PWM激活的淋巴细胞亚群的功能研究

应用放射性标记化合物渗入法研讨ＰＷＭ诱导人血淋巴细胞亚群的功能及其调节。实验表明，ＰＷＭ细胞对ＬＰＳ激活的Ｂ细胞转化有促进作用，受４０Ｇｙ辐照后，它的作用显著下降，但仍有一定加强效应。ＰＷＭ细胞对ＰＷＭ激活的淋巴细胞转化的促进作用不明显，对ＣｏｎＡ和ＰＨＡ激活的细胞无效。用玫瑰花环法分离Ｔ、Ｂ细胞，ＣＤ４、ＣＤ８和Ｂ３株单克隆抗体（ＭｃＡｂ），以亲和层析和Ｐａｎｎｉｎｇ法分离各淋巴细胞亚群，分别研     

过敏性哮喘患者T细胞亚群与减敏治疗后变化

用单克隆抗体－ＡＢＣ法检测２１例过敏性哮喘病人的外周血Ｔ淋巴细胞ＣＤ４、ＣＤ８亚群，观察其中１０例病人在特异性减敏治疗３个月后Ｔ淋巴细胞ＣＤ４、ＣＤ８亚群的变化。结果显示：①哮喘病人ＣＤ８细胞低于正常人（Ｐ＜０．０１），ＣＤ４／ＣＤ８升高，揭示哮喘病人存在Ｔ淋巴细胞亚群失衡现象，②在用特异性减敏治疗３个月后，ＣＤ８细胞增加（Ｐ＜０．０５），ＣＤ４／ＣＤ８降低。提示特异性减酶治疗可纠正哮喘病人的Ｔ淋巴细胞失衡。     

过敏性哮喘患者T细胞亚群与减敏治疗后变化

用单克隆抗体－ＡＢＣ法检测２１例过敏性哮喘病人的外周血Ｔ淋巴细胞ＣＤ４、ＣＤ８亚群，观察其中１０例病人在特异性减敏治疗３个月后Ｔ淋巴细胞ＣＤ４、ＣＤ８亚群的变化。结果显示：①哮喘病人ＣＤ８细胞低于正常人（Ｐ＜０．０１），ＣＤ４／ＣＤ８升高，提示哮喘病人存在Ｔ淋巴细胞亚群失衡现象，②在用特异性减敏治疗３个月后，ＣＤ８细胞增加（Ｐ＜０．０５），ＣＤ４／ＣＤ８降低。提示特异性减敏治疗可纠正哮喘病人的Ｔ淋     

反流性肾病患儿T淋巴细胞免疫活性的变化及其意义

目的：探讨细胞免疫在反返流性肾病（ＲＮ）发病中的作用。方法：通过流式细胞（ＦＣＭ），应用单标和双标免疫荧光法，利用单顾隆抗体测定１２例ＲＮ患儿外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）表面膜抗原，从而分析ＲＮ患者Ｔ淋巴亚群及茯活化情况。结果：Ｔ淋巴细胞亚群ＣＤ３、ＣＤ４与正常组相仿，ＣＤ８增高，ＣＤ４／ＣＤ８比值低于正常；Ｔ细胞ＣＤ２５高于正常，Ｔ细胞亚群活化表达ＣＤ３ＣＤ２４５、ＣＤ４ＣＤ２５、ＣＤ８ＣＤ２５     

NIDDM患者外周血T淋巴细胞亚群的变化

测定４８例ＮＩＤＤＭ患者的外周血Ｔ淋巴细胞亚群，结果显示ＣＤ＿３、ＣＤ＿４、ＣＤ＿８值均降低，与正常对照组比较，差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。提示ＮＩＤＤＭ患者有Ｔ淋巴细胞功能缺陷。并讨论ＮＩＤＤＭ患者Ｔ细胞亚群变化的可能原因。     

肝癌患者外周血NK和LAK活性及T细胞亚群的变化

采用３ＨＴｄＲ释放法测定了２０例肝癌患者的外周血自然杀伤细胞（ＮＫ）活性及淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ）活性，同时用ＡＢＣ法检测其外周血Ｔ细胞亚群变化。结果显示，肝癌患者的外周血ＮＫ和ＬＡＫ活性显著低于正常人（Ｐ＜０．０１），Ｔ细胞亚群ＣＤ３及ＣＤ４细胞减少（Ｐ＜０．０１），ＣＤ８细胞增多（Ｐ＜０．０１），ＣＤ４／ＣＤ８比值显著降低（Ｐ＜０．０１）且出现倒置。上述结果提示肝癌患者细胞免疫功能出现紊乱及免疫活性细胞功能有缺陷。     

慢性肾功能衰竭患者外周血T淋巴细胞亚群变化的观察

检测３０例慢性肾功能衰竭患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群的变化。结果显示：ＣＲＦ患者Ｔ淋巴细胞总数（ＣＤ３）、辅助性Ｔ细胞（ＣＤ４）、ＣＤ４／ＣＤ８明显低于正常对照组（Ｐ＜０．０１）；ＣＤ３、ＣＤ４与ＢＵＮ、ＳＣｒ呈负相关，抑制性Ｔ细胞（ＣＤ８）与ＢＵＮ、ＳＣｒ呈正相关。提示ＣＲＦ患者细胞免疫功能低下；Ｔ淋巴细胞亚群的变化可作为肾功能状况的指标。     

多发性肌炎和皮肤炎肌组织浸润的单个核细胞亚群分析

目的探讨多发性肌炎（ＰＭ）和皮肌炎（ＤＭ）骨骼肌组织损伤的免疫机制。方法应用抗单个核细胞（ＭＮＣ）亚群的系列单克隆抗体进行免疫组化ＳＰ法染色，分析１８例ＰＭ／ＤＭ肌组织ＭＮＣ亚群的分布和定位。结果１０例ＰＭ中８例肌组织有单个核细胞浸润（８０％），Ｔ淋巴细胞最多，巨噬细胞次之，Ｂ细胞最少，主要分布于肌内衣和肌束衣结缔组织中，Ｔ细胞亚群以ＣＤ８＋Ｔ为主，ＣＤ８＋／ＣＤ４＋比值为０．２５±０．０６７，并见表达Ｉａ抗原的激活Ｔ８细胞侵入肌纤维；７５％ＤＭ肌组织有单个核细胞浸润，以Ｂ细胞为主，Ｔ细胞次之，ＣＤ８＋／ＣＤ４＋比值为０．９３±０．２６，主要分布于肌束衣血管周围。结论免疫反应参与ＰＭ和ＤＭ病变过程，ＰＭ以Ｔ细胞介导的细胞毒作用为主，ＤＭ以体液免疫为主。     

胰岛素依赖型糖尿病患者T淋巴细胞亚群的观察

目的探讨胰岛素依赖型糖尿病（ＩＤＤＭ）患者外周血Ｔ淋巴细胞各亚群的变化。方法本研究采用ＳＰＡ间接花环法，测定了３４例病程为０．５～１．５ａ的ＩＤＤＭ患者和５０例正常人外周血Ｔ淋巴细胞亚群。结果显示两组间ＣＤ４无显著性差异，而ＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ４／ＣＤ８的差异有显著性。可见，外周血Ｔ淋巴细胞亚群失衡，特别是ＣＤ８数目减少，是ＩＤＤＭ发病的一个重要因素。     

慢性活动性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群与血清HBV—DNA的关系

对３３例血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性，３９例ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性的ＣＡＨ－Ｂ患者检测外周血Ｔ淋巴细胞亚群。结果显示：７２例患者的ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ４／ＣＤ８比值均明显低于正常人（Ｐ〈０．０１）；ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性组的ＣＤ４低于正常人（Ｐ〈０．０１）又高于ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性组（Ｐ〈０．０５）。提示，慢性ＨＢＶ感染可抑制Ｔ淋巴细胞亚群的增殖，而Ｔ淋巴细胞亚群的增殖低下、分化异常，尤其是ＣＤ４，又削弱     

THANK作用下T淋巴细胞的功能及表型分析

目的 观察THANK对T淋巴细胞的免疫调节功能。方法 在克隆和表达THANK基因的基础上,将THANK蛋白作用于B、T淋巴细胞,用^3H-TdR掺入法检测其对B、T淋巴细胞的共刺激作用,并用流式细胞仪观察THANK对T细胞的功能调节。结果 THANK除可共刺激B细胞的生长外;还可增强抗CD3单抗所引起的T细胞增殖,使外周成熟T细胞向效应功能转化,并可诱导活化后的T细胞,尤其是CD4^ T细胞,凋亡及其表型变化。结论 THANK可调节T细胞表型及功能变化。     

免疫磁珠法检测系统性红斑狼疮患者外周血T淋巴细胞亚群及其意义

目的探求系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血T淋巴细胞CD4、CD8亚群细胞数目的变化.方法采用免疫磁珠方法(magnetic activated cell sorting,MACS)分离SLE患者外周血CD4、CD8 T淋巴细胞并计数.结果SLE患者CD4及CD4/CD8较正常对照明显减少(CD4,P=0.001;CD4/CD8,P=0.046),CD8细胞无明显差异.结论SLE患者T淋巴细胞CD4及CD8亚群及两者的平衡关系存在异常,其中以CD4 T细胞减少更加显著.     

人外周血白介素-22产生细胞在不同淋巴细胞亚群中的比例

目的:采用流式细胞术(flow cytom etry,FCM)检测人外周血不同淋巴细胞亚群中白介素-22(IL-22)产生细胞的比例。方法:健康人外周全血用肝素抗凝管采集后与相同体积RPM I 1640培养液混匀,加入佛波酯和离子霉素,于37℃、5% CO₂静置培养2 h,再加入莫能霉素后继续培养4 h收集细胞。用荧光素标记单抗进行细胞表面抗原和胞内细胞因子染色,用FCM检测表达IL-22、IL-17的细胞在不同淋巴细胞亚群中的比例。结果:IL-22产生细胞在CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、自然杀伤(NK)细胞和B细胞的表达比例分别为1.83%、2.12%、0.67%、1.96%和1.09%,CD4+T细胞中的比例明显高于CD8+T细胞中的比例(P<0.01)。另外,在CD3+T细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞中,均检测到共表达IL-22和IL-17的细胞,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:用FCM检测IL-22产生细胞在CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞和B细胞均有表达,在CD4+T细胞的比例明显高于CD8+T细胞。     

皮肌炎/多发性肌炎相关间质性肺病患者支气管肺泡灌洗液淋巴细胞分析

目的 探讨皮肌炎/多发性肌炎相关性间质性肺病(DM/PM-ILD)患者支气管肺泡灌洗液(BALF)中淋巴细胞计数及不同淋巴细胞亚群的分布特征,为进一步研究DM/PM-ILD发病机制提供理论依据。 方法 2013年1月-9月安徽省立医院收治的16例DM/PM-ILD患者行经支气管肺泡灌洗,获得BALF,并行总细胞计数及分类细胞计数。流式细胞术检测BALF及外周血中淋巴细胞亚群(CD3+总T细胞、CD3+CD4+ T细胞、CD3+CD8+ T细胞、CD3-CD16+CD56+ NK细胞、CD3-CD19+ B细胞),计算每种淋巴细胞亚群百分比。比较DM/PM-ILD患者与正常对照BALF中细胞总数及各淋巴细胞亚群百分比。比较DM/PM-ILD患者BALF与外周血各淋巴细胞亚群百分比。 结果 DM/PM-ILD患者外周血不同淋巴细胞百分比大多均正常;BALF细胞总数较正常对照显著增多,明显淋巴细胞占优势(每例均>15%)。DM/PM-ILD患者BALF中CD3+总T细胞和CD8+ T细胞百分比较正常对照显著增加,并且较外周血中百分比显著增加;DM/PM-ILD患者BALF中NK细胞百分比较正常对照显著下降,B细胞百分比与正常对照差异无统计学意义,两者均较外周血中显著下降。 结论 DM/PM-ILD患者BALF中存在明显的淋巴细胞计数增多和淋巴细胞亚群比例失调,其中CD8+ T细胞明显增加,可能在DM/PM-ILD形成中发挥重要作用。      

病原体抗原刺激的正常人外周血CD4^＋T细胞对γδT细胞的影响

CD4 T辅助（Th）细胞和γδT细胞在抗微生物感染中发挥着重要作用，两者相互作用有待阐明。本文报道以胞内感染体结核杆菌、人类VI型疱疹病毒及胞外寄生虫阴道毛滴虫刺激活化从正常人外周血经洗淘法分离纯化的CD4 T细胞，结果各组活化的细胞均表现明显增殖和产生以白介素-2（IL－2）、γ干扰素（IFN－γ）显著升高为主的Th1型细胞因子分泌谱。利用细胞隔离渗透性共培养体系，将抗原活化的CD4 T细胞和γδT细胞共培养，结果显示γδT细胞的增殖和细胞毒作用均可为CD4 T细胞产生的可溶性因子所显著增强。这提示在抗感染免疫中，CD4 Th1细胞可通过Th1型细胞因子促进γδT细胞功能。     

HBV转基因小鼠体内淋巴细胞表型特点及干扰素α对其的影响

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）转基因小鼠体内淋巴细胞表型特点及干扰素α对其病毒学指标和免疫细胞表型的影响。 方法选取HBV 转基因小鼠和野生型（WT）小鼠,采用ELISA检测HBV转基因小鼠血清HBsAg和HBcAb水平及两组小鼠血 清IL-21及IL-6水平,分离肝、脾以及外周血淋巴细胞,流式细胞术检测CD4+T和CD19+B细胞频数;给予9只HBV转基因小鼠 重组鼠源性干扰素α（rmIFN-α）皮下注射,同时9只HBV转基因小鼠相应注射PBS,观察其血清HBsAg、HBV DNA、IL-6、IL-21 水平的变化以及外周血CD4+T和CD19+B细胞频数变化。结果HBV转基因小鼠的血清HBsAg水平较高并能检测到HBcAb, 其血清IL-21及IL-6水平较WT小鼠显著升高（P<0.05）;HBV转基因小鼠外周血、肝脏以及脾脏淋巴细胞中CD4+T细胞频数较 WT小鼠均明显低下（P<0.05）,但其肝脏CD19+B细胞频数明显高于WT小鼠（P<0.05）;HBV转基因小鼠肝内CD4+T细胞频数 与血清HBsAg水平呈负相关,而肝内CD19+B细胞频数与血清HBcAb水平呈正相关;rmIFN-α处理可显著提高HBV 转基因小 鼠外周血CD4+T和CD19+B细胞频数以及血清IL-6水平（P<0.05）。结论HBV转基因小鼠体内淋巴细胞亚群频数异常,外源性 干扰素α可通过调节淋巴细胞亚群频数发挥免疫调节作用。     

利妥昔单抗联合化疗治疗非霍奇金淋巴瘤后淋巴细胞亚群的动态观察

目的观察并分析非霍奇金淋巴瘤患者治疗前及经利妥昔单抗联合化疗治疗后6个月外周血淋巴细胞亚群的动态变化。方法应用流式细胞术分别检测健康志愿者40例、初治患者26例及经利妥昔单抗联合化疗患者16例6个月后外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞亚群及自然杀伤(NK)细胞的比例。结果与正常对照组比较,非霍奇金淋巴瘤患者化疗前外周血中CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+淋巴细胞亚群计数无统计学差异(P>0.05),CD19+淋巴细胞明显降低,而NK细胞则高于正常对照组(P<0.05);利妥昔单抗联合化疗后CD19+淋巴细胞较治疗前明显降低(P<0.05),而T淋巴细胞亚群及NK细胞计数无统计学差异(P>0.05)。结论利妥昔单抗联合化疗能够迅速有效地抑制B淋巴细胞淋巴瘤的恶性克隆增殖,在短期内,对机体T淋巴细胞及NK细胞的影响不大,本组病例随访时间仅6个月,有待于继续观察随访。     

流式细胞术检测过敏性紫癜患儿外周血调节性T细胞的研究

目的 了解过敏性紫癜(HSP)患儿外周血调节性T细胞数量的改变及其在过敏性紫癜患儿免疫功能紊乱中的调控作用.方法 应用四色流式细胞术,对35例过敏性紫癜患儿和35例正常儿童的CD4+CD25hi调节性T细胞、CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+辅助T细胞、CD3+CD8+抑制T细胞、CD19+B淋巴细胞、CD3-CD16+56+NK细胞进行测定.结果 HSP患儿外周血CD4+CD25hi调节性T细胞、CD3+CD4+辅助T细胞、CD3-CD16+56+NK细胞的百分率下降均明显低于对照组;CD19+B淋细胞的百分率则显著增高;而两组间CD3+T淋巴细胞、CD3+CD8+抑制T细胞的变化差异无统计学意义.结论 HSP患儿体内存在细胞及体液免疫功能紊乱,CD4+CD25hi调节性T细胞具有维持自身免疫耐受和调节免疫应答的功能,其数量下降可能是导致过敏性紫癜发病的重要原因之一.     

B7-H4对宫颈癌患者外周血活化T细胞增殖、凋亡和分泌细胞因子的影响

目的：观察重组人 B7-H4蛋白对宫颈癌患者外周血 T 细胞增殖周期、凋亡及分泌细胞因子的影响。方法B7-H4分别与15例宫颈癌患者外周血活化淋巴细胞混合培养48 h 后,采用流式细胞术分析 T 细胞增殖、细胞周期、凋亡及各亚群 T 细胞的变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)芯片检测培养上清液细胞因子含量。结果宫颈癌患者外周血 T 细胞与 B7-H4混合培养48 h 后,G1、G2和 S 期的 T 细胞分别占90.59%、8.55%和0.87%,空白对照组 T 细胞各期占92.83%、6.09%和1.13%;B7-H4组 CD4+ T 和 CD8+ T 细胞的 Ki67阳性率分别为2.13%±0.13%和1.03%±1.33%,空白对照组为2.74%±0.98%和1.71%±1.32%。B7-H4组较空白对照组 CD8+ T 和 CD4+ T 细胞占 T 细胞的比例下降,但 CD4+ T/CD8+ T 比值增高,CD4+ CD25+Foxp3+ T 细胞增多;B7-H4组混合培养上清液中 TGF-β1含量为(259.25±32.78)pg/mL,空白对照组为(202.75±20.17)pg/mL。B7-H4对宫颈癌患者外周血活化 T 细胞凋亡无明显影响。结论B7-H4使宫颈癌患者外周血活化 T 细胞被阻滞于 G2期, S 期细胞明显减少;B7-H4抑制 CD4+ T 和 CD8+ T 细胞增殖,但对 Foxp3+ T 细胞增殖和分泌 TGF-β1可能有促进作用;B7-H4对T 细胞凋亡无明显影响。B7-H4在抑制宫颈癌抗肿瘤细胞免疫中发挥作用,它可能成为宫颈癌免疫治疗的潜在靶点。     

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群的测定分析

目的：探讨淋巴细胞亚群(T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞及T细胞亚群)在慢性乙型肝炎患者外周血中的变化意义。方法：通过流式细胞技术比较分析56例慢性乙型肝炎患者及30例键康正常人的外周血淋巴细胞亚群。结果：与正常对照组相比，慢性乙型肝炎患者组外周血CD3^ CD4^ 细胞降低，淋巴细胞CD4^ /CD8^ 比值下降。结论：慢性乙型肝炎患者细胞免疫功能紊乱，存在辅助性T细胞减少及辅助性T细胞和细胞毒性T细胞比例失衡等异常表现。