不同胆囊病变树突状细胞浸润的免疫组化研究

应用免疫组化对胆囊不同病变内S-100~ 树突状细胞浸润与肿瘤相关分子的表达相互关系进行对比研究.包括胆囊癌症病人切除标本30例,结石20例,慢性炎症20例.用单克隆抗p53蛋白、抗增殖细胞核抗原(PCNA)、抗癌胚抗原(CEA)及多克隆抗S-100蛋白抗体,LSAB法检查上述病变标本.结果发现癌症病人p53蛋白阳性为46.7%(14/30),PCNA为86.7%(26/30),CEA为30.0%(9/30),S-100~ DC浸润仅为40.0%(12/30);结石标本p~(53)蛋白阴性,PCNA为35.0%(7/20),CEA为15%(3/20),S-100~ DC浸润为50%(10/20);慢性炎病例p53蛋白、CEA均为阴性,PCNA为25%(5/20),而S-100~ DC浸润为 85%(17/20).S-100~ DC浸润病例数与细胞密度,在恶性肿瘤中明显低于非肿瘤良性病变(P<0.05).本研究说明:①炎性病变的上皮组织多属单纯性增生而无肿瘤相关标记分子表达,同时伴有较高的细胞免疫活性;②胆囊结石上皮存在某些不典型变化有少许肿瘤标记分子表达,并伴有机体抗肿瘤免疫反应的下降,易于癌变;③癌症病人标本突变型p53基因过度表达、PCNA明显多曾多及 S-100~ DC明显减少,可能反映了免疫监视系统受损,使肿瘤细胞逃避机体的免疫攻击以促进肿瘤发生与发展.     

HPV16/18-E6、p53和MDM2蛋白在人喉鳞癌中的表达及相关性研究

目的:探讨HPV16/18-E6、p53和MDM2蛋白在人喉鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的表达及其在喉鳞癌发生和发展过程中的相互关系.方法:用EnVision免疫组织化学法检测72例喉鳞癌、24例喉癌前病变、15例声带息肉和8例癌周正常喉组织标本中HPV16/18-E6、p53和MDM2蛋白的表达并比较,对喉鳞癌与临床病理因素进行相关性分析.结果:癌周正常喉组织、声带息肉、喉癌前病变和喉鳞癌组织中 HPV16/18-E6蛋白的阳性表达率分别为0(0/8)、6.7%(l/15)、12.5%(3/24)和 37.5%(27/72),p53蛋白的阳性表达率分别为0(0/8)、13.3%(2/15)、25.0%(6/24)和52.8%(38/72),MDM2蛋白的阳性表达率分别为0(0/8)、6.7%(l/15)、37.5%(9/24)和70.8%(51/72),HPV16/18-E6、p53和MDM2蛋白的阳性表达在声带息肉、喉癌前病变与喉鳞癌组之间均有显著性差异(P＜0.05).HPV16/18-E6蛋白和MDM2蛋白的阳性表达在病理Ⅰ～Ⅲ级肿瘤之间呈明显升高趋势,有显著性差异(P＜0.05).HPV16/18-E6蛋白的阳性表达与临床分期和淋巴结转移明显相关(P＜0.05).p53蛋白阳性表达与HPV16/18-E6蛋白、MDM2蛋白阳性表达有显著正相关性(P＜0.05).结论:HPV16/18-E6、MDM2蛋白的过表达和p53的失活与人喉鳞癌的发生发展密切相关.     

成人喉乳头状瘤组织中HPV/E7、ki-67表达与微血管密度的相关性

目的：探讨人乳头状瘤病毒、细胞增殖活性及新生血管的生成在喉乳头状瘤中的作用。方法:选取21例成人喉乳头状瘤组织标本,以14例声带息肉和14喉鳞癌组织标本为对照组,PCR方法检测HPV16/E7的表达,免疫组化法检测Ki 67、CD34的表达。结果:HPV16/E7在声带息肉、成人喉乳头状瘤和喉鳞癌组织中的阳性表达率分别为:14.3%、66.7%、85.7%;Ki-67标记指数（labeling index,LI）分别为6.30±2.03、13.73±3.42、25.55±3.92;MVD分别为3.97±1.38、14.61±1.64、25.34±2.63;差异有统计学意义(P＜0.01)。HPV16/E7, CD34和Ki 67呈正相关（r＝0.854,P＜0.01;r=0.878,P＜0.01)。结论:Ki-67、MVD与细胞的增殖活化程度明显相关,可以作为反映成人喉乳头状瘤恶变潜能的指标之一。     

p53、p21及增殖细胞核抗原在尖锐湿疣皮损中的表达

目的 研究尖锐湿疣（CA）p53蛋白、p21蛋白和增殖细胞核抗原（PCNA）过度表达与人类乳头瘤病毒（HPV）感染的关系。方法 采用免疫组化法对20例CA患者的石蜡包埋组织标本进行检测。结果 20例CA 皮损中p53、p21及PCNA阳性率分别为5％（11／20）、50％（10／20）和70％914／20）,p53阳性细胞主要分布于基底层及棘层中下部,p21阳性细胞分布于棘细胞层,PCNA阳性细胞散布于表皮全层。结论 证实了CA中存在着p53、p21及PCNA的过度表达,同时也表明HPV的感染导致宿主细胞多基因表达的改变。     

HPV亚型对喉磷状细胞癌及癌前病变的定性诊断价值

目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)感染亚型与喉鳞状细胞癌及癌前病变的相关性及临床诊断价值。方法选取喉鳞状细胞癌39例,癌前病变48例(包括声带白斑22例和喉乳头状瘤26例)患者的组织标本石蜡切片,以38例声带息肉组织为对照组,采用PCR基因扩增和DNA反向点杂交DNA芯片技术,检测样本中HPV DNA表达及分型。结果喉鳞状细胞癌组HPV感染率高于声带白斑组和对照组,喉乳头状瘤组HPV感染率高于喉鳞状细胞组、声带白斑组和对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。喉鳞状细胞癌HPV阳性患者其高危亚型HPV16的发生率显著高于喉乳头状瘤,其低危亚型HPV6型发生率显著低于喉乳头状瘤,差异均有统计学意义(P0.05);两组患者的HPV33型和HPV11型发生率差异无统计学意义(P0.05)。喉鳞状细胞癌组和喉乳头状瘤组男性和女性HPV感染阳性率比较差异均无统计学意义(P0.05);男性喉乳头状瘤患者HPV感染率(73.33%)高于男性喉鳞状细胞癌患者(31.03%),差异有统计学意义(P0.05);而女性喉乳头状瘤患者与喉鳞状细胞癌患者的HPV感染率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 HPV感染与喉鳞状细胞癌和癌前病变显著相关,检测HPV亚型分布对喉癌的针对性防治及特定疫苗研发有重要临床意义。     

HSP70在喉乳头状瘤和声带白斑组织中的表达及其临床意义

目的: 探讨热休克蛋白70(HSP70)及其上游调控因子HSF1在喉乳头状瘤和声带白斑中的表达,阐明其在喉癌发生中的作用。方法:应用免疫组织化学法检测6例声带白斑 (声带白斑组)、6例喉乳头状瘤（喉乳头状瘤组）和7例声带息肉（对照组）的组织标本中HSP70和HSF1蛋白的表达。结果： HSP70和HSF1蛋白在喉乳头状瘤、声带白斑中的表达高于声带息肉,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;声带白斑在所有组织中表达最高。对声带息肉、喉乳头状瘤、声带白斑中HSP70蛋白表达量与HSF1表达的关系进行直线回归分析,结果显示,HSP70蛋白表达量与HSF1的变化呈现正的直线相关（r=0.867,P<0.01）。结论：HSP70和HSF1在声带白斑中的高表达可能与喉癌的发生密切相关,且HSP70和HSF1可能成为喉癌早期诊断的指标。
     

早期喉癌人乳头状瘤病毒感染和P53、P16、nm23蛋白表达及端粒酶激活相关性分析

目的:初步探讨早期喉癌发生与人乳头状瘤病毒(HPV)16/18感染及P 16、P 53、nm 23基因表达、端粒酶启动的相关性.方法:采用免疫组织化学方法、原位杂交及TRAP法分别检测了62例早期喉癌手术标本、14例癌前病变标本及12例正常声带粘膜/声带息肉标本的P 53、P 16、nm 23-H 1蛋白的表达,HPV 16/18 DNA、端粒酶活性的检出率,并进行了统计学分析.结果: (1)早期喉癌中P 16表达检出率低于正常声带粘膜/声带息肉及癌前病变的检出率(P<0.01); 早期喉癌中P 53表达检出率高于正常声带粘膜/声带息肉(小结)及癌前病变的检出率(P<0.05), 癌前病变的检出率高于正常声带粘膜/声带息肉(小结)检出率(P<0.05).nm 23H 1表达在上述不同标本中无显著性差异.癌前病变及癌组织标本中有70%有端粒酶激活,对照组为0%.(2)癌前病变及癌组织63%(48/76)有HPV16/18感染,对照组为0%.(3)与HPV阴性标本比较,HPV阳性标本中P 16表达检出率减少,P 53表达检出率及端粒酶启动增多.结论:喉癌的发生与喉粘膜P 16表达下调、P 53表达上调及端粒酶启动相关;P 53表达上调可能是癌变的早期事件;HPV感染可能介导并促进P 16、P 53的表达失调及端粒酶启动,在喉癌发生中起重要作用.     

eIF4E、survivin在儿童喉乳头状瘤组织中的表达及意义

目的通过检测真核起始因子4E(eukaryotic initiation factor 4E,eIF4E)、survivin蛋白在小儿喉乳头状瘤及声带息肉组织中的表达情况,探讨它们在喉乳头状瘤发生、发展过程中的作用.方法 采用免疫组织化学技术检测eIF4E、survivin蛋白在48例儿童喉乳头状瘤和15例声带息肉组织中的表达情况.采用半定量积分法,将阳性细胞百分率和染色强度相结合判定免疫组化染色结果,用spss13.0软件进行统计学分析.结果 eIF4E、survivin蛋白在喉乳头状瘤组织中的阳性表达率分别为85.42%、81.25%,均明显高于它们在声带息肉组织中的表达率26.67%、46.67%,两者差异有统计学意义(P<0.05).结论 eIF4E、survivin蛋白在儿童喉乳头状瘤组织中高表达,提示其与儿童喉乳头状瘤的发生、多发性可能有密切关系.     

喉部肿瘤HPV感染与p53基因变异的研究

应用PCR－SSCP及Southern杂交技术检测了56例喉鳞癌和35例喉乳头状瘤组织中HPV16／18的DNA及p53基因点突变。结果显示24例喉部肿瘤组织p53基因点突变；35例喉癌及24例喉乳头状瘤组织中检出了HPV－DNA。在13例喉癌组织和3例喉乳头状瘤组织中同时检出p53点突变和HPV－DNA。提示HPV感染和p53变异与喉部肿瘤发生有关，其内在联系有待深入研究。     

HPV16E7蛋白和Rb 蛋白在人喉鳞状细胞癌中的表达及相关性研究

目的:探讨HPV16E7蛋白和Rb蛋白在人喉鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的表达及其在喉鳞癌发生和发展过程中的相互关系.方法:用免疫组织化学方法检测78例喉鳞癌、26例喉癌前病变、24例声带息肉和10例癌周正常喉组织标本中HPV16E7蛋白和Rb蛋白的表达.结果:癌周正常喉组织、声带息肉、喉癌前病变和喉鳞癌组织中HPV16E7蛋白的阳性表达率分别为0(0/10)、4.1%(1/24)、27.0%(7/26)和43.6%(34/78),Rb蛋白的阳性表达率分别为80.0%(8/10)、79.2%(19/24)、61.5%(16/26)和50.0%(39/78);HPV16E7蛋白和Rb蛋白的阳性表达率在癌周正常喉组织、声带息肉与喉鳞癌组之间均有显著性差异(P＜0.05),HPV16E7蛋白表达呈明显升高趋势,而Rb蛋白表达呈明显下降趋势.HPV16E7蛋白的阳性表达率,喉鳞癌病理Ⅲ级明显高于Ⅰ级或Ⅱ级(P＜0.05),临床Ⅲ～Ⅳ期明显高于Ⅰ～Ⅱ期(P＜0.05);而Rb蛋白的表达正相反,肿瘤病理Ⅲ级明显低于Ⅰ级或Ⅱ级(P＜0.05),临床Ⅲ～Ⅳ期明显低于Ⅰ～Ⅱ期(P＜0.05).结论:HPV16E7蛋白的表达升高和Rb蛋白的表达下降可能会导致人喉鳞癌的发生和发展;检测HPV16E7蛋白和Rb蛋白的表达可用于喉鳞癌恶性程度的评定.     

p53基因蛋白在复发性呼吸道乳头状瘤病中的表达与临床意义探讨

目的：观察p53基因蛋白在成人型及幼儿复发性呼吸道乳头状瘤病（RRP）初诊病变中的表达与恶变或侵袭发生的关系，探讨其预测个体RRP转归的价值。方法：免疫组化Sp法检测p53基因蛋白在86例转归不同的RRP中的表达。结果；p53基因蛋白在AO－RRP及JO－RRP病变中的表达率分别为20．50％和38．29%，p53基因蛋白的表达和发生侵袭或恶变有关（P＜0．01，P＜0．01）。结论：RRP初诊病变中p53基因蛋白的表达可提示患病个体的转归， 即幼儿型RRP易发生侵袭，成人型RRP应密切随访，注意恶变。     

喉乳头状瘤及其癌变组织中PTEN蛋白表达与DNA含量分析

目的:研究在喉乳头状瘤及其癌变组织中PTEN蛋白表达及DNA含量的变化,探讨喉乳头状瘤癌变的机制。方法:以正常喉黏膜作对照,应用流式细胞测定技术检测20例喉乳头状瘤、15例喉乳头状瘤伴不典型增生及16例喉乳头状瘤恶变组织中PTEN蛋白表达及DNA含量变化。结果:喉乳头状瘤、喉乳头状瘤伴不典型增生及喉乳头状瘤恶变组织中PTEN蛋白表达逐渐降低,DNA含量逐渐升高,经统计学分析,喉乳头状瘤与恶变组织中PTEN蛋白表达与DNA含量差异显著(P<0.05)。结论:PTEN蛋白异常表达及DNA含量变化可能在喉乳头状瘤恶变机制中发挥重要作用。     

人喉鳞癌组织中HPV16E7、CyclinD1和Rb蛋白的表达

目的:探讨喉鳞癌组织中人乳头瘤病毒(HPV)16型E7、CyclinD1和Rb蛋白表达的变化.方法:采用免疫组织化学SABC法检测80例喉鳞癌、30例声带息肉组织中HPV16E7、CyclinD1和Rb蛋白的表达状况.结果:声带息肉组织中HPV16E7未见表达,喉鳞癌组织中的表达率为34/80(P＜0.000 1);声带息肉与喉鳞癌组织中Cy-clinD1的表达率分别为2/30和42/80(P＜0.000 1),Rb的表达率分别为25/30和42/80(P＜0.05).HPV16E7与CyclinD1的表达与临床分期、淋巴结转移情况和5 a生存率有关(P＜0.05或0.01).喉鳞癌组织中HPV16E7与Rb的表达相关(P＜0.01).结论:HPV16感染和Rb、CyclinD1的异常表达与喉鳞癌发生、发展有关.HPV16E7与CyclinD1可作为判定喉鳞癌预后的指标.     

微管不稳定蛋白Stathmin与喉乳头状瘤的相关性

目的  通过检测Stathmin蛋白在喉乳头状瘤组织及声带息肉组织中的表达情况,探讨其在喉乳头状瘤发生、发展过程中的作用。方法  采用免疫组织化学技术（PV-9000二步法）检测Stathmin蛋白在60例喉乳头状瘤和15例声带息肉组织中的表达情况,应用Image-ProPlus图像分析软件测定免疫组化图像的平均光密度（MOD）,运用SPSS13.0软件进行统计学分析,观察Stathmin蛋白与喉乳头状瘤临床特征之间的关系。结果  Stathmin蛋白在喉乳头状瘤组织的阳性表达率为88.33％,明显高于其在声带息肉组织中的阳性表达率（53.33％）,差异有统计学意义（P＜0.05）。Stathmin蛋白的表达与临床分型、是否复发、患者性别及年龄均无相关性（P＞0.05）。结论  Stathmin蛋白在喉乳头状瘤组织中高表达,可能与人喉乳头状瘤的发生、发展密切相关。     

喉鳞癌组织中HPV16、18E6和HPV16E7蛋白表达及其相关性研究

目的 :探讨人乳头瘤病毒 (HPV) 16、18型E6和E7蛋白与喉鳞癌发生的关系以及两种蛋白在致病过程中的相互关系。方法 :采用免疫组化SABC方法对 5 8例喉鳞癌 ,30例癌旁组织和 30例声带息肉进行检测。结果 :在喉鳞癌和癌旁组织中的E6蛋白的表达率分别为 31 0 % (18/5 8)和 2 0 0 % (6 /30 ) ;E7蛋白的表达率分别为 32 7%(19/5 8)和 2 0 3 % (7/30 )。声带息肉组中未见E6和E7蛋白阳性表达。E6和E7蛋白表达率在喉癌组与息肉组之间 ,有颈淋巴结转移组与无颈淋巴结转移组之间均有显著性差异 (P <0 .0 1)。E6和E7蛋白在喉鳞癌中的表达结果具有明显的相关性。结论 :HPV16、18E6和HPV16E7蛋白与喉鳞癌发生、发展关系密切 ,E6与E7蛋白在致癌过程中有协同作用     

人喉鳞癌和癌旁组织中P~(53)蛋白的过度表达与临床病理指标和吸烟的关系

应用微波炉(MWO)加热方法和链霉菌素一生物素(LSAB)免疫酶技术,检测了56例人喉鳞癌和19例癌旁组织及5例喉乳头状瘤伴恶变组织中P~53蛋白的表达状况.结果表明:56例喉鳞癌中的29例(51.8%)有P~53蛋白的过度表达,P~53蛋白的过度表达与肿瘤分期、组织学分级、淋巴结转移等各项临床病理指标无关(P>0.05).P~53蛋白的过度表达在乳头状瘤伴恶变及癌旁不典型增生组织中可检测到,但13例癌旁正常上皮无1例出现.提示P~53蛋白的过度表达出现在喉癌发生过程的早期,其在喉癌中的过度表达与吸烟的程度密切相关.     

喉乳头状瘤及其癌变组织中PTEN蛋白表达与DNA含量分析

目的：研究在喉乳头状瘤及其癌变组织中PTEN蛋白表达及DNA含量的变化,探讨喉乳头状瘤癌变的机制。方法：以正常喉黏膜作对照,应用流式细胞测定技术检测20例喉乳头状瘤、15例喉乳头状瘤伴不典型增生及16例喉乳头状瘤恶变组织中PTEN蛋白表达及DNA含量变化。结果：喉乳头状瘤、喉乳头状瘤伴不典型增生及喉乳头状瘤恶变组织中PTEN蛋白表达逐渐降低,DNA含量逐渐升高,经统计学分析,喉乳头状瘤与恶变组织中PTEN蛋白表达与DNA含量差异显著（P〈0．05）。结论：PTEN蛋白异常表达及DNA含量变化可能在喉乳头状瘤恶变机制中发挥重要作用。     

喉鳞状细胞癌组织中HPV16/18感染与hTERT、c-myc蛋白表达的关系及意义

目的研究喉鳞状细胞癌组织中人乳头状瘤病毒（HPV）16／18感染与端粒酶催化亚单位（hTERT）和c—myc蛋白表达的关系及意义。方法在39例喉鳞癌组织、10例声带息肉组织中应用原位杂交法检测HPV16／18的感染情况,同时应用免疫组化法检测hTERT和c—myc蛋白的表达情况,并分析喉鳞癌组织中HPV16／18感染、hTERT和c—myc蛋白表达之间的相关性。结果39例喉鳞癌组织中HPV16／18感染阳性表达率48．7％（19／39）,hTERT、c—myc蛋白阳性表达率分别为84．6％（33／39）、82．1％（32／39）。10例声带息肉组织中HPV16／18感染、hTERT蛋白均未见阳性表达,c—myc蛋白阳性表达率为10％（1／10）。经统计学分析HPV16／18感染、hTERT和c—myc蛋白在喉鳞癌组织与声带息肉组织间的表达差异均有统计学意义。喉鳞癌组织中HPV16／18感染与hTERT和c—myc蛋白阳性表达之间均存在显著正相关关系。结论喉鳞癌组织中hTERT和c—myc蛋白表达的改变可能与HPV16／18感染有关,且三者相互作用,共同影响喉鳞癌的发生、发展。这些指标综合分析可能为阐明HPV16／18的恶性转化机制以及为喉鳞癌早期诊断和基因治疗提供参考依据。     

人乳头状瘤病毒16/18感染与喉鳞状细胞癌关系

目的研究喉鳞癌组织中人乳头状瘤病毒（human papillomavirus,HPV）16／18亚型的感染情况并进行临床分析。方法应用原位杂交法分别检测39例喉鳞癌组织,10例声带息肉组织中HPV16／18亚型的感染情况,并分析喉鳞癌组织中HPV16／18阳性感染与肿瘤各项临床病理参数的关系。结果39例喉鳞癌组织中HPV16／18阳性率为48．7％（19／39）。10例声带息肉组织中均未见HPV16／18感染（0／10）。HPV16／18在喉鳞癌组织与声带息肉组织中的表达差异经χ^2检验有统计学意义。喉鳞癌组织中HPV16／18感染与癌组织的的组织学分级、临床分期、淋巴结转移间经Fisher＇s精确概率法χ^2检验均未见相关性。结论喉鳞癌的发生与HPV16／18感染相关。     

喉癌p21WAF1蛋白的表达及意义

目的：检测p21^WAF1蛋白在喉癌中的表达水平，研究其表达与临床、病理参数的关系，探讨p21^WAF1在喉癌发生发展过程中的作用。方法:选取喉癌患者30例，另选声带息肉患者30例及正常喉组织6例作为对照，采用免疫组织化学方法(S—P法)检测其p21^WAF1的表达。结果:p21^WAFl蛋白在喉癌、声带息肉中的阳性率分别为27％(8／30)及53％(16／30)。正常喉组织均为阴性。喉癌中p21^WAF1蛋白表达与组织分化呈正相关，分化越高，阳性率越高。结论:p21^WAF1蛋白在喉癌的发生发展中具有重要作用。