2型糖尿病大鼠胰岛素指标及胰腺组织的影响

目的观察甲壳低聚糖硒(COS-Se)对2型糖尿病大鼠的胰岛素含量、胰岛素敏感性及胰腺组织的影响。方法制备2型糖尿病大鼠模型,分别给予COS-Se、Se、甲壳低聚糖(COS)对其进行干预,观察20周,期间检测血糖、胰岛素的含量、胰岛素敏感指数及胰腺组织HE染色观察。结果 COS-Se、Se、COS对糖尿病模型的高胰岛素血症都有一定改善作用,随着时间的延长,COS-Se的改善作用更明显。结论 COS-Se可保护胰岛细胞,改善2型糖尿病大鼠的胰岛素敏感性。     

蛇葡萄素对2型糖尿病大鼠NO/NOS水平及抗氧化能力的影响

目的研究蛇葡萄素对2型糖尿病大鼠的降糖作用及NO/NOS水平和抗氧化能力的影响。方法采用高糖高脂饲料饲养大鼠1个月,再一次性腹腔注射小剂量链脲佐菌素,建立2型糖尿病大鼠模型。观察高、低剂量蛇葡萄素对糖尿病大鼠的降糖作用,并检测各组动物血清NO/NOS及肾脏组织SOD,MDA,GSH-Px含量。结果高、低剂量蛇葡萄素均能降低2型糖尿病大鼠的血糖水平,抑制糖尿病大鼠血浆NO、iNOS水平,降低肾脏组织MDA含量,提高SOD,GSH-Px活性。与模型组比较差异显著(P<0.05或0.01)。结论蛇葡萄素能够降低2型糖尿病大鼠血糖,增强糖尿病大鼠机体抗氧化作用及抑制糖尿病大鼠血清NO/iNOS水平。     

二甲双胍对1型糖尿病大鼠周围神经病变的影响及机制初探

糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy, DPN)是1型和2型糖尿病中最常见的微血管并发症之一,常导致患者遭受严重的痛觉过敏和异常性疼痛。迄今为止, DPN的临床治疗效果仍不令人满意。二甲双胍是一种几十年来一直被安全、广泛地用于治疗2型糖尿病的抗糖尿病药物。研究表明二甲双胍可改善DPN引起的疼痛,但是其对DPN神经传导速度、坐骨神经形态的影响及改善DPN的机制还不清楚。因此,本研究以链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)诱导SD大鼠形成的1型DPN模型为对象,考察二甲双胍对糖尿病周围神经病变的影响及探讨初步作用机制。所有动物实验操作和福利均遵循中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所实验动物伦理与动物福利委员会的规定。模型形成成功后,将STZ糖尿病大鼠随机分为模型组和二甲双胍治疗组,另取10只正常SD大鼠为正常对照组,连续灌胃给药12周。结果表明:二甲双胍可显著降低STZ大鼠血糖、糖化血红蛋白、摄食量和饮水量;二甲双胍明显增大STZ大鼠神经传导速度和机械刺痛阈值,延长热板潜伏期阈值,且改善坐骨神经病理形态异常;此外,二甲双胍增加S...     

芪莲汤颗粒长期干预对大鼠糖尿病并发症的影响

目的观察芪莲汤颗粒对糖尿病模型大鼠糖尿病并发症的中长期疗效。方法采用高脂饲料联合链脲佐菌素腹腔注射制备2型糖尿病大鼠模型，芪莲汤颗粒剂干预6个月。测定大鼠的认知记忆功能、肾功能、尿蛋白，统计眼部白内障发生率，病理切片观察肾脏、脑、眼底的病理改变。结果芪莲汤颗粒长期干预可以显著改善大鼠认知记忆功能和肾功能，降低尿蛋白排泄率和眼白内障发生率。结论芪莲汤颗粒剂对大鼠2型糖尿病的治疗效果较好，能够延缓糖尿病并发症的产生，减轻长期高糖高脂代谢紊乱状态对糖尿病大鼠器官实质和功能的损害。     

甲异靛对1型糖尿病大鼠心肌损伤的修复作用

目的观察甲异靛对糖尿病大鼠Wnt/β-catenin信号通路中相关蛋白在1型糖尿病大鼠心肌中表达的影响,明确其在糖尿病心肌病发生、发展中的作用。方法 SD♂大鼠腹腔一次性注射链脲佐菌素建立1型糖尿病大鼠模型,取模型成功大鼠分为糖尿病4、8周模型组以及甲异靛4、8周给药组。尾静脉采血检测空腹血糖值;HE染色法观察心肌病理结构变化;Western blot和免疫组织化学法检测心肌GSK-3β、p-GSK-3β、Wnt2、β-catenin、NF-κB-p65、p-NF-κB-p65蛋白表达变化。结果与正常对照组比较,1型糖尿病大鼠血糖值明显升高,体质量明显下降(P<0.01),8周甲异靛给药组大鼠血糖与糖尿病组比较明显下降(P<0.01);显微镜下能观察到糖尿病模型组大鼠心肌不同程度局灶性心肌细胞肥大、溶解性坏死、纤维组织增生等,甲异靛给药组大鼠心肌病变较糖尿病模型组有不同程度的缓解。糖尿病模型大鼠相对于正常对照组,心肌p-GSK-3β、Wnt2、β-catenin、p-NF-κB-p65表达升高,尤其是8周时,差异有显著性(P<0.01),给药组的蛋白表达与DM模型组比较明显降低(P<0.01)。结论甲异靛可能是通过降低Wnt2、β-catenin、GSK-3β等蛋白的表达,从而抑制Wnt/β-catenin信号通路在糖尿病大鼠体内的激活,参与修复糖尿病大鼠的心肌损伤及炎症过程,进一步研究该药在糖尿病大鼠心肌损伤修复中的作用机制,将为糖尿病心肌病找到新的治疗靶点提供理论依据。     

吸烟2型糖尿病大鼠葡萄糖转运子4的表达

目的了解葡萄糖转运子4在吸烟2型糖尿病大鼠骨骼肌组织中的表达,探讨吸烟对2型糖尿病发生发展的作用。方法以健康成年Wistar大鼠为研究对象,随机分为正常对照组、2型糖尿病非吸烟组及2型糖尿病吸烟组。正常对照组予普通饲料喂养,2型糖尿病吸烟组及2型糖尿病非吸烟组给予高糖高脂饲料喂养。7周时静脉注射链脲佐菌素诱导2型糖尿病模型。8周时2型糖尿病吸烟组大鼠关进"被动吸烟箱"内,12周时检测三组血清胰岛素及血糖等指标进行比较。实验12周时三组大鼠均处死,PCR法检测葡萄糖转运子4在骨骼肌组织中的表达。结果葡萄糖转运子4在2型糖尿病吸烟组及2型糖尿病非吸烟组骨骼肌组织中的表达均明显低于正常对照组。葡萄糖转运子4在吸烟2型糖尿病大鼠骨骼肌组织中的表达明显低于2型糖尿病非吸烟组。结论吸烟可能通过下调葡萄转运子4的表达增加胰岛素抵抗,促进2型糖尿病的发生和发展。     

原花青素对2型糖尿病局灶性脑缺血大鼠海马组织兴奋性氨基酸的影响

目的探讨原花青素(PC)对2型糖尿病局灶性脑缺血大鼠海马组织兴奋性氨基酸(EAA)的影响。方法通过高脂高糖饮食4 wk,尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)25.0 mg·kg~(-1)制备2型糖尿病大鼠模型,2 wk后建立局灶性脑缺血模型,24 h后处死,高效液相色谱法测模型大鼠海马组织EAA,观察PC(50、100、200 mg·kg~(-1))对EAA的影响。结果与假手术组比较,普通脑缺血大鼠模型和2型糖尿病缺血模型谷氨酸(Glu)和天冬氨酸(ASP)及抑制性氨基酸γ-氨基丁酸(CABA)均有升高(P<0.05,P<0.01),但2组间无明显差异(P>0.05),对甘氨酸(Gly)无明显影响(P>0.05);与2型糖尿病缺血模型组相比,PC中、高剂量组Glu、ASP显著下降(P<0.01),各剂量组对GABA和Gly无明显影响。结论PC可能通过对抗EAA毒性实现对2型糖尿病局灶性脑缺血大鼠的保护作用。     

小牛血清去蛋白注射液对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠模型骨骼肌GLUT4 mRNA表达的影响

目的观察小牛血清去蛋白注射液(DECB)对2型糖尿病胰岛素抵抗模型大鼠骨骼肌中葡萄糖转运因子4(GLUT4)的mRNA表达的影响。方法以高脂高糖饮食加链脲佐菌素制作2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠模型,观察DECB对大鼠葡萄糖耐量(OGTT),运用RT-PCR方法检测大鼠模型骨骼肌中GLUT-4的mRNA表达。结果 DECB可改善OGTT,增加大鼠模型骨骼肌中GLUT4的mRNA表达。结论 DECB具有较好的降血糖、改善胰岛素抵抗、防治糖尿病并发症的作用。     

2型糖尿病大鼠主动脉Wnt/β-catenin信号通路的变化及SIRT1的调节作用

目的检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白及沉默信息调节因子(SIRT1)在2型糖尿病大鼠主动脉中的表达变化,探究SIRT1对Wnt/β-catenin信号通路的调节作用,明确二者在糖尿病主动脉病变发生发展中的作用。方法高脂饮食联合链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,实验将大鼠分为空白对照组、糖尿病2、4、8和12周模型组,血清检测空腹血糖(FBG),总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C),空腹胰岛素(FINS),HE染色法观察主动脉病理结构变化,RT-PCR法和Western blot法检测主动脉Wnt2、β-catenin、TCF4、SIRT1和s FRP2等相关蛋白基因转录及表达变化。结果与正常组比较,2型糖尿病大鼠TC、TG、LDL-C水平明显升高,HDL-C水平明显降低,随着时间延长,糖尿病大鼠各时间点模型组与2周模型组相比较,TC、TG、LDL-C水平升高越来越明显,HDL-C水平降低更明显,差异均具有显著性(P<0.01);显微镜下糖尿病组大鼠主动脉可见不同程度局灶性内皮细胞空泡变性、甚至坏死。糖尿病组大鼠相对于正常对照组主动脉Wnt2和β-catenin的表达在2周及4周明显增加(P<0.01),4周后维持在较高水平;而TCF4、SIRT1的表达与正常对照组相比表现为持续的增加(P<0.01);s FRP2的表达在持续的降低(P<0.01)。结论 2型糖尿病大鼠主动脉病变发生发展过程中,SIRT1通过调节s FRP2的表达来调控Wnt/β-catenin信号通路的激活,参与糖尿病主动脉损伤的发生发展过程,进一步研究其在糖尿病主动脉损伤中的作用机制可能为糖尿病主动脉病找到新的治疗靶点。     

南五味子对2型糖尿病大鼠肝脏保护作用的研究

目的研究南五味子对2型糖尿病大鼠肝脏保护作用。方法雄性SD大鼠40只,随机分10只大鼠为空白对照组,其余采用高脂高糖饲料加STZ联合诱导2型糖尿病大鼠模型,将成模大鼠按体重、血糖随机分为模型组,南五味子高(A1)、低剂量(A2)组(给药剂量分别为8 g·kg-1、5 g·kg-1)。给药30 d后检测2型糖尿病大鼠空腹血糖(FBG)、口服糖耐量(OGTT)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肝脏总抗氧化能力(T-AOC),并计算脏器指数。结果与模型组比较,给药组可以有效降低2型糖尿病大鼠FBG、OGTT、ALT、AST水平,提高T-AOC。结论南五味子能够改善2型糖尿病大鼠肝脏功能,对2型糖尿病造成的肝脏损害具有一定的保护作用。     

不同基质氢化可的松软膏经糖尿病模型大鼠皮肤的透过性研究

目的:研究不同基质的氢化可的松软膏经糖尿病模型大鼠皮肤的透过性。方法:分别制备氢化可的松O/W型软膏、水溶性基质软膏和油脂性基质软膏。取Wistar大鼠随机分为正常对照组和模型组,模型组大鼠ip给予链脲菌素(40 mg/kg)以复制糖尿病模型。采用Franz扩散池透皮试验和高效液相色谱法,考察氢化可的松O/W型软膏、水溶性基质软膏和油脂性基质软膏分别经两组大鼠皮肤的透过速率。结果:与正常对照组比较,氢化可的松O/W型软膏和水溶性基质软膏经模型组大鼠皮肤的透过速率明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05);氢化可的松油脂性基质软膏经模型大鼠皮肤的透过速率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:氢化可的松O/W型软膏、水溶性基质软膏较易透过糖尿病模型大鼠皮肤;氢化可的松油脂性基质软膏不易透过糖尿病模型大鼠皮肤。     

六味地黄汤及其水提醇沉提取物对2型糖尿病肾阴虚证大鼠环磷酸腺苷的影响

目的观察六味地黄汤及其水提醇沉提取物对2型糖尿病肾阴虚大鼠血清中环磷酸腺苷(cAMP)含量的影响。方法采用高脂乳灌胃结合小剂量STZ(链脲佐菌素)腹腔注射后灌胃氢化可的松的方法建立2型糖尿病肾阴虚证大鼠模型。设立正常对照组、模型组、六味地黄汤组、六味地黄汤水提醇沉提取物组、罗格列酮组,经灌胃给药30 d后,检测各组大鼠血糖及血清cAMP含量。结果成功建立了高脂乳结合小剂量STZ加氢化可的松诱导的2型糖尿病肾阴虚证大鼠模型,模型组大鼠空腹血糖值≥16.7 mmol/L,其cAMP水平为(1.32±0.04)mmol/L;六味地黄汤及其水提醇沉提取物均能降低2型糖尿病肾阴虚证大鼠空腹血糖值及cAMP水平(P<0.01)。结论六味地黄汤改善2型糖尿病肾阴虚证可能与其降低cAMP水平有关,其水提醇沉提取物可能是六味地黄汤改善2型糖尿病肾阴虚证的药效物质基础。     

利用iTRAQ技术对2型糖尿病模型大鼠与正常大鼠的肝脏进行比较蛋白质组学研究

目的：研究2型糖尿病模型大鼠与正常大鼠肝脏蛋白表达差异。方法：采用相对和绝对定量同位素标记法（iTRAQ）进行比较蛋白质组学研究。结果：检测到模型组和空白对照组有161个蛋白差异,其中上调的61种,下调的100种。结论：iTRAQ法可以比较2型糖尿病模型大鼠与正常大鼠的肝脏蛋白表达的差异,为后续研究打下基础。     

染料木素对2型糖尿病大鼠模型血糖的影响

目的研究淡豆豉中所提取的染料木素的降糖效果以及改善糖耐量的效果。方法利用链脲佐菌素注射液对喂以高脂饲料的SD大鼠进行注射,从而制作出2型糖尿病大鼠模型;随机将2型糖尿病大鼠分成4组,每组8只,即糖尿病模型组（Model）、二甲双胍干预组（MET）、染料木素低剂量干预组（Genlow）以及染料木素高剂量干预组（Genhigh）;将4组2型糖尿病大鼠按照一定要求分别处置,并测量血糖水平和糖耐量,与正常对照组（Control）进行对比;对胰腺组织HE染色进行显微观察。结果染料木素高剂量组显著降低了血糖水平达16.5左右,与糖尿病模型组及二甲双胍组比较差异具有统计学意义（P〈0.05）;改善了各时段糖耐量,与正常对照组及糖尿病模型组比较差异均具有统计学意义（P〈0.05）;对受损萎缩的胰岛B细胞有明显的修复作用,与糖尿病模型组比较具有显著性。结论染料木素可显著降低2型糖尿病大鼠的血糖水平,并改善其糖耐量,且对受损的胰岛B细胞有修复作用,使胰岛细胞表面的胰岛素受体数量增多。     

枸杞多糖对2型糖尿病大鼠胰腺β细胞PDX-1基因表达的实验研究

目的探讨枸杞多糖对2型糖尿病大鼠β细胞分泌功能及PDX-1基因mRNA表达的影响。方法用高糖饲喂并结合链脲佐菌素诱导制备2型糖尿病大鼠模型,分组灌胃给予不同浓度的枸杞多糖及对照药物,50只实验动物随机分为5组:对照组、模型组、模型+30mg/kgLBP组、模型+60mg/kgLBP组、模型+90mg/kgLBP组。连续8周后检测空腹血糖、三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、血清胰岛素,处死大鼠取胰腺组织,RT-PCR检测β细胞内PDX-l及胰岛素mRNA的表达水平。结果 2型糖尿病大鼠胰腺β细胞PDX-l及胰岛素mRNA的表达水平显著下降(P0.01);60mg/kg和90mg/kgLBP组能显著上调2型糖尿病大鼠胰腺β细胞PDX-l与胰岛素mRNA表达水平(P0.05)。结论 LBP可以通过上调PDX-l和胰岛素mRNA表达,改善2型糖尿病大鼠β细胞胰岛素合成和分泌功能的损伤。