p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠肝脏病理学研究

目的观察p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠肝脏病理学改变.方法分别选取2、6、12、18、24月龄的SPF级p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠和p21+/+野生型小鼠,剖检进行大体观察,取肝脏及肝脏肿瘤组织,进行组织学HE染色及电镜超微结构观察.结果 p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠肝脏大体、光镜和电镜下均有明显病理改变.随着月龄的增加,肝脏色暗质硬,表面有结节和肿瘤形成;光镜下,肝细胞浊肿,炎症细胞浸润,脂肪变性,点状、灶状和碎屑状坏死,非典型增生,肝细胞癌.癌细胞分化良好,类似肝细胞,形成索状和腺泡状结构.癌细胞核深染,具核分裂像.电镜下,癌细胞核变形,核膜曲折凹陷,线粒体肿胀,数目增多,嵴减少.4例18月龄转基因小鼠发生肝细胞癌(4/10),6例24月龄的转基因小鼠发生肝细胞癌(6/10),其中2例发现远处转移.结论 p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠肝脏出现明显病理损害,18月龄小鼠开始发展成高分化的肝细胞癌,高龄小鼠形成的肝细胞癌能够转移.     

流式细胞术分析p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠肝细胞凋亡

目的观察p21^HBsAg/HBsAg转基因小鼠肝细胞凋亡。方法用流式细胞仪检测6、12、18、24月龄p21^HBsAg/HBsAg转基因小鼠和p21^＋/＋野生型小鼠新鲜肝脏组织。结果转基因小鼠肝细胞凋亡率低于同月龄野生型小鼠。结论HBsAg基因的转入和表达，抑制转基因小鼠肝细胞凋亡。     

不同月龄p21HBsAg/HBsAg和p21HBX/HBX转基因小鼠几种血液生化指标测定

目的 测定p21HBsAg/HBsAg和p21HBX/HBX转基因小鼠及野生型小鼠的血清生化指标,探讨几种血清生化指标在两种转基因小鼠及野生型小鼠的变化规律.方法 对p21HBsAg/HBsAg和p21HBX/HBX转基因小鼠不同月龄11种血清生化指标进行测定并分析比较.结果 p21HBsAg/HBsAg和p21HBX/HBX转基因小鼠不同月龄、不同的指标雌雄之间t检验差异显著,并且随着月龄的变化,雌雄之间的变化规律不同.结论 p21HBsAg/HBsAg和p21HBX/HBX基因的转入对小鼠的血清生化指标具有一定的影响.     

p21~(HBsAg/HBsAg)转基因小鼠的繁殖性能与生长发育

目的探讨p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠的繁殖性能与生长发育状态,分析p21HBsAg/HBsAg基因引入小鼠基因组p21位点中对其生长繁殖的影响。方法选者繁殖种鼠40对,日常生产繁殖过程中对相关的繁殖指标及应用分析天平对其体重进行测量和记录,并且与野生对照组进行比较。结果不同日龄野生型小鼠较p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠(-/-)增重快,而且两种表型小鼠雄性个体较雌性个体增重快;不同胎次胎间隔差异显著。野生型胎间隔较p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠长;不同胎次两种表型小鼠产仔数差异不显著,说明野生型小鼠较p21HBsAg/HBsAg转基因小鼠繁殖能力强。结论p21HBsAg/HBsAg基因转入小鼠基因组p21位点对其生长繁殖具有一定的影响。     

不同月龄p21^HBsAg/HBsAg和p21^HBX/HBX转基因小鼠血清酶含量的测定

目的 测定p21HBsAg/HBsAg和p 21HBX/HBX转基因小鼠纯合型及野生型小鼠的血清酶,探讨各种血清酶在两种纯合型小鼠及野生型小鼠的变化规律.方法 采用荷兰半自动生化分析仪Ⅱ对于肝功能相关的7种血清酶进行测定,应用SSPS10统计学软件进行T检验及方差分析比较.结果p21HBsAg/HBsAg和p 21HBX/HBX转基因小鼠不同年龄、不同的指标雌雄之间差异显著,并且随着年龄的变化,雌雄之间的变化规律不同.结论p21HBsAg/HBsAg和p21HBX/HBX转基因小鼠的血清酶在不同的年龄具有一定的变化规律,说明p21HBsAg/HBsAg和p 21HBX/HBX转基因小鼠的血清酶具有一定的特征,为其功能性研究及临床检验具有重要参考价值.     

四氯化碳/乙醇诱导乙型肝炎病毒转基因小鼠发生肝纤维化与肝癌的实验观察

目的 观察四氯化碳/乙醇诱导乙型肝炎病毒转基因小鼠实验性肝纤维化和肝癌的过程.方法 采用四氯化碳/乙醇分别诱导野生型小鼠、乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)转基因小鼠、HBsAg转基因小鼠20周,观察每组小鼠发生肝纤维化和肝癌的情况,并采用RT-PCR方法检测HBx及HBsAg基因的表达.结果 转基因小鼠肝脏有HBx或HBsAg基因表达,而野生型小鼠则没有.3组小鼠之间及雌、雄性之间发生肝纤维化的程度差异无统计学意义.四氯化碳/乙醇诱导显著加快了HBx和HBsAg转基因小鼠发生实验性肝癌的进程,雄性小鼠肝癌发生率显著高于雌性小鼠.结论 HBx和HBsAg基因整合进小鼠肝脏细胞内并不能增加肝纤维化程度,但能促进肝癌的发生发展;雄性小鼠较雌性更易发生肝癌;四氯化碳/乙醇诱导能显著促进乙型肝炎病毒转基因小鼠发生肝癌.四氯化碳/乙醇诱导乙型肝炎病毒转基因小鼠形成肝癌是一个较好的肝癌动物模型.     

共轭亚油酸对高脂血症大鼠脂质代谢及visfatin基因表达水平的影响

目的测p21^HBsAg/HBsAg和p21^HBXIHBX转基因小鼠及野生型小鼠的血清生化指标,探讨几种血清生化指标在两种转基因小鼠及野生型小鼠的变化规律。方法对p21^HBsAg/HBsAg和p21^HBXIHBX转基因小鼠不同月龄11种血清生化指标进行测定并分析比较。结果p21^HBsAg/HBsAg和p21^HBXIHBX转基因小鼠不同月龄、不同的指标雌雄之间t检验差异显著,并且随着月龄的变化,雌雄之间的变化规律不同。结论p21^HBsAg/HBsAg和p21^HBXIHBX基因的转入对小鼠的血清生化指标具有一定的影响。     

不同月龄p21^HBsAg/HBsAg和p21^HBX/HBX转基因小鼠血清代谢产物的测定

目的测定p21^HBsAg/HBsAg和p21^HBX/HBX转基因小鼠及野生型小鼠的血清代谢产物,探讨各种血清代谢产物在两种转基因小鼠及野生型小鼠的变化规律。方法对p21^HBsAg/HBsAg和p21^HBX/HBX转基因小鼠不同月龄4种代谢产物血清总胆红素（TBILI）＼尿酸（UA）、肌酐（CRE）和尿素氮（BUN）进行测定并分析比较。结果p21^HBsAg/HBsAg和p21^HBX/HBX转基因小鼠不同月龄、不同的指标雌雄之间t检验差异显著,并且随着年龄的变化,雌雄之间的变化规律不同。结论p21^HBsAg/HBsAg和p21^HBX/HBX转基因小鼠的血清代谢产物在不同的年龄具有一定的变化规律。     

p21^HBsAg/HBsAg转基因小鼠的繁殖性能与生长发育

目的探讨p21^HBsAg/HBsAg转基因小鼠的繁殖性能与生长发育状态，分析p21^HBsAg/HBsAg基因引入小鼠基因组p21位点中对其生长繁殖的影响。方法选者繁殖种鼠40对，日常生产繁殖过程中对相关的繁殖指标及应用分析天平对其体重进行测量和记录，并且与野生对照组进行比较。结果不同日龄野生型小鼠较p21^HBsAg/HBsAg转基因小鼠（-/-）增重快，而且两种表型小鼠雄性个体较雌性个体增重快；不同胎次胎间隔差异显著。野生型胎间隔较p21^HBsAg/HBsAg转基因小鼠长；不同胎次两种表型小鼠产仔数差异不显著，说明野生型小鼠较p21^HBsAg/HBsAg转基因小鼠繁殖能力强。结论p21^HBsAg/HBsAg基因转入小鼠基因组p21位点对其生长繁殖具有一定的影响。     

电镜下几种凋亡细胞的形态特征

 目的 观察不同种类、不同原因引起的凋亡细胞的基本形态及差异。方法 用透射电镜观察原位组织和培养细胞在生理条件下和外界因素作用下产生的凋亡细胞,其中有卵巢颗粒膜细胞、烷化剂作用的光感受细胞、培养的人膀胱癌T24细胞株和肝癌细胞株。结果 凋亡细胞的基本形态变化有：胞体变小、胞质浓缩、核染色质凝聚,而核膜、质膜及细胞器保存完好。各种凋亡细胞间的形态差异主要表现为核染色质凝聚的形态不同：有的凝聚染色质边移于核膜下,或呈新月形;有的核染色质凝聚成块状,散布于核内;有的呈致密凝聚,占据整个核区。结论 电镜下观察到凋亡细胞的核染色质凝聚除边移外还有其他形态,正常组织中的暗细胞和坏死组织中的凝固性坏死细胞应与凋亡细胞相区别。     

对乙型肝炎表面抗原破坏试验中HBsAg试验浓度的初步探讨

目的：探讨乙型肝炎表面抗原破坏试验中不同浓度HBsAg对消毒剂效能的影响。方法：通过对不同浓度的HBsAg采用定性破坏试验和定量破坏试验。观察HBsAg的破坏程度,确定对消毒剂效能的影响。结果：通过HBsAg定性破坏试验。证实HBsAg酶标检测试剂盒灵敏度为1ng/ml,有效氯含量为500ml/L,加入HBsAg悬液的浓度为100μg/ml,作用15min S/N值＜2．1,当加入HBsAg悬液的浓度为30μg/ml时,作用30minS/N值仍＞2．1,通过HBsAg定量破坏试验,证实当消毒剂的作用浓度相同时,HBsAg悬液的浓度为10μg/ml,作用15min,HBsAg残余量较作用6min时下降78．02％,而HBsAg悬液的浓度为32μg/ml时,只下降了60．19％,结论：所使用的HBsAg浓度越低,消毒剂最低有效浓度和最短有效时间将随之减小。     

HBsAg携带者血清睾酮、雌二醇与HBsAg含量变化的关系

目的　探讨HBsAg携带者血清睾酮 (T)、雌二醇水平 (E2 )与血清HBsAg含量之间的关系。方法　用RIA法测定 65例HBsAg携带者血清T ,E2 ,HBsAg含量。结果　HBsAg携带者血清T上升时 ,血清HBsAg上升 ,E2 上升时 ,HBsAg下降 ,血清T含量与HBsAg呈显著正相关 (r =0 .5 5 2 3 ,P <0 .0 0 1) ,E2 与HBsAg呈显著负相关 (r =-0 .864 1,P <0 .0 0 1) ,T/E2 与HBsAg呈显著正相关 (r =0 .62 12 ,P <0 .0 0 1)。结论　性激素对HBsAg携带者血清HBsAg含量有调节作用     

Detection of HBsAg and HBV DNA in sweat of HBsAg carriers

HBsAg and HBV DNA in the sweat of HBsAg carriers were detected.Thepositivity rates were 26.1%(12/46)by RIA and 17.4%(8/45)by dot blot hybridization.No HBsAg and HBV DNA were found in 6 persons with negative serum HBsAg.Viralparticles were observed in the sweat by means of immunoelectronic microscope.When se-rum HBeAg or HBV DNA were positive,the positivity rates of HBsAg and HBV DNAin sweat were higher than those with negative serum HBeAg and HBV DNA,and the dif-ference was significant.The results suggested that HBV may be excreted out ofbody through the sweat glands of serum HBsAg carriers,and contaminate environmentalobjects,which may play a role in contact transmission of hepatitis B.No relationshipswere found between anti-HBc,anti-HBe,titer of serum HBsAg and positivity rates ofHBsAg and HBV DNA in sweat.     

HBsAg母婴传播的研究

对HBsAg(+)母亲所生婴幼儿,连续两年的动态观察,发现这些婴幼儿的感染绝大多数皆在出生3个月后,其感染频率与母亲HBsAg的滴度成正相关,表明母婴传播阻断应以HBsAg(+)母亲所生之子女为重点对象。     

HBsAg携带者中的抗-HBe检测结果

报告299名3～53岁HBsAg阳性携带者以ELISA法检测抗—HBe的结果,总检出率为39.13％。在各年龄组中,<10岁组的检出率明显低于其他各组,经分别与40～岁和≥50岁组相比,差异均显著(P均<0.05)。不同HBsAg阳性滴度的各个抗—HBe检出率之间的变化粗粗看来似无明显的规律性,但高滴度组的抗—HBe检出率仍可见到下降趋势,经统计学处理,各组间的差异仍具有非常显著的统计学意义(x~2=27.23,P<0.01)。     

银川地区HBsAg阳性人群中HBV—DNA的分布

以非放射性(Dig—HBV—DNA 探针)分子杂交技术,检测了银川地区405例 HBsag携带人群中的 HBV—DNA。阳性率为34.81%(男性40.32%高于女性30.14%,P<0.05),且随年龄的增长而极急速地下降(P<0.005),回汉民族间无明显差异。HBsAg 的滴度与HBV—DNA 的检出率呈正相关(γ_s=0.999,P<0.01)HBsAg 的滴度至≥1:256时,HBV—DNA 的检出率可高达100%。作者等认为;以 HBsAg 的定量滴度来判定其传染性有一定的参考价值;滴度在1:64～1:128时需加强治疗管理,≥1:256时应视为病毒复制的标志,并具有较强的传染性。     

HBsAg破坏试验载体法制片中温度及时间对HBsAg回收率的影响

目的　比较两种温度制片及不同洗涤时间对载体上HBsAg含量的影响。方法　用 37℃、4℃两种温度制片载体经 30min振荡洗涤或先经 4、8、12h浸泡后再振荡洗涤 ,用ELISA法测定各自的OD值。结果　 37℃制片HBsAg的回收率为 88.6 9% ,4℃制片为 97.46 % ,两者之间有显著性差异 (P <0 .0 5 )。两种载片经 30min振荡洗涤和经 4℃浸泡 4h后再振荡洗涤 ,37℃HBsAg回收率为 87.93%和 93.93% ,4℃为 96 .5 3%和 98.47%。二者对应比较 ,有非常显著差异 (P皆 <0 .0 1)。结论　在载体法HBsAg破坏试验中 ,用 4℃制片及载体经 4h浸泡后再振荡洗涤 ,回收率效果最好。