固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠气道杯状细胞增生与黏液分泌相关基因的调控作用

目的?探讨中药复方固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠气道杯状细胞增生与黏液分泌相关基因IRE1β、SPDEF、AGR2和mCLCA3的影响。方法?结合前期研究采用卵蛋白(OVA)致敏和OVA-呼吸道合胞病毒(RSV)联合诱导激发BALB/c雌性小鼠,建立哮喘缓解期动物模型,随机分为正常组,模型组,固本防哮饮低、中、高剂量组,孟鲁司特钠组及地塞米松组。qPCR法检测肺组织中IRE1β、SPDEF、AGR2和mCLCA3 mRNA表达水平。结果?模型组小鼠肺组织中IRE1β、SPDEF、AGR2 mRNA表达显著高于正常组(P＜0.05),而mCLCA3 mRNA表达显著低于正常组(P＜0.05);固本防哮饮高、中、低剂量组,孟鲁司特钠组及地塞米松组小鼠肺组织中IRE1β、SPDEF、AGR2 mRNA水平较模型组存在不同程度的下降,而固本防哮饮低剂量组和孟鲁司特钠组小鼠肺组织中mCLCA3 mRNA表达显著高于正常组(P＜0.05)。结论?固本防哮饮防治哮喘抑制气道杯状细胞增生和减少黏液分泌的作用机制可能是通过降低IRE1β、SPDEF、AGR2 mRNA表达所致。      

清肺口服液黄酮类成分改善RSV感染小鼠肺上皮屏障损伤的机制研究

  目的  探讨清肺口服液黄酮类成分(Fla)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠肺上皮屏障损伤的保护机制。  方法  将BALB/c小鼠随机分为正常组,模型组,Fla低、高剂量组(30、60 mg·kg-1·d-1),阳性药利巴韦林组(46 mg·kg-1·d-1)。建立RSV感染的小鼠模型, 持续给药4 d后, HE染色观察肺组织病理学变化; ELISA检测肺泡灌洗液(BALF)中白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量; 以BALF蛋白含量和BALF/血清荧光比评估肺上皮通透性; Western blot检测肺组织紧密连接蛋白-1(Claudin-1)、闭合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、p-p38 MAPK、Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)的蛋白表达。  结果  与模型组相比, Fla高、低剂量组小鼠肺组织病理损伤减轻(P < 0.05, P < 0.01), BALF中IL-1β、TNF-α含量下降(P < 0.05, P < 0.01), BALF蛋白含量和BALF/血清荧光比降低(P < 0.05, P < 0.01), 肺组织中Claudin-1、Occludin、ZO-1蛋白表达升高(P < 0.05, P < 0.01), p-p38 MAPK/p38 MAPK、TLR4、MyD88蛋白表达下降(P < 0.05, P < 0.01)。  结论  Fla可能通过抑制TLR4/MyD88/p38 MAPK通路, 促进紧密连接蛋白表达, 减轻肺部炎症, 从而改善RSV导致的肺上皮屏障损伤。      

固本防哮饮对小鼠免疫功能影响

目的：观察固本防哮饮对小鼠免疫功能的影响。方法：ICR小鼠,每组12只,随机分成正常对照组、孟鲁司特钠组（0.33 mg.kg-1）及固本防哮饮低剂量组（12 g.kg-1）、固本防哮饮中剂量组（24 g.kg-1）、固本防哮饮高剂量组（48 g.kg-1）,通过对血清溶血素水平、单核吞噬细胞吞噬功能的测定,反映固本防哮饮对机体免疫功能的影响。结果：固本防哮饮各剂量组均可提高血清溶血素水平,增强单核吞噬细胞吞噬功能,同正常对照组比较,有显著性差异（P〈0.01）,其中固本防哮饮高剂量组效果显著优于孟鲁司特钠组（P〈0.01）。结论：固本防哮饮对小鼠免疫功能有促进作用。     

桑皮止咳方对呼吸道合胞病毒感染后咳嗽小鼠气道神经源性炎症的影响

【目的】探讨桑皮止咳方对呼吸道合胞病毒(RSV)感染后咳嗽小鼠气道神经源性炎症的影响。【方法】将96只小鼠随机分为正常组,模型组,孟鲁司特钠组,桑皮止咳方低、中、高剂量组,每组16只。除正常组,其他组别小鼠均采用RSV滴鼻建立RSV感染后咳嗽模型。造模成功后,各给药组对应给予药物灌胃,正常组、模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续14 d。记录RSV感染后第13、28天时辣椒素诱咳小鼠的咳嗽潜伏期和次数;苏木素—伊红(HE)染色法观察肺组织病理学变化;免疫组织化学染色法、蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测肺组织中神经生长因子(NGF)蛋白表达水平。【结果】与正常组比较,模型组小鼠咳嗽潜伏期明显缩短(P 0.01),咳嗽次数显著增多(P 0.01),肺组织可见病理损伤,肺组织NGF表达均显著上调(P0.01)。与模型组比较,桑皮止咳方低、中、高剂量组和孟鲁司特钠组小鼠咳嗽潜伏期明显延长(P 0.01),咳嗽次数显著降低(P 0.05或P 0.01),肺组织损伤减轻,肺组织NGF表达量下降(P0.01),且桑皮止咳方的作用效果呈剂量依赖性。【结论】桑皮止咳方可能通过抑制NGF蛋白的表达有效改善RSV感染导致的BALB/c小鼠的气道敏感,减少肺组织的炎性浸润,减少气道炎性反应,达到治疗作用。     

地塞米松对变应性哮喘小鼠胸腺活化调节趋化因子及mRNA表达的影响

目的 探讨地塞米松对哮喘小鼠胸腺活化调节趋化因子(TARC)及其mRNA表达的影响.方法 30只清洁级雄性BALB/C小鼠分为3组:正常对照组、哮喘组和地塞米松组.以卵清白蛋白(OVA)致敏激发法制备小鼠哮喘模型,末次激发24 h后留取支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织.BALF行嗜酸性粒细胞(EOS)计数及分类;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测BALF中TARC和IL-4水平;免疫组化法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测TARC蛋白和TARC mRNA在肺组织中的表达.结果 ①哮喘组BALF中细胞总数,EOS绝对数和EOS占细胞总数的百分数(EOS%)均显著高于正常对照组,地塞米松组上述指标均显著低于哮喘组(均P＜0.01);②哮喘组BALF中TARC,IL-4浓度均显著高于对照组,地塞米松干预后BALF中TARC,IL-4浓度均显著低于哮喘组(均P＜0.01).③免疫组化及RT-PCR结果显示,肺组织中TARC蛋白及其mRNA的表达,哮喘组显著高于对照组,地塞米松组较哮喘组显著减弱(均P＜0.01),免疫组化显示,TARC蛋白主要表达于支气管上皮细胞.④相关性分析显示,小鼠BALF中TARC浓度与EOS绝对值、IL-4浓度均呈显著正相关(均P＜0.01).结论 糖皮质激素(地塞米松)可抑制TARC在哮喘小鼠气道上皮中的表达,可能是其治疗哮喘气道炎症的部分作用机制.     

平喘宁调节哮喘大鼠肺组织EGF、C-JUN干预气道重塑研究

目的:研究平喘宁对寒哮大鼠肺组织中ERK信号通路中EGF、C-JUN等相关蛋白以及C-JUN mRNA表达水平的影响,探讨平喘宁干预哮喘气道重塑的作用机制。方法:随机将雄性SD大鼠分为正常组、模型组、平喘宁小剂量组、平喘宁中剂量组、平喘宁大剂量组、桂龙咳喘宁组、地塞米松组,采用HE染色法检测实验后肺组织的病理学改变;采用SqRT-PCR法检测实验后肺组织中C-JUN mRNA的表达丰度;采用Wersten blot法检测实验后肺组织中EGF、C-JUN的相对表达量。结果:HE染色后,模型组较正常组有明显气道重塑现象;各治疗组气道重塑均较模型组得到适当缓解。通过Western blot法检测发现,与正常组相比,EGF蛋白的表达在平喘宁大剂量组无特异性变化(P0.05),在其他各组均有增高(P0.01);C-JUN蛋白的表达在除平喘宁中剂量组无特异性变化外(P0.05),在其他各组均有增高(P0.01);与模型组相比,EGF的表达在地塞米松组和平喘宁大剂量组、小剂量组中降低(P0.01、P0.05);C-JUN蛋白的表达在平喘宁大剂量组和平喘宁中剂量组中下降(P0.01、P0.05)。通过RT-PCR检测:与正常组相比,C-JUN mRNA的表达在各组中均增高(P0.01);与模型组相比,C-JUN mRNA的表达在平喘宁大剂量组、平喘宁中剂量组中下降(P0.01)。结论:平喘宁大剂量组与平喘宁中剂量组可降低寒哮大鼠肺组织中EGF、C-JUN蛋白和基因的表达,从而延缓气道重塑以治疗哮喘。     

屏哮饮对哮喘小鼠细胞因子影响

目的：观察屏哮饮对哮喘小鼠IL-4、IL-10、IFN-γ的影响。方法：采用ELISA法观察哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IL-10、IFN-γ的表达。结果：屏哮饮低高剂量组IL-10、IFN-γ显著高于模型组及孟鲁司特钠组,差异有统计学意义,IL-4显著低于模型组,差异有统计学意义。结论：屏哮饮可通过上调IFN-γ表达,一定程度上调IL-10表达,抑制IL-4表达,达到抑制气道炎症、延缓气道重塑的作用。     

益气化痰中药复方对COPD小鼠黏液高分泌及肺通气功能相关性研究

目的通过检测不同剂量益气化痰中药对慢性阻塞性肺疾病(COPD)小鼠肺通气功能、肺组织中黏蛋白5ac(Muc5ac)及水通道蛋白-5(AQP-5)表达的影响,进一步探讨肺组织中Muc5ac和AQP-5表达与肺功能的相关性。方法将小鼠随机分成6组,分别是正常组,模型组,低、中、高剂量中药组,地塞米松组,每组10只。香烟烟熏方法建立慢性阻塞性肺疾病小鼠模型,给药后分别观察小鼠肺功能(PIF、PEF和MV值)以及肺组织Muc5ac及AQP-5表达的变化。结果与正常组比较,模型组吸气峰流速(Peak Inspiratory Flow,PIF)、呼气峰流量(Peak Expiratory Flow,PEF)及每分钟通气量(Minute Volume,MV)显著降低(P0.01)。与模型组比较,低、中、高剂量中药组的PIF、PEF和MV显著升高(P0.01);地塞米松组PIF、PEF和MV差异无统计学意义(P0.05)。与正常组比较,模型组的肺组织中Muc5ac的蛋白表达显著升高(P0.01),AQP-5的蛋白表达显著下降(P0.01);与模型组比较,低、中、高剂量中药组及地塞米松组的肺组织中Muc5ac蛋白表达显著下降(P0.01)。低、中、高剂量中药组及地塞米松组的肺组织中AQP-5蛋白表达显著升高(P0.01)。肺组织中Muc5ac蛋白表达与小鼠PIF、PEF和MV均呈负相关(r分别为-0.197 5,-0.300 8,-0.403 8,P0.05),肺组织中AQP5蛋白表达与小鼠PIF、PEF和MV均呈正相关(r分别为0.956 3,0.971 3,0.935 5,P0.01)。结论益气化痰中药复方能够改善COPD小鼠的肺通气功能,影响小鼠肺组织中Muc5ac和AQP-5的蛋白表达。     

支气管哮喘小鼠肺组织SOCS-3 mRNA和Muc5ac蛋白的表达及其关系的研究

目的探讨支气管哮喘(以下简称哮喘)小鼠肺组织细胞因子信号抑制因子-3(SOCS-3)mRNA和粘蛋白基因Muc5ac蛋白的表达及其二者的相关性.方法制作小鼠哮喘模型,应用RT-PCR法测定哮喘组及对照组肺组织SOCS-3 mRNA的表达,应用免疫组织化学法测定两组气道粘蛋白基因Muc5ac蛋白的表达.结果小鼠哮喘组肺组织SOCS-3 mRNA的表达较正常组明显升高,两组分别为(0.9045±0.01444和(0.5010±0.0206),差异显著(P＜0.01);小鼠哮喘组气道粘蛋白基因Muc5ac蛋白的表达较对照组明显增高,两组分别为(0.1930±0.0047)和(0.1186±0.0061),差异显著(P＜0.01);哮喘组小鼠肺组织SOCS-3 mRNA与气道Muc5ac蛋白呈显著的直线正相关(p＜0.01).结论哮喘时肺组织SOCS-3 mRNA表达升高可能与气道Muc5ac蛋白的表达升高有关,从而促进了气道黏液过度分泌.     

布地奈德抑制哮喘小鼠肺组织OX40?气道炎症和气道高反应性的研究

目的:研究布地奈德对哮喘模型小鼠肺组织OX40(CD134)表达?气道炎症和气道高反应性的干预作用?方法:18只SPF级BALB/c小鼠随机分为正常组?哮喘组?布地奈德组?卵蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和激发建立哮喘模型?末次激发24 h后,测定气道反应性,HE染色观察炎症细胞浸润,ELISA法分别检测血清总IgE?OVA特异性IgE(OVA-sIgE)以及支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中的IL-4和IL-13?Western blot检测肺组织OX40蛋白表达?结果:随着氯化乙酰胆碱(Ach)浓度的增加,哮喘组小鼠气道阻力明显增加,正常组仅轻度增加,布地奈德组小鼠气道阻力的增加程度低于哮喘组小鼠(P < 0.05);在BALF中炎症细胞总数和嗜酸性粒细胞分类计数方面,哮喘组小鼠高于正常组小鼠(P < 0.05),布地奈德组小鼠与哮喘组小鼠相比明显降低(P < 0.05);在BALF中IL-4?IL-13和血清总IgE?OVA-sIgE方面,哮喘组高于正常组(P < 0.05),布地奈德组低于哮喘组小鼠(P < 0.05);哮喘组小鼠肺组织OX40高于正常组(P < 0.05),布地奈德组与哮喘组相比小鼠肺组织OX40降低(P < 0.05)?结论:布地奈德可抑制哮喘模型小鼠气道炎症和气道高反应性,可能与抑制OX40/OX40L协同刺激通路有关?     

柴参解郁汤对腹泻型肠易激综合征小鼠粪便胆汁酸代谢轮廓的影响

目的 通过研究柴参解郁汤对腹泻为主型肠易激综合征(Diarrhea predominant irritable bowel syndrome,IBS-D)模型小鼠粪便中胆汁酸代谢轮廓的影响,探讨柴参解郁汤改善IBS-D的可能机制.方法 将C57BL/6小鼠随机分为3组,空白组、模型组、柴参解郁汤组(15 g·kg-1)...     

吸入低浓度氢气对小鼠哮喘和睡眠功能的影响

  目的  探讨吸入低浓度氢气对小鼠哮喘和睡眠功能的影响及其潜在机制。  方法  在哮喘实验中,BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组和氢气治疗组,卵清蛋白（ovalbumin,OVA）诱导建立哮喘模型后,氢气治疗组每天吸入24~26 mL/L氢气,连续7 d,正常对照组和哮喘模型组在相同条件下吸入空气;ELISA法检测小鼠肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中白细胞介素（interleukin,IL）-4、IL-13和干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）质量浓度;比色法检测肺组织中丙二醛（malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性;HE染色观察肺组织病理学改变。在睡眠实验中,ICR小鼠随机分为空白对照组,氢气治疗1 d、3 d、5 d组和地西泮组,观察吸入24～26 mL/L氢气对各组小鼠腹腔注射阈上剂量戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间以及阈下剂量所致小鼠睡眠发生率的影响。  结果  哮喘实验发现,与正常对照组比较,哮喘模型组小鼠BALF中IL-4、IL-13质量浓度均增加（P<0.05）,IFN-γ质量浓度降低（P<0.001）;肺组织中MDA含量增加（P<0.01）,GSH含量降低（P<0.05）,SOD活性轻度降低（P>0.05）。与哮喘模型组相比,氢气治疗组小鼠BALF中IL-4和IL-13质量浓度均降低、INF-γ质量浓度增加（P<0.05）,而肺组织中MDA含量略降低（P>0.05）,GSH含量和SOD活性增加（P<0.05）。HE染色结果显示氢气治疗可以减轻哮喘小鼠肺组织病理损伤。在睡眠实验中,腹腔注射阈上剂量戊巴比妥钠后,与空白对照组比较,各氢气治疗组小鼠睡眠潜伏期均缩短（P<0.05）、睡眠时间延长（P<0.001）;同时各氢气治疗组小鼠睡眠潜伏期均长于地西泮组（P<0.001）,睡眠时间短于地西泮组（P<0.001）。腹腔注射阈下剂量戊巴比妥钠后,与空白对照组比较,氢气吸入1 d和5 d睡眠发生率增加（P<0.01）,与地西泮组比较差异均无统计学意义;氢气吸入3 d睡眠发生率轻度增加（P>0.05）,其睡眠发生率低于地西泮组（P<0.05）。  结论  吸入低浓度氢气可以缓解OVA诱导的小鼠哮喘,其机制可能与氢气的抗氧化与抗炎作用有关。此外,吸入低浓度氢气对小鼠睡眠功能有一定改善作用。     

布地奈德对哮喘小鼠IL-17 表达的影响

目的 探讨白细胞介素17（IL-17）在哮喘小鼠发病机制中的作用,布地奈德控制哮喘的作用机 制与IL-17 表达的关系。方法 24 只4 周龄清洁级雌性BALB/c 小鼠,随机分为正常组、哮喘组及布地奈德组, 每组8 只。以卵清蛋白（OVA）致敏、激发复制哮喘小鼠模型。采用雾化吸入的方法给予哮喘小鼠布地奈德 混悬液治疗。模型复制成功后,取其肺组织行病理切片观察肺组织病理变化,并行实时荧光定量聚合酶链反 应（qRT-PCR）,测定肺组织中IL-17 mRNA 的表达。取支气管肺泡灌洗液（BALF）行酶联免疫吸附试验 （ELISA）检测IL-17 细胞因子的水平。结果 哮喘组气道中炎症细胞浸润、BALF 中IL-17 表达、肺组织中 IL-17 mRNA 表达与正常组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,哮喘组均增高。经布地奈德雾化吸入干预后, 布地奈德组气道中炎症细胞、BALF 中IL-17 的表达、肺组织中IL-17 mRNA 表达与哮喘组比较,差异有统 计学意义（P <0.05）,布地奈德组低于哮喘组。结论 IL-17 在哮喘小鼠中的表达升高,抑制小鼠中IL-17 的表达, 是布地奈德控制哮喘的作用机制之一。     

雾化吸入灭活草分枝杆菌对小鼠哮喘模型IL-17F表达的影响

目的：探讨雾化吸入灭活草分枝杆菌治疗小鼠支气管哮喘（哮喘）模型对白细胞介素17F（IL-17F）表达的影响.方法：雄性BALB/c小鼠24只,按数字随机表法分为3组,每组8只：分别为对照组、模型组、治疗组.建立OVA致敏的小鼠哮喘模型,以雾化吸入灭活草分枝杆菌治疗哮喘小鼠.取肺组织经HE染色,光镜下观察肺组织结构及病理改变;ELISA法检测肺泡灌洗液（BALF）和血清中IL-17F浓度;采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）的标准曲线法,测定小鼠肺组织IL-17F mRNA的表达情况.结果：小鼠BALF中IL-17F浓度均高于血清中IL-17F浓度;模型组BALF中IL-17F浓度明显高于对照组和治疗组（P＜0.01）;治疗组BALF中IL-17F浓度较模型组有所减少,但仍高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）.模型组和治疗组小鼠血清中IL-17F浓度高于对照组（P＜0.01）,治疗组较模型组小鼠血清中IL-17F浓度减少,但差异无统计学意义（P＞0.05）.模型组小鼠肺组织IL-17F mRNA的相对表达量显著高于对照组和治疗组（P＜0.01）.治疗组肺组织IL-17FmRNA的表达与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）.结论：小鼠哮喘模型气道炎症与IL-17F高表达有关,雾化吸入灭活草分枝杆菌减轻哮喘小鼠气道炎症,并下调IL 17F表达.     

白藜芦醇对中性粒细胞性哮喘小鼠肺组织炎症的抑制作用及其机制

目的：探讨白芦藜醇对中性粒细胞性哮喘小鼠肺组织炎症的抑制作用,并阐明其作用机制。方法：选取18只C57BL/6J雌性小鼠,采用脂多糖（LPS）+卵白蛋白（OVA）联合致敏方法建立中性粒细胞性哮喘小鼠模型,随机分为模型组（LPS+OVA组）、白藜芦醇组（Res组,于激发前2 h灌胃30 mg·kg^-1白藜芦醇）和N-乙酰半胱氨酸组（NAC组,于激发前2 h灌胃3 mmol·kg^-1 N-乙酰半胱氨酸）;同时选取6只同周龄小鼠作为正常对照组（PBS组）。于乙酰甲胆碱雾化期间观察各组小鼠的行为学变化,采用肺功能仪分析小鼠气道高反应（AHR）,光学显微镜观察支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数和炎症细胞,HE染色观察各组小鼠肺组织病理形态表现,酶联免疫法（ELISA）检测各组小鼠BALF上清中白细胞介素17（IL-17）水平,特异性荧光探针DCF-DA染色分析肺组织活性氧（ROS）水平,丙二醛（MDA）试剂盒检测肺组织匀浆中MDA水平。结果：与PBS组比较,LPS+OVA组小鼠Penh值、细胞总数、炎症细胞、气道炎症及评分均明显升高（P<0.05或P<0.01）,BALF上清中IL-17水平明显升高（P<0.01）,肺组织内ROS荧光强度明显升高,肺匀浆中MDA水平明显升高（P<0.01）。与LPS+OVA组比较,Res组和NAC组小鼠Penh值、细胞总数、炎症细胞、气道炎症及评分明显降低（P<0.05或P<0.01）,BALF上清中IL-17水平均明显降低（P<0.05）,肺组织内ROS荧光强度降低,肺匀浆中MDA水平明显降低（P<0.01）。结论：白藜芦醇能够有效抑制中性粒细胞性哮喘小鼠肺组织中的炎症反应,其机制可能与白藜芦醇抑制体内发生的氧化应激反应有关。     

血必净对哮喘小鼠气道重塑及黏附分子 ICAM-1、VCAM-1 的影响

目的 探讨血必净注射液对哮喘小鼠气道重塑及肺泡灌洗液中黏附分子ICAM-1、VCAM-1 的 影响。方法 40 只BALB/c 小鼠随机分成健康对照组（C 组）、慢性哮喘组（A 组）、血必净干预1 周组（1 组）、 血必净干预2 周组（2 组）和血必净干预3 周组（3 组）,每组8 只。复制哮喘模型后以血必净注射液分别干预1、 2、3 组小鼠1、2 和3 周。麻醉处死后取肺泡灌洗液（BALF）及肺组织。BALF 以酶联免疫吸附实验（ELISA） 法测定细胞间黏附分子1（ICAM-1）、血管内皮细胞黏附分子1（VCAM-1）的含量,肺组织切片并染色,镜 下观察肺组织病理形态改变及气道形态学改变。结果 ①血必净干预后可降低哮喘小鼠BALF 中ICAM-1、 VCAM-1 的水平,3 组与其他组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,降低最显著。②镜下观察见血必净可改 善哮喘小鼠气道及肺组织的病理形态,3 组效果最明显。③ 1 组、2 组、3 组支气管壁厚度、平滑肌厚度逐渐变薄, 但均厚于C 组,差异有统计学意义（P <0.05）。结论 血必净可改善哮喘小鼠气道重塑并可通过下调ICAM- 1、VCAM-1 的水平改善气道炎症。     

CpG ODN对哮喘小鼠肺组织FcεRⅠ、FcγRⅡb表达的影响

目的观察CpGODN对哮喘小鼠肺组织FcaRI、FcTRIIb表达的影响,探讨其诱导免疫耐受的相关机制。方法将48只清洁级雄性Balb／c小鼠随机分为正常对照组（A组）、哮喘组（B组）、地塞米松（DXM）治疗组（C组）、CpGODN治疗组（D组）,每组12只。以卵白蛋白（OVA）作用建立小鼠哮喘模型。收集支气管肺泡灌洗液（bronchialalveolarlavagefluid,BALF）计数细胞总数并分类,取肺组织作病理,反转录一聚合酶链反应（RT—PCR）法测定肺组织中FcεRⅠ、FcγRⅡbmRNA的表达。结果（1）电镜观察肺组织超微结构：B组显示支气管及血管周围有较多炎性细胞浸润,肺泡隔内嗜酸粒细胞浸润,c组和D组与B组相比明显减轻。（2）BALF中炎症细胞表达变化：与B组相比,C组、D组BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞（eosino—phil,EOS）绝对值以及EOS占细胞总数的百分比（EOS％）均显著减少（P〈0．01）。（3）RT—PCR结果：C组、D组FcεRⅠ mR—NA表达均显著低于B组（P〈0．01）,C组、D组FcγRⅡb mRNA表达均显著高于B组（P〈0．01）。（4）相关分析：小鼠肺组织FcεRⅠ和FcγRⅡb表达呈显著负相关（P〈0．01,n=40）。结论CpGODN能降低哮喘小鼠肺组织FcεRⅠ的表达,增加FcγRⅡb的表达,具有改善气道炎症和诱导免疫耐受的作用。     

哮喘小鼠模型中IL-25表达及其对肥大细胞IL-6分泌的影响

目的:探讨哮喘小鼠模型中白细胞介素(interleukin,IL)-25的表达,研究其对肥大细胞IL-6分泌的影响?方法:6~8周龄BALB/c小鼠随机分为对照组和哮喘组,分别用等量磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution,PBS)或卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏,检测肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中细胞总数及嗜酸性粒细胞(eosnophils,EOS)计数验证模型的成功建立?两组小鼠肺组织中IL-25 mRNA?BALF及血清中IL-25的表达分别应用逆转录-聚合酶链反应法?酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测?小鼠肥大细胞P815分为对照组和IL-25组,分别予等量培养基和IL-25干预,收集细胞培养上清,用ELISA检测IL-6的水平?结果:哮喘组BALF中细胞总数及EOS计数较对照组显著升高(P < 0.01),小鼠出现呼吸频率加快?烦躁不安等表现,模型建立成功?哮喘组肺组织中IL-25 mRNA?BALF及血清中IL-25表达较正常组显著升高(P < 0.01)?细胞水平的研究发现IL-25组P815上清中IL-6表达较对照组显著升高(P < 0.01)?结论:IL-25在OVA诱导哮喘小鼠模型中表达升高?IL-25刺激肥大细胞分泌IL-6,可能在哮喘的发病中起促进作用?     

Brg1通过STAT6促进哮喘气道黏液高分泌

目的研究染色质重构复合物核心催化亚基（Brg1）对哮喘小鼠气道黏液高分泌的影响及其作用机制。方法将6~8周龄 雌性野生型C57bl/6小鼠和Brg1-/-小鼠（Ⅱ型肺泡上皮细胞AEC2s上特异性条件敲低Brg1的C57bl/6小鼠）随机分为4组：正常 对照组、哮喘组、Brg1敲低对照组（Brg1-/-）和Brg1敲低后构建哮喘模型组（Brg1-/-+哮喘）,每组10只。哮喘组和Brg1-/-+哮喘组用 鸡卵清蛋白（OVA）制备过敏性哮喘模型,对照组用生理盐水代替。收取标本,用ELISA检测小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中 黏蛋白MUC5AC和IL-13的表达。糖原染色检测小鼠气道杯状细胞的增生和黏液分泌,q-PCR和免疫组化检测各组小鼠气道 黏蛋白MUC5AC的表达和定量。Western blot检测各组小鼠肺组织中STAT6、p-STAT6的表达。结果Brg1-/-+哮喘组较哮喘组 气道杯状细胞增生和黏液分泌均显著减少,BALF中IL-13、MUC5AC表达明显降低,肺组织MUC5AC mRNA表达显著降低, 同时肺组织STAT6和磷酸化STAT6显著下调。结论Brg1-/-敲低的小鼠建立哮喘模型时气道黏液分泌较野生型小鼠减轻,其可 能通过影响STAT6从而抑制黏蛋白MUC5AC的表达,抑制支气管哮喘气道黏液高分泌,表明Brg1具有促进哮喘气道黏液高分 泌的作用。