非β-内酰胺抗生素同青霉素结合蛋白的结合

在探索天然来源的新β-内酰胺抗生素过程中,头霉素类和sulfazecins(单菌胺素类)的发现系重要转折点,它加速了寻找许多其它新化合物的筛选工作。在利用β-内酰胺超敏变株定向靶位筛选β-内酰胺抗生     

非典型β—内酰胺Lactivicin类抗生素的研究进展

在探索天然来源的新型β-内酰胺抗生素过程中,头孢菌素类和单菌胺素类的发展系重要转折点,加速了寻找许多其它新化合物的筛选工作。1985年,利用β-内酰胺超敏变株定向靶位筛选β-内酰胺抗生素中从稳杆菌(Empedobacter)YK-258和LysobacterYK-422中发现新抗生素——Lactivicin(TAN-588)。Lactivicin是第一个得到证实的对细菌PBP具有亲和力的非β-内酰胺抗生素,它的发现证明了在显示所谓β-内酰胺抗生素活性中β-内酰胺环并非必须。     

阿司米星和β-内酰胺抗生素类联合应用对绿脓杆菌的效果

阿司米星(Astromicin;ASTM;即Fortimicin),系协和发酵工业株式会社发现的由橄榄色星状小单孢菌MK70(Micromonospora olivasterospora MK70)所产生的氨基糖苷抗生素类。本药对革蓝氏阳性菌及革蓝氏阴性菌有广谱的抗菌作用,特别对粘质沙雷氏菌比其它氨基糖苷抗生素类显示更强的抗菌力。对以庆大霉素为首的各种氨基糖苷抗生素类的耐药菌也有效,但对绿脓杆菌的抗菌力较弱。     

蒽环类抗生素

道诺霉素是从波赛链霉菌的发酵液中发现的一种新抗生素,它对各种实体瘤和腹水癌具有抗瘤作用,而且作为一种缓解诱导剂对早期白血病也具有疗效。自此,蒽环类抗生素便引起了许多学者的兴趣和重视。为寻找比道诺霉素抗瘤疗效更好的蒽环类抗生素,学者们进行了不断的探索,从波赛链霉菌青灰变种突变株的发酵液中发现了阿霉素(14-羟基道诺霉素)。用实验肿瘤进一步比较阿霉素与道诺霉素,表明亚德里亚霉素比道诺霉素具有更好的疗效并且抗瘤谱更广。阿霉素     

产AmpC酶大肠埃希菌中整合子的研究

目的:观察25株产AmpC酶大肠埃希菌中整合子的分类、结构及其在介导AmpC酶基因转移中的作用。方法:采用微量稀释法测定20种抗生素对试验菌株的敏感性。利用多重聚合酶链反应(PCR)方法检测整合酶基因(intI)及其定位,对其阳性菌株可变区(Int)扩增产物进行测序分析。结果:这25株菌对多种抗生素耐药。20株Ⅰ类整合酶基因阳性(80%);所携带的耐药基因盒绝大多数为aadA5和dfr17;未发现携带AmpC基因盒的整合子。结论:Ⅰ类整合子广泛地存在于产AmpC酶的大肠杆菌中;耐药基因盒是整合子阳性菌株对氨基糖苷类、磺胺类药物及氯霉素耐药的主要原因,但对介导AmpC酶基因转移,不起主要作用。     

合肥市产ESBLs肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏茵流行状况及耐药性研究

目的调查1999年9轮?000年9月安徽省合肥市产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的肺炎克雷伯氏菌(KP)和大肠埃希氏菌(EC)的流行状况及耐药性.方法收集合肥市四家大医院临床标本分离的KP和EC共299株,经ESBLs表型确认试验证实为产ESBLs细菌,用微量肉汤稀释法检测其对20种抗生素耐药性,用K-B法检测其对头孢哌酮/舒巴坦的耐药性.结果合肥市KP和EC中ESBLs检出率分别为50.5%和24.3%,总检出率为32.8%.产ESBLs菌对头孢他啶、氨曲南、头孢西丁、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/三唑巴坦、阿米卡星及环丙沙星等20种抗生素的耐药率比不产酶株都有不同程度增加,但亚胺培南对所有产ESBLs菌株都敏感.结论合肥市四家大医院ESBLs在KP和EC中的检出率高.产ESBLs菌对所测试的20种抗生素的耐药程度比不产酶株为高,唯有亚胺培南对所有菌株都敏感.     

大肠埃希菌在医院病房的分布及耐药性分析

目的 分析医院2014年病房大肠埃希菌分离株的分布及其耐药性情况.方法 使用西门子医学诊断公司的M/W-96全自动细菌鉴定/药敏鉴定仪对临床大肠埃希菌分离株进行药敏实验,药敏结果根据2012版临床和实验室标准协会(CLSI)M100-S22文件判读.结果 8486例送检标本共检出大肠埃希菌(EC)261株,其中大肠埃希菌药敏株(DS-EC)47株,大肠埃希菌多重耐药株(MDR-EC)88株,产超广谱 β-内酰胺酶大肠埃希菌(ESBLS-EC)124株,碳青霉烯类耐药大肠埃希菌(CR-EC)2株.不同标本EC检出率差异有统计学意义(P=0.000);不同病房EC检出率差异有统计学意义(P=0.000);EC对不同抗生素耐药率、敏感率差异有统计学意义(P=0.000).结论 大肠埃希菌对常用抗生素耐药率处于较高水平,必须引起临床和院感部门的重视,并采取一定的监管措施.     

金葡球菌对喹诺酮类的耐药机制

金葡球菌是重要的院内致病菌.由于它可同时对多种抗生素耐药,使得治疗由它引起的感染和控制其传播与流行十分困难.20世纪80年代初期出现的氟喹诺酮类药物,如环丙沙星、氧氟沙星等对金葡球菌包括对甲氧西林耐药金葡球菌(MRSA)显示了较高的活性.但随着喹诺酮类在临床上的广泛使用,很快MRSA出现了对喹诺酮类的耐药性,并且耐药率迅速上升.以色列 Shalit于1987年底调查了50株临床分离的MRSA,其中45株同时耐环丙沙星和氧氟沙星.加拿大的Ontario1988年开始在临床使用环丙沙星和诺氟沙星,而1989年调查102株MRSA中有50%同时耐此两种药.Michige某医院,1984~1985年分离的MRSA对环丙沙星均敏感,而1989年分离118株MRSA中,耐环丙沙星为65株.关于金葡球菌耐喹诺酮类药物,目前已至少提出3种机制:(1)靶酶DNA旋转酶的改变;(2)拓扑异构酶IV的改变,引起对喹诺酮低水平耐药;(3)药物的主动排出系统.其中DNA旋转酶的突变是耐药的主要机制.     

地中海诺卡氏菌谷氨酰肼抗性菌株的选育与力复霉素SV产量的提高

本文报道应用谷氨酰胺的拮抗物——谷氨酰肼筛选地中海诺卡氏菌(Nocardiamediterranei)AS_4.918抗性菌株,从中发现抗性突变株产生力复霉素的能力分布幅度较广,产量也有较大的提高,最高者为原种产生抗生素能力的2.5倍。通过菌体内谷氨酰胺合成酶比活力测定,结果表明抗性菌株的这个酶的比活力也有提高。另外,抗性菌体内的脂肪积累显著降低。这些结果说明抗谷氨酰肼突变株消除了谷氨酰胺对谷氨酰胺合成酶的阻遏作用,从而力复霉素产量有较大的提高。     

多重耐药菌株正在迅速蔓延

由于抗生素在临床上广泛过度地使用,造成了多重耐药菌(multi-drug resistamt bacteria,MDR)迅速蔓延,对婴幼儿、免疫缺陷者和老年人的威胁极大.MDR引起的疾病常用的抗菌药物(多数β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类、大环内酯类等)治疗效果欠佳或无效,主要有:肺结核、肺炎、及其它呼吸道感染等,并伴有较高的病死率.在比利时,16家监护病房(ICU)进行耐药监测,发现产诱导酶的肠杆菌科对头孢噻肟耐药率高达50%,在美国的耐药监测中,242个ICU中有200个ICU肠杆菌科对头孢他啶的耐药率在20%以上.而在雅典、结构型突变株的比率高达70%[1].事实说明,耐药菌株与抗生素研制在竞争中赛跑,速度之快超过新抗生素的开发.     

抗生素生物合成的研究

抗生素生物合成研究的目的旨在阐明微生物生物合成抗生素的途径和机制,更为有效地进行发酵调控以提高目的产物的生物合成量;同时利用抗生素次级代谢物合成酶的底物特异性较差的特点和次级代谢产物发生变化的突变株来制备新的抗生素。用于抗生素生物合成的研究方法主要有:(1)同位素示踪法;(2)突变生物合成技术;(3)参与抗生素生物合成的酶的研究及(4)代谢调控的研究。对于一个具有临床意义或其他应用价值而有着开发前景的抗生素来说,进行生物合成的研究是很重要的。研究者可根据自己的     

链霉菌分子遗传学研究的新进展

链霉菌的基因表达 (一)RNA多聚酶天蓝色链霉菌(S. coelicolor)A 3(2)和抗生链霉菌(S. antibiotieus)的RNA多聚酶类似于其它原核生物,其特征是有ββ′α_2亚基结构,可是在已经发表的研究中还没有清楚地鉴定出sigma亚基。该酶对利福平敏感,尽管在不同菌株中敏感程度有所不同,并且已在天蓝色链霉菌A 3(2)中得到一株RNA多聚酶发生改变的利福平抗性突变株(这些Rif~R突变的位置紧靠于strA座位)。     

多重耐药不动杆菌碳青霉烯酶耐药基因及Ⅰ类整合子

了解安徽省多重耐药不动杆菌碳青霉烯类耐药的机制.方法 收集安徽省多家医院2006～2007年临床分离非重复的不动杆菌共167株,用琼脂稀释法测定最低抑菌浓度(MICs),用聚合酶链反应(PCR)扩增和克隆测序方法确认碳青霉烯酶基因,用PCR扩增整合酶.结果 34株对包括碳青霉烯类抗菌素在内的多种抗菌药耐药,34株中19株产OXA-23型碳青霉烯酶基因、23株Ⅰ类整合酶阳性,未检测到OXA-24型酶,IMP、VIM、SIM型金属酶基因和Ⅱ,Ⅲ整合酶基因.发现2株新基因取得登录号FJ194460;FJl94494.23株Ⅰ整合酶阳性菌株有21株测出Ⅰ类整合子基因结构.结论 安徽省多重耐药不动杆菌的耐药性与其携带OXA-23型酶和Ⅰ类整合子有关.     

链霉素抗性筛选法在柔红霉素产生菌S.coeruleorubidus var.zhengding SIPI 1482菌种选育中的应用

采用链霉素抗性筛选法,用含链霉素的高氏一号合成培养基筛天蓝淡红链霉菌ＳＩＰＩ１４８２菌株对链霉素的抗性自发突变株,检测突变株产抗生素水平。实验结果发现,在ＳＩＰＩ１４８２菌株的莲霉素抗性自发突变株中,正向突变的频率比较高（３４％）,同时获得了产抗生素能力是原菌株的１．５倍左右的突变株。     

合肥市产ESBLs肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌流行状况及耐药性研究

目的 调查1999年9月至2000年9月安徽省合肥市产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs)的肺炎克雷伯氏菌（KP）和大肠埃希氏菌（EC）的流行状况及耐药性。方法 收集合肥市四家大医院临床标本分离的KP和EC共299株,经ESBLs表型确认试验证实为产ESBLs细菌,用微量肉汤稀释法检测其对20种抗生素耐药性,用K－B法检测其对头孢哌酮／舒巴坦的耐药性。结果 合肥市KP和EC中ESBLs检出率分别为50．5％和24．3％,总检出率为32．8％。产ESBLs菌对头孢他啶、氨曲南、头孢西丁、头孢吡肟、头孢哌酮／舒巴坦、哌拉西林／三唑巴坦、阿米卡星及环丙沙星等20种抗生素的耐药率比不产酶株都有不同程度增加,但亚胺培南对所有产ESBLs菌株都敏感。结论 合肥市四家大医院ESBLs在KP和EC中的检出率高。产ESBLs菌对所测试的20种抗生素的耐药程度比不产酶株为高,唯有亚胺培南对所有菌株都敏感。     

聚合酶链反应RFLP与SSCP检测伤寒杆菌DNA旋转酶基因变异

ＤＮＡ旋转酶为喹诺酮类抗菌药物作用靶位,其变异为细菌耐药主要原因之一。本文利用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ、ＳＳＣＰ对伤寒杆菌２７５（临床分离敏感株）及其自发耐药突变株ＲＧ１ＤＮＡ旋转酶Ａ亚单位基因（ｇｙｒＡ）耐喹诺酮类决定区进行检测。并以ＤＮＡ序列分析对该变异进行检测。结果表明,与伤寒杆菌２７５相比,ＲＧ１ｇｙｒＡ第２４７位由Ｔ变异为Ｇ,相应于ＤＮＡ旋转酶Ａ亚单位第８３位氨酸由丝氨酸变为丙氨酸,ＨｉｎｆⅠ对     

Na^＋调节天蓝淡红链霉菌突变株SIPI 1482—NS—4合成柔红霉素的机制研究

SIPI 1482－NS－4是柔红霉素的产生菌天蓝淡红链霉菌SIPI 1482的阻断突变株,不能合成柔红霉素。研究发现Na^ 对SIPI 1482－NS－4恢复合成柔红霉素具有调节作用。在GM培养基中添加2％NaCl后,虽然突变株的菌体生长量降低,细胞脂肪含量下降,电镜还观察到细胞中脂肪颗粒显著减少,但不产抗生素的负突变株SIPI 1482－NS－4却恢复合成柔红霉素,推测Na^ 的这种调节作用可能同初级代谢与次级代谢之间的代谢流向有关。检测突变株SPIP 1482－NS－4在GM培养基和GM＋2％ NaCl培养基中,催化柔红霉素前体内酰CoA合成的甲基丙二酰CoA羧基转移酶（MCT）和甲基丙二酰CoA脱羧酶（MDC）的活力变化,结果发现在GM培养基中MCT酶和MDC酶的活力很低,但添加了2％NaCl后,伴随着柔红霉素的恢复合成,MDC酶活力迅速提高。说明SIPI 1482－NS－4的阻断突变与前体丙酰CoA有关,Na^ 诱导了MDC酶,从而前体丙酰CoA重新合成,突变株恢复合成柔红霉素。亲株SIPI 1482在GM培养基中,MDC酶的活力很低,但MCT酶的活力的柔红霉素的生物合成有一定的相关性;培养基添加2％NaCl后,MDC酶的活力上升,柔红霉素产量提高。说明在SIPI 1482中,柔红霉素前体丙酰CoA主要是通过MCT酶途径催化而生成的,Na^ 可诱导MDC酶途径。研究发现Na^ 诱导的MDC酶是位于细胞膜的可溶性酶。     

β-内酰胺类抗生素超敏变株在新抗生素筛选中的应用

七十年代以来,随着分子生物学和分子遗传学的研究进展,在新抗生素筛选领域中不断地涌现出一些根据抗生素作用机制和耐药机理建立起来的筛选新方法,超敏感变株的应用是其中之一。抗生素超敏变株是一种通过诱变获得的遗传变异株,由于基因突变使它们对某类抗生素的敏感性得以明显提高。对此类变株的研究早在六十年代就有不少报道,但仅用     

60株肺炎克雷伯菌多重耐药性及主要耐药基因的研究

目的：了解临床分离的肺炎克雷伯菌耐药性及主要耐药基因存在状况。方法：采用Micmsean微生物鉴定仪，微量肉汤稀释法测定肺炎克雷伯菌对21种抗生素的敏感性。采用聚合酶链反应(PCR)及测序技术分析超广谱B内酰氨酶(ESBLs)，质粒介导的AmpC酶和氨基糖苷类修饰酶基因型。结果：肺炎克雷伯菌对亚胺培南全部敏感，对其他抗生素均有不同程度的耐药。60株全部扩增出TEM基因，有25株检出CTX-M-I群基因，有54株扩增出DHA基因，59株检出共3种氨基糖苷类修饰酶基因。且有22株同时携带2～6种耐药基因。对其中4株细菌进行基因型测序，证实CTX-M-I群扩增产物均为CTX-M-3；DHA扩增产物均为DHA-1；氨基糖苷类修饰酶基因分别为aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-I和ant(3″)-I。其中CTX-M-3(AY635141)、DHA-1(AY635140)已注册GenBank(括号内为GenBank注册号)。结论：临床分离的肺炎克雷伯菌为多重耐药菌，同时存在2～6种耐药基因。     

一种新的碳青霉烯类抗生素——6643—X

已有报道链霉菌 KC—6643可产生两种新的碳青霉烯类抗生素:毯霉素(Carpeti-mycins)A 和 B。作者对该菌株进行诱变处理获得突变株,产生一种新的碳青霉烯类抗生素6643—X。本文介绍新抗生素6643的发酵,分离及特性。突变株 KC—6643M—162/175于装有30