慢性胃炎和消化性溃疡中幽门螺杆菌babA2和cagA及vacA基因型分析

目的 :研究慢性胃炎和消化性溃疡中幽门螺杆菌 (Hp) bab A2、cag A、vac A基因型的分布 ,探讨 Hpbab A2、cag A、vac A基因型与慢性胃炎和消化性溃疡的关系。方法 :用聚合酶链反应测定 5 8株从浙江省慢性胃炎和消化性溃疡患者中分离的 Hp bab A2基因、cag A基因和 vac A基因亚型。结果 :5 8株 Hp中 bab A2、cag A、vac A s1a、vac A m1、vac A m2基因的阳性率分别为 87.9%、10 0 %、93.1%、1.7%、65 .5 %。慢性胃炎和消化性溃疡患者感染的Hp bab A2、vac A s1a、vac A m2基因阳性率差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :从浙江地区慢性胃炎和消化性溃疡患者中分离的 Hp bab A2、cag A、vac A基因型均以 bab A2阳性、cag A阳性和 vac A s1a/ m2型为主 ,未发现 Hp bab A2、cag A和 vac A基因型与慢性胃炎和消化性溃疡的关系。     

浙江地区幽门螺杆菌临床菌株vacA优势基因型及其核苷酸序列分析

目的 :了解浙江地区消化性溃疡和慢性胃炎患者感染的幽门螺杆菌 (Hp) vac A优势基因型及其序列特点。方法 :分别从 2 9例消化性溃疡和 34例慢性胃炎患者的胃窦、胃体粘膜组织中分离出 12 6株 Hp。采用聚合酶链反应检测 vac A基因的信号区 (s)和中间区 (m)亚型 ,部分优势基因型的扩增产物 T- A克隆后进行核苷酸序列测定。结果 :所有菌株均扩增出 vac A s区和 m区基因片段 ,发现 s1a/ m1、s1a/ m2、s1a/ m1b、s1a/ m1b- m2 4种基因型 ,其比例分别为 7.1% (9/ 12 6)、61.9% (78/ 12 6)、2 9.4 % (37/ 12 6)、1.6% (2 / 12 6)。 17.5 %患者 (11/ 63)存在不同 vac A基因型Hp菌株混合感染 ,但在胃炎组和溃疡组中的分布差异无显著性 (P>0 .0 5 )。 6株 s1a型 Hp菌株的 s区扩增产物与报道的 s1a型 60 190株核苷酸序列同源性为 93.15～ 94 .86% ,4株 m2型 Hp菌株的 m区扩增产物与报道的 m2型 87-2 0 3株核苷酸序列之间同源性为 93.63～ 97.61%。结论 :s1a/ m2和 s1a/ m1b均是浙江地区消化性溃疡或慢性胃炎患者感染的 Hp菌株的 vac A优势基因型 ,部分优势 vac A基因型菌株的核苷酸序列与国外报道的参考菌株有较高的同源性 ;部分患者同时感染多株不同 vac A基因型 Hp。     

胃肠B细胞淋巴瘤的增殖与凋亡及其与幽门螺杆菌的关系

目的:探讨胃肠B细胞淋巴瘤(B cell lymphoma,BCL)的临床病理特点、不同组织学分型胃肠,BCL肿瘤细胞增殖与凋亡情况,以及BCL与幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)的关系.方法:用免疫组化方法进行肿瘤组织学分类、HP的表达、细胞增殖性及凋亡相关因子检测;末端转移酶生物素标记法[TdT(terminal deoxynucleotidyl transferase)dUTP nick end-labeling,TUNEL]检测细胞凋亡数.结果:57例胃肠BCL中,MALT淋巴瘤(mucosa-associated lymphoid tissue,MALT)15例(胃9例,肠6例),弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)42例(胃28例,肠14例).MALT和DLBCL的平均凋亡指数(apoptotic index,AI)分别为O.16%和2.54%,平均增殖指数(proliferation index,PI)分别为2.22%、8.71%,p53的阳性表达率分别为6.7%和35.7%,并且PI值(P=0.026)及p53(P=O.044)差异有显著性;而Bcl-2的阳性表达率分别为60.0%、35.7%,HP的阳性率分别为66.7%、23.8%,且差异有显著性(P=0.005).结论:HP与胃肠MALT淋巴瘤关系密切.DLBCL的细胞凋亡和增生活性较MALT高,MALT Bcl-2的高表达可能与其低凋亡率有关.p53促进凋亡,p53基因突变可能在MALT向DLBCL转化过程中起一定的作用.抗HP抗体免疫组化染色必要时可以用于胃肠BCL中的HP检测.     

胃癌组织中HpcagA基因表达

目的　了解胃癌组织 Hpcag A基因感染状况 ,探讨Hpcag A基因与胃癌的关系 .方法　采用 Warthin- Starry银染和原位 PCR方法 ,检测慢性浅表性胃炎 (CSG) 35例、慢性萎缩性胃炎 (CAG) 4 0例和胃癌 (CG) 35例的胃粘膜 Hp及cag A基因感染状况 .观察非癌患者胃粘膜炎症反应程度 .结果　慢性浅表性胃炎、萎缩性胃炎、癌组织、癌旁胃粘膜组织 Hp检出率分别为 5 7% ,6 2 % ,0 %和 5 4 % ;cag A基因检出率分别为 2 0 % ,5 0 % ,2 9%和 4 6 % ,萎缩性胃炎、癌旁组 cag A基因检出率显著高于浅表性胃炎组 (P<0 .0 1) .非癌患者胃粘膜单个核细胞、分叶核细胞浸润程度 cag A+组较 cag A-组、Hp+组较 Hp-组显著增多 (P<0 .0 1) ,且 cag A+组还较 Hp+组明显增多 (P<0 .0 5 ) .结论　萎缩性胃炎、胃癌患者 cag A菌株感染率显著高于慢性浅表性胃炎组 . cag A菌株引起更严重的炎症反应 .说明 Hpcag A菌株感染与萎缩性胃炎、胃癌关糸密切     

幽门螺杆菌及其cagA因子与胃腺癌的关系及其致癌的可能机理

目的　 (1)探讨幽门螺杆菌 (Hp)与胃腺癌的相关性 ,特别是 cag A因子与胃腺癌相关性 ;(2 )探讨 Hp特别是 cag A因子与胃粘膜中 Bcl- 2、Bax、P2 1 - WAF 1 、P1 6 - MTS1 蛋白表达异常的关系 ,从而探讨 cag A是否为一致癌因子及其致癌的可能机理 ;(3)通过对胃腺癌演化系列胃粘膜中 Bcl- 2、Bax、P2 1 - WAF1 、P1 6 - MTS1 蛋白的检测 ,探讨胃腺癌发生的可能机制。　方法　 (1)利用血抗 Hp-Ig G、RU T、PCR- Hp- DNA3种方法检测 2 70例病人耳垂血或胃粘膜活检组织中的 Hp及其 cag A基因 ;(2 )利用免疫组化 S- P法检测胃癌演化系列胃粘膜中 Bcl- 2、Bax、P2 1 - WAF 1 、P1 6 - MTS1 蛋白的表达 ;(3)利用 SPSS统计软件包作统计学分析处理。　结果　 (1)福州地区 Hp感染率 6 8.2 5 % ,男性 cag A+Hp感染率为 6 3.41% ,女性为 41.94% ;cag A+Hp致胃炎程度及活动性均较cag A - Hp及 Hp者高 (P<0 .0 5 ) ;男性感染 cag A +Hp更易发展为 CAG、IM(P<0 .0 5 ) ;感染 Hp者胃腺癌的分化程度低 ,且向周围浸润及淋巴结转移的能力强 (P<0 .0 5 ) ,但与 cag A因子无关 (P>0 .0 5 ) ;非贲门腺癌患者血抗 Hp- Ig G抗体为 76 .32 % ,大于贲门癌 (5 2 .90 % ) (P<0 .0 5 )。 (2 )在 CSG、CAG、IM阶段 ,Hp感染促进胃粘膜中     

50例胃原发性恶性淋巴瘤临床特点分析

目的:探讨原发性胃淋巴瘤的临床特点, 提高原发性胃淋巴瘤的诊治水平。方法:回顾性分析中南大学湘雅医院肿瘤科2005 年9 月至2009 年9 月收治的50 例胃原发性恶性淋巴瘤。结果:原发性胃恶性淋巴瘤临床表现包括腹痛、上腹部不适、呕吐、黑便、食欲减退、发热、乏力、消瘦等, 其中最主要临床表现为腹痛。50 例胃原发性恶性淋巴瘤中, 1 例为外周T 细胞性淋巴瘤;49 例为B 细胞性淋巴瘤, 其中弥漫大B 细胞性淋巴瘤(di use large Bcell lymphoma, DLBCL) 34 例, 黏膜相关淋巴组织淋巴瘤(mucosa associated lymphoid tissue lymphoma, MALT) 13 例, DLBCL 合并MAIT 淋巴瘤2 例。50 例胃原发淋巴瘤患者中共12 例接受手术治疗, 所有患者均接受化学治疗。49 例DLBCL 患者中14 例接受利妥昔单抗联合化学治疗, 35 例单纯化学治疗, 利妥昔单抗联合化学治疗患者的2 年总生存率优于单纯化学治疗患者(85.7% vs 77.1%, P<0.05)。临床分期I~II 期的患者2 年总生存率优于临床分期III~IV 期的患者(90.9% vs 71.4%, P<0.05)。结论:原发性胃恶性淋巴瘤患者临床表现以消化道症状为主, 但无特异性, 腹痛是最常见的表现。临床以组织病理检查为金标准, 最常见病理类型为DLBCL。治疗选择以化学治疗为主的综合治疗, 患者预后与临床分期、是否联合美罗华化学治疗相关。治疗后50 例患者的2 年总生存率达80.0%。     

cagA与cag致病岛在中国人群感染幽门螺杆菌中关系的研究

目前研究认为幽门螺杆菌 (Hp)的致病性主要与其毒力因子有关。而作为毒力相关因子基因群集的特殊染色体区域—— cag致病岛 (Pathogenicity island) [1 ] ,已成为 Hp致病机制研究中新的热点之一。 cag致病岛编码蛋白的功能经计算机分析 ,推测为毒素及毒素转运功能相关的分泌系统 [1 ,2 ] 。本文在基因水平探讨毒素相关基因 A (cag A )与 cag致病岛在中国人群感染 Hp中的检出关系 ,为 cag致病岛的存在及相关意义的研究提供快捷、有效的方法。1　材料和方法1.1　菌株来源及细菌培养　胃镜下取患者胃窦粘膜活检组织 ,涂布于含 10 %脱纤维羊…     

弥漫性大B细胞淋巴瘤临床病理分析

目的按照WHO关于B细胞淋巴瘤的新分类,对我省部分弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)进行形态学、免疫学表型及基因重排的研究。探讨三结合方案在DLBCL中的诊断和鉴别诊断价值。方法收集28例弥漫性大B细胞淋巴瘤,进行组织形态学观察和免疫表型测定,同时采用PCR扩增对其进行免疫球蛋白重链(IgH)和T细胞受体β基因(TCR-β)克隆性重排的研究。结果28例弥漫性大B细胞性淋巴瘤有四种变型,分别为中心母细胞型17例(60.7%),免疫母细胞型5例(17.8%),间变性大细胞型4例(14.3%),富于T细胞或组织细胞型2例(7.1%)。免疫组织化学标记:28例DLBCL肿瘤细胞CD20均阳性表达(100%);4例间变性大细胞型DLBCL肿瘤细胞CD30阳性表达(14.3%);1例中心母细胞型DLBCL肿瘤细胞CD5阳性表达(3.5%);1例富于T细胞或组织细胞型DLBCL肿瘤细胞Lysozyme阳性表达(3.5%)。PCR扩增检测结果:DLBCL中IgH重排9例(32.1%),TCR重排10例(35.7%),双阳性2例(7.1%),总的阳性率为75.0%。结论弥漫性大B细胞淋巴瘤的诊断和鉴别诊断,长期以来一直是病理工...     

幽门螺杆菌Vac A与Cag A在胃癌形成过程中的作用

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是一种微需氧的、螺旋状的革兰氏阴性杆菌。大量研究证实Hp与胃的癌前疾病、癌前病变及胃癌的发生发展密切相关,近年来研究的热点是Hp菌株的2个重要基因:空泡毒素基因(vacuo-lating toxin gene A,vac A)和细胞毒素相关基因(cytotoxinassocia     

幽门螺杆菌cag致病岛的研究进展

幽门螺杆菌(Helicobacter pyfori,Hp)是人类常见的致病菌,它的感染不但与B型胃炎和消化性溃疡的发生密切相关,而且与非溃疡性消化不良,MALT淋巴瘤和胃癌等也有重要关系H叫0。其致病物质有尿素酶、细胞相关毒素、空泡毒素(VacA),而cag致病岛(cag pathogenicity island,cag PAI)是坳中又一致病相关因素。所谓cag致病岛是指某些致病菌染色体上毒力因子群集的特殊区域。随着对Hp致病机制的深入研究,作为其重要结构的cag致病岛,已受到很多学者关注。本文将对其作一简要综述。     

幽门螺杆菌的cagA基因和iceA基因与胃十二指肠疾病的关系

目的 :探讨幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)cagA基因及iceA基因的存在情况与胃十二指肠疾病的关系。方法 :用PCR方法检测 174例临床病人胃粘膜活检标本中Hp的cagA基因及iceA基因的存在情况。 结果 :cagA的检出率为 89.7% (15 6 / 174) ,iceA1的检出率为 6 2 .1% (10 8/ 174) ,iceA2的检出率为 32 .2 % (5 6 / 174) ,7例为iceA1和iceA2皆阳性 ,3例未能检测到iceA等位基因型。各疾病组间cagA、iceA1、iceA2的检出率无统计学差异。结论 :cagA基因及iceA基因不能作为本地区Hp毒力增强的标志。     

Preparation and identification of the oligonucleotide chip for detecting the virulence-associated genotypes and drug resistance of Helicobacter pylori

OBJECTIVE: To develop an oligonucleotide microarray-based method for the simultaneous detection of Helicobacter pylori (Hp) infection, virulence-associated genotypes, and drug resistance. METHODS: Hp was classified into cagA + and cagA- genotypes based on its virulence. Clarithromycin-resistance of Hp was identified by existence of point mutations in 23S rRNA. We constructed an oligonucleotide microarray chip to simultaneously diagnose Hp infection and detect its virulence-associated genotypes and mutations associated with clarithromycin-resistance. The diagnostic accuracy of the constructed microarry was tested with templates of wild type and mutated type. RESULTS: The oligonucleotide chip accurately detected cagA + and cagA- genotypes of Hp, as well as four common point mutations in 23S rRNA related to clarithromycin-resistance. CONCLUSION: Oligonucleotide microarry chip can be used to diagnose Hp infection and test its virulence-associated genotypes and drug resistance simultaneously.     

幽门螺杆菌毒力基因与克拉霉素耐药基因突变相关性

目的 分析浙江省台州地区幽门螺杆菌（helicobacter pylori,Hp）cagA和VacA为主的毒力基因型分布,探讨其与克拉霉素耐药基因突变类型的关系。方法 招募存在上消化道症状患者,并行胃镜检查活检患者胃黏膜组织。通过Hp分离培养方法,培养出216株Hp。采用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测并分析cagA和VacA的分型情况。采用PCR扩增和Sanger测序技术检测克拉霉素耐药基因（23S rRNA）2142和2143位碱基点突变情况。结果 CagA基因的阳性检出率为99.54%（215/216）,其中CagA-D为95.83%（207/216）、CagA-C为3.70%（8/216）。VacA基因阳性检出率为97.22%（210/216）,s1、s2、m1、m2亚型分别为97.22%（210/216）、0、35.19%（76/216）、60.65%（131/216）。本研究发现,浙江省台州地区毒力基因以CagA-D和VacAs1 m2型为优势基因型。此外,23S rRNA基因2142和2143位点均未突变的有93株。突变的有123株,其中A2142G位点突变4株、A2143G位点突变119株。毒力基因型与23S rRNA基因2142和2143位点突变类型无相关性（P>0.05）。结论 台州地区为HP高毒力地区,且以CagA-D和VacAs1 m2型为主,其分布与克拉霉素耐药基因突变无密切相关性。     

插入序列IS605与cag致病岛分割在中国人幽门螺杆菌中的不一致性

目的:探讨中国人群感染的幽门螺杆菌(Hp)中IS605在 cag致病岛基因分割中的地位和作用.方法:采用PCR方法检测107例临床分离培养的Hp菌株,分别扩增cagA中的298 bp片段、cag致病岛中cagⅠ与cagⅡ连接处的228 bp片段及IS605中的1 167 bp片段.结果:作为cag致病岛一部分的cagA,其阳性的检出率为92.5％,在慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌等疾病间的检出率无显著差异(P>0.05).cagⅠ与cagⅡ连接处、即未被分割为cagⅠ与cagⅡ的cag致病岛的检出率仅有4.7％,而作为参与分割cag致病岛的IS605,其检出率仅有43.9％,明显低于被分割为cagⅠ与cagⅡ的cag致病岛的检出率,IS605在十二指肠溃疡中的检出率(13.6％)明显低于慢性胃炎(52.2％)中的检出率(P<0.05).而呈连续状态cag致病岛在十二指肠溃疡中的检出率(14.8％)则显著高于慢性胃炎(1.5％)中的检出率(P<0.01).结论:在中国人群感染的Hp中,IS605的检出率与cagⅠ与cagⅡ呈连续状态的cag致病岛检出率明显不符,提示不仅有IS605,可能还存在有其他类似转座子的基因成分参与cag致病岛分割.     

慢性胃炎患者口腔幽门螺杆菌对胃幽门螺杆菌根除率的影响

目的 明确慢性胃炎患者口腔内幽门螺杆菌（Helicobaeter pylori,Hp）对胃幽门螺杆菌根除率的影响.方法 选择65例有慢性胃炎症状、并经全口牙周检查有不同程度牙周炎的患者进行胃镜检查,每例均取口腔标本进行Hp检测.对胃Hp感染患者治疗后4周以及1年后分别复查胃Hp的感染状况,Hp检测采用碳13呼气试验.引物选用尿素酶C基因和CagA基因,PCR检测Hp.结果 口腔Hp阳性者龈下菌斑与龈上菌斑中的Hp阳性率比较,P〈0.01;慢性胃病Hp的检出率与牙周临床指数相关,牙周袋深度（PD）≥4 mm部位菌斑中Hp检出率显著高于PD〈4 mm的部位（P〈0.05）;口腔Hp阳性患者用药4周后的胃Hp根除率稍低于用药前口腔Hp阴性患者（68.0%vs 69%,P〉0.05）,用药1年后的胃Hp根除率更是显著低于口腔Hp阴性组（32.0%vs 66%,P〈0.05）.结论 慢性胃病患者胃Hp的根除率受口腔Hp存在的影响;牙周炎患者口腔Hp阳性者的胃Hp根除率显著低于口腔Hp阴性者根除率.     

幽门螺杆菌基因分型及耐药检测寡核苷酸芯片的制备及鉴定

目的探讨应用寡核苷酸芯片简单快速检测幽门螺杆菌(HP)感染并对其致病性相关的基因型及耐药性同时进行检测的方法,并进行鉴定。方法根据Hp的致病性将其分为cagA 和cagA-两种基因型,通过检测23SrRNA基因是否发生点突变判断其对克拉霉素的耐药性。应用寡核苷酸芯片技术对临床标本的Hp进行基因分型和耐药性检测,并制备相应的寡核苷酸芯片。通过构建的野生型模板和突变模板证实制备的寡核苷酸芯片的准确性。结果制备的寡核苷酸芯片可准确地将Hp分为cagA 和cagA-两种基因型,并能够通过检测23SrRNA基因中4种常见的、与克拉霉素耐药性密切相关的点突变,判断幽门螺杆菌对克拉霉素的耐药性。结论应用寡核苷酸芯片可快速检测Hp感染并同时对其致病性相关的基因型及耐药性进行检测。     

35例胃肠道B细胞淋巴瘤的临床病理分析

目的:探讨胃肠道B细胞淋巴瘤的临床特点和病理诊断。方法:对35例胃肠道B细胞淋巴瘤分别进行HE染色和免疫组织化学染色。临床病理学观察内容包括患者年龄、性别、肿瘤发生部位、肿瘤的组织形态学等。免疫组织化学染色采用EliVision plus法。结果:35例胃肠道B细胞淋巴瘤的男女之比为1.3∶1;发病年龄25～83岁,平均59岁。诊断为弥漫性大B细胞淋巴瘤19例(54%);黏膜相关组织边缘区B细胞淋巴瘤(MALT淋巴瘤)7例(20%);套细胞淋巴瘤7例(20%);不能分类2例(6%)。发生于胃18例(51%);发生于小肠7例(20%);发生于结肠6例(17%);发生于回盲部、阑尾、肛管、吻合口各1例。免疫组织化学标记:所有病例均表达CD20和CD79a,不表达CD3,不同类型淋巴瘤不同程度表达CD10、bcl-6、MuM1、CyclinD1等。结论:胃肠道B细胞淋巴瘤主要分为弥漫性大B细胞淋巴瘤和小B细胞淋巴瘤两大类;胃肠道小B细胞淋巴瘤以MALT淋巴瘤和套细胞淋巴瘤多见;对胃肠道B细胞淋巴瘤中的诊断进行了分析和总结。     

唾液幽门螺杆菌致病菌型的PCR检测分析

目的 :通过检测唾液中幽门螺杆菌 (HelicobacterpyloriHp)的细菌菌型 ,了解唾液Hp的不同致病菌型及其与胃内Hp菌型的同源性。方法 :采用分子生物学PCR法 ,用胃内Hp的 4种致病菌菌型的特异性引物来检测唾液Hp的致病菌型。 结果 :4 0个唾液Hp阳性样本中 ,感染cagA基因的致病菌阳性率为 6 5 % ;感染含vacAm1基因的致病菌的阳性率为 6 7.5 % ;感染含vacAm2基因的致病菌的阳性率为 5 5 % ;感染含vacAs1基因的致病菌的阳性率为 6 5 %。结论 :唾液Hp与胃内Hp的致病菌型存在相关性 ,唾液Hp与胃内Hp的感染存在一定的病因学联系。