新生乳鼠肠道铁过载模型的建立

目的 通过灌喂硫酸亚铁·七水化合物(FeSO₄·7H₂O)建立新生乳鼠肠道铁过载模型,并探讨适宜的建模铁浓度。方法 将30只新生的乳鼠随机分为对照组、A组、B组、C组、D组(每组6只),于乳鼠出生后第2～7天分别给予灌喂0 mg/kg、10 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg、300 mg/kg的FeSO₄·7H₂O溶液,记录干预期间乳鼠的体重变化。于出生后第8天处死各组乳鼠,取回肠组织,进行HE染色、普鲁士蓝染色观察各组乳鼠回肠组织的病理变化及铁沉积情况,检测各组乳鼠回肠组织的总铁含量及铁蛋白重链1(FTH1)蛋白表达水平。结果 (1)各组乳鼠的体重均呈增长的趋势(均P<0.05);出生后第3天,B组和D组乳鼠体重低于对照组,且D组乳鼠体重低于A组和C组(均P<0.05);出生后第7天,D组乳鼠的体重仍低于对照组、A组、C组(均P<0.05),而A组、B组和C组的乳鼠体重与对照组乳鼠体重比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。(2)与对照组相比,各模型组乳鼠...     

轮状病毒肠道外感染乳鼠模型的建立

目的:建立轮状病毒(rotavirus,RV)肠道外感染乳鼠模型。方法:实验动物选用10~11日龄的清洁级ICR乳鼠,将32只乳鼠随机分为2组,每组16只,即RV肠道外感染组:乳鼠经腹腔注射150μl猴RVSAl1(病毒滴度TCID₅₀为10-4);对照组:乳鼠经腹腔注射150μl生理盐水。接种后每天观察乳鼠的活动状况、饮食情况、毛色、体型、大便变化等,4天后处死,留取心、肝、肾、脾、肠进行病理学切片和匀浆培养。结果:感染组在接种RV后第2天开始出现食欲不振,体毛蓬松、无光泽,活动减少,呆滞、嗜睡,对刺激反应淡漠,大便量少,上述症状逐渐加重,到第4天症状最明显,并有3只乳鼠出现腹泻,观察中累积腹泻率和发病率分别为18.75%和100.00%。光镜下肝、肾、脾、小肠有病理改变,且肝、肾、小肠组织匀浆培养72 h后出现不同程度细胞病变,余阴性。对照组乳鼠无明显变化。结论:该方法初步建立了RV肠道外感染乳鼠模型。     

布拉酵母菌对轮状病毒肠炎患儿肠道菌群及免疫功能影响的前瞻性研究

目的：探讨布拉酵母菌治疗轮状病毒肠炎对患儿肠道菌群、炎性因子水平及免疫功能的影响。方法：选取2020年3月～2021年11月62例轮状病毒肠炎患儿作为研究对象，随机分为对照组31例和观察组31例，在常规治疗基础上对照组接受蒙脱石散治疗，观察组接受布拉酵母菌联合对照组治疗，两组均治疗至出院。比较两组治疗后临床效果、临床症状消退及住院时间、治疗前后肠道菌群变化、炎性因子水平及免疫功能。结果：对照组治疗总有效率64.52%低于观察组的87.10%,观察组患者退热、腹泻消失、呕吐停止时间少于对照组，住院时间短于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后，两组乳酸杆菌、双歧杆菌、类杆菌数量比治疗前明显增加且观察组增加幅度高于对照组，两组患者大肠埃希菌、肠球菌数量比治疗前明显减少且观察组降低幅度大于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。两组患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、外周血CD8⁺水平与治疗前比均降低且与对照组比降低幅度更高，两组患者外周血CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺水平与...     

芡茎多糖通过诱导CD4+T、CD8+T和NK细胞的浸润促进小鼠肺癌LLC细胞凋亡

目的 探究芡茎多糖(EFPP)对肺癌LLC细胞异位移植瘤模型的影响。方法 40只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组,分别为空白对照组(Control)、芡茎多糖低、高剂量组(100、200 mg·kg^-1)、5-氟脲嘧啶组(5-Fu 20 mg·kg^-1),每组10只;建立异位移植瘤模型后,空白对照组灌胃PBS,每日1次,给药组灌胃芡茎多糖,每日1次,阳性药3 d注射1次,总共给药15 d,最后1次给药第2天处死全部小鼠。取各组肿瘤样品,称量体积与瘤质量;采用苏木精-伊红(HE)染色、流式细胞术、TUNEL凋亡染色以及Western blot法对芡茎多糖进行药效学检测。结果 与空白对照相比,芡茎多糖可以抑制LLC细胞的体内增殖,增加CD3⁺CD4⁺T、CD3⁺CD8⁺T和CD3^-NK1.1⁺细胞水平。同时,芡茎多糖上调活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase3)、B细胞白血病-淋巴瘤-2相关...     

七味白术散对人轮状病毒感染乳鼠胸腺细胞的程序性死亡和IL-2、IL-2R表达的影响

观察七味白术散对人轮状病毒（HRV）感染乳鼠胸腺细胞的程序性死亡和IL－2、IL－2R表达的影响。NIH乳鼠经口感染HRV建立感染模型,采用DNA凝胶电泳、细胞形态学、ELISA方法观察处理对HRV感染乳鼠胸腺细胞凋亡以及IL－2、IL－2R表达的影响。七味白术散100g/L可明显抑制乳鼠胸腺细胞,药物干预10h未出现明显的细胞凋亡梯带,处理各组胸腺细胞24h均可见典型凋亡形态和DNA梯状带,而新鲜的胸腺细胞则无。七味白术散治疗组乳鼠血清中IL－2、IL－2R表达上调。七味白术散能延缓HRV感染乳鼠胸腺细胞凋亡,促进IL－2、IL－2R的表达,显示出七味白术散一种新的免疫调节效应。     

CXC趋化因子配体10对肝细胞癌SMMC-7721细胞增殖和迁移的影响及其机制

目的：探讨外源性CXC趋化因子配体10 (CXCL10)对肝细胞癌(HCC) SMMC-7721细胞增殖和迁移的影响,并阐明其作用机制。方法：按照CXCL10作用浓度,将人HCC SMMC-7721细胞分为0 mg·L^-1 CXCL10组、10 mg·L^-1 CXCL10组和30 mg·L^-1 CXCL10组。上述部分细胞给予细胞外调节蛋白激酶(ERK)抑制剂PD98059 (80μmol·L^-1)后,将SMMC-7721细胞分为0 mg·L^-1CXCL10+PD98059组、 10mg·L^-1 CXCL10+PD98059组和30mg·L^-1 CXCL10+PD98059组。CCK-8法检测各组SMMC-7721细胞增殖率,EdU法检测各组SMMC-7721细胞中EdU阳性表达率,Transwell小室实验检测各组SMMC-7721细胞迁移率,Western blotting法检测各组SMMC-7721细胞中ERK、磷酸化ERK (...     

乳凝集素抗独特型抗体Ab2β在人轮状病毒腹泻乳鼠模型治疗中的作用

目的 探讨乳凝集素抗独特型抗体Ab2β在新生乳鼠感染人轮状病毒（human rotavirus, HRV）的预防与治疗中的作用，并分析其作用机制。方法 采用杂交瘤技术制备乳凝集素抗独特型抗体；选取120只7日龄昆明小鼠乳鼠作为研究对象，采用随机数字表法将其分为A、B、C组以及对照组，每组30只，A、B、C三组均采用灌胃病毒方式造模，其中A组造模后不进行任何处理，B组在造模前连续7 d喂服乳凝集素，C组在造模后连续7 d喂服乳凝集素，对照组灌胃不含病毒的细胞培养液。观察各组乳鼠感染病毒后不同时间点的临床表现（腹泻、体重）并采用酶联免疫分析法（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）检测乳鼠粪便中轮状病毒抗原含量；HRV感染7 d后，采用免疫组化法检测各组乳鼠小肠组织细胞间粘附分子1(intercellular adhesion molecule-1, ICAM-1)的表达水平。结果 对照组新生乳鼠各时间点均未非发生腹泻，A、B、C 3组乳鼠在HRV攻击1 d后出现腹泻症状，B、C组腹泻程度在HRV攻击后2～4 d低于A组，差异有统计学意义（P&l...     

姜酮通过激活Nrf2/HO-1信号通路减轻OGD/R后氧化应激损伤对HT22细胞凋亡的抑制作用

目的：探讨姜酮对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)后小鼠海马神经元HT22细胞的保护作用,阐明其相关作用机制。方法：培养HT22细胞,设置不同OGD/R时间梯度,建立OGD/R细胞损伤模型。HT22细胞分为对照组、OGD/R组、OGD/R+1μmol·L^-1姜酮组、OGD/R+10μmol·L^-1姜酮、OGD/R+100μmol·L^-1姜酮组和OGD/R+0.2%二甲亚枫(DMSO)组,CCK-8法检测各组细胞活性并计算各组细胞存活率,确定姜酮最适药物浓度。细胞分为对照组、OGD/R组、OGD/R+姜酮组和OGD/R+姜酮+核因子E2相关因子2 (Nrf2)抑制剂(ML385)组,OGD/R+姜酮组细胞经姜酮给药处理4 h后予以OGD 8 h和复糖复氧8 h处理,OGD/R+姜酮+ML385组细胞在姜酮给药前予以10μmol·L^-1 ML385预处理6 h, CCK-8法检测各组细胞活性,Western blotting法检测各组细胞中Nrf2、血红素加氧酶1 (HO-1)、B细胞淋巴瘤2 (Bcl-...     

Sirtuins蛋白在双酚A诱导的雄性生殖系统损伤模型小鼠睾丸组织和GC-2细胞中的表达及其意义

目的：探讨Sirtuins (Sirt)蛋白家族在双酚A (BPA)诱导的雄性生殖系统损伤细胞和动物模型中的作用,阐明其对BPA诱导的雄性生殖系统损伤的影响。方法：40只昆明种小鼠随机分为对照组、低剂量BPA组(给予3 mg·kg^-1·d^-1 BPA)、中剂量BPA组(给予30 mg·kg^-1·d^-1 BPA)和高剂量BPA组(给予300 mg·kg^-1·d^-1 BPA),每组10只。低、中和高剂量BPA组小鼠采用玉米油(0.01 mL·g^-1)配成相应浓度BPA灌胃,对照组小鼠给予0.01 mL·g^-1玉米油。5周后,检测各组小鼠体质量、睾丸指数和附睾指数,计算机辅助精液分析(CASA)系统检测各组小鼠精子质量,HE染色观察各组小鼠睾丸组织形态表现,Western blotting法检测各组小鼠睾丸组织中Sirt1～Sirt7蛋白表达水平。小鼠GC-2细胞分为0、20、40和80μmol·L^-1     

含金属硫蛋白蛋奶粉对H-22小鼠肝癌的预防作用

目的：观察含金属硫蛋白（MT）蛋奶粉对BALB/c小鼠H-22肝癌的预防作用。方法：雌性BALB/c纯系小鼠70只随机分为正常对照组(10只)、荷瘤鼠对照组(20只)、含MT蛋奶粉预防肿瘤低剂量及高剂量组(各20只)。将MT低和高剂量蛋奶粉给小鼠灌胃2周后,皮下接种H-22细胞,建立小鼠移植肿瘤模型,观察MT蛋奶粉对肿瘤出现时间及肿瘤大小和生长的影响;观察1个月后处死小鼠,MTT法检测脾脏淋巴细胞转化功能,流式细胞术检测脾脏CD4⁺、CD8⁺和CD25⁺ T细胞百分率以及细胞周期进程和凋亡的变化,³H-TdR掺入法检测CTL和NK细胞杀伤活性。结果：与荷瘤对照组相比,含MT蛋奶粉组小鼠其肿瘤生长速率显著降低（P<0.05）,淋巴细胞增殖率显著增加 （P<0.01）,脾脏CD4⁺和CD8⁺ T细胞百分率及CD4⁺/CD8⁺比值显著升高（P<0.05或P<0.01）, CD25⁺ T细胞百分率和淋巴细胞凋亡百分率均显著降低（P<0.05或P<0.01）, NK细胞毒性显著提高 （P<0.05或P<0.01）,CTL细胞毒性亦显著增高（P<0.01）。结论：含MT蛋奶粉可明显增强荷瘤小鼠的免疫功能,对小鼠移植性肿瘤的生长起到一定程度的抑制作用。     

北五味子多糖对人膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的 探讨北五味子多糖（SCP）对体外培养人膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响,并阐明其可能的作用机制。 方法 体外培养人膀胱癌T24细胞,分为对照组和50、100及200 mg·L^－1 SCP组。不同剂量SCP干预24~48 h后,采用MTT法检测各组T24细胞增殖抑制率,Hoechst 33258荧光染色法检测各组T24细胞凋亡情况,Annexin Ⅴ-FITC/碘化丙啶（PI）双染法检测各组T24细胞凋亡率,流式细胞术检测各组T24细胞不同细胞周期细胞百分率和细胞凋亡率,Western blotting法检测各组T24细胞中磷酸酶和张力蛋白同源物（PTEN）、磷酸化磷脂酰肌醇-3激酶（p-PI3K）、蛋白激酶B（Akt）和磷酸化Akt（p-Akt）蛋白表达水平。 结果 与对照组比较,50、100和200 mg·L^－1 SCP组T24细胞增殖抑制率明显升高（P<0.05或P<0.01）;T24细胞凋亡率明显升高（P<0.05或P<0.01）;50、100和200 mg·L^－1 SCP组 T24细胞G₀/G₁期细胞百分率明显升高（P<0.05或P<0.01）,100和200 mg·L^－1 SCP组T24细胞S期和G₂/M期细胞百分率明显降低（P<0.01）;50、100和200 mg·L^－1 SCP组T24细胞中PTEN蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）,p-PI3K蛋白表达水平和p-Akt/Akt比值明显降低（P<0.05或P<0.01）。 结论 SCP 能够抑制T24细胞增殖,促进其凋亡,其机制可能与调控PTEN和PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达有关。     

发酵红参总皂苷对高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞间充质转化的抑制作用及其机制

目的 探讨发酵红参总皂苷（FRGTS）对高糖诱导下肾小管上皮细胞发生上皮细胞-间充质转化（EMT）的抑制作用,并阐明其作用机制。 方法 将大鼠肾小管上皮NRK-52E细胞分为正常对照组（5.5 mmol·L^－1 D-葡萄糖）、高糖组（30.0 mmol·L^－1 D-葡萄糖）、沉默信息调节因子1（SIRT1）抑制剂EX527组（30.0 mmol·L^－1 D-葡萄糖＋10.0 μmol·L^－1.EX527）、FRGTS组（30.0 mmol·L^－1 D-葡萄糖＋25 mg·L^－1FRGTS）和EX527+FRGTS组（30.0 mmol·L^－1 D-葡萄糖＋10 μmol·L^－1 EX527＋25 mg·L^－1FRGTS）。采用免疫荧光法检测各组细胞中E-钙黏蛋白（E-cadherin）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）蛋白表达水平,实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组细胞中E-cadherin、α-SMA和SIRT1 mRNA表达水平,ELISA法检测培养上清液中Ⅰ型胶原（ColⅠ）水平,Western blotting 法检测各组细胞中SIRT1、转化生长因子β1（TGF-β1）和Smad3 蛋白表达水平。 结果 高糖培养48 h后,与正常对照组比较,高糖组NRK-52E细胞中E-cadherin 蛋白表达水平和mRNA表达水平降低（P<0.01）,α-SMA 蛋白表达水平和mRNA表达水平升高（P<0.01）,NRK-52E细胞上清液中ColⅠ水平升高（P<0.01）,SIRT1 mRNA和蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）,TGF-β1和Smad3蛋白表达水平升高（P<0.01）;与高糖组比较,FRGTS组NRK-52E细胞中E-cadherin mRNA表达水平升高（P<0.01）,α-SMA mRNA表达水平降低（P<0.05）,NRK-52E细胞上清液中ColⅠ水平降低（P<0.05）,SIRT1 mRNA和蛋白表达水平均升高（P<0.05或P<0.01）,TGF-β1和Smad3蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01）;与FRGTS组比较,EX527+FRGTS组NRK-52E细胞中E-cadherin mRNA表达水平明显降低（P<0.01）,α-SMA mRNA表达水平明显升高（P<0.05）,NRK-52E细胞上清液中ColⅠ水平升高（P<0.05）,SIRT1 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,TGF-β1和Smad3蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。 结论 FRGTS可通过上调SIRT1表达,进而抑制TGF-β1/Smad信号通路,有效抑制肾小管上皮细胞发生EMT。     

中药靛玉红衍生物E804对肺癌A549细胞增殖、凋亡和分化的影响及其作用机制

目的 探讨不同浓度靛玉红衍生物E804对非小细胞肺癌（ NSCLC）A549细胞增殖、凋亡和分化的影响,阐明其可能的作用机制。 方法 体外培养A549细胞,分为对照组（0 μmol·L^－1 E804）和不同浓度（2.5、5.0和10.0 μmol·L^－1）E804组。采用MTT法检测各组细胞增殖率,细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力,软琼脂克隆实验观察各组细胞分化及克隆形成能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白和Janus 激酶1（JAK1）/信号转导与转录激因活子3（STAT3）信号通路相关蛋白表达水平。 结果 MTT法,与对照组比较,2.5、5.0和10.0 μmol·L^－1 E804组细胞增殖率明显降低（P<0.05或P<0.01）,并呈时间和浓度依赖性。细胞划痕和软琼脂克隆法,与对照组比较,2.5、5.0和10.0 μmol·L^－1 E804组细胞迁移距离和克隆形成数减少（P<0.05或P<0.01）。流式细胞术检测,与对照组比较,2.5、5.0和10.0 μmol·L^－1 E804组细胞凋亡率明显升高（P<0.05或P<0.01）。Western blotting法检测,与对照组比较,2.5、5.0和10.0 μmol·L^－1 E804组细胞中B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、磷酸化JAK1（p-JAK1）和磷酸化STAT3（p-STAT3）蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）、裂解的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved caspase-3）和裂解的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9（cleaved caspase-9）蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）。 结论 E804可抑制A549细胞体外增殖、迁移和分化,并诱导其凋亡,其机制可能与下调JAK1/STAT3信号通路相关蛋白表达有关。     

当归红芪超滤物对X射线引起人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用及其机制

目的 探讨当归红芪超滤物（UFE-AH）对X射线引起人脐静脉内皮细胞（HUVECs）损伤的保护作用,阐明其可能的机制。 方法 体外培养 HUVECs,采用不同剂量（0、2、4、6、8和10 Gy）X射线辐射,筛选出最佳辐射剂量（6 Gy）;用不同浓度（0、50、100、200、400、600、800和1 000 μg·L^－1）UFE-AH干预HUVECs,筛选出最佳促增殖浓度（100、200和400 μg·L^－1）。实验分为空白组、模型组（6 Gy X射线）、低剂量UFE-AH组（6 Gy X射线+100 μg·L^－1 UFE-AH）、中剂量UFE-AH组（6 Gy X射线+200 μg·L^－1 UFE-AH）和高剂量UFE-AH组（6 Gy X射线+400 μg·L^－1 UFE-AH）。CCK-8法检测各组细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,透射电子显微镜下观察各组细胞超微结构,Western blotting法检测各组细胞中磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、血管内皮生长因子（VEGF）、B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关 X 蛋白（Bax）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（caspase-3）蛋白表达水平。 结果 CCK-8法检测,与0 Gy比较,当辐射剂量大于2 Gy时,辐射后48和72 h X射线对HUVECs的抑制率随辐射剂量增加而升高（P<0.05或P<0.01）,6 Gy及6 Gy以上辐射剂量细胞抑制率升高更明显（P<0.01）。与0 μg·L^－1 UFE-AH比较,100、200、400和600 μg·L^－1UFE-AH作用时细胞存活率升高（P<0.05或P<0.01）,且100、200和400 μg·L^－1UFE-AH作用24、48和72 h时细胞存活率明显升高（P<0.01）。与空白组比较,模型组细胞存活率明显降低（P<0.01）;与模型组比较,中和高剂量UFE-AH 组细胞存活率明显升高（P<0.01）。流式细胞术检测,与空白组比较,模型组细胞凋亡率明显升高（P<0.01）;与模型组比较,低、中和高剂量UFE-AH组细胞凋亡率均明显降低（P<0.01）。透射电子显微镜观察,空白组细胞膜完整,胞质较均匀,线粒体呈卵圆形,未见明显肿胀,胞内可见少量溶酶体;与空白组比较,模型组细胞重度肿胀,细胞膜多处破损,胞质稀松且出现多个空泡区,细胞核呈轻度不规则形,线粒体数量明显减少,呈轻度或中度肿胀,基质变浅且不均,线粒体少部分嵴局部断裂、变短,胞内可见较大量自噬溶酶体（ASS）;与模型组比较,低、中和高剂量UFE-AH组细胞肿胀减轻,胞内细胞器空泡逐渐减少,线粒体肿胀减轻,数量增多,胞内可见一定量ASS,但仍未恢复正常。Western blotting 法检测,与空白组比较,模型组细胞中PI3K、p-Akt、Bcl-2和VEGF蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,Bax和caspase-3蛋白表达水平及Bax/Bcl-2比值明显升高（P<0.01）;与模型组比较,中和高剂量 UFE-AH组细胞中PI3K、p-Akt、Bcl-2和VEGF蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,Bax和caspase-3蛋白表达水平及Bax/Bcl-2比值明显降低（P<0.01）。 结论 一定剂量的UFE-AH对X射线引起的HUVECs 损伤具有保护作用,其机制可能与UFE-AH影响HUVECs中PI3K、Akt、p-Akt、VEGF、Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白表达有关。     

苍术挥发油和苍术醇提物对溃疡性结肠炎模型小鼠的改善作用及其效果比较

目的 探讨苍术挥发油和苍术醇提物对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的小鼠溃疡性结肠炎（UC）的改善作用,为苍术的临床用药提供实验依据。 方法 40只雄性BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、苍术挥发油（0.185 g·kg^－1）组、苍术醇提物（1.107 g·kg^－1）组和柳氮磺吡啶（0.250 g·kg^－1）组,每组8只。采用自由饮用3.5%DSS溶液建立UC小鼠模型。检测各组小鼠体质量和疾病活动指数（DAI）评分,解剖小鼠后检测各组小鼠结肠长度并计算脾脏系数,采用髓过氧化物酶（MPO）试剂盒检测各组小鼠结肠组织中MPO活性,HE染色观察各组小鼠结肠组织病理形态表现,实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组小鼠结肠组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素6（IL-6） mRNA表达水平,免疫组织化学染色检测各组小鼠结肠组织中炎症因子阳性表达情况,阿利新蓝-过碘酸-雪夫（AB-PAS）染色观察各组小鼠结肠组织中杯状细胞数。 结果 与正常组比较,模型组小鼠第 7和8天时体质量降低（P<0.05）,第4~8天时DAI评分升高（P<0.05）,结肠长度缩短（P<0.05）,脾脏系数增大（P<0.05）,结肠组织中MPO活性升高（P<0.05）,结肠组织损伤严重,结肠组织中TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达水平升高（P<0.05）,炎症因子阳性表达增加,杯状细胞数减少。与模型组比较,苍术挥发油组、苍术醇提物组和柳氮磺吡啶组小鼠第7和8天时体质量升高,但差异无统计学意义（P>0.05）,第6~8天时DAI评分降低（P<0.05）,结肠长度增加（P<0.05）,脾脏系数减小（P<0.05）,结肠组织中MPO活性降低（P<0.05）,结肠组织损伤程度减轻,结肠组织中TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达水平降低（P<0.05）,炎症因子阳性表达减少,杯状细胞数增多。与苍术挥发油组比较,苍术醇提物组小鼠结肠组织中MPO活性降低,但差异无统计学意义（P>0.05）;TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达水平降低（P<0.05）,杯状细胞数增多。 结论 苍术挥发油和苍术醇提物对UC模型小鼠均有改善作用,同等剂量下,苍术醇提物对小鼠UC的改善作用更好。     

参红补血颗粒对气滞血瘀型血管内皮功能障碍小鼠血管内皮的保护作用及其机制

目的 探讨参红补血颗粒（SBG）对气滞血瘀型血管内皮功能障碍（VED）模型小鼠血管内皮的保护作用和对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子（MyD88）、核因子 κBp65（NF-κB p65）及细胞间黏附分子1（ICAM-1）蛋白表达水平的影响,阐明其相关作用机制。 方法 将60只昆明小鼠随机分为正常对照组、VED组、阳性对照组（0.62 g·kg^－1·d^－1 血府逐瘀胶囊）、低剂量SBG（3 g·kg^－1·d^－1）组、中剂量SBG（6 g·kg^－1·d^－1）组和高剂量SBG（9 g·kg^－1·d^－1）组,每组10只。除正常对照组外,其他各组小鼠采用冰水浴游泳法构建气滞血瘀型VED模型,连续给药造模21 d。观察各组小鼠行为表现,血液流变仪检测各组小鼠全血黏度,苏木精-伊红（HE）染色观察各组小鼠肺和胸主动脉组织病理形态表现,ELISA法检测各组小鼠血清血管性血友病因子（vWF）、血栓调节蛋白（TM）、ICAM-1、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）水平,试剂盒检测各组小鼠血清一氧化氮（NO）水平和胸主动脉组织中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）及超氧化物歧化酶（SOD）活性。体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,分为正常对照组,叔丁基过氧化氢（TBHP）组,低、中和高剂量SBG组,除正常对照组外,其他4组HUVECs采用TBHP诱导HUVECs建立氧化损伤模型,采用MTT法检测各组HUVECs存活率,Western blotting法检测各组HUVECs中TLR4、MyD88、NF-κB p65和ICAM-1蛋白表达水平。 结果 与正常对照组比较,VED组小鼠抓力值和自主活动次数明显降低（P<0.05）, 全血黏度明显升高（P<0.05）; 与VED组比较,阳性对照组和低、中及高剂量SBG组小鼠抓力值均明显升高（P<0.05）,小鼠全血黏度明显降低（P<0.05）,阳性对照组和高剂量SBG组小鼠自主活动次数明显升高（P<0.05）。HE染色,与正常对照组比较,VED组小鼠肺组织出现明显的毛细血管扩张和淤血,并且组织伴有大量炎性细胞浸润;与VED组比较,阳性对照组和不同剂量SBG组小鼠肺泡壁毛细血管扩张和淤血的程度减轻,炎性细胞浸润数量明显减少,并呈剂量依赖性;与正常对照组比较,VED组小鼠胸主动脉内壁结构紊乱,出现缺损和脱落;与VED组比较,阳性对照组和不同剂量SBG组小鼠血管内膜的脱落损伤情况改善,内膜相对完整。与正常对照组比较,VED组小鼠血清vWF、TM、ICAM-1、TNF-α和IL-6水平明显升高（P<0.05）,血清NO水平以及动脉组织中GSH-Px和SOD活性明显降低（P<0.05）;与VED组比较,阳性对照组和高剂量SBG组小鼠血清vWF、TM、ICAM-1、TNF-α和IL-6水平明显降低（P<0.05）,血清NO水平以及动脉组织中GSH-Px和SOD活性明显升高（P<0.05）。与正常对照组比较,TBHP组HUVECs存活率明显降低（P<0.05）,HUVECs中TLR4、MyD88、NF-κB p65和ICAM-1蛋白表达水平升高（P<0.05）;与TBHP组比较,高剂量SBG组HUVECs存活率明显升高（P<0.05）,HUVECs中TLR4、MyD88、NF-κB p65和ICAM-1蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。 结论 SBG可通过抑制氧化应激,缓解炎症反应,达到保护气滞血瘀型VED小鼠血管内皮的作用。     

1,25(OH)2D3联合黄芪多糖对体外骨骼肌细胞胰岛素抵抗的改善作用及其机制

目的 探讨骨化三醇［1,25（OH）₂D₃］联合黄芪多糖（APS）对骨骼肌细胞胰岛素抵抗（IR）的改善作用及其作用机制,为采用1,25（OH）₂D₃和APS缓解IR提供依据。 方法 采用CCK-8法和己糖激酶法确定棕榈酸（PA）溶液（0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mmol·L^－1）的最佳作用剂量和最佳作用时间、APS（25、50、100和200 mg·L^－1）最佳作用剂量及1,25（OH）₂D₃（1、10、100和1 000 nmol·L^－1）最佳作用剂量。将骨骼肌细胞分为对照组（不进行任何处理）、PA组（给予0.4 mmol·L^－1 PA 作用24 h）、PA+APS组（给予0.4 mmol·L^－1 PA 作用24 h后再给予100 mg·L^－1 APS作用24 h）、PA＋1,25（OH）₂D₃组［给予0.4 mmol·L^－1 PA作用24 h后再给予100 nmol·L^－1 1,25（OH）₂D₃作用24 h］、PA＋APS＋1,25（OH）₂D₃组［给予0.4 mmol·L^－1 PA作用24 h后再给予100 mg·L^－1 APS和100 nmol·L^－1 1,25（OH）₂D₃作用24 h］。酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组细胞培养上清中白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素10（IL-10）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平,流式细胞术检测各组细胞中活性氧（ROS）水平,Western blotting法检测各组细胞中胰岛素受体（InsR）、胰岛素受体底物1（IRS-1）、磷酸化胰岛素受体底物1（p-IRS-1）、葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）、P65、磷酸化P65（p-P65）、P38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）和Toll样受体4（TLR4）蛋白表达水平。 结果 与对照组比较,PA组骨骼肌细胞中ROS、IL-6、TNF-α、MCP-1水平和P65、p-P65、p38MAPK及TLR4蛋白表达水平均升高（P<0.05）,IL-10水平和InsR、IRS-1、p-IRS-1及GLUT4蛋白表达水平均降低（P<0.05）;与PA组比较,PA+APS、PA+1,25（OH）₂D₃和PA+APS+1,25（OH）₂D₃组细胞中ROS、IL-6、MCP-1和TNF-α水平及P65、p-P65、p38MAPK及TLR4蛋白表达水平均降低（P<0.05）,IL-10水平和InsR、IRS-1、p-IRS-1及GLUT4蛋白表达水平均升高（P<0.05）。PA+APS+1,25（OH）₂D₃组细胞中ROS水平、p-P65和p38MAPK蛋白表达水平均低于PA+APS和PA+1,25（OH）₂D₃组（P<0.05）,InsR、IRS-1、p-IRS-1和GLUT4蛋白表达水平均高于PA+APS和PA+1,25（OH）₂D₃组（P<0.05）。 结论 1,25（OH）₂D₃联合APS可有效减轻IR,其机制可能是通过抑制氧化应激通路以及炎性因子的释放来实现的,且联合应用效果优于单独应用。     

川芎嗪对肾结石模型大鼠肾组织氧化损伤的改善作用

目的 探讨川芎嗪（TMP）对肾结石模型大鼠肾组织氧化损伤的改善作用,阐明其可能的作用机制。 方法 健康雄性SD大鼠40只,随机分为对照组、模型组、TMP组和阳性对照组,经预实验后,除对照组外其余各组大鼠采用乙醛酸盐原液80 mg·kg^－1腹腔注射构建肾结石大鼠模型,同时TMP组大鼠采用盐酸TMP注射液100 mg·kg^－1腹腔注射,阳性对照组大鼠采用肾石通颗粒3.12 g·kg^－1灌胃,对照组大鼠采用0.9%氯化钠注射液2.5 mL·kg^－1腹腔注射,连续用药10 d。取各组大鼠肾组织切片,Von Kossa染色和HE染色观察各组大鼠肾组织中钙盐沉积情况和病理形态表现,检测各组大鼠肾组织中丙二醛（MDA）水平和超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。Western blotting法检测各组大鼠肾组织中核因子E2相关因子2（Nrf2）和血红素氧合酶1（HO-1）及NAD（P）H醌：氧化还原酶1（NQO1）蛋白表达水平。 结果 与对照组比较,模型组大鼠肾组织Von Kossa染色可见明显的钙盐沉积,结晶量化分级评分明显升高（P<0.01）,HE染色可见肾组织细胞出现明显的病理损伤,肾组织中MDA水平明显升高（P<0.01）,SOD和GSH-Px活性明显降低（P<0.01）,肾组织中Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。与模型组比较,TMP组和阳性对照组大鼠肾组织Von Kossa染色可见钙盐沉积,结晶量化分级评分明显降低（P<0.05）,HE染色可见肾组织细胞病理损伤减轻,肾组织中MDA水平明显降低（P<0.01）,SOD和GSH-Px活性明显升高（P<0.05）,肾组织中Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。 结论 肾结石可引起大鼠肾组织氧化应激损伤,导致肾组织中氧化应激指标改变和Nrf2/抗氧化反应原件（ARE）信号通路蛋白表达水平变化,TMP干预处理后可激活该信号通路,从而发挥对肾组织氧化应激损伤的改善作用。     

丝胶对高糖所致足细胞损伤和JNK信号通路的影响

目的 探讨丝胶对高糖所致足细胞损伤时c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号通路相关蛋白的表达及足细胞凋亡的影响,阐明丝胶的保护作用及其可能机制。 方法 分化成熟的条件永生化小鼠足细胞随机分为正常对照组（含5.5 mmol·L^－1葡萄糖的培养基）、高渗对照组（含5.5 mmol·L^－1葡萄糖+24.5 mmol·L^－1甘露醇的培养基）、高糖组（含30.0 mmol·L^－1葡萄糖的培养基）、低浓度丝胶组（含30.0 mmol·L^－1葡萄糖+150.0 mg·L^－1丝胶的培养基）、中浓度丝胶组（含30.0 mmol·L^－1葡萄糖+300.0 mg·L^－1丝胶的培养基）和高浓度丝胶组（含30.0 mmol·L^－1葡萄糖+600.0 mg·L^－1丝胶的培养基）。采用光学倒置显微镜观察各组足细胞形态表现,实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组足细胞中裂孔膜蛋白（Nephrin）、丝裂原活化蛋白激酶激酶1（MEKK1）、丝裂原活化蛋白激酶激酶4（MKK4）、c-Jun氨基末端激酶1（JNK1）和c-Jun mRNA表达水平,Western blotting法检测各组足细胞中Nephrin、MEKK1、MKK4、JNK1和c-Jun蛋白表达水平,AnnexinⅤ/PI双染法检测各组足细胞凋亡率。 结果 正常对照组足细胞胞体较大,并延伸生出树枝状突起;与正常对照组比较,高糖组足细胞胞体回缩变小,细胞间隔增大,脱落和悬浮的足细胞数目增多;与高糖组比较,不同浓度丝胶组足细胞形态逐渐趋于正常。高糖组足细胞中Nephrin mRNA和蛋白表达水平较正常对照组均明显降低（P<0.05）,表明高糖致足细胞损伤模型建立成功。高糖组足细胞中MEKK1、MKK4、JNK1、c-Jun mRNA和蛋白表达水平较正常对照组明显升高（P<0.05）;不同浓度丝胶组足细胞中MEKK1、MKK4、JNK1和c-Jun mRNA及蛋白表达水平较高糖组明显降低（P<0.05）,且高浓度丝胶组足细胞中MEKK1、MKK4、JNK1和c-Jun mRNA及蛋白表达水平较中浓度丝胶组明显降低（P<0.05）,中浓度丝胶组足细胞中MEKK1、MKK4、JNK1和c-Jun mRNA及蛋白表达水平较低浓度丝胶组明显降低（P<0.05）。高糖组和高渗对照组足细胞凋亡率较正常对照组明显升高（P<0.05）;不同浓度丝胶组足细胞凋亡率较高糖组明显降低（P<0.05）,且高浓度丝胶组足细胞凋亡率较中浓度丝胶组明显降低（P<0.05）,中浓度丝胶组足细胞凋亡率较低浓度丝胶组明显降低（P<0.05）。 结论 丝胶对高糖所致足细胞损伤发挥保护作用,其机制可能与抑制JNK信号通路中MEKK1、MKK4、JNK1和c-Jun的表达及抑制足细胞凋亡有关联。     

环状RNA hsa_circ_0009735对胃癌细胞上皮间质转化、细胞周期和自噬的影响

目的 探讨环状RNA hsa_circ_0009735在胃癌组织和细胞中的表达,阐明其对胃癌细胞上皮间质转化（EMT）、迁移、细胞周期和自噬的影响。 方法 取正常胃黏膜GES-1细胞、胃癌MGC-803细胞、MKN-45细胞和HGC-27细胞。将hsa_circ_0009735小干扰RNA和阴性对照转染MGC-803细胞,将胃癌MGC-803细胞分为si-hsa_circ_0009735组和阴性对照组;将对照质粒和hsa_circ_0009735过表达质粒转染入HGC-27细胞,将胃癌HGC-27细胞分为OE-hsa_circ_0009735组和对照质粒组;MGC-803细胞转染细胞自噬质粒pcDNA-eGFP-LC3后分为空白组和不同浓度（0.25、0.50、1.00和2.00 mg·L^－1）雷帕霉素组。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测胃癌组织和细胞中hsa_circ_0009735表达水平,激光共聚焦显微镜观察各组MGC-803细胞形态表现和细胞中自噬小体数,Transwell小室实验检测各组迁移细胞数,流式细胞术检测不同细胞周期各组细胞百分率,Western blotting法检测各组细胞中微管相关蛋白轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）、微管相关蛋白轻链3Ⅰ（LC3Ⅰ）、E-钙黏蛋白、Cyclin D1、Vimentin和N-钙黏蛋白表达水平。 结果 PCR产物经测序发现存在环化位点,与hsa_circ_0009735序列匹配。与癌旁组织比较,胃癌组织中hsa_circ_0009735表达水平升高（P<0.05）;与GES-1细胞比较, MGC-803细胞中hsa_circ_0009735表达水平升高（P<0.05）。与空白组比较,0.25和0.50 mg·L^－1雷帕霉素组MGC-803细胞形态无明显改变,1.00 mg·L^－1雷帕霉素组MGC-803细胞中颗粒增多,边界不清;2.00 mg·L^－1雷帕霉素组死亡MGC-803细胞较多。激光共聚焦显微镜下1.00 mg·L^－1雷帕霉素组MGC-803细胞中自噬小体数与2.00 mg·L^－1雷帕霉素组比较差异无统计学意义（P>0.05）。与空白组比较,不同浓度雷帕霉素组MGC-803细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高（P<0.05）,hsa_circ_0009735表达水平降低（P<0.01）。与阴性对照组比较,si-hsa_circ_0009735组MGC-803细胞中hsa_circ_0009735表达水平降低（P<0.01）,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高（P<0.01）,迁移细胞数减少（P<0.01）,G₁期细胞百分率升高（P<0.05）,S期细胞百分率降低（P<0.01）,G₂期细胞百分率降低（P<0.05）,细胞中Cyclin D1、Vimentin和N-钙黏蛋白表达水平均降低（P<0.05）;与对照质粒组比较,OE-hsa_circ-0009735组HGC-27细胞中hsa_circ_0009735表达水平明显升高（P<0.01）,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低（P<0.01）,迁移细胞数减少（P<0.01）,G₁期细胞百分率降低（P<0.01）,S期细胞百分率升高（P<0.05）,G₂期细胞百分率升高（P<0.05）,E-钙黏蛋白表达水平降低（P<0.05）,Cyclin D1、Vimentin和N-钙黏蛋白表达水平均升高（P<0.05）。 结论 胃癌细胞中高表达hsa_circ_0009735可能促进EMT进程,影响细胞迁移和细胞周期,并抑制细胞自噬过程。