氧化苦参碱对苯巴比妥钠诱导的肝细胞凋亡小鼠肝细胞bcl-2、bax基因表达的影响

目的：探讨氧化苦参碱（OM）阻断苯巴比妥钠（PB）诱导的肝细胞凋亡的机制。方法：105只雄性昆明种小鼠随机分为5组。空白对照组：腹腔注射生理盐水，连续7d，停药12h后处死。PB组：5g/L PB75 mg/kg,1次／d，腹腔注射，连续7d，停药后12h处死。PB撤除组：5g/L PB 75mg/kg,1次／d，腹腔注射，连续6d，停药后36h处死。OM治疗I组：首先腹腔注射5g/L PB 75mg/kg,1次／d；第6d后腹腔注射OM 150mg/kg,3次／d，至停PB后36h，将动物处死。OM治疗Ⅱ组：首先腹腔注射5g/L PB 75mg/kg,1次／d，第6d后腹腔注射OM 75mg/kg,3次／d，至停PB后36h，将所有动物脱颈处死，取出肝脏，体积分数为4％多聚甲醛固定，石蜡包埋。用Tunel法检测肝细胞凋亡，用免疫组化和原位杂交技术检测bcl-2、bax基因的表达。结果：仅PB撤除组Tunel法检测到细胞凋亡。Bcl-2蛋白在OM治疗I、Ⅱ组的表达较PB撤除组显著增强（P＜0．05），在OM治疗I组和Ⅱ组之间差异无统计学意义。Bax蛋白在PB撤除组表达较其他各组显著增强（P＜0．05），而在其他各组之间差异无统计学意义（P＞0．05）。bcl-2、bax基因表达的mRNA阳性信号强度与Bcl-2、Bax蛋白免疫组化反应的强度一致。结论：氧化苦参碱可能通过上调bcl-2基因的表达来阻断肝细胞凋亡。     

柴胡及甘草酸对小鼠肝细胞凋亡的影响

目的：研究柴胡（ＲＢ）及甘草酸（ＧＬ）对小鼠肝细胞凋亡的影响。方法：以肝／体重比，肝组织ＤＮＡ含量，组织学改变及原位凋亡细胞ＴＵＮＥＬ反应为指标，观察ＲＢ（１２．０ｇ／ｋｇ）及ＧＬ（５０ｍｇ／ｋｇ）ｉｐ，１次／８ｈ，对撇除苯巴比胺钠（ＰＢ）后引起的小鼠肝细胞凋亡的影响。结果：与对照组Ｃ相比，ＲＢ组小鼠肝／体重比及肝ＤＮＡ含量无明显回落，组织学检查未见明显凋亡改变，ＴＵＮＥＬ反应阴性，ＧＬ组小鼠肝／     

地锦草黄酮醇诱导U14宫颈癌小鼠肿瘤细胞凋亡作用及其机制

目的 研究地锦草黄酮醇(Euphorbia Humifusa Willd Flavonol, EHWF)诱导U14宫颈癌小鼠肿瘤组织细胞凋亡作用和分子机制。方法 将40只U14宫颈癌小鼠随机分成阴性对照组、环磷酰胺(CTX)阳性对照组、EHWF低剂量组和EHWF高剂量组四组,每组各10只。接种肿瘤24小时后,小鼠灌胃给药,EHWF剂量分别为100 mg/kg和200 mg/kg,连续给药14天。阴性对照组灌服蒸馏水,阳性对照组腹腔注射环磷酰胺(25 mg/kg)。第15天,取肿瘤组织。TUNEL染色检测细胞的凋亡情况;流式细胞仪分析小鼠肿瘤细胞周期与细胞凋亡关系;Western-blot分析Caspase-8、Caspase-3、CyclinD1和P16在凋亡过程中蛋白表达变化。结果 TUNEL染色分析发现高剂量组肿瘤组织中凋亡细胞明显高于对照组。与对照组比较,细胞周期中的S期及G2/M期比例明显降低。凋亡相关蛋白Caspase-8、Caspase-3和P16在高剂量组中表达明显增加,而周期蛋白CyclinD1表达下调。结论 EHWF参与诱导U14宫颈癌小鼠肿瘤细胞凋亡过程。     

大麻提取物对人结肠癌细胞LS174T体内外抑制及诱导凋亡作用

目的：研究大麻提取物在体内外对人结肠癌细胞LS174T的生长抑制及诱导凋亡作用。方法：体外培养结肠癌细胞,加以不同浓度（500,250,125,62.5,31.25μg/mL）的大麻提取物培养72 h,用MTT法检测大麻提取物对结肠癌细胞抗增殖的作用;用DNA末端原位标记染（TUNEL）法检测大麻提取物对结肠癌细胞的诱导凋亡作用;建立结肠癌小鼠模型,将实验动物随机分为五组：空白对照组、阳性药物组、低剂量组（25 mg/kg）、中剂量组（50 mg/kg）、高剂量组（100 mg/kg）,每组5只小鼠,2周后处死动物测定肿瘤的重量和体积。结果：不同浓度的大麻提取物处理细胞72 h后,结肠癌细胞的抑制率分别为（93.12±2.66）%（、74.56±4.62）%（、62.37±3.77）%（、36.84±6.24）%（、19.16±4.24）%,各组间抑制率相比,差异有统计学意义（P〈0.05）;用TUNEL法可检测到典型的结肠癌细胞凋亡形态;在结肠癌小鼠模型上给药组肿瘤生长被抑制,其肿瘤体积、重量均较对照组减小,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：大麻提取物在体内外具有抑制结肠癌细胞LS174T增殖及诱导凋亡的作用,且呈剂量依赖性。     

CAPE-NO2预处理对CCl4引起的小鼠肝损伤的保护作用

目的 研究对硝基咖啡酸苯乙酯(CAPE-NO2)对CCl4诱导的小鼠化学性肝损伤的保护作用.方法 小鼠分为7组,每组10只.分组:正常组,CAPE-NO2(2.0 mg/kg)组,模型组,CAPE(2.0 mg/kg)+CCl4组,CAPE-NO2(2.0 mg/kg)+CCl4组,CAPE-NO2 (1.0 mg/kg)+CCl4组,CAPE-NO2(0.5 mg/kg)+ CCl4组.各组腹腔注射给药15 d,正常组和模型组给生理盐水0.1 mL/10 g.第15天给药结束后,正常组和CAPE-NO2组腹腔注射橄榄油溶液(0.1 mL/10g),其余各组腹腔注射0.15％CCl4橄榄油溶液(0.1 mL/10 g).测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性、三酰甘油(TG)水平,肝组织匀浆谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、过氧化氢酶(CAT)活性.取肝左叶经10％多聚甲醛固定,进行组织病理学检查和TUNEL染色.结果 CAPE-NO2能显著降低CCl4诱导的肝损伤小鼠血清ALT、AST活性、TG水平,升高小鼠肝组织中CAT、GSH-Px的活性,且呈药效剂量依赖性.CAPE-NO2能明显减少肝细胞损伤和降低肝细胞凋亡率,且作用强于CAPE.结论 CAPE-NO2对小鼠化学性肝损伤具有一定的保护作用,机制可能与增强肝细胞抗氧酶的水平,提高机体清除自由基能力和抑制细胞凋亡有关.     

熊果酸缓解酮康唑肝毒作用及机制

目的:探讨熊果酸对酮康唑肝毒作用的影响及机制。方法:酮康唑100 mg/kg灌胃21 d,制作小鼠慢性肝损伤模型。熊果酸高低剂量和双环醇给药7 d,测血清ALT、AST、ALP、TBil值、血糖水平及肝糖原含量;观察肝组织病理变化;单细胞凝胶电泳观察肝细胞核DNA完整性;流式细胞术测定肝细胞凋亡率和细胞周期。结果:酮康唑组sALT、sAST、ALP和肝指数均明显高于生理盐水对照组(P<0.01),TBil水平无明显改变,肝细胞广泛变性坏死,肝组织内脂质大量堆积,彗星电泳显示肝细胞核DNA片段化明显,流式细胞仪检测结果表明肝细胞凋亡坏死率明显高于空白对照组(P<0.05),肝细胞G2/M期停滞。熊果酸400 mg/(kg.d)可明显降低酮康唑所致sALT、sAST、ALP水平和肝指数的上升,使脂质沉积减少,肝细胞坏死程度降低,彗星样肝细胞出现减少,彗星尾长缩短,肝细胞凋亡坏死率降低,肝细胞G2/M期停滞明显改善。结论:熊果酸能减轻酮康唑引起小鼠肝毒作用。其机制可能与减少脂质堆积,保护肝细胞DNA完整或有助于DNA修复有关。     

Effect of oxymatrine on murine fulminant hepatitis and hepatocyte apoptosis

目的　观察氧化苦参碱 (oxymatrine ,OM)对实验性小鼠暴发型肝炎 (fulminanthepatitis,FH)及其早期肝细胞凋亡的保护作用 ,并研究其药理机制。方法　腹腔注射 (ip)脂多糖 (LPS) +氨基半乳糖 (GalN)造成小鼠FH模型。两次实验均设生理盐水对照组、暴发型肝炎组和OM预保护组 (5 0mg/kg ,ip ,bid× 3d)。分别于注射GalN/LPS后 5h、7 5h取血清检测肿瘤坏死因子(TNFα) ,同时在 5h点取肝组织作原位凋亡细胞检测 ,并于电镜下观察凋亡细胞超微结构 ;在 7 5h点取肝组织作HE染色及Fas及其配体 (FasL)的免疫组化检测。结果　与模型组相比 ,OM治疗组 5h、7 5h点TNFα水平明显减低 (P <0 0 5和 0 0 1) ,5h点肝细胞凋亡亦明显减少 (P <0 0 1)。OM组 7 5h点肝组织损伤及Fas、FasL表达程度均较模型组减轻 (P <0 0 1和P <0 0 5 )。结论　OM对GalN/LPS诱导的小鼠FH有保护作用 ,其机制可能为抑制TNFα释放及Fas、FasL表达 ,从而阻断肝细胞凋亡及坏死。     

光气对小鼠肺上皮细胞和内皮细胞凋亡的诱导作用

目的 研究光气对肺水肿小鼠肺上皮细胞和内皮细胞凋亡的诱导作用。方法 将32只BALB/C小鼠随机分成正常对照组(16只)和染毒组(16只)2组。正常对照组小鼠以空气为对照,染毒组小鼠给予11.9mg/L剂量的光气,时间为5min。染毒后4h,取小鼠分离、培养肺Ⅱ型细胞用于电镜观察和流式细胞仪检测细胞凋亡,取小鼠肺脏进行DNA琼脂糖凝胶电泳和TUNEL染色检测肺组织凋亡。结果 光气染毒肺水肿小鼠电镜下原代肺Ⅱ型细胞出现凋亡小体;流式细胞术显示肺Ⅱ型细胞凋亡率(40.26±7.74)显著高于正常对照组(1.58±1.01,P<0.001);DNA琼脂糖凝胶电泳出现"DNA梯状改变";TUNEL染色检测到肺上皮细胞和血管内皮细胞凋亡。结论 光气染毒可造成肺水肿小鼠肺脏细胞发生凋亡,提示光气造成小鼠肺水肿的发生机制存在细胞凋亡的诱导作用。     

高活性小牛血去蛋白提取物对四氯化碳致急性肝损伤模型小鼠的保护作用

目的：观察小牛血去蛋白提取物（DECB）对四氯化碳（CCl₄）所致肝损伤小鼠的保护作用,初步探讨其作用机制。方法：健康ICR种小鼠40只,随机分组法分为对照组、模型组、DECB组和阳性药物组,每组10只。各组小鼠腹腔灌胃给药,对照组和模型组小鼠给予生理盐水20 mL·kg^-1,DECB组小鼠给予DECB 1 g·kg^-1,阳性药物组小鼠给予护肝片0.63 g·kg^-1,每天1次,连续30d;末次给药2 h后,对照组小鼠腹腔注射调和油溶液,其余各组小鼠腹腔注射10% CCl₄调和油溶液（10 mL·kg^-1）并禁食,建立CCl₄致急性肝损伤模型。测定各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性和肝组织总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽（GSH）及丙二醛（MDA）水平;HE染色法观察小鼠肝组织病理表现;TUNEL方法检测小鼠肝细胞凋亡。结果：与模型组比较,DECB组和阳性药物组小鼠血清中ALT和AST活性及肝组织中MDA和GSH水平明显降低（P<0.05）,T-SOD水平明显升高（P<0.05）;与模型组比较,DECB组和阳性药物组小鼠肝组织病理学损伤明显减轻,凋亡细胞数明显减少。结论：DECB对CCl₄诱导急性肝损伤小鼠具有保护作用,可以增强肝脏抗氧化能力,抑制肝细胞凋亡,其机制可能与减少氧自由基和抑制脂质过氧化有关。     

链脲佐菌素诱导急性非糖尿病小鼠胰岛β细胞凋亡模型的建立

目的：以非致糖尿病的小剂量链脲佐菌素（STZ）诱导 BABL/ C 小鼠胰岛β细胞发生凋亡,建立小鼠急性损伤胰岛细胞凋亡的模型,明确其诱导胰岛β细胞凋亡的发生规律,为胰岛β细胞凋亡相关研究提供在体模型。方法选取 BABL/ C 小鼠,分别予生理盐水（对照组）及60、80、100 mg/ kg 小剂量 STZ 一次性腹腔注射（实验组）,观察时点分别为干预后6、12和24 h,动态观察指标为血糖、胰腺 HE 染色观察病理改变以及末端脱氧核苷酸转移酶介导的 dUTP 缺口标记技术（ TUNEL）检测胰岛β细胞凋亡。结果在所有测试时点血糖均在6～11 mmol/ L 范围内波动,未达到糖尿病模型范畴,TUNEL 凋亡检测发现：与对照组相比,实验组各时点的胰岛β细胞凋亡率均明显升高（P ＜0.05）;各实验组均在12 h 时点凋亡率达到最高峰,并且80 mg/ kg 组与60 mg/ kg、100 mg/kg 组相比明显升高（P ＜0.05）。结论非致糖尿病的小剂量 STZ 可成功构建急性非糖尿病小鼠胰岛β细胞凋亡模型,凋亡高峰期在注射后12 h 时点。     

清开颗粒对急性肝衰竭小鼠肝细胞凋亡和Caspase-3表达的影响

目的:研究急性肝衰竭小鼠肝细胞凋亡和Caspase-3表达的变化及清开颗粒对其影响,探讨清开颗粒防治急性肝衰竭的作用机制。方法:以Ga1N LPS染毒昆明小鼠造成急性肝衰竭动物模型。分别以大、中、小剂量清开颗粒进行干预,并以大、中、小剂量促肝细胞生长颗粒(HGF)作为阳性对照,采用TUNEL染色观察肝细胞凋亡,RT-PCR检测Caspase-3 mRNA表达,采用免疫印迹方法(Western Blot)检测Caspase3表达。结果:清开颗粒各组凋亡细胞数均较HGF各组明显减少(P<0.05);清开颗粒中、高剂量组Caspase-3 mRNA表达明显低于HGF低、中剂量组(P<0.05);清开颗粒各组活化的Caspase3表达较HGF低、中剂量组显著降低(P<0.05)。结论:清开颗粒能减少内毒素肝损伤小鼠肝细胞凋亡、下调肝细胞Caspase-3的表达,提示其抑制肝细胞凋亡可能是其防治急性肝衰竭的机制之一。     

灵芝及其与丹参、五味子、柴胡配伍对小鼠实验性肝损伤的影响

目的　探讨灵芝醇提物分别与柴胡、丹参、五味子醇提物配伍后对小鼠实验性肝损伤的保护作用。方法　分别采用四氯化碳 (CCl4 )或D 氨基半乳糖 (D GlaN)诱导的小鼠肝损伤模型 ,给予同一剂量的药物 ,测定血清及肝组织ChE和ALT活性 ,肝组织MDA、ALP、GSH含量 ,VG染色观察肝组织形态学变化。结果　CCl4 所致小鼠血清ALT急剧升高 ,ChE显著下降 ,灵芝及灵芝 +五味子、灵芝 +柴胡组有显著降低和升高作用 ;灵芝各配伍组可显著抑制GSH的升高 ,对MDA的升高只有灵芝 +五味子可显著抑制 ,使其降至正常水平。对D GlaN所致模型组的ChE活性影响不明显 ;灵芝组可使显著升高的ALT活性明显降低 ;对GSH的升高 ,灵芝 +丹参有影响 ,但差异无显著性。灵芝及灵芝各配伍组对升高的MDA有显著降低作用 (P <0 .0 1) ,病理切片观察表明 ,灵芝及灵芝 +五味子组对肝细胞的损伤有较好的修复作用。结论　灵芝对实验性肝损伤有一定的保护作用 ,与五味子配伍作用更明显。这一作用机制可能与抗肝细胞氧化损伤有关     

清毒汤对实验性重症肝损伤大鼠Bax蛋白及Bcl-2蛋白表达的影响

目的 观察清毒汤对实验性重症肝损伤大鼠Bax、Bcl-2蛋白的表达以及肝细胞凋亡的影响,探讨该方对慢性重型肝炎（chronic severe hepatitis,CSH）大鼠肝细胞凋亡作用机制。方法 建立硫代乙酰胺（thioacetamide,TAA）致实验性大鼠重症肝损伤模型,给予清毒汤干预后,用原位细胞凋亡技术法检测大鼠肝细胞凋亡指数（apoptotic index,AI）、蛋白免疫印迹法检测大鼠肝组织中Bax、Bcl-2蛋白表达的水平。结果 与正常组比较,模型组AI显著增高（P<0.05）,清毒汤各组较模型组AI明显降低,（P<0.01或P<0.05）。清毒汤对实验性肝损伤大鼠模型Bax蛋白表达具有抑制作用（P<0.01）,对Bcl-2蛋白表达具有促进作用（P<0.01）,能够提高Bcl-2/Bax的比值（P<0.01）。结论 清毒汤可以调控Bax、Bcl-2蛋白表达量、降低AI,减轻肝细胞的凋亡和坏死。     

锌转运体ZIP13在小鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用

目的:探讨锌转运体ZIP13（SLC39A13）在肝脏缺血再灌注损伤中的作用及机制。方法:通过结扎肝左叶和肝中叶的门静脉及肝动脉共干,建立小鼠在体肝脏缺血再灌注模型,将小鼠分组如下:（1）ZIP13fl/fl-Sham组、ZIP13fl/fl+I1R12组和ZIP13LKO+I1R12组。（2）ZIP13fl/fl-Sham组、ZIP13fl/fl+I1R24组和ZIP13LKO+I1R24组。（3）Vector-Sham组、Vector+I1R12组和ZIP13OE+I1R12组。（4）Vector-Sham组、Vector+I1R24组和ZIP13OE+I1R24组,上述每组小鼠3～4只。采用电感耦合离子发射光谱仪（ICP-OES）测量肝组织的锌含量;试剂盒检测丙氨酸转氨酶（ALT）和门冬氨酸转氨酶（AST）水平;HE染色观察病理学改变;原位末端转移酶标记法（TUNEL法）检测细胞凋亡;Western印迹检测CHOP、GRP78和凋亡蛋白表达。结果:与ZIP13fl/fl小鼠相比,ZIP13LKO小鼠肝脏中ZIP13表达明显下降（t=6.26,P<0.01）,而与Vector感染对照小鼠相比,ZIP13OE小鼠肝脏ZIP13蛋白表达明显增加（t=4.17,P<0.05）。与ZIP13fl/fl-Sham组相比,ZIP13fl/fl+I1R12组血清ALT、AST水平升高（t= 11.43、13.70,均P<0.001）,ZIP13fl/fl+I1R24组小鼠肝组织锌含量明显降低（t=13.49,P<0.001）,内质网应激蛋白CHOP和GRP78表达增强（t=4.76、4.54,均P<0.05）,凋亡蛋白Cleaved Caspase9和Cleaved Caspase3表达升高（t=4.56、3.73,均P<0.05）。与相应的ZIP13fl/fl缺血再灌注组相比,ZIP13LKO+I1R12组血清ALT、AST水平进一步升高（t=2.95、3.20,均P<0.05）,ZIP13LKO+I1R24组肝组织中锌含量显著降低（t=3.29,P<0.05）,内质网应激蛋白表达上调（t=2.60、2.98,均P<0.05）,凋亡蛋白表达也明显升高（t=3.44、2.49,均P<0.05）。与相应的Vector感染缺血再灌注组相比,ZIP13OE+I1R12组血清ALT、AST水平明显下降（t=3.69、4.26,均P<0.05）,ZIP13OE+I1R24组小鼠肝组织中锌含量增加（t=3.88,P<0.05）,内质网应激蛋白表达下降（t=3.47、2.88,均P<0.05）,凋亡蛋白的表达水平也呈现降低（t=3.02、2.96,均P<0.05）。结论:肝脏缺血再灌注时,ZIP13通过维持肝脏锌稳态,减轻内质网应激和细胞凋亡。     

不同剂量虫草对肝纤维化小鼠肝脏TGF-β1、Smad3的影响

目的明确不同剂量冬虫夏草对四氯化碳小鼠肝纤维化的作用及对TGF-β1mRNA、Smad3蛋白表达的影响。方法四氯化碳(CCl4)皮下注射复制BALB/c小鼠肝纤维化模型,虫草组在造模同时予以不同剂量虫草煎剂,直至造模结束。HE染色观察肝组织炎症,天狼猩红染色观察肝脏胶原沉积,生化法测定肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量,免疫组化测定Smad3在肝脏内的表达,RT-PCR测定TGF-β1mRNA在肝脏内的表达。结果与正常小鼠比较,肝纤维化小鼠肝脏肝静脉与汇管区周围肝细胞明显脂肪变性,肝脏胶原沉积,可见纤维间隔形成,肝脏Hyp含量、TGF-β1mRNA、Smad3蛋白表达量均显著增加。与模型组比较,虫草组肝脏炎症与胶原沉积减轻,TGF-β1mRNA、Smad3蛋白表达量明显降低,以虫草高剂量组为明显。结论肝纤维化BALB/c小鼠的肝脏TGF-β1mRNA、Smad3蛋白表达明显上升,虫草制剂有良好的抗肝纤维化作用,高剂量虫草有着更好的抗肝纤维化作用,其作用机制与下调Smad3蛋白及TGF-β1mRNA表达有关。     

胃肠外营养相关肝损伤机制的实验研究

目的建立幼兔胃肠外营养(PN)相关肝损伤模型,探讨氧化损伤及凋亡在PN相关肝损伤机制中的作用。方法20只新西兰种白兔随机分为对照组(母乳喂养,n=10)和PN组(n=10),PN组经右颈静脉置入硅胶管,连续24 h输注静脉营养液,10 d后比较两组间血清肝功能生化指标、肝脏病理变化及电镜下肝细胞细胞器的变化。用比色法检测肝细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性;硫代巴比妥酸法测定肝组织丙二醛(MDA)水平;免疫印迹法检测肝细胞线粒体释放细胞色素C活性;ELISA法检测肝细胞caspase-3活性;原位末端标记法检测肝细胞凋亡。结果PN组血清胆汁酸、总胆红素、MDA水平和细胞色素C、caspase-3活性及肝细胞凋亡指数均明显高于对照组(P<0.01);而SOD活性却显著低于对照组(P<0.01)。PN组肝脏病理学观察可见门脉区炎症细胞浸润,有肝细胞变性、坏死或胆汁淤积;电镜下主要表现为胞浆空泡样变,毛细胆管微绒毛稀疏等。结论PN肝脏损伤机制可能是PN某些配方成分应用中,脂质过氧化导致肝细胞氧化损伤,同时损伤线粒体膜,促使线粒体膜通透性增加,释放细胞色素C等凋亡相关因子,激发caspase-3等级联反应,产生肝细胞凋亡,导致肝损伤。     

The effect of blockage of macrophage on tumor-suppressive activity of polyactin B

OBJECTIVE To investigate the tumor-suppressive activity of polyactin B (PB) and the life-span of tumor bearing mice treated with PB and the anti-tumor mechanisms of PB by blockage of macrophage in vivo.

METHODS Thirty-two S180 sarcoma-bearing (s.c.) BALB/c inbred mice were divided into 4 groups, i.e., control group (8 mice), PB group (8), Trypan blue (TrB) group (8) and PB + TrB group (8). Five days after PB injection (i.p.), the tumor size of the mice was measured, and the ratio of TNA to TTA in HE section of the tumor maximal area was calculated and the pathological features of the tumors were observed. Forty S180 sarcoma-bearing (i.p.) ICR mice, which were randomly divided into 4 groups as above, were used for observation of the life-span.

RESULTS PB could strongly inhibit the growth of S180 sarcoma with the tumors regressing completely in 3 of 8 mice, prolong the life-span of mice bearing S180 sarcoma, increase the infiltration of macrophages and lymphocytes in the periphery and inside of the tumors. In addition, there were more prominent hemorrhagic necrosis, neutrophil infiltration and microthrombi in small vessels around the necrotic areas in the tumors of PB treated group. The tumor-suppressive effect of PB disappeared after macrophage system blockage with TrB. In PB + TrB, TrB, control and PB groups, the size of tumors reduced, and the life-span of mice increased in successive order.

CONCLUSIONS (1) PB is a strong activator of macrophage. (2) In vivo the tumor-suppressive effect of PB is initially mediated by PB activated macrophage system. Then other immunocompetent cells, e.g., T-cells, NK-cells, etc, activated directly and/or indirectly by PB, may play a very important role in tumor suppression. (3) PB-activated macrophages are more sensitive to TrB blockage. Therefore, using TrB + PB to block macrophage system is more effective than TrB alone. (4) Blockage of macrophage function might influence the life-span of the mice.

     

萱草花黄酮对酒精性肝损伤氧化应激及肝细胞凋亡机制的探讨

目的 探讨萱草花黄酮对急性酒精性肝损伤小鼠肝细胞凋亡及相关蛋白表达的影响.方法 40只小鼠分为4组,分别为空白对照组、模型对照组和萱草花黄酮低、高剂量组,每组各10只.连续灌胃给药7d,末次给药1h后,造模组小鼠一次性灌胃50％乙醇12 mL/kg,空白对照组给予同体积蒸馏水.测定各组小鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性;肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;HE染色观察肝脏病理学改变;利用流式细胞仪检测肝细胞悬液中细胞凋亡率;Western blot检测肝细胞caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 萱草花黄酮各组可降低血清AST、ALT活性;还可降低肝组织匀浆MDA水平,提高SOD的活性;肝组织病理学检查可见,萱草花黄酮高剂量组可使肝细胞变性、坏死的程度明显减轻,缓解肝组织的病理学改变;与模型组比较,萱草花黄酮各组肝细胞的凋亡率均有明显下降;Western blot结果显示萱草花黄酮各组caspase-3蛋白水平降低,Bcl-2蛋白表达增加,而Bax蛋白表达减少,Bax/Bcl-2比值降低.结论 萱草花黄酮对小鼠急性酒精性肝损伤具有明显的保护作用并且能够抑制肝细胞凋亡,其作用机制可能与其抗氧化作用及调节凋亡相关蛋白caspase-3、Bcl-2和Bax的表达有关.