21-清咽滴丸抗柯萨奇病毒CVB3,CVB5作用的研究

目的:探究清咽滴丸及其六种中药成分(甘草、青黛、冰片、诃子、牛黄和薄荷)提取物对柯萨奇病毒B3、B5的抑制作用。方法:采用MTT法检测活细胞生存率,结合观察CPE,在细胞水平上检验清咽滴丸及其六种成分对CVB3、CVB5增殖的抑制作用。取其有效成分后,进一步用血清药理学的方法,检验经机体吸收后药物是否仍然具有抗病毒的效果。结果:在细胞水平上,清咽滴丸及其六种主要成分都对细胞有明显毒性作用,但只有清咽滴丸、甘草、诃子可以抑制CVB3、CVB5在细胞内的增殖。血清药理学进一步验证清咽滴丸、甘草、诃子对CVB3、CVB5有抑制作用。结论:清咽滴丸对CVB3、CVB5有一定的抗感染能力和治疗效果,其中起主要作用的成分是甘草和诃子,且抑制作用呈一定的浓度、时间依赖性。     

遗传毒性鸡血藤水提物抗柯萨奇病毒B3作用及机制

目的:探讨鸡血藤抗柯萨奇B3病毒(CVB3)的作用和机制。方法:不同浓度的鸡血藤水提物与适量CVB3感染的Vero E6细胞共同培养,采用甲基噻唑基四唑塞唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,计算鸡血藤水提物对CVB3,CVB5,埃可病毒9(Echo virus 9,EV9),EV29和脊髓灰质炎病毒(Polio virus1,PVⅠ)这5种肠道病毒的半数抑制浓度(IC50)和治疗指数(TI),并用RT-PCR检测鸡血藤水提物对CVB3侵染Vero E6细胞的RNA复制的影响。结果:鸡血藤水提物能有效抑制CVB3,CVB5,EV9,EV29和PVⅠ这5种肠道病毒引发的细胞病变,IC50分别为60.8,47.1,17.1,65.5和29.1μg.mL-1,TI分别为4.1,5.3,14.6,3.8和8.6,对肠道病毒的抑制作用存在量效关系;鸡血藤不能阻止CVB3对Vero E6细胞的吸附作用,但可干扰CVB3侵染细胞后病毒核酸的复制。结论:鸡血藤能抑制CVB3引发的细胞病变,其机制可能是抑制侵染后病毒复制的初级阶段。     

大蒜多糖体外抗柯萨奇病毒B3作用

目的研究大蒜多糖体外抗柯萨奇病毒B3(Coxsackievirusg roup B type 3，CVB3)作用。方法观察大蒜多糖A，B，C的细胞毒性、对CVB3直接灭活作用、抗CVB3吸附作用及对CVB3生物合成抑制作用。结果大蒜多糖A，B，C对Hep-2细胞的半数中毒浓度(TC50)分别为1000，800，4000μg／mL；均无直接灭活CVB3及抗CVB3吸附作用；除A外，B和C均可剂量依赖性抑制CVB3生物合成。结论大蒜多糖B和C在体外通过抑制CVB3生物合成而发挥抗CVB3的作用。     

十味板蓝根颗粒剂抗病毒作用的实验研究

目的:探讨十味板蓝根颗粒剂体外抗柯萨奇病毒B3株(CVB3)、单纯疱疹病毒II型(HSV II)的作用.方法:采用组织细胞培养法,观察药物毒性和细胞病变效应,评价十味板蓝根颗粒剂的细胞毒性及抗病毒效果.结果:十味板蓝根颗粒剂对Hep-2和Hela细胞毒性均较低(TD0为1 mg·mL-1),浓度在125μg·mL-1以上时,可以明显抑制HSV-II病毒对Hela细胞感染;浓度达250 μg·mL-1以上时,明显抑制CVB3病毒对Hep-2细胞的致病变作用,对Hep-2和Hela细胞有保护作用,并且随着药物浓度的增加,CPE特征逐渐减弱,病毒抑制率(细胞存活率)明显升高.结论:十味板蓝根颗粒剂在体外能明显抑制CVB3和HSV-II病毒的致细胞病变作用.     

大黄素配伍中药活性成分体外抗柯萨奇B_3病毒试验

目的:研究大黄素与不同中药活性成分配伍后体外抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的作用,并探讨其抗病毒机制。方法:用不同组成、不同浓度的中药材提取液处理CVB3感染的Hep-2细胞,72h后用MTT法测定细胞活性。结果:在Hep-2细胞系中,所有经配伍后的中药组合都能抑制CVB3致细胞病变作用,提高细胞存活率,降低细胞毒性。对病毒直接作用效力最高的药物组合为大黄素:姜黄素:苦参碱=2:1:2;抗病毒合成效力最高的药物组合为大黄素:姜黄素:苦参碱=2:0:1。结论:大黄素与中药活性成分配伍,其细胞毒性降低,抗CVB3效力增强。     

黄芩茎叶提取物与生脉饮抗柯萨奇病毒B3的体外研究

目的：探讨黄芩茎叶提取物及生脉饮体外抗柯萨奇病毒B3（CVB3）的作用。方法：应用细胞感染模型按照药物对Hela细胞及CVB3不同作用方式设直接抗病毒作用组、增强细胞抗病毒作用组、对感染细胞保护作用组及正交设计组。采用光镜观察并结合MTT测定的方法进行综合判断。结果：与病毒对照组比较黄芩茎叶提取物、生脉饮对细胞病变有抑制作用（P〈0．05）。结论：黄芩茎叶提取物、生脉饮均有直接抗病毒作用以及对未感染或已感染Hela细胞的保护作用。生脉饮与黄芩茎叶提取物之间有交互作用。     

安心康滴丸体外抗柯萨奇病毒的实验

目的 评价安心康滴丸的体外抗柯萨奇病毒（CVB3）活性。方法 在大鼠心肌细胞上进行抗病毒实验，观察安心康滴丸对细胞病变的影响、对病毒繁殖抑制作用和对肌钙蛋白含量的影响。结果 安心康滴丸能有效的修复病变细胞，抑制病毒繁殖和降低肌钙蛋白含量。结论 安心康滴丸在体外具有显著的抗柯萨奇病毒作用。     

苦瓜提取液体外抗柯萨奇病毒的实验研究

目的:探讨苦瓜提取液体外抗柯萨奇病毒(CVB3)的作用及抗病毒作用的机制,从而为柯萨奇病毒感染的治疗提供新的手段。方法:根据病毒复制周期,设计2个药物抗病毒作用靶点,观察苦瓜提取液在不同靶点对柯萨奇病毒的作用。在H ep-2单层细胞上,通过观察细胞病变效应(CPE)、四甲基偶氮唑蓝(M TT)法检测细胞活性、病毒抑制率测定,以确定苦瓜提取液体外抗病毒活性。结果:苦瓜提取液对H ep-2细胞的半数毒性浓度(TC50)为1004.8μg.mL-1;苦瓜提取液抑制病毒组对柯萨奇病毒的抑制率随药物浓度的增加而增加,其半数抑制浓度(IC50)为35.4μg.mL-1,T I为7.82。苦瓜提取液直接灭活病毒组,各浓度组均出现典型CVB3所致的细胞病变,与病毒对照孔无显著区别。结论:苦瓜提取液可通过抑制病毒增殖发挥抗柯萨奇病毒作用。     

双黄连注射液对人胚脑联奇病毒脑炎模型的抑毒效果观察

为观察中药双黄连对人胚脑柯节奇B3病毒（CVB3）脑炎模型的病变影响,采用人胚脑皮质细胞原代培养,感染CVB3,制备脑炎模型,用双黄连进行抑毒实验。检测指标为培养液肌酸激酶和定量CVB3测定。结果表明,双黄连实验组对CVB3感染后的细胞病变有明显抑制作用。结论：双黄连具有抗CVB3感染的作用。     

参麦注射液对感染柯萨奇B3病毒心肌细胞的影响

目的在细胞水平探讨参麦注射液（SMI）对实验性病毒性心肌炎的治疗作用。方法采用原代培养的SD大鼠心肌细胞感染柯萨奇B3病毒（CVB3）造成实验性病毒性心肌炎细胞模型;设立正常对照组、模型组、SMI高剂量（10g／L）组、SMI中剂量（5g／L）组及SMI低剂量（2．5g／L）组,观察心肌细胞感染CVB,后第3天和第5天的搏动频率、细胞病变、细胞超微结构、上清液中乳酸脱氢酶（LDH）的活性和CVB,滴度。结果感染CVB,后心肌细胞的搏动频率明显减慢;第5天模型组有半数细胞搏动停止,细胞病变明显,线粒体肿胀且形态不完整,内质网扩张,部分肌原纤维损坏,上清液中LDH的活性显著升高;SMI各剂量组心肌细胞均维持搏动,且高剂量组细胞病变程度、LDH活性和CVB,滴度均明显低于模型组,除部分肌原纤维损坏外,线粒体形态完整,内质网未见扩张。结论SMI对感染CVB,的培养心肌细胞搏动功能具有保护作用,并能降低心肌细胞上清液中CVB3滴度和减轻CVB,对心肌细胞的损伤。     

大八角根中二萜类化学成分及其抗柯萨奇病毒活性

目的研究大八角根（RadixIlliciiMaji）中二萜类化学成分及其抗B3型柯萨奇病毒的活性。方法采用硅胶、C18反相硅胶、SephadexLH-20柱色谱以及制备HPLC等方法对二萜类化合物进行分离纯化,通过波谱学方法以及Mo（OAc）。诱导的圆二色谱法鉴定其结构,并采用细胞病变效应（cytopathiceffect,CPE）法对分离得到的化合物进行抗柯萨奇病毒B3的活性评价。结果分离鉴定了12个二萜类化合物,分别为4-表-脱氢松香酸（4-epi—dehydroabieticacid,1）、8,11,13,15-四烯松香烷-19-烷酸（8,11,13,15-abietatraen-19-oicacid,2）、jiadifenoicacidsB（3）、C（4）、G（5）和I（6）、majusanicacidsB（7）和D（8）、lamberticacid（9）、angustanoicacidsF（10）和G（11）,及13-hydroxy-8,11,13-podocarpatrien-19-oicacid（12）,经活性筛选发现,这些化合物具有较好的抗柯萨奇病毒B3的活性,IC50值为3．3—66．7μmol／ml。结论大八角根中的二萜类化合物抗B3型柯萨奇病毒的活性及毒性与其分子中的含氧取代密切相关,化合物3—6和9为首次从该植物中分离得到的化合物。     

Phyllaemblicin B inhibits Coxsackie virus B3 induced apoptosis and myocarditis

Coxsackie virus B3 (CVB3) is believed to be a major contributor to viral myocarditis since virus-associated apoptosis plays a role in the pathogenesis of experimental myocarditis. In this study, we investigated the in vitro and in vivo antiviral activities of Phyllaemblicin B, the main ellagitannin compound isolated from Phyllanthus emblica, a Chinese herb medicine, against CVB3. Herein we report that Phyllaemblicin B inhibited CVB3-mediated cytopathic effects on HeLa cells with an IC₅₀ value of 7.75 ± 0.15 μg/mL. In an in vivo assay, treatment with 12 mg kg⁻¹ d⁻¹ Phyllaemblicin B reduced cardiac CVB3 titers, decreased the activities of LDH and CK in murine serum, and alleviated pathological damages of cardiac muscle in myocarditic mice. Moreover, Phyllaemblicin B clearly inhibited CVB3-associated apoptosis effects both in vitro and in vivo. These results show that Phyllaemblicin B exerts significant antiviral activities against CVB3. Therefore, Phyllaemblicin B may represent a potential therapeutic agent for viral myocarditis.     

高山红景天酪醇对病毒感染细胞的保护作用

本文采用细胞培养技术、中性红染料摄入、细胞病变效应和扫描电镜等几种不同实验方法观察了高山红景天酪醇对柯萨奇B_s病毒感染细胞的保护作用。实验结果表明,在无毒剂量范围内.高山红景天酪醇对病毒感染细胞具有保护作用.以病毒和红景天酪醇同时加入组作用更为明显。本研究结果为探讨中药抗病毒作用机理和病毒性疾病的防治提供实验依据。     

拉米夫定对肺结核并HBV感染患者的作用分析

目的：观察拉米夫定对肺结核并HBV感染患者的作用。方法：标准化疗的41例血清HBV-DNA阳性的肺结核并HBV感染患者,随机分成拉米夫定抗病毒治疗组21例,对照组20例。治疗组用拉米夫定0.1g.d-1,对照组未用拉米夫定,疗程半年。两组患者均随访至4.3年。观察肺结核并HBV复制患者化疗中,拉米夫定抗病毒治疗与肝功能变化以及患者预后的相关性。结果：102例肺结核并HBV感染患者血清HBV-DNA阳性41例,阳性率为40.20%,化疗中,肺结核并血清HBV-DNA阳性抗病毒组,肺结核并血清HBV-DNA阳性未抗病毒组,肺结核并HBV-DNA阴性、其它HBV-M阳性组,单纯肺结核组的肝功能受损率分别为28.57%,95%,9.68%及5.07%。随访至4.3年,肺结核并血清HBV-DNA阳性,未抗病毒组,死亡4例（20%）,且死亡与肝病直接相关（肝衰竭）,发生肝硬化2例;肺结核并血清HBV-DNA阳性抗病毒组,无肝硬化及死亡病例。结论：肺结核并HBV感染,且HBV复制,化疗中应用拉米夫定有重要意义。拉米夫定抗HBV治疗,对改善存在HBV复制的肺结核患者预后有重要作用,并有HBV感染的肺结核患者,化疗前可常规检查血清HBV-DNA。血清HBV-DNA阳性的肺结核患者,建议化疗中常规联用拉米夫定抗HBV治疗。     

复方血栓通系列品种中丹酚酸B的通用检测方法研究

目的：统一复方血栓通颗粒、片、滴丸和胶囊中丹酚酸B的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法,使用Thermo Syncronis（5μm,250mm×4．6mm）色谱柱,流动相为乙腈：甲醇：甲酸：水（10：25：1：64）,流速为1．0ml·min^-1,检测波长286nm。结果：丹酚酸B的量在0．0541-5．4108μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0．9999;精密度、重复性、稳定性及加样回收率结果均能满足分析要求。结论：该方法简单可行,为复方血栓通品种中丹酚酸B含量测定方法的统一提供可靠的依据。     

Antiviral activities of extracts and selected pure constituents of Ocimum basilicum

1. Ocimum basilicum (OB), also known as sweet basil, is a well known medicinal herb in traditional Chinese medicine preparations. In the present study, extracts and purified components of OB were used to identify possible antiviral activities against DNA viruses (herpes viruses (HSV), adenoviruses (ADV) and hepatitis B virus) and RNA viruses (coxsackievirus B1 (CVB1) and enterovirus 71 (EV71)). 2. The results show that crude aqueous and ethanolic extracts of OB and selected purified components, namely apigenin, linalool and ursolic acid, exhibit a broad spectrum of antiviral activity. Of these compounds, ursolic acid showed the strongest activity against HSV-1 (EC50 = 6.6 mg/L; selectivity index (SI) = 15.2), ADV-8 (EC50 = 4.2 mg/L; SI = 23.8), CVB1 (EC50 = 0.4 mg/L; SI = 251.3) and EV71 (EC50 = 0.5 mg/L; SI = 201), whereas apigenin showed the highest activity against HSV-2 (EC50 = 9.7 mg/L; SI = 6.2), ADV-3 (EC50 = 11.1 mg/L; SI = 5.4), hepatitis B surface antigen (EC50 = 7.1 mg/L; SI = 2.3) and hepatitis B e antigen (EC50 = 12.8 mg/L; SI = 1.3) and linalool showed strongest activity against AVD-II (EC50 = 16.9 mg/L; SI = 10.5). 3. No activity was noted for carvone, cineole, beta-caryophyllene, farnesol, fenchone, geraniol, beta-myrcene and alpha-thujone. 4. The action of ursolic acid against CVB1 and EV71 was found to occur during the infection process and the replication phase. 5. With SI values greater than 200, the potential use of ursolic acid for treating infection with CVB1 and EV71 merits further investigation.     

维拉帕米对CVB_3感染心肌细胞Ca~(2+)内流及CVB_3-RNA含量的影响

观察了维拉帕米(Verapamil,Ver)对感染柯萨奇B_3病毒(CVB_3)的大鼠培养心肌细胞Ca~(2+)内流及CVB_3-RNA复制的影响。结果发现在感染48h后,Ver对感染细胞及正常对照的Ca~(2+)内流均有显著的抑制作用(P<0.01);若在病毒感染同时加入Ver,经48h培养后,细胞中CVB_3-RNA含量显著高于病毒对照组(P<0.05)。提示钙拮抗剂(如Ver)可减少病毒感染引起的心肌Ca~(2+)内流增加,有可能减轻感染细胞的继发性Ca~(2+)损伤;但Ver会促进病毒RNA的复制,提示在急性病毒性心肌炎临床上用Ver治疗心律失常时宜慎重。