阿里红多糖对阿尔茨海默症小鼠认知功能的作用机制研究

目的 考察阿里红多糖（FOPS）改善淀粉样前体/早老素（APP/PS1）阿尔茨海默症小鼠的认知功能及潜在机制。方法 C57BL/6J雄性小鼠作正常组;根据体重将APP/PS1双转基因雄性小鼠随机分为4组：模型组、对照组、FOPS-a实验组和FOPS-b实验组,每组8只。模型组正常饲养,对照组给予0.65 mg·kg^-1盐酸多哌奈齐,FOPS-a实验组给予60 mg·kg^-1 FOPS-a, FOPS-b实验组给予60 mg·kg^-1 FOPS-b,灌胃给药;qd,连续给药3个月。用Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,实时荧光定量-聚合酶链反应法测定海马区糖原合成酶激酶-3（GSK3α）、淀粉样前体蛋白（APP）、β淀粉样蛋白（Aβ）基因转录情况,蛋白质印迹法检测GSK3Α、APP、Aβ_1-42、早老素（PS-1）蛋白的表达。结果 模型组、正常组、对照组、FOPS-a组、FOPS-b剂量组第4天逃避潜伏期分别为（48.29±10.49）,（27.36±17.25）(28.91±20.31),（...     

荭草苷对APP/PS1转基因痴呆小鼠认知功能和海马自噬的影响

目的探究荭草苷对APP/PS1转基因小鼠认知功能的影响及其可能的作用机制。方法实验动物分为3组:7月龄的转基因模型组(Tg)、荭草苷处理转基因组(Tg+Ori)、同月龄的野生型C57BL/6J小鼠作为非转基因对照组(NT),每组8只。Tg+Ori组连续30 d每天腹腔注射荭草苷(10 mg·kg~(-1)),NT和Tg组注射同等剂量的生理盐水。水迷宫实验检测学习记忆能力,免疫组化检测β淀粉样蛋白(Aβ),免疫印迹检测自噬相关蛋白。结果与NT组相比,Tg组小鼠学习记忆能力受损,海马出现大量Aβ斑块, LC3-Ⅱ、p62、Cathepsin D蛋白表达升高;与Tg组相比,Tg+Ori组小鼠学习记忆能力增强,海马Aβ斑块减少,LC3-Ⅱ、p6、Cathepsin D蛋白水平降低;组间Beclin-1蛋白水平无明显差异。结论荭草苷能够改善转基因小鼠认知功能,减少海马Aβ沉积,促进自噬溶酶体降解。     

蛇床子素对APP/PS1小鼠学习记忆的影响

目的观察蛇床子素(OST)对APP/PS1小鼠学习记忆功能的影响。方法采用雄性APP/PS1双转基因小鼠及野生型(WT)小鼠,随机分为3组:WT对照组、APP/PS1对照组和APP/PS1+OST。给药组小鼠自9月龄开始每天给予OST10 mg·kg~(-1),对照组小鼠则给予等体积的双蒸水,连续给药12周。每月观察小鼠筑巢行为的改变;实验结束前采用Morris水迷宫观察小鼠行为学的改变。之后,麻醉并处死小鼠,收集脑组织,采用Nissl染色观察海马神经元的形态及数量;Western蛋白印迹法检测海马组织Aβ1-40/Aβ1-42含量,APP、α分泌酶(ADAM10)及β分泌酶(BACE1)的蛋白表达水平。结果 APP/PS1小鼠筑巢行为评分随着时间推移而逐渐变差,不能筑成完整的巢穴;给予OST治疗后,小鼠的筑巢行为评分接近WT小鼠,基本筑成完整巢穴。由此说明,12月龄的APP/PS1小鼠日常生活能力和社会行为有所损伤,而OST对此可部分恢复。水迷宫结果显示,与WT小鼠相比,APP/PS1小鼠出现明显的空间学习记忆能力的下降,表现为平均逃避潜伏期明显延长且目标象限停留时间百分比和穿越平台次数明显减少;给予OST后改善了APP/PS1小鼠的空间学习记忆能力。组织形态及分子生物学结果显示,APP/PS1小鼠海马DG区及CA3区神经元的细胞形态受损并伴有完整神经元数量的减少,并且海马组织Aβ1-40/Aβ1-42含量增加,APP及BACE1蛋白呈现高表达,ADAM10的蛋白表达下降;给予OST后,减少了APP/PS1小鼠海马组织Aβ的含量,降低了APP及BACE1蛋白水平,增加了ADAM10的蛋白表达。结论 OST可改善APP/PS1小鼠日常生活能力、社会行为及空间学习记忆等能力,并减少海马组织Aβ的含量,可能与调节海马APP的酶切途径有关。     

柚皮素对APP/PS1转基因小鼠淀粉样斑块沉积和胶质细胞活化的抑制作用

目的探讨柚皮素(NAR)对APP/PS1转基因小鼠淀粉样蛋白沉积和胶质细胞活化的抑制作用。方法利用APP/PS1转基因小鼠观察NAR对AD小鼠在水迷宫实验中记忆损伤的改善作用;硫磺素-S染色法检测淀粉样斑块沉积;免疫荧光法检测SYN-1水平;蛋白免疫印迹法测定小鼠大脑SYN-1、PSD-95和GAP-43含量;免疫荧光法检测GFAP和Iba-1水平。结果水迷宫实验结果显示NAR可明显降低转基因小鼠逃避潜伏期并增加穿越平台所在象限次数。硫磺素-S染色结果显示,NAR可明显降低小鼠皮层及海马淀粉样斑块沉积。蛋白免疫印迹实验显示,NAR可增加SYN-1、PSD-95和GAP-43表达水平。免疫荧光实验显示,NAR可明显降低APP/PS1转基因小鼠皮层和海马GFAP和Iba-1荧光强度。结论 NAR可通过减少皮层和海马中淀粉样斑块沉积并抑制胶质细胞活化改善APP/PS1转基因小鼠记忆功能受损。     

C反应蛋白对β淀粉样蛋白生成的调节参与Alzheimer’s病发病的研究

β淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发病的重要因素。我们前期发现C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)能诱导大鼠产生与Aβ相似的认知障碍,提示CRP可能是AD的重要致病因子。本实验目的是利用PC12细胞初步探讨CRP的细胞毒性与Aβ相关因子淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP),β-分泌酶(β-site of APP cleaving enzyme,BACE-1)、早老素1(presenilins-1,PS-1)和早老素2(presenilins-2,PS-2)的表达调控关系。继而以APP/PS1转基因小鼠作为研究对象,分析脑内CRP和Aβ1-42的相关性;同时脑室给予APP/PS1转基因小鼠CRP以及bis(PC)-H后,观察CRP及其抑制剂是否能影响转基因小鼠的学习记忆,并分析脑内Aβ斑块的形成以明确CRP参与AD早期发病过程的机制。结果显示,CRP诱导PC细胞的相对活力下降,LDH释放增加,表明CRP对PC12细胞产生毒性损伤作用;bis(PC)-H则通过拮抗CRP活性逆转CRP对PC12细胞产生的毒性作用。CRP处理细胞后可诱导Aβ生成相关因子和Aβ1-42的表达显著上调,而bis(PC)-H则可以逆转CRP这一效应,提示了CRP可以调节Aβ的生成。我们在动物实验中发现APP/PS1转基因小鼠脑内CRP与Aβ1-42的水平存在正相关,推测CRP可能通过调节Aβ1-42的生成参与AD早期的发病。我们通过脑室给药的方式给予疾病早期的APP/PS1转基因小鼠CRP及其抑制剂,发现CRP可以影响其学习记忆和Aβ斑块形成。拮抗CRP可以逆转APP/PS1转基因小鼠在物体识别、Morris水迷宫和跳台实验中轻度学习记忆损伤的趋势,并减少Aβ斑块的形成;给予CRP则可以加重APP/PS1转基因小鼠的学习记忆的损伤,并增加Aβ斑块的形成,一正一反地证明了CRP参与AD转基因小鼠的发病。本实验发现了CRP是一个可以作为早期干预AD发病的新靶点,也阐明了CRP参与AD发病的新机制。     

神经节苷脂GM1对Aβ_(1-42)诱导的AD小鼠学习记忆能力及神经细胞凋亡的影响

目的考察鹿茸中单唾液酸四己糖神经节苷脂(monosialotetrahexosylganglioside,GM1)对Aβ_(1-42)诱导的阿尔茨海默症(alzheimer’s disease,AD)小鼠病理模型的学习记忆能力以及淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)、淀粉样蛋白(Aβ)、细胞凋亡的影响。方法实验动物随机分成6组,每组8只。侧脑室注射Aβ_(1-42)制备AD模型,采用GM1腹腔给药,应用自主活动检测小鼠运动能力,应用水迷宫、Y迷宫、新物体识别实验检测小鼠空间记忆及学习能力,应用试剂盒检测APP、 Aβ、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)以及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-9(caspase-9)水平。结果 GM1给药组与模型组相比,GM1小鼠Y迷宫的自发交替率增加,水迷宫的逃避潜伏期逐渐变短;并且降低APP、Aβ、caspase-3、caspase-9的积累。结论 GM1能明显改善AD小鼠学习记忆能力,其机制可能与降低APP、Aβ水平以及抑制神经细胞凋亡有关。     

通天草醇提物对阿尔茨海默病小鼠血脑屏障的影响

目的研究通天草(WH)醇提物对淀粉样蛋白前体蛋白/早老基因1(APP/PS1)双转基因小鼠炎症反应和血脑屏障的影响及作用机制。方法将C57BL/6小鼠作为正常组(n=6)。按照体重将APP/PS1双转基因小鼠分成4组:模型组、对照组和高、低2个剂量实验组,每组6只。低、高2个剂量实验组分别给予WH醇提物1. 32,5. 54 g·kg^-1;对照组给予吡拉西坦0. 6 g·kg^-1;正常组和模型组给予量0. 9%Na Cl,均每天灌胃1次,连续灌胃28 d。用Morris水迷宫检测WH醇提物对小鼠学习和记忆能力的影响,用伊文思蓝染色检测血脑屏障,用逆转录-聚合酶链式反应和免疫印迹法检测紧密连接蛋白(ZO-1)、Claudin-5和Occludin的mRNA与蛋白表达水平,用酶联免疫吸附法检测小鼠血清炎性因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。结果正常组、模型组、对照组和高、低2个剂量实验组的逃避潜伏时间分别为(18. 68±3. 75),(41. 09±7. 57),(23. 55±3. 07),(29. 98±5. 66)和(34. 50±6. 10) s;这5组的伊文思蓝含量分别为(4. 03±0. 55),(10. 57±1. 66),(5. 94±1. 00),(6. 93±1. 13)和(9. 13±1. 59)μg·g^-1;这5组的ZO-1 mRNA的相对表达量分别为1. 00±0. 07,0. 25±0. 01,0. 95±0. 04,0. 75±0. 01和0. 37±0. 01(蛋白表达水平与基因的趋势一致);这5组的IL-6的含量分别为(178. 05±26. 17),(611. 46±63. 96),(308. 05±47. 44),(386. 70±76. 51)和(538. 00±46. 86) pg·m L^-1;这5组的TNF-α的含量分别为(39. 05±5. 78),(325. 55±61. 44),(124. 37±18. 14),(200. 10±38. 18)和(250. 80±29. 64)pg·m L^-1,高、低2个剂量实验组与模型组比较,以上指标差异均有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01)。其中高剂量实验组效果更好。结论 WH醇提物能改善APP/PS1双转基因小鼠的学习能力和记忆障碍,降低炎症反应并缓解血脑屏障损伤,其保护作用机制可能与升高血脑屏障中紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5和Occludin表达水平有关。     

淫羊藿激活CREB/BDNF信号通路改善APP/PS1双转基因小鼠的认知功能

目的 研究淫羊藿能否通过调节CREB/BDNF信号通路改善APP/PS1双转基因小鼠的认知功能。方法 取7月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠30只,按体重随机分为模型对照组和淫羊藿组,每组15只;另取15只同龄的雄性C57BL/6小鼠作为空白对照组。淫羊藿组灌胃给予3 g·kg^-1的药物溶液,空白组和模型组给予等体积0.3% CMC-Na,连续灌胃给药28 d,每天1次。筑巢试验检测小鼠日常生活能力;Morris水迷宫试验检测小鼠的学习和记忆能力;苏木素-伊红（H&E）和尼氏（Nissl）染色法观察小鼠脑组织病理学变化;采用TBA法、羟胺法检测小鼠脑组织中丙二醛（Malondialdehyde,MDA）和超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）的水平;免疫荧光化学法检测小鼠脑内β-淀粉样蛋白（amyloid β-protein,Aβ）的表达情况;Western blot法检测环磷酸腺苷效应元件结合蛋白（cAMP response element binding protein,CREB）和脑源性神经营养因子( brain-derived neurotrophic factor,BDNF)信号通路相关蛋白的表达情况。结果 与空白组比较,APP/PS1双转基因小鼠的筑巢得分明显降低,逃避潜伏期和游泳距离明显增加（P<0.01）,目标象限停留时间和穿越平台次数显著减少;皮层和海马存在明显的神经病理损伤。此外,APP/PS1双转基因小鼠的皮层和海马区域可观察到大量Aβ沉积,并且脑组织中SOD活性降低,MDA水平升高。Western blot 结果显示,模型组小鼠脑内CREB蛋白磷酸化受到抑制,伴随着BDNF蛋白表达明显降低。淫羊藿（3 g·kg^-1）连续灌胃4周,可明显改善模型小鼠的筑巢能力和认知功能,减轻神经病理损伤,抑制Aβ沉积,减轻氧化应激,促进CREB蛋白磷酸化,增加BDNF蛋白表达。结论 淫羊藿可明显改善APP/PS1双转基因小鼠的认知功能和神经病理损伤,其作用机制可能与激活CREB/BDNF信号通路有关。     

氯化锂降低氧化应激水平改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆功能的机制

目的锂(Li)对神经退行性疾病有潜在神经保护作用,但其分子作用机制尚不清楚。在阿尔茨海默病(AD)发病机制中,氧化应激(OS)水平升高及β-淀粉样肽(Aβ)产生过多是重要的导致患者智力低下的致病因素之一。本课题探讨经氯化锂(Li Cl)处理的APP/PS1双转基因小鼠是否能减少Aβ的生成,以及其是否能通过调控糖原合成激酶-3β(GSK3β)/核因子E2相关因子(Nrf2)/血红素加氧合酶1(HO-1)通路来减轻该小鼠脑组织OS损伤,并逆转APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力水平的降低。方法应用免疫组化方法检测各组小鼠脑组织中老年斑的数量;用PCR法扩增模板DNA进行双转基因突变鉴定,筛选APP/PS1双转基因小鼠;转基因及野生型小鼠随机分为4组,即野生型组、野生型+Li Cl处理组、转基因+Li Cl处理组、转基因组。野生型+Li Cl处理组及转基因+Li Cl处理组小鼠4月或8月龄时每天1次用Li Cl灌胃处理(100 mg·kg~(-1),为期2个月),野生型组及转基因组小鼠则用同等容量的生理盐水进行灌胃处理;蛋白印迹法检测动物脑组织中GSK3β,p-GSK3β(ser9),Nrf2及HO-1蛋白表达水平;用生物化学方法测定各组小鼠脑组织与血清中SOD和GSH-Px活性及MDA含量;ELISA法测定脑组织内不可溶性Aβ含量;尼氏染色检测各组小鼠脑组织神经元尼式小体密度;行为学实验检测各组小鼠学习记忆能力。结果与野生型小鼠相比,6月及10月龄APP/PS1双转基因小鼠脑组织内可见明显的老年斑,不可溶性Aβ含量较高,以10月龄小鼠尤为明显(P<0.05);同时GSK3β活性明显增加,Nrf2和HO-1蛋白表达水平降低,脑组织及血清中SOD和GSH-Px活性降低,MDA含量增加(P<0.05);且转基因小鼠脑组织神经元中尼式小体密度明显减少,其学习记忆能力降低。而对4月或者8月龄APP/PS1双转基因小鼠予以Li Cl进行灌胃处理2月后,与未经处理的同龄APP/PS1双转基因小鼠相比,其脑组织内可见老年斑、不可溶性Aβ含量下降(P<0.05);同时APP/PS1双转基因小鼠脑组织中GSK3β活性、Nrf2及HO-1蛋白表达水平的改变被逆转,转基因动物脑组织和血清OS水平降低(P<0.05),且尼式小体密度明显增加,小鼠空间学习记忆能力提升(P<0.05)。结论 APP/PS1转基因小鼠体内氧化应激水平升高伴随空间记忆力及学习能力下降及脑组织神经元中尼式小体密度减少;Li Cl能减少APP/PS1双转基因小鼠脑组织中Aβ含量,从而减少Aβ在AD发病中的毒性作用,同时Li Cl能预防及逆转APP/PS1双转基因小鼠脑组织中GSK3β/Nrf2/HO-1通路表达的下调,提高机体抗氧化应激能力,减少OS损伤,从而改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力,增加尼式小体密度,发挥神经保护作用。     

白藜芦醇对高脂饮食诱导小鼠高脂血症的作用机制研究

目的考察白藜芦醇对高脂血症小鼠的影响,并探讨其作用机制。方法按体重将雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组:正常组、模型组及实验组,每组10只。正常组正常饲养,模型组及实验组小鼠连续饲喂4周高脂饲料构建高血脂模型。建模后,实验组灌服白藜芦醇(400 mg·kg^-1),模型组及空白组灌服等量生理盐水,每天1次,连续干预4周。全自动生化分析仪检测小鼠血清三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）及高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平;称量小鼠肝重量,计算各组小鼠肝指数;蛋白质印迹法检测肝组织丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）蛋白表达。结果正常组、模型组和实验组的血清TG水平分别为（0.70±0.19）,（0.97±0.19）和（0.86±0.14）mmol·L^-1;TC水平分别为（2.08±0.33）,（3.59±0.32）和（3.03±0.32）mmol·L^-1;LDL-C水平分别为（0.26±0.04）,（0.50±0.08）和（0.4...     

IL-10对Aβ1-42诱导的阿尔茨海默病模型大鼠的保护作用

目的研究IL-10对β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)诱导的阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马淀粉样前体蛋白(APP)表达的影响。方法 48只大鼠随机均分为正常对照组(A组)、PBS对照组(B组)、Aβ1-420.1、0.2、0.4mM注射模型组(分别为C1、C2、C3组)和IL-10 80μg/ml预处理注射组(D组)。注射2d后,Morris水迷宫测定大鼠潜伏期,Western blot法检测海马组织中APP的表达量。结果与A、B组相比,C1、C2、C3组大鼠水迷宫实验潜伏期、APP蛋白表达均呈浓度依赖性的增加(P<0.01);而D组潜伏期、APP蛋白表达较C3组明显减少(P<0.05)。结论海马内注射IL-10能抑制Aβ1-42诱导的AD大鼠水迷宫潜伏期及海马内APP表达的增加,提示IL-10可能抑制由Aβ1-42诱导的AD神经炎症。     

新药AD-08对两种痴呆动物模型学习记忆障碍和海马乙酰胆碱酯酶活性的影响

目的 研究抗阿尔采末病(Alzheimer's disease,AD)新药AD-08对动物学习记忆功能以及海马乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响.方法 采用侧脑室注射Aβ1-42蛋白的引起的痴呆大鼠模型和APP/PS1双转基因痴呆小鼠模型.SD大鼠分为正常组、模型组、多奈哌齐对照组、AD-08低、中、高剂量组.APP/PS1双转基因小鼠分为模型组、多奈哌齐对照组、AD-08低、中、高剂量组,以及用具有相同遗传背景的小鼠作为正常对照组.正常对照组及模型组动物每天固定时间灌胃给予相应剂量的药物溶剂(生理盐水);阳性药对照组和AD-08各剂量组动物分别给予相应剂量的药物.SD大鼠给药8 d,APP/PS1双转基因小鼠给药1个月,之后用Morris水迷宫方法对动物进行空间记忆能力测试.并用AChE活性试剂盒测定受试动物大脑海马组织的AChE活性.结果 与正常对照组相比,痴呆模型组大鼠和小鼠的空间学习记忆能力均明显降低(P＜0.05),海马组织中的AChE活性明显升高(P＜0.05).各剂量的AD-08均能够明显改善痴呆模型动物的空间学习记忆能力,并降低其海马组织AChE的活性(P＜0.05).所试剂量(0.7 mg·kg-1~10 mg·kg-1)的AD-08改善痴呆模型动物空间学习记忆能力的作用与多奈哌齐(1 mg·kg-1~3 mg·kg-1)相似(P＞0.05).结论 AD-08可以明显改善Aβ1-42所致的痴呆模型大鼠和APP/PS1双转基因痴呆模型小鼠的空间学习记忆能力;其作用机制可能与抑制海马AChE的活性有关.     

半胱氨酰白三烯受体1调节APP/PS1小鼠原代神经元β淀粉样蛋白生成及机制

目的 探究半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1R)对体外培养的APPswe/PS1?E9双转基因小鼠(APP/PSI小鼠)皮质原代神经元β淀粉样蛋白(Aβ)生成的影响及机制.方法 ①将携带CysLT1R的慢病毒-绿色荧光蛋白载体(LV-CysLT1R-EGFP)或空载体(LV-EGFP)转染至APP/PS1小鼠皮质原代神...     

山茱萸环烯醚萜苷对APP/PS1/tau小鼠脑内阿尔茨海默病样病理变化的作用机制

目的阿尔茨海默病(AD)最典型的病理变化是β-淀粉样蛋白(Aβ)在脑部沉积形成的老年斑和过度磷酸化的tau蛋白聚集导致的神经纤维原缠结(NFT),同时伴随氧化应激、神经炎症、突触损伤、神经元变性或死亡等。本研究利用APP/PS1/tau三转基因(3x Tg)模型小鼠,观察山茱萸环烯醚萜苷(CIG)对小鼠脑内多种病理变化的影响。方法 16月龄3x Tg模型小鼠每天灌胃给予CIG 100或200 mg·kg~(-1)至18月龄。采用刚果红染色法观察3x Tg小鼠海马中老年斑沉积;Western蛋白印迹法检测tau蛋白在Thr212和Thr217位点的磷酸化水平;免疫组化法观察小鼠海马中脑源性神经营养因子(BDNF)的表达和分布;实时荧光定量PCR法(q RT-PCR)检测小鼠BDNF转录水平;尼氏染色法观察小鼠海马中尼氏小体的变化。结果 18月龄模型组小鼠与对照组相比,Aβ淀粉样斑块沉积明显增加,而给予CIG 100或200 mg·kg~(-1)均能不同程度降低脑内斑块负荷。模型组小鼠tau蛋白在Thr217位点的磷酸化水平明显升高,而在Thr212位点的磷酸化水平无明显升高;CIG治疗组能明显拮抗tau蛋白在Thr217位点的过度磷酸化。模型组小鼠海马BDNF蛋白和m RNA的水平均降低,CIG能够明显恢复BDNF蛋白和m RNA表达;模型组小鼠海马内尼氏小体数量减少,染色变浅,排列散乱,CIG有增高尼氏体数量的趋势。结论 CIG能够减少Aβ在脑内的沉积和tau蛋白异常过度磷酸化,恢复BDNF在脑内的表达,并且保护神经元。     

党参多糖对环己酰亚胺所致记忆巩固障碍小鼠脑保护作用的研究

目的研究党参多糖（CPPS）预处理对环己酰亚胺所致记忆巩固障碍小鼠脑保护作用,及其对钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）、环腺苷酸反应元件结合蛋白（CREB）蛋白表达的影响。方法将60只昆明种小鼠随机分为空白组、模型组、对照组和低、高剂量实验组,每组12只。按体质量20.0 mL·kg^-1的剂量灌胃给药,低、高剂量实验组给予7.5和15.0 mg·mL^-1党参多糖,对照组给予25.0 mg·mL^-1吡拉西坦,空白组和模型组均给予等体积0.9%NaCl。5组小鼠每天给药1次,连续给药15 d。然后进行Morris水迷宫的空间记忆和空间探索实验,每天继续灌胃给药,并观察各组小鼠的学习记忆巩固能力的变化情况,连续5 d。期间,除空白组,其他各组小鼠按体质量20.0 mL·kg^-1的剂量腹腔注射6.0 mg·mL^-1的环己酰亚胺抑制记忆蛋白合成,造成小鼠空间记忆巩固障碍。在行为学实验结束后,用蛋白质印迹法检测小鼠海马组织中CaMKⅡ/CREB信号通路相关蛋白的表达情况。结果空白组、模...     

瑞香素对阿尔茨海默病模型小鼠自噬的影响

目的 探讨瑞香素对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)自噬的影响以及对AD神经保护的作用机制。方法 选用APP/PS1双转基因模型小鼠，3个月龄后开始灌胃给药。药物治疗3个月后，通过Morris水迷宫试验观察瑞香素对AD模型小鼠空间探索和记忆能力的影响；采用ELISA试剂盒检测AD模型小鼠海马脑组织Aβ_1-40、Aβ_1-42水平；利用Western blotting检测瑞香素对AD模型小鼠海马组织微管相关蛋白轻链3Ⅱ(microtubule-associated proteins light chain 3 Ⅱ，LC3-Ⅱ)、beclin-1及p62表达水平的影响。结果 Morris水迷宫试验显示，APP/PS1双转基因模型小鼠逃避潜伏期较对照组明显延长，原象限停留时间明显缩短；瑞香素组小鼠逃避潜伏期较模型组明显缩短，原象限停留时间明显延长。与对照组比较，APP/PS1双转基因模型小鼠脑组织中Aβ水平增多，而瑞香素减少模型小鼠Aβ水平；Western blotting结果显示AD模型小鼠海马区LC3-Ⅱ及beclin-1显著降低，p62显著增加，而瑞香素可上调APP/PS1双转基因模型小鼠LC3-Ⅱ及beclin-1表达并抑制p62的蛋白表达。结论 瑞香素通过上调LC3Ⅱ和beclin-1自噬相关蛋白增强自噬，改善AD模型小鼠的学习记忆功能。     

金钗石斛多糖对脂多糖诱导的大鼠海马APP和GSK-3β基因的影响

目的：观察金钗石斛多糖（NDP）对脂多糖诱导的大鼠海马APP和GSK-3β基因的影响。方法预防性给药7 d后,侧脑室注射LPS溶液诱导大鼠的神经炎症模型,real time RT-PCR仪定量检测大鼠海马组织中淀粉样前体蛋白APP及糖原合成激酶GSK-3β的mRNA表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠海马组织中的APP、GSK-3βmRNA表达明显增加;NDP给药组[80,160 mg/（kg·d）]大鼠海马组织中的APP、GSK-3βmRNA表达量均较模型组明显降低。结论NDP[80,160 mg/（kg·d）]可以降低LPS诱导的大鼠海马组织APP、GSK-3βmRNA表达。     

米索前列醇对APP/PS1转基因小鼠的神经保护作用

目的观察米索前列醇对APP/PS1转基因小鼠海马和皮层损伤的保护作用并探讨其机制。方法实验动物设4组:转基因模型组和药物处理组APP/PS1转基因小鼠各10只,老年对照组为野生型C57小鼠10只,药物处理组给予米索前列醇,另两组给予羧甲基纤维素钠,均在小鼠24周龄时以200μg·kg-1的量开始灌胃给予,连续给药20周,每周连续5 d,每天1次;在指标测试阶段,另取10只8周龄野生型C57小鼠作为青年对照组。采用Morris水迷宫测试空间学习记忆能力,HE染色观察海马和皮层神经元形态变化,生化法检测海马和皮层SOD活性、MDA含量变化,免疫组织化学法检测海马和皮层Aβ表达情况。结果与老年对照组小鼠相比,转基因模型组小鼠寻台潜伏期明显延长,海马和皮层神经元出现明显核固缩,SOD活性明显下降,MDA含量明显增加,Aβ表达明显增多;给予米索前列醇后,APP/PS1转基因小鼠寻台潜伏期明显缩短,海马和皮层神经元核固缩明显减轻,SOD活性明显升高,MDA含量明显降低,Aβ表达明显减少。结论米索前列醇对APP/PS1转基因小鼠海马和皮层的神经损伤有显著保护作用,其机制可能与米索前列醇减轻APP/PS1转基因小鼠脑组织氧化应激有关。     

辅酶Q10对糖尿病小鼠肝肾损伤以及骨骼的影响

目的 建立糖尿病小鼠模型并探讨辅酶Q₁₀对糖尿病小鼠肝肾损伤以及骨骼的影响。方法 除正常组（n=20）外,其余小鼠通过腹腔注射50 mg·kg^-1链脲佐菌素建立糖尿病小鼠模型,造模后随机分为3组：模型组（n=20）、二甲双胍组（n=10）和辅酶Q₁₀组（n=10）。正常组和模型组小鼠灌胃生理盐水,二甲双胍组灌胃500 mg·kg^-1盐酸二甲双胍,辅酶Q₁₀组灌胃3 000 mg·kg^-1辅酶Q₁₀。各组小鼠每天灌胃给药1次,连续75 d。给药期间定期测定小鼠空腹血糖。给药结束后,用分光光度计与酶标仪检测血清生化指标水平;用三点弯曲实验测定骨生物力学参数;用苏木精-伊红染色法与糖原染色法观察小鼠肾、肝组织病理学变化。结果 正常组、模型组、二甲双胍组和辅酶Q₁₀组小鼠肾功能指标肌酸酐（Cr）含量分别为（152.23±40.08）,（390.60±85.32）,（346.64±37.20）和（277.27±62.36）...     

黄芪多糖对肺癌A549细胞自噬的作用及机制研究

目的 探讨黄芪多糖（APS）对黄嘌呤氧化酶（XOD）诱导的肺癌A549细胞自噬模型及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（PI3K/Akt/mTOR）信号通路的影响及对自噬相关调节因子表达。方法 实验分为6组：正常组、模型组(20 U·L^-1 XOD处理24 h)、低、中、高3个浓度实验组(在模型组基础上分别使用100,200和400 mg·L^-1 APS进行处理)及3-MA抑制组(在模型组基础上使用2 mmol·L^-1 3-甲基腺嘌呤进行处理)。以免疫荧光法检测自噬相关蛋白,以蛋白质印迹法检测PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白,以实时荧光定量聚合酶链反应法检测mRNA的表达水平。结果 正常组、模型组、高浓度实验组及3-MA抑制组的微管相关蛋白1轻链3B（LC3B）的蛋白荧光强度分别为6 368.50±17.90,2.57×10⁴±224.03,7 443.00±19.20和8 356.50±18.52;抗坏死骨片1（P62）的蛋白荧光强度分别为2.86×10⁴