AdipoR1在ApoE基因敲除小鼠粥样斑块中的表达及其变化

目的 探讨脂联素(adiponectin)1型受体(AdipoR1)在载脂蛋白E(ApoE)基因敲除小鼠动脉粥样硬化形成过程中的变化.方法 取野生型C57BL/6J小鼠作为对照组,ApoE基因敲除小鼠分为10周龄、20周龄和30周龄组,观察不同组别小鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)及脂联素的含量及主动脉斑块面积的变化.免疫组织化学染色法对AdipoR1进行半定量及定位分析.结果 ApoE基因敲除小鼠的血清TG、TC、LDL水平与对照小鼠比较显著升高,并随小鼠周龄增加而升高;斑块面积也随小鼠周龄增加而增大.ApoE基因敲除小鼠血浆脂联素水平低于对照小鼠,免疫组织化学染色法显示AdipoRl在ApoE基因敲除小鼠血管内膜表达阳性减弱,其程度随周龄增加有减少趋势.结论 ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的形成不仅与低脂联素血症相关,而且与主动脉血管组织中AdipoR1型脂联素受体表达下调也相关.     

甘露糖加重ApoE缺陷小鼠的脂蛋白代谢紊乱

目的：探讨甘露糖暴露对载脂蛋白E(ApoE)缺陷小鼠高脂血症的影响及其机制。方法：6周龄雄性ApoE基因敲除小鼠在西方饮食同时给与2%甘露糖饮水4周。酶法检测血浆总胆固醇及甘油三酯水平,利用快速蛋白液相色谱分离血浆脂蛋白,并检测分析载脂蛋白和胆固醇水平的变化。利用RT-PCR和Western蛋白印迹,分别检测分析肝脏和空肠组织中脂蛋白代谢相关基因的mRNA和蛋白表达水平。结果：甘露糖饮水可显著升高ApoE缺陷小鼠的血浆总胆固醇和甘油三酯水平,同时伴有极低密度脂蛋白(VLDL)中胆固醇含量和载脂蛋白B100(ApoB100)蛋白水平显著升高、高密度脂蛋白(HDL)中载脂蛋白A1(ApoA1)和载脂蛋白A4(ApoA4)水平降低。血中ApoA1和ApoA4水平下调的机制与肝脏和空肠组织中的蛋白表达水平降低有关。结论：甘露糖暴露可影响ApoE缺陷小鼠的脂蛋白代谢,加重高脂血症。     

蚤休水提液对ApoE 基因敲除小鼠动脉粥样硬化晚期斑块的影响

目的研究蚤休水提液对载脂蛋白E基因敲除小鼠(ApoE-/-)晚期斑块的影响。方法将30周龄的ApoE基因敲除小鼠分为三组,两实验组分别在小鼠正常饲料中添加蚤休水提液和药物辛伐他汀粉末,空白对照组喂饲小鼠正常饲料。结果蚤休水提液能显著降低小鼠血清的总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)以及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,同时减少无名动脉处的斑块面积,降低斑块中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的含量。结论蚤休水提液能抑制小鼠动脉粥样硬化晚期斑块的进一步的发展。     

慢性铁超载对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变的影响

目的:观察慢性铁超载对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变的影响.方法:24只ApoE基因敲除小鼠随机分为ApoE基因敲除组(腹腔注射0.1 mL生理盐水,连续4周)和铁荆组(腹腔注射10 mg右旋糖苷铁,连续4周),检测血清铁、总铁结合力、肝匀浆丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,铁染色观察肝脏、心脏铁沉积改变,分析主动脉窦粥样硬化斑块面积.结果:铁荆组血清铁浓度升高377.86%,转铁饱和度升高121.98%,肝脏铁浓度升高2 548.15%,与ApoE基因敲除组比较差异有统计学意义(P＜0.01).与对照组比较,ApoE基因敲除组肝脏中MDA含量升高了32.51%,SOD活性下降了17.2%,差异均有统计学意义(P＜0.05).与ApoE基因敲除组比较,铁荆组肝脏MDA含量升高了411.15%,SOD活性下降了46.84%,差异均有统计学意义(P＜0.01).与ApoE基因敲除组比较,铁剂组小鼠肝脏、心脏可见明显铁沉积,主动脉窦动脉粥样斑块面积明显增大.结论:铁超载可促进ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变的形成,其机制可能与增强机体氧化应激、促进脂质过氧化有关.     

载脂蛋白E基因敲除小鼠用于动脉粥样硬化研究的进展

载脂蛋白（apolipoprotein，ApoE）基因敲除小鼠是目前研究动脉粥样硬化发生发展机制的最为理想的动物模型之一，尤其是近年来，又成为易损斑块动物模型研究的热点。有关apoE^-I-小鼠动脉粥样硬化斑块病理特点、炎症在斑块破裂中的作用及对其干预治疗等研究，近来又有了许多新的发现。     

高脂饮食诱导APOE和LDLR基因敲除鼠AS斑块形成的分子病理学特征

目的 观察在高脂饮食务件下,载脂蛋白E(ApoE)和低度密度脂蛋白受体(LDLR)基因敲除小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块形成的病理学特征与基质金属蛋白酶(MMP-2,9)和Mac-3表达水平.方法 用C57BL/6J小鼠普通饮食作对照,用ApoE基因敲除和LDLR基因敲除两种小鼠,每种分为普通饮食和高脂饮食两组,8只/组.连续喂养120d后,分离获得各组小鼠主动脉,用Masson染色,油红O染色法观察小鼠动脉粥样斑块病理形态学变化,用免疫组织化学检测AS斑块内炎症以及基质金属蛋白酶(MMP-2,9)表达水平,用免疫双荧光抗体法分析AS斑块巨噬细胞和平滑肌细胞内MMP-9表达的差异.结果 与普通饮食的基因敲除鼠比,高脂饮食的ApoE和LDLR基因敲除鼠的动脉粥样硬化斑块显著增大,炎性细胞增多,纤维帽中基质纤维成分减少,纤维帽形状变薄和大量中性脂滴沉积.其中,以ApoE基因敲除鼠的最为严重.AS斑块形成大小与Mac-3表达水平和炎症细胞增加呈正相关.斑块内MMP-9表达在巨噬细胞内占50%～70%,在平滑肌细胞内占30%.结论 高脂饮食可加重ApoE和LDLR基因敲除小鼠AS斑块形成和Mac-3表达及炎症细胞增加,MMPs水平亦相应增加,其病变呈现出不稳定性斑块特征.     

载脂蛋白E与脑缺血研究进展

载脂蛋白E（ApoliopoproteinE，APOE：gene；ApoE：protein）是血浆脂蛋白的重要组成成分，在脂质代谢中发挥着重要的作用。它的缺失或者变异引起体内的代谢异常或者组织器官的功能障碍，从而导致一系列的疾病和并发症。载脂蛋白基因敲除小鼠问世以来，它给研究载脂蛋白的功能及其在各种相关疾病当中的作用提供了广阔的平台。     

α-硫辛酸对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块稳定性的影响

目的：探讨α-硫辛酸（α-LA）对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块稳定性及血脂的影响.方法：将30只ApoE基因敲除小鼠随机分为模型组、α-硫辛酸、辛伐他汀组,高脂饮食16周后,分别给与生理盐水、α-硫辛酸、辛伐他汀灌胃,另取10只G57BL/6J小鼠正常饮食后给与生理盐水灌胃作为正常对照组.8周后处死小鼠,酶法检测血清血脂,氧化型低密度脂蛋白,HE染色观察主动脉粥样硬化斑块病理形态结构,图像分析法测定主动脉粥样硬化斑块面积及与管腔面积比值,胶原Mas-son染色检测斑块部位胶原含量及占斑块面积比值.结果：与高脂模型组比较,α-LA组TG,LDL,ox-LDL均明显降低,HDL明显升高（P＜0.01）,TC降低（P＜0.05）.与高脂模型组比较,α-LA动脉粥样硬化斑块面积及与管腔面积比值缩小（P＜0.05）.胶原含量及占斑块面积比值增加.结论：α-LA有稳定ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑决的作用,其作用与降脂,抗脂质过氧化有关.     

近10年来动脉粥样硬化中西医结合研究进展

综述作者及课题组近10年来动脉粥样硬化(AS)相关的系列研究工作,并结合本领域中医、中西医结合有关研究成果,从中医药干预颈动脉粥样硬化、载脂蛋白E(ApoE)基因敲除小鼠AS模型、AS易损斑块、AS泡沫化细胞以及解毒与活血配伍抗AS稳定斑块等5个方面,概要介绍研究思路、研究方法与进展。参考文献44条。     

ApoE基因敲除小鼠海马神经元内β淀粉样蛋白的表达变化

目的 观察载脂蛋白E基因敲除(ApoE KO)对小鼠海马神经元内β淀粉样蛋白(Aβ)表达的影响,探讨其与神经退行性疾病的认知功能障碍之间的可能联系.方法 10只正常C57BL/6J小鼠予普通饲料喂养作为对照(C)组,10只ApoE-KO的C57BL/6J小鼠予普通饲料喂养作为KO组,10只ApoE KO的C57BL/6...     

血清淀粉样P蛋白缺失对小鼠动脉粥样硬化斑块形成的影响

目的观察血清淀粉样P蛋白(serum amyloid P component,SAP)缺失对小鼠动脉粥样硬化形成的影响。方法构建载脂蛋白E(Apolipoprotein E)和SAP双基因敲除小鼠(ApoE-/-;SAP-/-)作为实验组,ApoE-/-小鼠作为对照组。2组小鼠各12只,组内雄雌小鼠各半。在小鼠第8周龄时,体质量约20 g,此时开始同时给予2组小鼠高脂饮食,于第16周龄时获取小鼠全血分离得到血清进行血脂分析,处死小鼠后获取其心脏,胸腹主动脉进行油红O染色并进行病理统计。结果双基因敲除小鼠组的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显高于对照小鼠(P<0.01),低密度脂蛋白和高密度脂蛋白的比值和动脉粥样硬化指数(AI)小于对照组小鼠且差异显著(P<0.01),而总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度无显著性差异(P>0.05);主动脉根部切片和胸腹主动脉的油红O染色结果表明SAP缺失明显减轻了小鼠动脉粥样硬化斑块面积(P<0.01)。结论 AP缺失可能通过上调HDL从而抑制ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成。     

载脂蛋白E基因多态性与血脂关系研究

人类载脂蛋白E(ApoE)基因具多态性,3种等位基因ε2、ε3、ε4,编码3种异构体E2、E3、E4。ApoE在脂质代谢中起重要调节作用,其基因多态性可能与血脂异常症的发生有关。近年来,人们利用分子生物学技术对人群中ApoE基因多态性与血脂关系进行了广泛研究,对ApoE基因多态性的分析,可能对预测血脂异常症的发生有重要临床意义。现综述ApoE基因多态性在此领域的研究进展。     

载脂蛋白E基因多态性与急性心肌梗死及血胆固醇水平的关系

目的：探讨载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）基因多态性与急性心肌梗死及血胆固醇水平的关系，方法：５０例急性心梗患者及１００便正常人，采用聚合酶链反应－－限制性片段长度分析ＡｐｏＥ的基因型，并按标准酶法及免疫学方法测定血脂和载脂蛋白。结果：Ｅ４等位基因及基因型频率在病例中均明显高于对照组，而在病例组中共Ｅ４患者血脂固醇也高于Ｅ３．３患者。结论：本研究表明ＡｐｏＥ基因多态性与急性心梗相关，并影响血胆固醇水平。     

载脂蛋白E的多态性与糖尿病并发症的研究进展

载脂蛋白E基因的多肽性在脂蛋白代谢素乱和动脉粥样硬化中起着重要作用，与糖尿病及其并发症密切相关。近年来，人们利用分子生物学技术对人群中ApoE基因多肽性与血脂、糖尿病及其血管并发症进行了广泛的研究。笔者就此领域的研究进展进行综述。     

蛋氨酸诱导ApoE基因敲除小鼠主动脉不稳定斑块形成模型的研究

目的 通过2%(wt/vol) L-蛋氨酸负荷诱导ApoE基因缺陷小鼠,建立高同型半胱氨酸(Hcy)血症的动脉粥样硬化(AS)易损斑块模型.方法 将60只6周龄C57BL/6J系ApoE基因缺陷小鼠随机分为三组,每组20只.对照组:给予同剂量饮用水灌胃;高蛋氨酸组:给予2%(wt/vol) L-蛋氨酸灌胃;极高蛋氨酸组:给予[3%(wt/vol) L-蛋氨酸灌胃.另设正常小鼠作为正常对照组(n=20).1个月和2月后分别测定血清Hcy和血脂变化,并通过斑块HE、Van Gieson(EVG)弹性纤维染色和EVG苦味酸复红法胶原染色及anti-MAC3单克隆抗体标记来检测斑块大小、纤维帽厚度、胶原比例和炎症浸润程度的变化.TUNEL法检测主动脉血管组织中细胞凋亡情况.结果 高蛋氨酸负荷可诱导ApoE基因缺陷小鼠AS易损斑块产生,且随负荷提高和时间延长程度加重,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);凋亡细胞在脂核区大量积聚;内皮细胞水肿变性;血管平滑肌细胞(SMCs)由收缩型向合成型转变,胞质疏松,水肿变性,内质网扩张,胞质内空泡增多以及肌丝溶解;并可见核固缩的凋亡SMCs.结论 高蛋氨酸饮食可诱导apoE基因缺陷小鼠出现高Hcy血症,从而生成AS易损斑块.斑块内SMCs增生与凋亡现象并存.     

蛋氨酸诱导ApoE基因敲除小鼠主动脉不稳定斑块形成模型的研究

目的通过2%（wt/vol）L-蛋氨酸负荷诱导ApoE基因缺陷小鼠,建立高同型半胱氨酸（Hcy）血症的动脉粥样硬化（AS）易损斑块模型。方法将60只6周龄C57BL/6J系ApoE基因缺陷小鼠随机分为三组,每组20只。对照组：给予同剂量饮用水灌胃;高蛋氨酸组：给予2%（wt/vol）L-蛋氨酸灌胃;极高蛋氨酸组：给予[3%（wt/vol）L-蛋氨酸灌胃。另设正常小鼠作为正常对照组（n=20）。1个月和2月后分别测定血清Hcy和血脂变化,并通过斑块HE、VanGieson（EVG）弹性纤维染色和EVG苦味酸复红法胶原染色及anti-MAC3单克隆抗体标记来检测斑块大小、纤维帽厚度、胶原比例和炎症浸润程度的变化。TUNEL法检测主动脉血管组织中细胞凋亡情况。结果高蛋氨酸负荷可诱导ApoE基因缺陷小鼠AS易损斑块产生,且随负荷提高和时间延长程度加重,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;凋亡细胞在脂核区大量积聚;内皮细胞水肿变性;血管平滑肌细胞（SMCs）由收缩型向合成型转变,胞质疏松,水肿变性,内质网扩张,胞质内空泡增多以及肌丝溶解;并可见核固缩的凋亡SMCs。结论高蛋氨酸饮食可诱导apoE基因缺陷小鼠出现高Hcy血症,从而生成AS易损斑块。斑块内SMCs增生与凋亡现象并存。     

氧化型低密度脂蛋白与动脉粥样硬化研究进展

氧化型低密度脂蛋白是一种重要的致动脉粥样硬化脂蛋白,作为动脉粥样硬化的独立危险因素,在动脉粥样硬化的发生、发展过程中具有重要的作用。它可诱导血管内皮细胞损伤,诱导单核细胞与内皮细胞的黏附,并在泡沫细胞的形成及影响斑块稳定性方面发挥作用。本文就近年来氧化型低密度脂蛋白与动脉粥样硬化关系的研究予以综述。     

半枝莲总黄酮对ApoE基因敲除小鼠血脂及抗氧化功能的影响

目的探讨半枝莲总黄酮对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变形成早期血清脂质水平、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）表达的影响。方法载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为模型组、辛伐他汀组、银杏叶胶囊组和半枝莲总黄酮高、中、低剂量组,取正常C57BL/6小鼠为对照组,每组6只。除模型组、对照组给予等容量羧甲基纤维素钠外,其他各组分别给予阳性对照药与受试药8周。处死小鼠,ELISA法检测血脂水平,黄嘌呤氧化酶法检测SOD活力,硫代巴比妥酸法测定MDA含量,HE染色观察主动脉形态学变化。结果半枝莲总黄酮中、高剂量组血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平明显低于模型组,高剂量组高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平明显高于模型组（P〈0.05或0.01）。半枝莲总黄酮3个剂量组的MDA含量较模型组显著减少,SOD活性表达水平较模型组显著升高（均P〈0.01）。结论半枝莲总黄酮可通过降低载脂蛋白E基因敲除小鼠TG、TC、LDL-C水平,升高HDL-C水平,升高SOD活性,降低MDA含量,从而发挥抗动脉粥样硬化的作用。