大黄素对重症胰腺炎肾损伤模型大鼠血清缺氧诱导因子-1α及糖原合酶激酶-3β水平的影响北大核心CSCD

目的研究大黄素对重症胰腺炎肾损伤大鼠血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)水平影响。方法将60只大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、对照组和实验组,每组12只。模型组和试验组注入牛磺胆酸钠0.1 mL/100 g建立重症胰腺炎肾损伤大鼠模型;假手术组和对照组打开腹腔后仅轻轻翻动十二指肠以及胰腺;空白组大鼠未作任何处理。空白组、假手术组、模型组均予以腹腔注射5μL·g-10.9%Na Cl q6 h;对照组和实验组均按25μg·g-1剂量予以腹腔注射5 g·L^(-1)大黄素q6 h。术后3,6,12h,比较各组大鼠的血清肌酸酐(SCr)、尿素氮(BUN)、HIF-1α和GSK-3β水平。结果空白组、假手术组、对照组和实验组的胰腺组织病理学评分分别为(1.30±0.14),(1.39±0.14),(1.40±0.15)和(2.73±0.30)分,与模型组的胰腺组织病理学评分(9.84±1.05)分相比,差异均有统计学意义(均P<0.05),且实验组的胰腺组织病理学评分与空白组、假手术组、对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。术后3 h,空白组、假手术组、对照组、模型组和实验组的SCr分别为(60.46±6.78),(61.52±6.78),(60.38±6.74),(120.57±13.43)和(95.35±9.85)μmol·L^(-1),BUN分别为(7.47±0.79),(8.02±0.92),(7.93±0.83),(12.49±1.53)和(8.56±0.89)mmol·L^(-1),HIF-1α分别为(225.46±23.57),(210.57±23.58),(229.67±6.74),(160.46±17.47)和(144.57±14.85)μg·L^(-1),GSK-3β分别为(6.59±0.69),(6.57±0.69),(6.74±0.68),(19.95±2.13)和(10.56±1.39)μg·L^(-1)。术后6 h,空白组、假手术组、对照组、模型组和实验组的SCr分别为(60.57±6.79),(60.55±6.76),(59.50±6.76),(143.57±15.47)和(110.57±12.55)μmol·L^(-1),BUN分别为(7.65±0.84),(8.11±0.93),(8.29±0.92),(15.46±1.64)和(12.35±1.37)mmol·L^(-1),HIF-1α分别为(226.46±24.04),(222.46±23.57),(230.57±24.05),(155.36±15.74)和(127.57±12.84)μg·L^(-1),GSK-3β分别为(6.25±0.67),(6.71±0.69),(6.82±0.71),(25.34±2.64)和(11.56±1.27)μg·L^(-1)。术后12 h,空白组、假手术组、对照组、模型组和实验组的SCr分别为(60.61±6.79),(61.68±6.79),(61.54±6.78),(166.45±17.05)和(131.45±13.46)μmol·L^(-1),BUN分别为(8.03±0.85),(7.98±0.82),(8.79±0.93),(18.66±19.46)和(15.35±1.63)mmol·L^(-1),HIF-1α分别为(219.57±23.63),(226.35±24.04),(220.25±24.04),(148.46±18.94)和(117.46±12.04)μg·L^(-1),GSK-3β分别为(6.77±0.69),(6.70±0.70),(6.86±0.70),(35.02±3.76)和(20.35±2.13)μg·L^(-1)。空白组、假手术组、对照组术后3,6,12 h的SCr、BUN、HIF-1α、GSK-3β与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),且实验组与模型组术后3,6,12 h的SCr、BUN、HIF-1α、GSK-3β比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论大黄素可能通过上调血清HIF-1α和GSK-3β水平,提高肾细胞耐缺氧的能力,从而发挥对重症急性胰腺炎肾损伤的保护作用。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子对人卵巢癌SKOV3细胞凋亡和迁移侵袭的影响

目的探究细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)对人卵巢癌SKOV3细胞凋亡和迁移侵袭的作用。方法建立稳定表达EMMPRIN基因的SKOV3细胞为实验组,分别以转染pc DNA3.0空载体的SKOV3细胞和正常卵巢上皮细胞IOSE80分别作为对照组和空白组。用流式细胞术检测凋亡率,用划痕实验和Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力,用免疫印迹法检测EMMPRIN、Bcl-2和Bax的表达水平。结果空白组、对照组和实验组的凋亡率分别为(10.27±1.35)%,(12.40±0.70)%和(5.67±0.96)%,平均相对迁移指数分别为(0.25±0.03),(0.64±0.03)和(0.83±0.02),平均侵袭细胞数分别为(45.75±2.87),(120.00±3.92)和(153.25±8.06),EMMPRIN表达量分别为(0.12±0.02),(0.22±0.01)和(0.34±0.02),Bcl-2表达量分别为(0.06±0.01),(0.55±0.02)和(0.87±0.03),Bax表达量分别为(0.37±0.02),(0.28±0.01)和(0.12±0.01)。实验组的上述指标与空白组和对照比较,差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.01)。结论 EMMPRIN过表达后人卵巢癌细胞SKOV3细胞凋亡能力降低,细胞迁移和侵袭能力增强。     

右美托咪定对小鼠树突状细胞免疫功能的影响

目的研究右美托咪定对小鼠树突状细胞功能的影响及作用机制。方法分离获取小鼠骨髓原性树突状细胞鉴定成功后,体外分组培养,以正常培养基作为空白组,实验组为含有10μmol·L-1右美托咪定的正常培养基,对照1组和对照2组分别为含有10μmol·L-1酚苄明及同时含有10μmol·L-1右美托咪定和酚苄明的正常培养基,分别于96孔板培养24 h、Transwell 24孔板培养4 h和6孔板培养24 h。测定实验药物对小鼠树突状细胞活力、细胞迁移数量及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)的影响情况。结果空白组、实验组、对照1组和对照2组的树突状细胞活力分别为(99.96±0.19)%,(62.61±0.08)%,(98.74±0.45)%和(79.25±0.23)%,树突状细胞迁移细胞数量分别为(3684.68±38.36),(1836.37±21.38),(3659.90±27.92)和(2670.06±27.61)个,树突状细胞培养上清液的TNF-α浓度分别为(67.26±1.51),(353.81±6.29),(67.92±1.45)和(169.63±2.89)pg·mL-1,IL-6浓度分别为(29.64±1.20),(511.29±12.97),(29.38±1.88)和(230.17±2.19)pg·mL-1,IL-1β浓度分别为(46.51±2.43),(436.97±5.86),(46.19±1.29)和(147.30±3.57)pg·mL-1,实验组与其他组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论右美托咪定能够影响小鼠树突状细胞的活力、迁移能力以及促炎性细胞因子的分泌,其作用机制跟α肾上腺素受体的激活有关。     

依托咪酯通过下调叉头框转录因子D3反义RNA 1对胃癌细胞恶性表型调控作用北大核心CSCD

目的探讨依托咪酯对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及可能的作用机制。方法体外培养胃癌细胞HGC-27,将细胞分为8组:正常对照组(细胞用常规培养基培养24 h)、依托咪酯组(细胞分别用含40μg·mL^(-1)依托咪酯的培养基培养24 h)、第1转染组(转染小干扰RNA阴性对照的细胞用常规培养基培养24 h)、第2转染组(转染FOXD3-AS1小干扰RNA的细胞用常规培养基培养24 h)、第3转染组(用含40μg·mL^(-1)依托咪酯的培养基培养转染空载体的细胞24 h)和第4转染组(用含40μg·mL^(-1)依托咪酯的培养基培养转染FOXD3-AS1过表达载体的细胞24 h)。用细胞计数试剂盒-8检测细胞增殖(OD值),流式细胞术检测细胞凋亡率,Transwell检测细胞迁移和侵袭,实时定量-PCR法检测细胞中叉头框转录因子D3反义RNA 1(FOXD3-AS1)基因表达(2^(-△△Ct)值)。结果与正常对照组比较,依托咪酯组HGC-27细胞增殖水平(0.32±0.02 vs 0.66±0.07,)、迁移数[(42.80±5.35)个vs(165.28±12.86)个]、侵袭数[(31.57±3.46)个vs(125.26±11.56)个]及细胞中FOXD3-AS1基因表达(0.41±0.03 vs 1.01±0.03)均显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);而凋亡率升高[(29.83±2.58)%vs(2.89±0.21)%,],差异有统计学意义(P<0.05)。与第1转染组比较,第2转染组HGC-27细胞增殖水平(0.40±0.03 vs 0.67±0.06)、迁移数[(59.11±7.15)个vs(163.11±11.99)个]和侵袭数[(40.33±3.12)个vs(121.89±10.39)个]均显著降低(P<0.05),而凋亡率显著升高[(23.87±1.98)%vs(2.53±0.33)%],差异均有统计学意义(均P<0.05)。与第3转染组比较,第4转染组HGC-27细胞增殖水平(0.56±0.02 vs 0.34±0.02)、迁移数[(138.33±12.01)个vs(44.89±3.62)个]和侵袭数[(103.89±7.72)个vs 30.56±1.81)个]均显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05),而凋亡率显著降低[(9.96±0.73)%vs(29.39±2.36)%],差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论依托咪酯可抑制胃癌HGC-27细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导其凋亡,其作用机制与下调FOXD3-AS1表达有关。     

黄芩苷对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响北大核心CSCD

目的研究黄芩苷对乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡中的作用及其机制。方法将乳腺癌MCF-7细胞分为4组:空白组不给予任何处置;对照组给予200μmol·L^(-1)黄芩苷处理24 h;第1转染组和第2转染组分别转染inhibitor control和微小RNA-30a-5p(miR-30a-5p)inhibitor,并添加200μmol·L^(-1)黄芩苷处理24 h。用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-30a-5p的水平;用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖;用Transwell小室法检测细胞的侵袭;用流式细胞术检测细胞的凋亡率。结果空白组、对照组、第1转染组、第2转染组细胞miR-30a-5p水平分别为0.98±0.05,2.51±0.37,2.32±0.28,1.27±0.18;增殖抑制率分别为(3.46±0.79)%,(31.65±2.38)%,(34.82±3.14)%,(12.53±1.62)%;侵袭的细胞数目分别为(53.67±3.12),(23.14±2.02),(25.67±1.87),(41.15±3.73)个;凋亡率分别为(6.72±0.48)%,(13.79±1.63)%,(12.65±0.78)%,(8.36±0.52)%。对照组与空白组比较,第2转染组与第1转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论黄芩苷通过上调乳腺癌细胞中miR-30a-5p的表达,抑制细胞的增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡。     

红景天苷对过氧化氢诱导SHSY-5Y细胞氧化应激损伤的影响北大核心CSCD

目的探究红景天苷通过沉默信息调节因子2相关酶1(sirtuin 1,Sirt1)抑制过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的神经母细胞瘤细胞SHSY-5Y氧化应激损伤的机制。方法将对数生长期的人神经母细胞瘤细胞SHSY-5Y随机分为空白组、模型组和低、中、高剂量实验组。空白组给予生理盐水处理,模型组给予100μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)处理,低、中、高剂量实验组先分别用1,10,100μmol·L^(-1)红景天苷处理后,再用100μmol·L^(-1)过氧化氢处理。用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,以流式细胞术检测细胞凋亡率,以酶联免疫吸附(ELISA)法检测一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平,以实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)、免疫荧光技术及蛋白质印迹(Western blot)法检测Sirt1 mRNA和蛋白的表达水平。结果空白组、模型组和低、中、高剂量实验组的细胞活力分别为(100.00±5.99)%,(22.89±4.17)%,(30.75±6.01)%,(60.69±9.37)%,(80.81±4.38)%;凋亡率分别为(6.77±0.72)%,(68.53±11.07)%,(57.01±6.33)%,(46.41±8.54)%,(20.12±3.60)%;NOS水平分别为(0.41±0.08),(4.99±0.32),(4.24±0.24),(2.95±0.19),(2.33±0.25)ng·mL^(-1);SOD水平分别为(24.15±1.92),(10.65±0.78),(13.62±1.52),(17.01±1.63),(21.38±0.54)U·mg^(-1);MDA水平分别为(6.31±0.89),(15.40±1.03),(11.77±0.90),(9.95±1.01),(7.51±1.13)ng·mL^(-1);8-OHdG水平分别为(3.67±0.30),(10.99±1.04),(9.72±1.35),(6.89±0.33),(4.62±0.66)μmol·mg^(-1);模型组和空白组的上述指标比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);低、中、高剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论红景天苷对过氧化氢诱导SHSY-5Y细胞氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能与Sirt1蛋白激活相关。     

微小RNA-222-3p在儿童肺炎中的表达及其对LPS诱导的肺成纤维细胞凋亡和炎症因子表达的影响北大核心CSCD

目的探讨微小RNA-222-3p(miR-222-3p)在肺炎患儿血清中的表达水平,以及对脂多糖(LPS)诱导的肺成纤维细胞中凋亡和炎症因子水平的影响。方法选取87例儿童血清样本(50例肺炎患儿为肺炎组,37例健康儿童为健康对照组)作为实验标本,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测血清中miR-222-3p表达水平。将人胚肺成纤维细胞WI-38细胞株分为4组:对照组(无任何处理)、模型组(5μg·m L^(-1)LPS诱导12 h)、转染组-1(转染inhibitor NC后,5μg·m L^(-1)LPS诱导12 h后,)、转染组-1(转染miR-222-3p inhibitor后用5μg·m L^(-1)LPS诱导12 h)。用ELISA试剂盒检测各组WI-38细胞培养上清液白介素-1β(IL^(-1)β)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;用流式细胞术比较各组细胞的凋亡率。结果健康对照组与肺炎组血清中miR-222-3p的相对表达分别为1.10±0.36,1.51±0.52;对照组、模型组、转染组-1、和转染组-2细胞上清IL^(-1)β的水平为(10.08±1.33),(317.85±37.67),(304.87±37.07),(152.12±24.38)pg·m L^(-1);IL-6的水平为(19.78±2.17),(423.75±54.16),(429.05±48.03),(208.18±34.85)pg·m L^(-1);TNF-α的含量为(17.54±3.85),(602.13±42.13)(606.44±53.32),(349.30±25.73)pg·m L^(-1);凋亡率分别为(4.73±0.64)%,(9.75±1.27)%,(10.68±1.87)%,(7.18±0.79)%;模型组与对照组比较,转染组-1与对照组比较,转染组-2与转染组-1比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-222-3p在肺炎患儿血清中高表达,敲低miR-222-3p可降低LPS诱导的WI-38炎症因子水平,并抑制细胞凋亡。     

鸦胆子苦醇联合长波紫外线辐射对人恶性黑色素瘤A375细胞凋亡的影响研究北大核心CSCD

目的观察鸦胆子苦醇联合长波紫外线(UVA)辐射对人恶性黑色素瘤A375细胞凋亡的影响及机制。方法人恶性黑色素瘤A375细胞分为空白组、对照组和实验组。空白组细胞不做任何处理,对照组用75 k J·m^(-2)长波紫外线处理,实验组在75 k J·m^(-2)长波紫外线处理2 h后分别加入10,20,50,100,200nmol·L^(-1)的鸦胆子苦醇。检测各组细胞活性、细胞周期及凋亡率,检测人转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)通路及线粒体凋亡途径相关蛋白表达情况。结果对照组和实验组细胞活性均显著低于空白组,50,100,200 nmol·L^(-1)实验组细胞活性均显著低于对照组,且随鸦胆子苦醇作用浓度增大而逐渐降低(P<0.05或P<0.01)。对照组和10,20,50,100,200 nmol·L^(-1)实验组细胞凋亡率分别为(3.21±0.24)%,(3.45±0.26)%,(5.86±0.42)%,(12.62±1.12)%,(13.02±2.24)%,(16.15±2.78)%,均显著高于空白组的(0.89±0.12)%,20,50,100,200 nmol·L^(-1)实验组细胞凋亡率均明显高于对照组(均P<0.01)。对照组和实验组与空白组比较,人恶性黑色素瘤A375细胞G0/G1期细胞比例逐渐升高,G2/M和S期细胞比例逐渐降低(P<0.05或P<0.01)。空白组、对照组和50 nmol·L^(-1)实验组Nrf2蛋白相对表达量分别为1.69±0.23,1.23±0.24,1.03±0.15,谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)蛋白相对表达量分别为2.43±0.16,2.89±0.18,2.78±0.21,B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)蛋白相对表达量分别为0.59±0.14,1.05±0.21,1.59±0.24,胱天蛋白酶-3(caspase-3)蛋白相对表达量分别为2.63±0.15,2.71±0.26,2.63±0.28。与空白组比较,对照组和实验组人恶性黑色素瘤A375细胞Nrf2蛋白表达相对量降低,Bax和GSTP1蛋白表达相对量升高,caspase-3无明显变化。结论鸦胆子苦醇联合UVA辐射可抑制人恶性黑色素瘤A375细胞增殖,且存在一定的量效关系,与抑制Nrf2信号通路及激活线粒体凋亡途径相关蛋白,加速细胞凋亡有关。     

Apelin-13对高糖诱导的脐静脉内皮细胞凋亡的保护作用北大核心CSCD

目的探讨Apelin-13对高糖环境下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护机制是否与沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)相关。方法实验分组分为4部分。实验Ⅰ,将HUVECs分为6组,分别为空白组(5.5 mmol·L^(-1)糖)、模型组(33 mmol·L^(-1)高糖)、各实验组(分别用1×10^(-9),1×10^(-8),1×10^(-7)和1×10^(-6)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)。实验Ⅱ,将HUVECs分为4组,分别为空白组(5.5 mmol·L^(-1)糖)、模型组(33 mmol·L^(-1)高糖)、对照组(1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin)、实验组(用1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)糖)。实验Ⅲ,将HUVECs分为2组,分别为空载质粒组(1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)和APJ低表达组(1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)。以上3个实验均用Western blot法检测高糖环境下SIRT1蛋白的表达水平。实验Ⅳ,将HUVECs分为5组,分别为空白组(5.5 mmol·L^(-1))、模型组(33 mmol·L^(-1)高糖)、实验组(用1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)、抑制剂组(33 mmol·L^(-1)高糖+1×10^(-5)mol·L^(-1)EX527)、干预组(用1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖+1×10^(-5)mol·L^(-1)EX527)。用流式细胞术检测HUVECs的凋亡率。结果实验Ⅰ,空白组、模型组和1×10^(-9),1×10^(-8),1×10^(-7)和1×10^(-6)mol·L^(-1)Apelin实验组的SIRT1蛋白相对表达量分别为0.51±0.06,0.30±0.05,1.02±0.07,1.12±0.10,1.14±0.10和1.05±0.10,模型组的SIRT1蛋白相对表达量与4个实验组和空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验Ⅱ,空白组、模型组、对照组和实验组的SIRT1蛋白相对表达量分别为0.82±0.09,0.59±0.05,0.77±0.05和0.72±0.06;模型组的SIRT1蛋白相对表达量与实验组和空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验Ⅲ,空载质粒组和APJ低表达组的SIRT1蛋白表达水平分别为0.94±0.13和0.71±0.17,差异有统计学意义(P<0.05)。实验Ⅳ,空白组、模型组、实验组、抑制剂组和干预组的细胞凋亡率分别为(13.60±0.92)%,(24.63±1.25)%,(12.73±1.00)%,(25.68±1.42)%和(10.25±2.30)%。模型组的细胞凋亡率与空白组和实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);抑制剂组的细胞凋亡率与干预组相比,差异有统计学意义(P<0.05);干预组的细胞凋亡率与实验组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论Apelin-13减轻高糖诱导的脐静脉内皮细胞凋亡的机制与SIRT1信号通路无关。     

MicroRNA-136在妊娠糖尿病患者血清中的表达及其对高糖诱导的滋养层细胞增殖和侵袭的影响北大核心CSCD

目的研究微小RNA-136(miR-136)在妊娠糖尿病患者血清中的表达,及其对高糖诱导的滋养层HTR8-S/Vneo细胞损伤的保护作用。方法选择在本院进行产检和住院分娩的妊娠糖尿病患者45例(妊娠糖尿病组),并选择同期在本院产检和分娩的健康产妇45例作为对照组,用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组血清中miR-136的表达。将HTR8-S/Vneo细胞分为正常组(5 mmol·L^(-1)葡萄糖处理)、高糖组(25 mmol·L^(-1)葡萄糖处理)、第1转染组(给予高糖处理,并转染抑制剂阴性对照)和第2转染组(给予高糖处理,并转染miR-136抑制剂)。用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞的增殖;用划痕实验检测细胞的迁移;用Transwell小室法评估细胞的侵袭能力。结果对照组和妊娠糖尿病组产妇血清中miR-136的相对表达水平分别为1.09±0.56,2.31±0.74,妊娠糖尿病组血清中miR-136的表达水平显著高于对照组(P<0.05)。正常组、高糖组、第1转染组、第2转染组细胞的存活率为(100.00±0.00)%,(71.26±3.08)%,(69.34±2.75)%,(92.53±4.13)%;迁移率为(76.32±4.87)%,(46.81±2.49)%,(51.59±4.32)%,(67.94±3.18)%;细胞的侵袭数分别为(58.00±3.61),(31.33±2.52),(29.33±2.08)和(52.00±3.60)个。高糖组与正常组比较,第2转染组与第1转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-136在妊娠糖尿病患者血清中高表达,下调miR-136可促进高糖诱导的HTR8-S/Vneo细胞增殖、迁移和侵袭。     

防己诺林碱对宫颈癌HeLa细胞的作用及其机制研究北大核心CSCD

目的探索防己诺林碱(FAN)对宫颈癌He La细胞的作用及分子机制。方法人宫颈癌He La细胞随机分为空白组(0μmol·L^(-1)FAN)和低、高剂量实验组(7.5,15μmol·L^(-1)FAN)。通过CCK-8法、细胞划痕和Transwell检测FAN对宫颈癌He La细胞增殖、迁移和侵袭的影响,采用流式细胞术检测FAN对细胞周期和凋亡的作用。用Western Blot法检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1),P27,P53,B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl2),细胞外调节蛋白激酶(ERK)和磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)的表达。结果FAN对宫颈癌He La细胞有明显抑制作用,呈现浓度和时间依赖关系(P<0.05)。给药48 h后,空白组、低、高剂量实验组划痕愈合率分别为(48.10±5.19)%,(22.68±3.36)%,(12.31±2.79)%;侵袭细胞数量分别为(248.60±33.34),(186.60±24.58),(53.00±13.04)个。给药24 h后,空白组、低、高剂量实验组G0/G1期细胞比例分别为(68.67±2.32)%,(77.43±3.51)%,(85.90±1.31)%;细胞凋亡率分别为(4.07±0.40)%,(5.48±1.36)%,(10.25±1.88)%;Cyclin D1蛋白相对表达量分别为0.75±0.07,0.45±0.07,0.20±0.03;P27蛋白相对表达量分别为0.01±0.00,0.17±0.02,0.55±0.04;P53蛋白相对表达量分别为0.08±0.01,0.12±0.03,0.34±0.08;Bcl-2蛋白相对表达量分别为0.40±0.03,0.17±0.02,0.06±0.01;p-ERK蛋白相对表达量分别为0.61±0.03,0.34±0.03,0.15±0.04;低、高剂量实验组的上述指标与空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论FAN能抑制宫颈癌He La细胞的增殖、迁移及侵袭能力,同时阻滞细胞周期并促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制ERK信号通路有关。     

羟基红花黄色素A舒张大鼠大脑中动脉作用机制的研究北大核心CSCD

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对离体大鼠大脑中动脉(MCA)的肌原性作用及其作用机制。方法从大鼠脑组织中分离得到MCA血管环,并分离其血管平滑肌细胞。将同一根血管的不同节段随机分为5组:对照组(生理盐水)、HSYA-1组、HSYA-2组、HSYA-3组和HSYA-4组(HSYA浓度分别对应3,10,30,100μmol·L^(-1));将同一根血管的不同节段随机分为2组:内皮完整组和去内皮组;用同一根血管自身前后对照,分为2组:HSYA组和G?6983+HSYA组,上述实验均用微血管张力法检测大鼠MCA血管环的舒张功能。将同一只大鼠MCA平滑肌细胞分为4组:对照组(生理盐水)、HSYA-1组、HSYA-2组和HSYA组-3(HSYA浓度分别对应10,30,100μmol·L^(-1));将同一只大鼠MCA平滑肌细胞分为4组:对照组(生理盐水)、HSYA组、G?6983组和G?6983+HSYA组,上述实验均用全细胞膜片钳记录法检测MCA平滑肌细胞的Kv电流。结果对照组、HSYA-1组、HSYA-2组、HSYA-3组和HSYA-4组的舒张KCL预收缩的MCA百分比分别为(100.00±0.00)%,(98.32±1.39)%,(92.07±3.92)%,(59.40±5.07)%和(35.89±5.62)%,各组舒张U46619预收缩的MCA百分比分别为(100.00±0.00)%,(98.82±0.70)%,(92.57±5.06)%,(59.23±7.21)%和(40.22±6.67)%,HSYA-2组、HSYA-3组、HSYA-4组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);内皮完整组与去内皮组比较,各剂量组HSYA舒张预收缩大鼠MCA血管环的作用差异无统计学意义(均P>0.05);100μmol·L^(-1)HSYA组和G?6983+100μmol·L^(-1)HSYA组舒张KCL预收缩的MCA百分比分别为(34.93±4.91)%和(58.39±6.57)%,这2组舒张U46619预收缩的MCA百分比分别为(37.95±4.13)%和(53.59±6.00)%,上述指标,两组间比较差异均有统计学意义(均P<0.01);对照组、HSYA-1组、HSYA-2组和HSYA-3组MCA平滑肌细胞Kv电流最大电流密度分别为(41.24±4.34),(49.48±5.56),(67.94±5.61)和(78.84±3.79)pA/pF,各浓度HSYA组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);对照组、HSYA组、G?6983组和G?6983+HSYA组MCA平滑肌细胞Kv电流最大电流密度分别为(41.24±4.34),(67.09±4.52),(40.24±4.32)和(56.24±4.82)pA/pF,HSYA组与对照组比较,G?6983+HSYA组与HSYA组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论HSYA可舒张预收缩的大鼠MCA,该作用与血管内皮无关,与PKC/Kv通道有关。     

壁虎活性组分对HepG2细胞增殖及活性氧的影响北大核心CSCD

目的该研究旨在探讨壁虎活性组分(GACs)对人肝癌HepG2细胞内活性氧水平,钙离子水平及线粒体膜电位水平的影响。方法实验分为对照组(不加药)和低、中、高3个浓度实验组(GACs,0.1,0.2,0.3 mg·m L^(-1))。GACs作用于HepG2细胞24 h后,用噻唑蓝比色法(MTT法)检测GACs对HepG2细胞增殖能力的影响,用流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平、钙离子水平及线粒体膜电位(MMP)水平。结果 GACs可抑制HepG2细胞的增殖,并具有质量浓度依赖性,作用24 h后其IC_(50)值为0.21 mg·m L^(-1)。对照组、低、中、高剂量组细胞增殖抑制率分别为(0.07±0.01)%,(0.17±0.03)%,(0.49±0.12)%和(0.67±0.18)%;ROS含量分别为(16.61±1.12),(85.81±2.56),(268.91±2.34),(1741.5±5.64);钙离子水平分别为(9.67±0.98),(12.30±1.07),(94.80±2.75),(910.99±5.31);MMP分别为(27.02±1.8)×10^(-2),(23.78±1.2)×10^(-2),(18.27±1.5)×10^(-2),(16.49±2.1)×10^(-2),低、中、高剂量组各指标分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 GACs能抑制HepG2细胞增殖,可能通过引起HepG2细胞内ROS含量升高、钙离子水平升高、MMP降低,扰乱线粒体的正常功能,最终导致HepG2细胞的凋亡。     

寒冷刺激对大鼠的结肠功能障碍的影响北大核心CSCD

目的研究寒冷刺激对SD大鼠结肠功能的影响。方法按体重将SD大鼠随机分为对照组和实验组,每组40只。实验组大鼠每天灌胃0~4℃冷0.9%NaCl 20 mL·kg-1,连续60 d。对照组大鼠灌胃等量饮用水。于处理后第15,30,45,60天,测定各组大鼠6 h内排便量和排便时间;按照酶联免疫分析试剂盒测定血白蛋白(Alb)、尿素氮(BUN)、钠及钾、血清肌酸酐(Cr)浓度;同时,观察结肠大体形态和结肠黏膜、胃窦黏膜组织形态,显微镜下观察组织形态学改变。结果实验第60天,实验组与对照组的体重分别为(268.2±18.35),(319.2±10.17)g,这2组的24 h摄食量分别为(48.0±1.7),(85.1±2.6)mg·g-1,饮水量分别为(54.6±9.5),(84.6±2.7)μL·g-1,6 h排便量分别为(0.65±0.43),(3.06±0.62)g,首次排黑便时间为(615.5±56.48),(408.2±29.7)min,与对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.01)。实验第60天,实验组大鼠的血清Alb为(38.48±2.95)g·L^(-1),Cr为(36.46±2.07)mmol·L^(-1),BUN为(6.38±0.46)mmol·L^(-1),钠离子浓度为(142.04±4.43)mmol·L^(-1),钾离子浓度为(5.98±1.03)mmol·L^(-1),与对照组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。组织形态学显示,实验第60天,实验组大鼠胃黏膜出现不同程度的萎缩;黏膜层上皮细胞和杯状细胞出现不同程度缩小,少量炎性细胞浸润;粪便多成串珠样粘附于结肠,质硬、表面无光泽。结论寒冷刺激可导致SD大鼠结肠运动功能和分泌功能障碍,出现便秘症状。     

依托咪酯和丙泊酚对无抽搐电痉挛治疗癫痫发作持续时间的影响

目的:观察依托咪酯(Etomidate)和丙泊酚(Propofol)对无抽搐电痉挛治疗(modern electroeonvulsive therapy,MECT)中癫痫发作持续时间的影响.方法:将112例精神障碍随机分为依托咪酯组(n=43)、丙泊酚组(n=39)和对照组(n=30)3组.采用标准的电痉挛治疗(ECT)程序进行治疗,比较3组癫痫发作持续时间和治疗后主观不良反应发生率.结果:3组癫痫发作持续时间均不少于25s,丙泊酚组癫痫发作持续时间为(30±9)s,依托咪酯组为(35±8)s,二组比较差异有显著性意义(P＜0.05).依托咪酯组、丙泊酚组治疗后主观不良反应发生率分别为12.50%及13.47%,对照组为37.50%,2个治疗组与对照组比较差异有非常显著性意义(P＜0.01).结论:依托咪酯及丙泊酚均不会影响MECT治疗效果,但依托咪酯对癫痫发作持续时间的影响小于丙泊酚.     

甘草酸联合Notch1 siRNA对肺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响北大核心CSCD

目的研究甘草酸(GA)联合Notch1小干扰RNA(siRNA)对肺癌细胞(HCC827)增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法将HCC827细胞分为对照组(正常培养的细胞)、GA组(5.0 mmol·L^(-1) GA处理)、GA+si-NC组(5.0 mmol·L^(-1) GA处理转染si-NC的细胞)、GA+si-Notch1组(5.0 mmol·L^(-1) GA处理转染si-NC细胞)。用细胞计数(CCK-8)法、流式细胞术、Transwell实验检测各组细胞增殖、凋亡、迁移侵袭情况。结果对照组、GA组、GA+si-NC组、GA+si-Notch1组HCC827细胞活力(72 h)为1.00±0.12,0.70±0.09,0.63±0.04,0.46±0.06,迁移细胞数为136.00±8.88,60.00±8.96,66.00±6.08,34.00±3.21,侵袭细胞数为106.00±7.51,45.00±5.56,48.00±3.21,29.00±3.51,凋亡率分别为(6.31±0.83)%,(15.07±0.65)%,(14.87±0.47)%,(20.61±1.64)%,对照组与GA组比较、GA+si-NC组与GA+si-Notch1组比较,上述指标差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论甘草酸联合Notch1 siRNA1可抑制肺癌细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡。     

依托咪酯和丙泊酚对无抽搐电痉挛治疗癫痫发作持续时间的影响

目的:观察依托咪酯(Etomidate)和丙泊酚(Propofol)对无抽搐电痉挛治疗(modern electroeonvulsive therapy,MECT)中癫痫发作持续时间的影响.方法:将112例精神障碍随机分为依托咪酯组(n=43)、丙泊酚组(n=39)和对照组(n=30)3组.采用标准的电痉挛治疗(ECT)程序进行治疗,比较3组癫痫发作持续时间和治疗后主观不良反应发生率.结果:3组癫痫发作持续时间均不少于25s,丙泊酚组癫痫发作持续时间为(30±9)s,依托咪酯组为(35±8)s,二组比较差异有显著性意义(P＜0.05).依托咪酯组、丙泊酚组治疗后主观不良反应发生率分别为12.50%及13.47%,对照组为37.50%,2个治疗组与对照组比较差异有非常显著性意义(P＜0.01).结论:依托咪酯及丙泊酚均不会影响MECT治疗效果,但依托咪酯对癫痫发作持续时间的影响小于丙泊酚.     

γδTCR受体拮抗剂部分缓解C57BL/6小鼠抑郁症状的作用机制研究北大核心CSCD

目的研究γδT细胞在慢性应激诱发抑郁行为中的免疫炎性机制。方法按照随机数表法将C57BL/6小鼠分为4组,每组20只:正常组、对照组、模型组和实验组。后3组按照慢性温和不可预知性刺激程序建立抑郁行为小鼠模型,为期4周。同时对照组和实验组每天分别经腹腔注射氟西汀溶液10mg·kg^(-1)和γδTCR的单克隆抗体(UC7-13D5)250μg,正常组和模型组经腹腔注射等体积0.9%Na Cl。4周后,进行糖水偏好实验和强迫游泳实验,用Bioplex检测系统测定外周血和脑组织内的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果 4周后,正常组、对照组、模型组和实验组的糖水偏好百分比分别为(56.30±1.03)%,(56.37±1.20)%,(46.90±1.45)%,(54.65±1.88)%,模型组与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.01);实验组与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。这4组的血浆TNF-α浓度分别为(11.61±0.59),(11.99±1.19),(80.31±2.32),(12.14±0.84)pg·m L^(-1),模型组和正常组相比,差异有有统计学意义(P<0.01);对照组和实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。这4组的皮质TNF-α浓度为(64.66±0.49),(67.26±1.22),(120.79±0.99),(79.87±0.49)pg·m L^(-1)。模型组和正常组相比,差异有有统计学意义(P<0.01);对照组和实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论慢性应激可以通过炎性反应诱导抑郁行为的发生,UC7-13D5可以通过阻断γδT细胞分泌细胞因子部分缓解抑郁症状。     

银杏达莫联合乌司他丁治疗创伤性脑出血患者的临床研究北大核心CSCD

目的探究银杏达莫联合乌司他丁治疗创伤性脑出血疗效及对血清表皮生长因子样结构域(EGFL7)表达的影响。方法将116例创伤性脑出血患者,用随机数字法分为对照组和试验组,各58例。对照组将注射用乌司他丁4×10^(5) U溶于生理盐水100 mL,静脉滴注,每天2次,用药时间间隔≥6 h;试验组在对照组的基础上给予银杏达莫注射液5 mL溶于0.9%氯化钠溶液250 mL中,静脉滴注,每天1次。2组均治疗14 d。比较2组患者的EGFL7、血肿体积、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分、炎症反应指标及氧化应激反应指标,同时观察2组治疗期间药物不良反应发生情况。结果治疗后,试验组和对照组EGFL7水平分别为(1.05±0.20),(1.68±0.23)μg·mL^(-1),血肿量分别为(7.15±0.95),(9.94±1.67)mL,白细胞介素-8(IL-8)分别为(30.98±3.30),(41.41±4.17)μg·L^(-1),正五聚蛋白3(PTX-3)分别为(1.78±0.31),(2.74±0.39)ng·L^(-1),血管细胞黏附分子-1 (VCAM-1)分别为(28.99±3.90),(40.24±4.39)ng·L^(-1),核因子-κB(NF-κB)分别为(0.71±0.09),(0.97±0.16)U·L^(-1),丙二醛(MDA)分别为(3.39±0.43),(5.91±0.48)μmol·L^(-1),过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)分别为(1.65±0.35),(2.18±0.46)μg·L^(-1),活性氧(ROS)分别为(6.62±1.04),(9.11±1.37)U·L^(-1),缺血修饰清蛋白(IMA)分别为(68.45±5.74),(84.55±8.61)U·L^(-1),NIHSS分别为(6.59±1.43),(10.36±1.63)分,GCS评分分别为(14.76±2.59),(10.71±1.41)分,差异均有统计学意义(均P<0.05)。试验组和对照组的药物不良反应发生率分别为15.52%,13.79%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论银杏达莫联合乌司他丁能够有效减轻由创伤激发的全身炎症、氧化应激反应,促进脑血管内皮细胞增殖、迁移、黏附,且对创伤性脑出血患者血肿清除程度高,可进一步促进患者神经功能的恢复并减轻其昏迷程度。     

紫草素对非小细胞肺癌细胞增殖和迁移的影响北大核心CSCD

目的研究紫草素对非小细胞肺癌NCI-H358细胞增殖和迁移的抑制作用。方法将NCI-H358细胞随机分为对照组和低、中、高剂量实验组。对照组细胞给予常规培养,低、中、高剂量实验组分别以5,10,20μmol·L^(-1)紫草素处理24 h。以细胞计数(CCK-8)法检测NCI-H358细胞活力;以划痕愈合实验评估细胞的迁移能力;以蛋白质印迹法检测细胞中磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路相关蛋白表达水平。结果对照组和低、中、高剂量实验组细胞的存活率分别为(98.72±1.33)%,(90.68±3.52)%,(76.41±5.64)%,(52.85±3.76)%;迁移率分别为(98.54±2.85)%,(67.94±5.31)%,(42.46±2.23)%,(23.26±4.79)%;p-Akt的表达水平分别为0.42±0.05,0.28±0.03,0.16±0.04,0.17±0.02;p-PI3K的表达水平分别为0.26±0.03,0.15±0.03,0.14±0.02,0.11±0.02;p-mTOR的表达水平分别为0.69±0.08,0.51±0.05,0.33±0.05,0.25±0.04。低、中、高剂量实验组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论紫草素通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,抑制非小细胞肺癌NCI-H358细胞的增殖和迁移。