激活LXR对海马神经元神经甾体合成的促进作用

目的:研究肝X受体(LXR)激活对海马神经元神经甾体合成的影响.方法:将大鼠海马神经元体外培养至第7日,在培养液中加入2.0μmol/L T0901317,继续培养48 h.应用高效液相.质谱联用(HPLC-MS)分离测定培养液中游离型神经甾体孕烯醇酮(PREG)、脱氢表雄酮(DHEA)和结合型神经甾体孕烯醇酮硫酸酯(PREGS)、脱氢表雄酮硫酸酯(DHEAS)的含量;RT-PCR方法观察海马神经元P450侧链裂解酶(P450scc)、甾体合成快速调节蛋白(StAR)和3β-羟基甾醇脱氢酶(3β-HSD)等神经甾体合成关键酶基因的mRNA的表达.结果:T0901317激活LXR,促进P450scc,StAR和3β-HSD的mRNA表达,增加海马神经元培养液中神经甾体PREG,DHEA,PREGS和DHEAS含量.结论:LXR激活时,可通过上调海马神经元P450scc,StAR和3β-HSD的mRNA表达.促进神经甾体的合成.     

不同方式低氧对大鼠离体主动脉环内皮依赖性舒张功能的影响

目的 比较不同方式低氧对大鼠离体主动脉血管环舒张功能的影响.方法 3组雄性wistar大鼠,分别经正常氧、慢性低氧及间断低氧30 d,取大鼠胸主动脉血管环,测定其对不同浓度(10-8 mol/L～10-5mol/L)乙酰胆碱(Ach)的舒张反应.结果 与常氧对照组比较,持续低氧组血管环对低浓度Ach(10-8,10-8×3mol/L)的舒张反应有所下降(P<0.05).而间断低氧组血管环对多数浓度Ach(10-8、10-8× 3、10-7、10-7×3、10-6mol/L)的舒张反应较常氧对照组和持续低氧组均明显降低(P<0.05或P<0.01).结论 间断低氧易导致大鼠主动脉内皮依赖性血管舒张(EDVR)功能受损.     

大鼠血清中二十碳五烯酸与二十二碳六烯酸的气相色谱测定法研究

目的 :用气相色谱测定法观察改变大鼠饲料成分后 ,其血清中二十碳五烯酸 (EPA)与二十二碳六烯酸 (DHA)组分含量的变化。方法 :选用丁二酸二乙二醇酯 (DEGS)色谱柱。样品经提取后用三氟化硼 -乙醚 /甲醇 ,甲酯化处理。结果 :两者酯化率均为 97.1%～ 10 0 .8% ,回收率前者为 92 .8% ,后者为 91.2 %。线性关系前者为 10～ 160mg/L ,后者为 2 0～ 2 0 0mg/L。 结论 :用气相色谱法测定大鼠血清中的EPA与DHA快速、准确且灵敏度高。     

不同浓度硝酸甘油对大鼠离体心脏保护8 h的效果

目的 探讨在托马斯液中加入不同浓度硝酸甘油对大鼠离体心脏保护8 h的效果.方法 取30只Wistar大鼠,建立Langendorff离体心脏灌注模型,按保存液不同随机分为单纯托马斯液组、托马斯液+4×10-6 mol/L硝酸甘油组和托马斯液+4×10-5 mol/L硝酸甘油组,每组10只,比较4 ℃低温保存8 h后各组心脏功能指标;切取左心室壁组织于透射电镜下观察超微结构变化.结果 4 ℃低温保存8 h后,与单纯托马斯液组相比,托马斯液+4×10-5 mol/L硝酸甘油组的心功能显著改善,细胞超微结构受损较轻;而托马斯液+4×10-6 mol/L硝酸甘油组各指标则无显著改善.结论 在托马斯液中加入4×10-5 mol/L硝酸甘油可显著提高大鼠离体心脏的保存效果.     

阿托伐他汀对醛固酮诱导心脏成纤维细胞内皮素表达的影响

目的:研究阿托伐他汀对醛固酮诱导大鼠心脏成纤维细胞(CFs)内皮素(ET)表达的影响.方法:以培养的新生SD大鼠CFs为实验模型,放免法检测CFs培养液中ET水平,流式细胞术测定CFs中的ET-1含量,RT-PCR测定内皮素-1前体(ppET-1)mRNA的表达.结果:醛固酮(1×10-7 mol/L)组CFs培养液中ET水平和CFs中的ET-1含量及ppET-1mRNA的表达明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);醛固酮(1×10-7 mol/L) 阿托伐他汀(1×10-6,1×10-5,1×10-4 mol/L)组明显低于醛固酮(1×10-7 mol/L)组,差异有统计学意义(P＜0.01);醛固酮(1×10-7 mol/L) 阿托伐他汀(1×10-4 mol/L) 甲羟戊酸(1×10-3 mol/L)组明显高于醛固酮(1×10-7 mol/L) 阿托伐他汀(1×10-4mol/L)组,差异有统计学意义(P＜0.01),但和醛固酮(1×10-7 mol/L)组接近,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:阿托伐他汀可抑制醛固酮诱导的CFs ppET-1 mRNA表达以及ET-1的合成和分泌,其机制可能与甲羟戊酸代谢途径有关.     

高效液相色谱法测定室内屋尘麦角甾醇的含量

目的建立室内屋尘中麦角甾醇含量的高效液相色谱测定方法.方法屋尘样过200目筛,加甲醇超声提取、过滤、冷凝回流、皂化、蒸干后高效色谱仪定量测定.色谱条件为:以Inertsil ODS-3柱(250 mm×4 mm,5μm)反相柱为固定相,以100%乙腈为流动相,流速为1.0 mL/min,紫外检测波长为282 nm.结合气-质联用技术进行定性以及分子结构的分析.结果标准曲线的范围是5.04×10-5至2.02×10-3 mol/L,r=0.999 2,线性良好,最低检测浓度为1.26×10-6mol/L;日内及日问相对标准差(RSD,n=3)分别为10.2%～11.7%和4.54%～7.34%,绝对回收率为77.1%～80.1%.结论本方法操作简便、灵敏、准确,具有实用性,可用于环境中麦角甾醇的含量测定.结合气-质联用技术,复核结果的可靠性.     

以抗体竞争结合抗原测定单抗亲和力常数的研究

目的在Friguent方法基础上建立更加稳定可靠的基于抗原/抗体竞争结合原理的单抗亲和力常数(Kd)检测方法。方法以抗体对抗原进行竞争结合,通过双抗体夹心法检测在一定抗体浓度竞争下抗原的结合率计算Kd值。结果用改良方法在两次不同条件下检测抗IL-8单抗的Kd值分别为:2.61×10-12mol/L和2.39×10-12mol/L,而使用Friguent方法在两次不同条件检测抗IL-8单抗的Kd值分别为:5.57×10-10mol/L和1.41×10-10mol/L。结论相对于Friguent方法,本研究计算出的Kd值更能反映抗原/抗体结合的真实情况,而且在不同实验条件下检测结果重现性强。     

替硝唑单扫示波极谱法测定

在0.1mol/L KCl溶液(pH=6.50)中,替硝唑在汞电极上可得到一线性扫描还原峰,其峰电位Ep=-0.580V(Vs.SCE),峰电流(ip)与替硝唑浓度在2×10-5～9×10-7mol/L(r=0.999 8)范围内呈良好线性关系.替硝唑的检出限可迭4×10-7mol/L.该法用于模拟尿样的测定和替硝唑片剂含量的测定,结果令人满意.     

气相色谱-质谱联用同时测定龙脑樟鲜叶中右旋龙脑、樟脑及异龙脑的含量

目的建立气相色谱-质谱(GC-MS)联用同时测定龙脑樟鲜叶中右旋龙脑、樟脑及异龙脑含量的方法。方法采用超声辅助水蒸气蒸馏法提取龙脑樟鲜叶,60%乙醇重结晶,GC-MS法测定右旋龙脑、樟脑及异龙脑的含量。色谱条件:色谱柱为石英毛细管柱(30.00 m×250.00μm×0.25μm),载气为高纯氦气,纯度≥99.999%,进样量1μL,柱温从60℃开始程序升温,流速1 mL/min,进样口温度280℃。质谱条件:电子能量70 eV,离子源温度230℃,溶剂切除时间5.0 min,扫描范围50～650 m/z,扫描模式为全扫描。结果右旋龙脑、樟脑及异龙脑的回归方程分别为Y=2.0×10~8X+1.0×10~8(r=0.999 9),Y=7.0×107X-3.0×107(r=0.999 9),Y=8.0×107X-8. 0×107(r=0.999 9),表明三者分别在0.03～0.27μg,0.06～0.48μg,0.05～0.36μg范围内线性关系良好。三者的平均回收率分别为96. 32%,95. 49%和97. 51%,RSD分别为1. 92%,0.85%和1.87%。从龙脑樟鲜叶中提取纯化后的右旋龙脑含量百分比均在98.09%以上,樟脑含量百分比较低,不含异龙脑。结论该法操作简便、准确,灵敏度、精密度高,分析速度快,可作为龙脑樟药材的质量控制,并为龙脑樟药材的综合利用提供了科学依据。     

纳米粒子催化化学发光测定血样中葡萄糖含量的应用研究

目的：探究纳米粒子催化化学发光在测定血样中葡萄糖含量的应用。方法用聚合物壳聚糖将钴铁氧体纳米粒子进行修饰,催化鲁米诺过氧化氢体系产生化学发光,结合流动注射技术,通过测定葡萄糖氧化后产生的过氧化氢含量来间接测定葡萄糖的含量。结果葡萄糖检测的线性范围为：5×10-8～1×10-5 mol/L,检测限低至1×10-8 mol/L。结论该方法简单快速,对不同血样中的葡萄糖含量的测定结果与医院的测定结果一致。