HIV-1衣壳蛋白抑制剂体外筛选方法研究进展

HIV-1的感染高度依赖其圆锥形的"富勒烯"型衣壳。衣壳由大约1 500个衣壳蛋白组装而成。近年来,衣壳蛋白已成为设计和筛选抗HIV-1药物的理想靶点。目前,文献已报道了多种基于不同原理的HIV-1衣壳蛋白抑制剂的筛选方法,该文将对这些体外筛选方法进行综述。     

人乳头瘤病毒及其病毒样颗粒的研究及应用

人乳头痛病毒( human papillomavirus,HPV)感染是导致尖锐湿疣、宫颈上皮瘤样病变和宫颈癌的主要原因.鉴于HPV的特殊扩增机制,目前尚不能通过体外培养的传统方法来获得病毒用于疫苗研究.HPV的主要衣壳蛋白L1在体外可自行组装成病毒样颗粒(virus-like particle,VLP),形成的VLP在实验动物和人体中均可诱生高滴度的保护性抗体,是理想的预防性疫苗组分.此文就HPV的流行病学、致病机制及其VLP的制备和应用作一综述.     

戊型肝炎病毒及其病毒样颗粒疫苗的研究进展

戊型肝炎(hepatitis E,HE)是全球最主要的病毒性肝炎之一,由戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)感染导致.因为HEV不能在体外细胞培养体系中有效生长,因此HE灭活或减毒活疫苗的研制不可行.目前HE疫苗研究主要集中在有免疫原性的重组病毒衣壳蛋白上.HEV的开放读码框架2编码的蛋白为病毒衣壳蛋白,可在体外自行组装成病毒样颗粒(virus-like particle,VLP).形成的VLP在动物和人体中均可诱导产生高滴度的保护性抗体,是理想的预防性疫苗组分.此文就HEV的流行病学、HEV VLP的形成机制和结构特征以及VLP疫苗的研究现状作一综述.     

HIV病毒组装信息

在位于伯明翰的阿拉巴马州立大学 ,由Pre velige领导的小组发现了一些有关介导病毒组装的相互作用的新信息。他们运用质谱法 (MS)探索了HIV 1的衣壳蛋白的组装。衣壳蛋白是具有明显治疗作用的靶点。关于病毒蛋白的结构在过去的几十年里已经获得了很多数据 ,然而大量的衣壳亚单位是如何形成病毒微粒的 ,目前仍不清楚 ,尤其是反转录病毒。关于这些相互作用的本质的新发现对于药物研究将具有重要意义 ,因为对于发展可以影响衣壳微粒之间的相互作用并可裂解病毒的抗病毒药物来说 ,最新的结构知识是一个重要的基础。这个小组是用高溶解度MS来…     

HIV-1Gag蛋白与胞膜结合的结构基础

逆转录病毒基因组编码的Gag蛋白含有病毒组装所需的多种病毒原件，在核糖体合成后，Gag蛋白直接到达胞膜或内含体膜的结合位点进行组装并发育成非成熟的病毒体，然后被病毒蛋白水解酶裂解成基质（MA）、农壳（CA）和核衣壳蛋白，从而组装成成熟的可感染的病毒颗粒。对于大多数逆转录病毒，病毒与细胞膜的结合依赖于转录后GagN端MA结构域的乙酰化，HW1型（HIV-1）和2型的MA是含有132个氨基酸的多肽残基，N端含有十四烷基，可以与保守片断相互作用，从而进行膜的选择和结合。     

治疗HIV-1感染的新型成熟抑制剂Bevirimat

现有的治疗HIV-1抗逆转录病毒的方法都因拮抗问题和药物间相互作用而受到限制。Bevirimat因其不同于其他抗逆转录病毒药物的作用机制而成为一种新型的HIV-1成熟抑制剂。Bevirimat可特异地抑制病毒结构蛋白合成过程中最后的限速反应,阻止成熟衣壳蛋白从底物中释放,产生未成熟、无感染力的病毒颗粒。在体外,bevirimat可抑制野生型及HIV-1抗性病毒株的复制,并获得对2病毒株的半数抑制浓度。     

抗HIV药物的体外筛选和研究方法

合适的体内外药物研究方法是研究和开发新药中最关键的环节之一，由于至今尚无理想的艾滋病（AIDS）动物模型，目前抗人免疫缺陷病毒（HIV）药物的筛选和研究仍然主要依赖于各种体外的筛选和研究方法。本文简要综述了抗HIV药物的体外筛选和研究方法。     

抗HIV药物的筛选评价方法

随着对艾滋病致病机制的深入研究，越来越多新的抗艾滋病病毒（HIV）药物进入临床试验，但大量抗HW药物的应用也导致了耐药性问题的出现。因此，建立高通量快速的抗HW药物筛选平台对研究新的抗HW药物非常重要。本文综述了目前抗HIV药物研究中常用的体外和体内筛选模型，重点阐述了体外以病毒复制特异性功能活动或特定结构作为靶点的筛选系统及其评价方法。     

桑白皮抗病毒有效成分的提取分离及体外抗病毒活性研究

目的研究桑白皮中化学成分的抗病毒作用。方法利用细胞病变方法进行体外抗病毒筛选试验。结果桑白皮中分离得到的化合物1和化合物3在体外有较好的抑制副流感病毒、流感病毒的致病作用;化合物1具有抗呼吸道合胞病毒作用,延缓腺病毒Ⅲ、HSV Ⅰ致病作用;化合物2和化合物5也有部分抗病毒作用;化合物4能抑制腺病毒Ⅲ、柯萨奇病毒B3 、HSV Ⅰ、副流感病毒的致细胞病变作用。结论桑白皮提取物对呼吸道常见病毒有抑制作用。     

SOD酶生物传感器筛选清除超氧阴离子自由基的活性物

目的制备超氧化物歧化酶传感器，建立清除氧自由基药物的体外筛选方法。方法将固定化铜锌超氧化物歧化酶与光纤氧传感器通过特定装置组装为酶传感器。以邻苯三酚的自氧化作为超氧阴离子的发生源，预置的固定化酶响应为内标，以已知有氧自由基清除作用的Vit C为阳性对照，验证测定方法；通过对比加入样品前后邻苯三酚自氧化速度的变化情况考察样品清除超氧阴离子自由基能力。结果酶传感器检测限为7.0 U，使用寿命大于2周。以本传感器对15种样品进行了体外清除氧自由基活性实验，分别验证和发现了部分样品的清除活性。结论所研制的传感器信号稳定性较好，测定方法简便、快速，能直观地获得氧自由基清除的动力学信息，可用于大量药物的体外初筛实验。     

具有抗病毒作用的中草药应用研究

无论是去年SARS病毒的流行还是今年禽流感病毒的传播，现代社会文明人深感病毒及其变异品种对人类和社会的危害。对付这种原始的或与人类起源以来就与之共生存的微生物，化学药物却略显无能为力。但传统药物学所提供的线索，例如，利用鸡胚培养、组织培养等体外方法，已经筛选出一批对流感病毒有效的中草药。如：大青叶、板蓝根、金银花、连     

鼻病毒抑制剂的研究进展

20世纪80年代后期鼻病毒学研究取得了重大进展，病毒生命周期中的几个重要事件都基本清晰，并由此产生了许多抗鼻病毒药物作用的分子靶标。鼻病毒蛋白1（VP1）是一种相对保守的衣壳蛋白，它介导病毒的吸附／脱壳过程，是抗鼻病毒药物设计的理想靶标。近年来，针对VP1的抗鼻病毒药物研究非常活跃，新的抑制剂不断出现，分别处于活性测试、Ⅰ～Ⅳ期临床试验阶段。本文综述了作用于VP1的抗鼻病毒药物的研究进展。     

安心康滴丸体外抗柯萨奇病毒的实验

目的 评价安心康滴丸的体外抗柯萨奇病毒（CVB3）活性。方法 在大鼠心肌细胞上进行抗病毒实验，观察安心康滴丸对细胞病变的影响、对病毒繁殖抑制作用和对肌钙蛋白含量的影响。结果 安心康滴丸能有效的修复病变细胞，抑制病毒繁殖和降低肌钙蛋白含量。结论 安心康滴丸在体外具有显著的抗柯萨奇病毒作用。     

45例小儿传染性单核细胞增多症EB病毒抗体的检测及临床分析

目的探讨小儿传染性单核细胞增多症抗-EBV检出情况及临床分析。方法采用酶联免疫吸附法体外测定人血清或血浆中抗EB病毒衣壳抗原（EBV-CA）IgM抗体。采用血凝集试验法检测嗜异性抗体。结果 45例患儿血清中抗EBVIgM阳性率82.2%;嗜异性抗体阳性率73.3%。结论 EBV特异性抗体阳性示传染性单核细胞增多症的重要诊断标准之一。     

心可舒汤体外抗柯萨奇病毒实验研究

目的评价心可舒汤的体外抗柯萨奇病毒活性。方法在大鼠心肌细胞上进行抗病毒实验，观察用药后心可舒汤对细胞病变的影响、对病毒繁殖抑制作用的影响。结果心可舒汤能有效的修复细胞病变，抑制病毒繁殖。结论心可舒汤在体外具有显著的抗柯萨奇病毒作用。     

HPV16的新型伪病毒对DNA特异性B细胞的靶向实验研究

目的:构建人乳头状病毒(human papilloma virus,HPV)16型的新型伪病毒,并检测其对DNA特异性B细胞(R4A)的靶向性。方法:利用昆虫杆状病毒表达系统表达病毒蛋白,在体外变性与复性过程中将病毒蛋白包装绿色荧蛋白EGFP表达型质粒,形成伪病毒。透射电镜观察病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)的结构,并转染R4A细胞,荧光显微镜和流式细胞仪检测其转染效率。结果:透射电镜观察证实病毒蛋白可自我组装成VLP,在转染R4A细胞后,荧光显微镜和流式细胞仪成功检测到荧光的表达。结论:HPV16的新型伪病毒能成功转染R4A细胞,为系统性红斑狼疮(SLE)的靶向治疗提供了理想的策略。     

用红细胞膜吸附兔瘟病毒对病毒形态结构的电镜观察和研究

用纯化的人O型红细胞膜吸咐兔瘟病毒后,分别用超薄切片和负染对兔瘟病毒的结构和形态进行观察和研究。在超薄切片上兔瘟病毒的直径为27～32nm,病毒呈六角形或卵圆形,电子致密的髓蕊直径为14～17nm。病毒衣壳由2层结构组成,即壁厚约为2nm的六角形内壳层和由许多纤维状突起组成的外壳层,从负染样品可见兔瘟病毒呈球形,并通过病毒衣壳的外层亚基与红细胞膜表面相连,因此血凝因子存在于兔瘟病毒外层衣壳亚基的顶端。     

小核糖核酸病毒抑制剂研究及WIN系列抗病毒化合物的发展(英文)

小核糖核酸病毒科是人类病毒性病原体中最大的家族之一。它可以导致一系列不同程度的临床症状, 从轻微的发热、普通感冒到严重的瘫痪型脊髓灰质炎、慢性阻塞性肺病等, 其中有一些极具致命性。小核糖核酸病毒还会引起动物性大流行, 给人类社会带来巨大的经济损失。虽然到目前为止, 还没有正式批准的能够有效预防或治疗小核糖核酸病毒感染的药物上市, 但是大量具有很好的抗小核糖核酸病毒活性的化合物已经被研发出来。通过对这些物质的研究, 也揭示出许多有关小核糖核酸病毒的信息。病毒信使RNA的翻译过程, 复制过程和病毒衣壳蛋白集中了这些被广泛研究的抗病毒物质的主要靶点。其中一类通过键合病毒衣壳, 抑制病毒吸附和脱壳的WIN系列化合物最为典型。因此本文将介绍抗小核糖核酸病毒化合物研究的总体概况并对WIN系列化合物的具体演进过程进行讨论。     

乙型肝炎病毒核衣壳蛋白装配抑制剂--甲磺酸莫非赛定

乙型肝炎病毒(HBV)是引起乙型肝炎的病原体,属嗜肝DNA病毒科,具有较强的传染性、突发性等特点,在临床上表现多样化,易发展为慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化并可转变为原发性肝癌,是一类严重影响我国民众健康的重大疾病,现有的治疗药物在使用中有明显的局限性。甲磺酸莫非赛定(GLS4JHS)是由我国广东东阳光药业自主研发的一款二氢嘧啶类药物,按作用机制属于靶向HBV核衣壳蛋白装配抑制剂,可呈剂量依赖性减少病毒衣壳的正确组装,加速异常衣壳形成,从而强烈抑制HBV的复制和成熟病毒颗粒的产生。目前,已进入Ⅱ/Ⅲ期临床试验,现已公布的试验数据表明,甲磺酸莫非赛定对HBV DNA抑制作用十分明显,且安全性较好。本文就甲磺酸莫非赛定的基本信息、作用机制、药物代谢动力学及临床研究等作一概述。     

柯萨奇-腺病毒受体在恶性肿瘤细胞中的表达研究

柯萨奇-腺病毒受体(CAR)是柯萨奇B组病毒(CBV)和腺病毒(Ad)与靶细胞结合的共同体.柯萨奇病毒是无衣壳的核糖核酸(RNA)病毒,属于微小的RNA病毒家族,有A、B、C、D、E、F六种血清型.腺病毒为无衣壳的DNA病毒,这是两种在种系发育过程中不相干的病毒,却有一个共同的受体--CAR.CAR是一种跨膜糖蛋白,属于免疫球蛋白超家族成员之一.由于其在生物学领域的特殊作用,近年来已经成为肿瘤学领域中的热点问题.