阿托伐他汀对兔动脉粥样硬化中NF-κB/IκB和炎症因子表达的影响

目的探讨高脂饮食诱发兔动脉粥样硬化中核因子-κB(NF-κB)的活化与其抑制因子IκB的表达,以及阿托伐他汀对NF-κB/IκB信号途径、ICAM-1和P选择素的影响。方法24只新西兰♂家兔随机分为正常对照组、高胆固醇组和阿托伐他汀组,应用W estern b lot方法检测动脉中胞核NF-κB p65亚基和胞浆IκBα表达变化;免疫放射法检测血清P选择素水平,免疫组织化学检测血管壁ICAM-1的表达。结果高胆固醇组与对照组比较胞核NF-κB p65和血管壁ICAM-1表达明显增强、血P选择素明显升高(P<0.05),胞浆中IκBα表达明显减弱(P<0.05);阿托伐他汀组与高胆固醇组比较NF-κB p65和血管壁ICAM-1明显表达较弱、血P选择素明显减少(P<0.05),胞浆IκBα的表达增强(P<0.05)。结论NF-κB/IκB信号途径在动脉粥样硬化中起重要作用,阿托伐他汀可以减少P选择素、ICAM-1的表达。     

津力达对高脂饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠血清瘦素、脂联素的影响

目的 观察中药复方制剂津力达对高脂饮食诱导的胰岛素抵抗(IR)大鼠血清瘦素、胰岛素、脂联素、抵抗素、游离脂肪酸(FFA)的影响。方法 36只大鼠随机分为正常对照组12只(正常饲料喂养)和高脂饮食组24只(高脂饲料喂养),每组随机选6只行高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验确定成功建立IR大鼠模型,将高脂饮食组剩余18只大鼠分为高脂饮食对照组、津力达组和二甲双胍组各6只,正常对照组和高脂饮食对照组均给予生理盐水灌胃,津力达组给予津力达生理盐水混悬液灌胃,二甲双胍组给予二甲双胍生理盐水混悬液灌胃。药物干预8周后各组均行高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验计算葡萄糖输注率(GIR),检测血清瘦素、胰岛素、脂联素、抵抗素、FFA水平。结果高脂饮食对照组GIR较正常对照组降低,津力达组及二甲双胍组GIR较高脂饮食对照组升高(P<0.05)。高脂饮食对照组较正常对照组血清瘦素、胰岛素、抵抗素及FFA升高,脂联素降低(P<0.05);津力达干预可降低血清瘦素、胰岛素、抵抗素及FFA,升高血清脂联素水平,与高脂饮食对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 津力达可以调节瘦素、胰岛素、脂联素、抵抗素等脂肪细胞因子的分泌以及血清FFA的水平,这种调节与胰岛素敏感性的改善作用有一定的关系。     

胆红素对内毒素致大鼠急性肺损伤的保护作用

目的探讨胆红素对内毒素致急性肺损伤(ALI)的保护作用及其可能机制。方法将雄性Wis-tar大鼠30只随机分为正常对照组、ALI模型组和胆红素干预组。检测肺系数(LI)、支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞(WBC)计数和中性粒细胞(PMN)百分比、蛋白质含量(Pr)、肺泡通透指数(LPI);采用原位杂交技术半定量法和免疫组织化学染色测定肺血管内皮细胞间黏附分子1(ICAM-1)mRNA、核因子κB(NF-κB)和其抑制蛋白I-κBα的表达。结果①ALI模型组LI、BALF中WBC计数、PMN百分比和Pr及LPI均显著高于正常对照组(P均<0.01);胆红素干预组LI、BALF中WBC计数和LPI均显著低于ALI模型组(P均<0.01),PMN百分比和Pr也明显低于ALI模型组(P均<0.05),且与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05)。②ALI模型组肺血管内皮ICAM-1 mRNA表达和胞核NF-κB含量与正常对照组比较显著升高(P均<0.01),胞质I-κBα水平却明显降低(P<0.01);胆红素干预组ICAM-1 mRNA表达和胞核NF-κB与模型组相比明显减低(P<0.01),胞质I-κBα含量显著升高(P<0.01),但与正常对照组比较差异有统计学意义(分别P<0.05、P<0.01)。结论胆红素通过抑制NF-κB和ICAM-1 mRNA的表达而减少中性粒细胞肺内浸润来对抗大鼠急性肺损伤。     

雷帕霉素预防再狭窄的机制探讨

目的观察肌肉注射雷帕霉素对血管介入治疗后再狭窄的影响,探讨雷帕霉素防止再狭窄的可能机制。方法采用雄性新西兰白兔,给予高脂高胆固醇饮食复制成动脉粥样硬化模型后,再行髂动脉内膜损伤术复制再狭窄模型,随机分为3组:单纯损伤组、雷帕霉素组和联合用药组,雷帕霉素组和联合治疗组又随机分别分为2个亚组:低剂量组和高剂量组。分别对各组进行肌肉注射雷帕霉素、口服抗血小板药和调脂药的干预。4周后使用免疫组织化学方法检测血管壁增殖细胞核抗原(PCNA)表达阳性细胞,即增殖细胞;以及核因子κB(NF-κB)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达;用计算机图像分析法观察血管组织形态学的变化,并对免疫组化结果进行定量分析。结果①雷帕霉素组与单纯损伤组相比:表示内膜增殖程度的指标显著减少(P<0.05),且随注射剂量的增大而改变(P<0.05);血管壁增殖细胞PCNA及NF-κB、ICAM-1的表达均降低(P<0.05),降低程度随注射剂量的增大而增强(P<0.05);②联合组和雷帕霉素组相比:表示内膜增殖程度的指标均减少(P<0.05),且随注射剂量的增大,上述指标的改变差异有统计学意义(P<0.05);血管壁增殖细胞PCNA及NF-κB、ICAM-1的表达降低(P<0.05),降低程度随注射剂量的增大而增强(P<0.05)。结论雷帕霉素可防止再狭窄的形成,在一定范围内注射剂量与新生内膜增殖程度有相关性,联合应用辛伐他汀和氯吡格雷进行干预比单用雷帕霉素效果更加明显。     

藻酸双酯钠对2型糖尿病心血管并发症防治作用的研究

目的观察藻酸双酯钠(PSS)对2型糖尿病并发的心血管疾病危险因素的影响,并探讨其可能机制。方法高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素(STZ 20mg·kg-1)制作2型糖尿病Wister大鼠模型,并将其随机平均分为5组:正常对照(NC)组、模型(Mod)组、藻酸双酯钠(PSS)组、二甲双胍(Met)组、洛伐他汀(Lov)组,并给予相应的药物治疗8wk。实验过程中观察血糖、血脂的变化;发色底物法检测血清中组织纤溶酶原激活物(t-PA)、组织纤溶酶原激活抑制物(PAI-1)的活性;22wk后处死大鼠,取其主动脉,透射电镜观察主动脉的超微结构;免疫组织化学及Western blot方法检测动脉内核转录因子(NF-κB)及细胞间粘附分子(ICAM-1)的表达水平。结果PSS组的空腹血糖(FBG)、血脂(TG、TC、LDL)水平及PAI-1的活性均明显低于模型组(P<0.05),而t-PA的活性则明显高于模型组(P<0.05);同时PSS组NF-κB和ICAM-1的表达比模型组明显减少(P<0.05);PSS组主动脉损伤明显轻于模型组。结论藻酸双酯钠能抑制2型糖尿病大鼠并发的心血管疾病的发生、发展,其机制可能与其降低血糖、血脂水平,改善t-PA和PAI-1的活性,抑制核因子NF-κB的活化及细胞间粘附分子ICAM-1的表达有关。     

活化蛋白C通过NF-κB抑制TNF-α介导的炎症反应

目的观察活化蛋白C(APC)是否能够通过核因子-κB(NF-κB)途径抑制TNF-α介导的炎症反应。方法分离培养正常组、TNF-ɑ组、TNF-ɑ+rhAPC组的人脐静脉内皮细胞细胞(HUVECs)。用ELISA法,检测细胞上清液中的细胞内粘附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)及选择素浓度。用逆转录聚合酶链反应、Western bloting技术检测HUVECs NF-κBmRNA、NF-κB蛋白的表达。结果细胞上清液中ICAM-1、VCAM-1及E选择素浓度,TNF-ɑ组较正常组显著升高(均P<0.05);而TNF-ɑ+rhAPC组较TNF-ɑ组显著降低(均P<0.05)。HUVECs NF-κB mRNA、蛋白表达水平,TNF-ɑ组较正常组均显著升高(均P<0.05);而TNF-ɑ+rhAPC组较TNF-ɑ组均显著降低(均P<0.05)。结论 APC通过抑制黏附分子的产生来调节TNF-α介导的炎症反应,其可能是通过NF-κB途径来实现。     

枸杞多糖对小鼠海马神经元细胞系缺糖缺氧损伤保护作用及机制研究

目的探讨枸杞多糖(LBP)对小鼠海马神经元细胞系HT22细胞缺糖缺氧损伤保护作用的机制。方法采用含1 mmol/L连二亚硫酸钠的无糖DMEM培养基建立HT22细胞缺糖缺氧损伤模型,设对照组、模型组和LBP高、中、低剂量(100、50、25 mg/L)组,以CCK8法检测细胞活性,流式细胞术检测检测细胞凋亡情况;Western blotting检测Bcl-2、Bax蛋白表达情况;利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测TNF-α、NF-κB、I-κBα、Caspase-9基因转录活性。结果与对照组比较,模型组HT22细胞存活率显著降低、凋亡率显著增加(P<0.05);TNF-α、NF-κB、Caspase-9基因转录活性显著上调,I-κBα基因转录活性显著下调(P<0.05);Bax蛋白表达水平显著升高,Bcl-2的蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,LBP各剂量组细胞存活率显著上升、凋亡率显著下降(P<0.05);TNF-α、NF-κB、Caspase-9基因转录活性显著下调,I-κBα基因转录活性显著上调(P<0.05);Bax蛋白表达水平显著降低,Bcl-2的蛋白表达水平显著增高(P<0.05)。结论 LBP可能是通过下调TNF-α、NF-κB、Caspase-9基因转录活性以及Bax蛋白表达,增强I-κBα基因转录活性及Bcl-2的蛋白表达,抑制缺糖缺氧损伤诱导神经细胞凋亡的发生。     

五聚素3对高脂血症小鼠血脂水平的影响及作用机制研究

目的 探讨五聚素3(PTX3)对高脂血症小鼠血脂的影响及其作用机制.方法 10只小鼠分为高脂组6只和正常组4只,高脂组给予高脂饮食,正常组给予正常饮食,检测2组小鼠血清中血脂水平及肾组织中PTX3和核因子-κB(NF-κB)通路蛋白的表达水平.将高脂组小鼠分为实验组和对照组各3只,实验组经尾静脉注射PTX3抗体,对照组注射生理盐水,检测2组高脂血症小鼠血脂水平及肾组织中PTX3和NF-κB通路蛋白的表达情况.结果 高脂组血脂水平和肾组织PTX3和NF-κB通路蛋白表达水平高于正常组(P＜0.05).实验组血脂、PTX3和NF-κB通路蛋白表达水平低于对照组(P＜0.05).结论 PTX3抗体可通过抑制NF-κB通路下调血脂水平,而减缓动脉粥样硬化进程.     

黄芩苷对高脂诱发小鼠动脉粥样硬化NF-κB及ACE2蛋白表达的影响

目的:观察黄芩苷对apoE-/-小鼠的主动脉壁细胞内核因子κB(NF-κB)及ACE2蛋白表达的影响,探讨黄芩苷干预动脉粥样硬化(AS)进程的可能作用机制。方法:6周龄apoE-/-小鼠30只随机分成模型组和黄芩苷高低剂量组,同时用野生型小鼠C57BL10只作为正常对照组。正常组给予普通饲料喂养,模型组和黄芩苷组给予高脂饲料喂养12周,建立小鼠AS模型,黄芩苷组给予300 mg.d-1及150 mg.d-1灌胃8周;20周后处死小鼠。实验结束后,检测血脂,免疫组化分析主动脉壁细胞内NF-κB、血管紧张素转换酶2(ACE2)表达水平。结果:黄芩苷组与模型组相比,apoE-/-小鼠主动脉壁细胞NF-κB灰度值明显升高、ACE2灰度值降低有统计学差异(P<0.05)。结论:黄芩苷可能通过抑制NF-κB转录表达,干预炎症反应进而增强ACE2蛋白表达,干预动脉粥样硬化的发生发展。     

α-硫辛酸对Ⅱ型糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用

目的:探讨α-硫辛酸对STZ所致Ⅱ型糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用及其机制。方法:SD大鼠随机分为5组:对照组、糖尿病模型组、α-硫辛酸低、中、高剂量组。后4组采用小剂量链尿佐菌素(Streptozocin,STZ)30 mg.kg-1腹腔注射,建立Ⅱ型糖尿病模型。α-硫辛酸低、中、高剂量组分别按15,30,60 mg.kg-1灌胃12周。检测血糖和血脂,心功能状态;HE染色观察大鼠心肌形态变化;免疫组织化学法和Western Blot法测定心肌组织核因子-κB(NF-κB)、细胞间黏附因子-1(ICAM-1)和单核趋化蛋白-1(MCP-1)蛋白表达。结果:与对照组比较,糖尿病组大鼠血糖及三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)明显增高(P<0.01),高密度脂蛋白(HDL)明显降低(P<0.01),心肌组织中NF-κB、ICAM-1、MCP-1蛋白表达显著增加(P<0.05);与糖尿病组比较,α-硫辛酸30 mg.kg-1血糖及TG、TC、LDL明显降低(P<0.05),HDL显著提高(P<0.05);LVEDP[(5.6±1.0)mmHg]明显降低(P<0.05),LVSP[(127.6±5.4)mmHg]明显升高(P<0.05);α-硫辛酸30 mg.kg-1组NF-κB、ICAM-1、MCP-1蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论:α-硫辛酸对Ⅱ型糖尿病大鼠心肌有保护作用,其机制可能与降糖、降脂、抑制炎症因子有关。     

Inhibitory effect of reinioside C on monocyte–endothelial cell adhesion induced by oxidized low-density lipoprotein via inhibiting NADPH oxidase/ROS/NF-κB pathway

Monocyte adhesion to activated vascular endothelial cells is the critical event in the initiation of atherosclerosis. Adhesion molecules are inflammatory markers, which are upregulated by oxidized low-density lipoprotein (ox-LDL) and play a pivotal role in atherogenesis. In present study, the effect of reinioside C, a major compound of Polygala fallax Hemsl., on adhesion of monocytes to endothelial cells induced by ox-LDL was investigated. The results showed that incubation of endothelial cells with ox-LDL (100?µg/mL) for 24 h markedly increased the expression of ICAM-1 and P-selectin and enhanced the adhesion of monocytes to endothelial cells. Pretreatment with reinioside C (1, 3, or 10?µM) dose-dependently decreased ox-LDL-induced upregulation of expression of ICAM-1 and P-selectin and the enhanced adhesion of monocytes to endothelial cells. To determine the role of NADPH oxidase/reactive oxygen species (ROS)/nuclear factor-κB (NF-κB) pathway, endothelial cells were treated with ox-LDL (100?µg/mL) for 2 h, and NADPH oxidase subunit (Nox 2 and p22^phox) mRNA expression, intracellular ROS level, and NF-κB activity were measured. The results showed that reinioside C attenuated ox-LDL-induced NADPH oxidase subunit (Nox 2 and p22^phox) mRNA expression, generation of ROS, and activation of NF-κB in endothelial cells in a dose-dependent manner; the two latter effects were inhibited by pyrollidine dithiocarbamate, the inhibitor of NF-κB. These findings suggest that reinioside C attenuates ox-LDL-induced expression of adhesion molecules (P-selectin and ICAM-1) and the adhesion of monocytes to endothelial cells by inhibiting NADPH oxidase/ROS/NF-κB pathway.     

通心络胶囊对实验家兔动脉粥样硬化腹主动脉NF-κB的影响

目的通过构建家兔主动脉粥样硬化类型,观察通心络胶囊对家兔动脉粥样硬化腹主动脉核因子-κB（NF-κB）的影响。方法通过高脂＋高胱氨酸饮食制作家兔动脉粥样硬化模型,灌药组分为通心络组、复方丹参滴丸组,同时设空白对照组和模型对照组,利用免疫组化技术检测各组动物腹主动脉平滑肌内核因子-κB（NF-κB）阳性细胞率。结果家兔动脉粥样硬化腹主动脉NF-κB阳性率表达,模型对照组〉丹参滴丸组〉通心络组〉空白对照组,组间两两比较差异均有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）。结论通心络胶囊能抑制家兔动脉粥样硬化腹主动脉平滑肌NF-κB的表达,是其稳定易损斑块的可能作用靶点之一。     

Suppression of endothelial cell adhesion by XJP-1, a new phenolic compound derived from banana peel

The adhesion of monocytes to activated vascular endothelial cells is a critical event in the initiation of atherosclerosis. Adhesion is mediated by oxidized low-density lipoprotein (ox-LDL) which up-regulates inflammatory markers on endothelial cells. Here we report that (±) 7, 8-dihydroxy-3-methyl-isochromanone-4 (XJP-1), an inhibitor of ox-LDL-induced adhesion of monocytes to endothelial cells blocks cellular functions which are associated with adhesion. We show that XJP-1 down-regulates ox-LDL-induced over-expression of adhesion molecules (ICAM-1 and VCAM-1) in a dose-dependent manner in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs), attenuates ox-LDL-induced up-regulation of low-density lipoprotein receptor (LOX)-1, decreases generation of reactive oxygen species (ROS), blocks translocation of nuclear factor-kappa B (NF-κB) activity, and prevents activation of c-Jun N-terminal kinase (JNK)/p38 pathways in endothelial cells. These findings suggest that XJP-1 may attenuate ox-LDL-induced endothelial adhesion of monocytes by blocking expression of adhesion molecules through suppressing ROS/NF-κB, JNK and p38 pathways.     

Motorcycle exhaust particles up-regulate expression of vascular adhesion molecule-1 and intercellular adhesion molecule-1 in human umbilical vein endothelial cells

Epidemiological studies have shown that there is a strong correlation between atherosclerosis and ambient air pollution. In this study, we found that motorcycle exhaust particles (MEP) induced adhesion between cells of the human monocytic leukemia cell line (THP-1) and human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) in a time-and dose-dependent manner. In addition, MEP treatment induced both mRNA and protein expression of vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) and intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) in HUVECs. The IκB degradation and p65 nuclear translocation was found in MEP-treated HUVECs, suggested the involvement of nuclear factor-κB (NF-κB). MEP-induced VCAM-1 and ICAM-1 protein expression was inhibited by NF-κB inhibitor BAY 11-7085. Oxidative stress was also involved in the signaling of VCAM-1 and ICAM-1 expression. MEP treatment caused hydrogen peroxide and superoxide formation. Pretreatment with α-tocopherol could inhibit MEP-induced reactive oxygen intermediates generation and suppressed MEP-induced IκB degradation and adhesion molecules expression. Furthermore, the carbon black (CB) nanoparticles with different diameters could induce VCAM-1 and ICAM-1 protein expression; however, polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) only increased the expression of ICAM-1 but not that of VCAM-1 in HUVECs. In this study, we found that MEPs could induce ICAM-1 and VCAM-1 expression through oxidative stress and NF-κB activation in HUVECs.     

异丙酚对大鼠心肌缺血/再灌注损伤时核因子-κB信号途径的影响

目的观察异丙酚对大鼠在体心肌缺血/再灌注时核因子-κB(NF-κB)信号途径的影响,以探讨异丙酚的心肌保护作用机制。方法阻断大鼠左冠状动脉前降支30min,再灌注2h引起心肌缺血/再灌注损伤。60只SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血/再灌注组(I/R)和异丙酚3、6、12mg·kg-1·h-1组。分别于缺血前、缺血30min末、再灌注2h末记录心率、平均动脉压,并计算心率-血压指数。ELISA及放射免疫法分别测定血清、心肌中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)的含量。分别用原位杂交法(ISH)和半定量RT-PCR法检测心肌组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、粘附分子1(ICAM-1)的mRNA的表达。免疫组化染色分析心肌组织中NF-κB的核移位,Western blot检测心肌组织NF-κB的表达量。结果缺血/再灌注后各组大鼠的平均动脉压、血压-心率指数均呈进行性下降(与Sham组相比P<0.05)。异丙酚12mg·kg-1·h-1组在缺血/再灌注后的平均动脉压和血压-心率指数明显高于I/R组(P<0.05)。与Sham组相比,I/R组NF-κB活化,明显从细胞质移位于细胞核,表达量也增加(P<0.05);血清、心肌中TNF-α、IL-1β含量明显升高(P<0.01),心肌中iNOSmR-NA、ICAM-1 mRNA表达增强(P<0.01)。而异丙酚6、12mg·kg-1·h-1组,NF-κB从细胞质向细胞核的移位被明显限制,NF-κB的表达量也明显低于I/R组(均P<0.05);血清、心肌中TNF-α、IL-1β含量明显较I/R组降低(P<0.05),心肌中iNOS mRNA、ICAM-1 mRNA表达减弱(与I/R组相比,P<0.05,P<0.01)。结论异丙酚能减轻缺血/再灌注损伤,同时明显抑制心肌缺血/再灌注时NF-κB的活化,阻断NF-κB相关信号通路的传导,下调TNF-α、IL-1β、ICAM-1和iNOS等炎症相关因子的表达。     

基于NF-κB/ICAM-1通路探讨右美托咪定对子痫前期大鼠的神经保护作用

目的　基于核因子-κB（NF-κB）/细胞间黏附分子-1（ICAM-1）通路探讨右美托咪定（DEX）对子痫前期大鼠的神经保护作用。方法　SD孕鼠随机分为对照组,模型组,DEX低、中、高剂量组,每组10只。除对照组外,其余各组孕鼠于妊娠第10~20天每日腹腔注射同型半胱氨酸（Hcy,200 mg/kg）及隔日背部皮下注射谷氨酸单钠（MSG,1 g/kg）制备子痫前期模型,在妊娠第10~20天,DEX低、中、高剂量组分别腹腔注射7.5、15.0、30.0 μg/kg 的DEX。神经行为学实验评估大鼠行为学缺损情况;酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测脑脊液中S100B、铁蛋白和脑组织炎性因子白细胞介素（IL）-1β、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及IL-6表达水平;TUNEL染色检测脑组织细胞凋亡情况;Western blot检测大鼠脑组织NF-κB/ICAM-1通路相关蛋白表达。结果　与对照组相比,模型组大鼠脑组织细胞凋亡现象严重,行为学缺损评分,脑脊液中S100B与铁蛋白,脑组织IL-1β、TNF-α、IL-6含量,p-NF-κB/NF-κB、ICAM-1蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）;与模型组相比,DEX低、中、高剂量组大鼠凋亡细胞比例较低,行为学缺损评分,脑脊液中S100B与铁蛋白,脑组织IL-1β、TNF-α、IL-6含量,p-NF-κB/NF-κB、ICAM-1蛋白表达水平下降（P＜0.05）,且DEX各组之间呈剂量依赖性。结论　DEX对子痫前期大鼠神经细胞有保护作用,其机制可能与抑制NF-κB/ICAM-1信号激活、炎性因子释放及脑神经细胞凋亡有关。