山羊肺泡巨噬细胞的分离、培养与鉴定

目的建立一种高纯度的肺泡巨噬细胞分离培养方法,为研究巨噬细胞生物学特性,开展细胞内寄生菌存活机理研究提供材料。方法在无菌环境下以PBS多次灌洗山羊肺脏,收集细胞后,用外周血单核细胞分离液结合密度梯度离心法从混合细胞中分离出羊肺泡巨噬细胞;培养于含10%胎牛血清的细胞培养基中,倒置显微镜下观察细胞形态,并利用其对鸡红细胞的吞噬功能检测细胞活性;采用流式细胞术检测单核巨噬细胞表面特征性标志CD14。结果获得的贴壁细胞具典型的巨噬细胞形态学特征,有伪足和突起伸出,呈现圆形及不规则形状,胞浆丰富,胞体较大;培养的巨噬细胞54.5%吞噬了鸡红细胞,具有较强的吞噬活性;在体外连续培养近一个月,仍有93.7%的细胞能特异性表达CD14抗原,具有巨噬细胞特异性免疫表型。结论本研究获得的山羊肺泡巨噬细胞纯度高、生物活性好,为开展细胞内寄生菌的疾病机理研究提供了细胞模型。     

地塞米松对M-CSF体外诱导分化的骨髓巨噬细胞的影响

目的研究地塞米松对单核细胞集落刺激因子(M-CSF)体外诱导分化的骨髓巨噬细胞的影响。方法 M-CSF诱导分化的小鼠骨髓巨噬细胞,采用不同浓度地塞米松处理,进行形态学观察及增殖生长测定。免疫荧光法检测其吞噬功能,RT-PCR技术检测巨噬细胞各种细胞因子mRNA水平的表达。结果不同浓度地塞米松处理后,M-CSF体外诱导分化的骨髓巨噬细胞的增殖活性被明显抑制,且具有剂量依赖性;而且M-CSF体外诱导分化的骨髓巨噬细胞的吞噬活性被有效抑制。经过地塞米松处理后细胞趋于类圆形,伪足变宽、变短。地塞米松能抑制M-CSF体外诱导分化的骨髓巨噬细胞的促炎症因子mRNA水平的表达。结论地塞米松能有效抑制M-CSF体外诱导分化的骨髓巨噬细胞的活化及功能,为其作为免疫调节剂治疗噬血细胞综合征提供实验依据。     

驻极体静电场对巨噬细胞迁移能力的影响

目的 探讨驻极体产生的静电场对巨噬细胞迁移能力的影响.方法 常温下利用低温等离子体放电法(栅控恒压电晕放电)制备得-2000 V聚丙烯驻极体,借助常规等温表面电位衰减测量方法研究驻极体在储存和实验条件下的电荷储存稳定性.用紫外线消毒后的驻极体作用于对数生长期的小鼠巨噬细胞(RAW264.7细胞),采用细胞划痕实验、Transwell细胞实验、荧光探针示踪法研究在驻极体静电场作用下细胞的迁移和形态变化.结果 -2000 V驻极体在常温、常湿条件下放置14 d时其表面电位稳定在初始值的70％,置于细胞培养箱28 h后其表面电位与0 h时相比差异无统计学意义(P>0.05).细胞划痕实验结果显示,驻极体静电场作用28 h时RAW264.7细胞向划痕区迁移、增殖能力增强,划痕面积减小.Transwell实验结果显示,驻极体静电场作用12和24 h时跨膜细胞数均较对照组增加(P均<0.01).荧光探针示踪实验结果显示,驻极体静电场作用下RAW264.7细胞体积变大,发生延展,褶皱增多,生出板状伪足、丝状伪足等突足结构.结论 制备的-2000 V驻极体可在体外提供稳定的静电场并持续作用于细胞,其静电场促进巨噬细胞体积变大、发生延展、褶皱增多并生出板状伪足和丝状伪足等突足结构,增强了巨噬细胞的迁移能力.     

LPS等丝裂原所致THP-1细胞活化增殖的优化因素

目的 探讨LPS等丝裂原所致THP-1细胞增殖分化的优化因素.方法 利用MTT法及改良WST-8法测定,THP-1细胞的增殖情况,并对THP-1细胞生长特性及其曲线进行测定,同时测定成熟THP-1细胞的吞噬功能.由此探讨LPS、PHA、ConA对PMA诱导成熟的THP-1细胞活化增殖的最佳浓度及作用时间曲线.结果 WST-8法测定THP-1细胞增殖活性优于MTT法,比较敏感;THP-1细胞增殖测定表明LPS比PHA、ConA效果好;LPS浓度在1μg/ml、作用24 h可充分诱导活化巨噬细胞,同时巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力.结论 LPS可使巨噬细胞活化增殖,并且吞噬功能明显增强.     

γ射线照射后大鼠脾脏巨噬细胞内异噬与自噬的关系

本文研究了丙种射线照后大鼠脾脏巨噬细胞的超微结构变化,特别着重于溶酶体的活动情况及其酸性磷酸酶(AcP)的活性。丙种射线照射导致脾脏巨噬细胞大规模地吞噬受损淋巴细胞和红细胞,于是在巨噬细胞内形成大量具有AcP酶活性并转化为异噬溶酶体(HPL)的异噬体。随后,部分大HPL出现绞窄,并分离形成许多小溶酶体。有部分大HPL进一步变扁平并伸出伪足样突起包围某些胞质区或细胞器(如小溶酶体)而形成自噬溶酶体。溶酶体的这些行为可能与巨噬细胞内溶酶体系统的调节或自我控制有关。     

布氏菌感染人巨噬细胞模型的建立与鉴定

目的建立布氏菌感染人单核-巨噬细胞模型。方法用Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞(PBMC),用含重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rh GM-CSF)的RPMI1640诱导巨噬细胞;光学显微镜观察、瑞氏染色法等从形态上检测诱导的巨噬细胞;通过鸡红细胞吞噬实验和布氏菌吞噬实验检测其吞噬功能。结果 rh GM-CSF可诱导来自人外周血单个核细胞分化为具有较强贴壁能力的巨噬细胞样细胞,该细胞对鸡红细胞和布氏菌表现出明显吞噬作用。结论利用rh GM-CSF成功地诱导人外周血单个核细胞获得巨噬细胞,可用于建立布氏菌感染人单核-巨噬细胞模型。     

蜂胶调节小鼠免疫功能实验研究

目的:观察蜂胶对小鼠免疫功能的影响.方法:用MTT法、耳肿胀法、Jerne改良玻片法、血凝法、半体内法、乳酸脱氢酶测定法,分别观察小鼠脾淋巴细胞转化、迟发型变态反应、抗体生成细胞、血清溶血素、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞、NK细胞活性状况.结果:蜂胶提取物具有增强小鼠细胞免疫功能和体液免疫功能的作用.蜂胶提取物还具有增强小鼠巨噬细胞吞噬功能和小鼠NK细胞活性的作用.结论:蜂胶能增强小鼠免疫功能.     

健康老年人骨髓细胞分类及形态学观察

对３０例健康老年人骨髓细胞分类及形态学进行了观察，结果发现健康老年人骨髓原始和各种幼稚位细胞降低，杆状和分叶核粒细胞正常；原始红细胞降低，各种幼稚红细胞增高；原始、颗粒和裸核巨核细胞正常，幼稚巨核细胞降低，产板巨核细胞增高；淋巴细胞降低；浆细胞增高；原始单核细胞正常，幼稚和单核细胞降低；巨噬细胞增高；红细胞系细胞形态学可见点彩晚幼红细胞、花瓣样晚幼红细胞、幼红细胞核分裂相和嗜碱性点彩红细胞，其它系列细胞形态正常。本文还对健康老年人骨髓细胞分类及形态学变化的原因进行了分析。     

pH对溶组织内阿米巴运动的影响

用细胞电泳技术,对两株溶组织内阿米巴在pH梯度中的细胞电泳及伪足形成情况进行观察。结果表明:随着pH值变大,电泳速度加快,伪足出现率也增多,两者之间具有显著的相关性。提示阿米巴的伪足运动可能与其质膜的电荷变化有关。     

应用特异性吞噬试验与ELISA及PHA检测抗HBAg i-RNA免疫活性研究

本文应用特异性细胞吞噬试验、PHA与ELISA在小鼠模型系统中对抗HBAgi-RNA的免疫活性进行了一些探讨。结果如下: 1.正常小鼠及N-RNA和i-RNA致敏鼠吞噬试验检测:为证明抗HBAgi-RNA是否具有细胞免疫活性,应用小鼠腹腔巨噬细胞对醛化羊红细胞的吞噬和对HBsAg致敏羊红细胞的吞噬,分别测定了特异及非特异吞噬功能,发现N-RNA、     

小鼠类巨shi细胞系MMC—1生物学特性的缩时显微电影分析

By using time-lapse microcinematography, we recorded and conducted an analysis of the macrophage-like cell line MMC-1, including observations of the spreading, polarity, contact inhibition and mitosis common to cultured cells as well as the properties of phagocytosis and rosette formation unique to macrophage. We also found an MMC-1 cell which, after feeding, still stretched its finger-like filopodia towards surrounding red blood cells. The filopodia extended as red blood cells moved towards them. At the point of contact, red blood cell fragments were seen moving towards the cell body along the filopodia; a kind of cytolysis was progressing.     

人大肠肥大细胞多态性光镜特征(两种新类群:CTMC-1与MMC-1的发现)

人体肥大细胞的多态性已受到广泛关注,对于肥大细胞分型的研究已成为这一问题的关键。本实验研究了42例人大肠4种肥大细胞类群光镜特征,其中两种为作者的新近发现,暂命名为结缔组织肥大细胞-1(CTMC-1)和粘膜肥大细胞-1(MMC-1)。     

保存前滤除白细胞对红细胞保存质量的研究分析

目的 探讨保存前滤除白细胞对不同保存时期红细胞的质量影响.方法 随机采集10名志愿健康献血者全血400×10袋,常规分离血浆制备成悬浮红细胞2μ×10袋.根据配对设计方法,将血液等量分成两份1μ×20袋,其中10袋在2～4℃静置2～4h后用一次性去白细胞滤器滤除白细胞制备少白细胞红细胞（LPRC）为滤过组,另10袋不做其它处理直接保存悬浮红细胞（CRCs）为对照组.在两组相同保存期0、7、14、21、28、35d分别测定：1）红细胞平均体积MCV、红细胞分布宽度RDWR;2）保存期红细胞形态观察;3）红细胞ATP水平;4）悬浮红细胞上清液检测钾离子K＋、乳酸脱氢酶LDH.结果 两组MCV,RDWR随保存时间延长未见明显改变P〉0.05.两组红细胞ATP水平随保存期延长逐渐下降无显著差异P〉0.05,保存35d时两组红细胞ATP水平下降至0.92mmol/L、0.97mmol/L以下,同时镜下观察到对照组有10%左右、滤过组5%左右红细胞棘状样变,但未见畸形红细胞.对照组和滤过组K＋随保存时间延长逐渐增加,对照组增加速度略高于过滤组,至保存期14d两组差异有统计意义P〈0.05.与滤过组相比对照组LDH增加速度明显高于滤过组,除0d外其他保存期两组差异均有统计意义P〈0.01.结论 过滤组可见LDH水平明显抑制,K＋增加速度相对较缓.两组红细胞ATP水平随保存期延长逐渐下降,并出现数量和程度不等的红细胞棘状样改变,提示保存前去除白细胞可能更有利于红细胞保存.     

外周血异常红细胞形态学检验与诊断的意义

红细胞形态学检查在临床检验中易被忽视。观察红细胞形态一般以外周血涂片较为可靠。由于各类型血液细胞分析仪尚不具备识别红细胞、白细胞和血小板形态的能力,只能用作健康人血液一般检验的筛查,其结果可为是否需要进一步镜检提供筛检信息,尚不能完全代替显微镜对各类血细胞的识别和分类检查。现从红细胞大小、形态、数量、红细胞内血红蛋白含量改变、自身抗体引起红细胞凝集现象以及红细胞结构异常等几个方面进行总结,主要介绍外周血涂片中成熟红细胞的各种形态特征和临床意义,目的是要重视外周血红细胞形态特点,提高诊断水平。     

高血糖对非胰岛素依赖型糖尿病患者红细胞（Ca~（2＋）－Mg~（2＋））－ATP酶的影响

为了解高血糖对非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者红细胞膜（Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋）－Ａｒｐ酶的影响，采用改良的Ｈａｎａｈａｎ和Ｌｕｔｈｒａ法测定了红细胞膜（Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋）－ＡＴＰ酶活性。结果表明，ＮＩＤＤＭ患者红细胞膜（Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋）－ＡＴＰ酶活性降低，且与空腹血糖、糖化血红蛋白、果糖胺及红细胞变形指数呈负相关，后者与红细胞内Ｃａ２＋浓度呈正相关。说明（Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋）－ＡＴＰ酶活性下降时，红细胞变形能力降低，可能与患者红细胞膜蛋白的过度糖化及细胞内Ｃａ２＋浓度的增高有关。     

血常规检查在鉴别诊断地中海贫血和缺铁性贫血中的临床意义

目的探讨血常规检查在地中海贫血和缺铁性贫血中的临床意义。方法选取本院2017年10月至2019年10月收治的72例贫血患者作为贫血组,另选取本院同期健康体检者72名作为健康对照组。比较两组红细胞、血红蛋白、红细胞平均血红蛋白含量和红细胞平均体积;比较不同类型贫血患者血常规检测指标;比较单一血常规指标检测和联合检测的阳性检出率。结果贫血组红细胞、血红蛋白、红细胞平均血红蛋白含量和红细胞平均体积均低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。缺铁性贫血患者红细胞和血红蛋白水平均低于地中海贫血患者,差异有统计学意义(P<0.05);二者红细胞平均血红蛋白含量和红细胞平均体积比较差异无统计学意义。红细胞、血红蛋白、红细胞平均血红蛋白含量和红细胞平均体积联合检测对缺铁性贫血和地中海贫血的检出率均高于单项指标检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血常规检验方便快捷,在地中海贫血和缺铁性贫血的鉴别诊断中价值较高,值得临床推广应用。     

活血清热方对糖尿病大鼠红细胞中葡萄糖转运蛋白1的影响

目的：观察活血清热方对糖尿病大鼠的血糖、糖化血红蛋白、红细胞中葡萄糖转运蛋白1的影响。方法：65 mg/kg链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,活血清热方灌胃16周,氧化酶法检测大鼠血糖,免疫抑制比浊法测定糖化血红蛋白,western法检测红细胞中葡萄糖转运蛋白1含量。结果：模型组大鼠比正常组大鼠空腹血糖显著升高（P〈0.05）,糖化血红蛋白HbA1c显著升高（P〈0.05）,红细胞中葡萄糖转运蛋白1含量升高;活血清热方大鼠与模型组大鼠空腹血糖无显著差异（P〉0.05）,糖化血红蛋白HbA1c显著降低（P〈0.05）,红细胞中葡萄糖转运蛋白1含量下降。结论：活血清热方可能通过降低糖尿病大鼠红细胞中葡萄糖转运蛋白1,从而降低糖化血红蛋白。     

1294例成人静脉血血细胞参数的参考值范围调查

目的确定本市血细胞计数及其各参数的健康参考值范围。方法用美国雅培公司生产的1700型血细胞分析仪,对1294例健康成人作血细胞及其各参数的健康参考值范围调查,并将所得数据进行统计学处理。结果实验组红细胞（RBC）、血红蛋白（HB）、红细胞压积（HCT）均偏高,其他血细胞计数及其各参数的健康参考值与文献报道’值相比较基本一致,男女比较有差异。结论血细胞计数及其各参数与年龄、性别和区域有关,该参考值范围的确定．为血细胞计数及其各参数在本市实验室操作和临床应用方面提供了必要的依据。     

不同时间去除白细胞与红细胞免疫功能的关系研究

目的探讨去除白细胞时间对红细胞免疫功能的影响。方法选取53份标本分别留取三段,在采血后1h-2h、6h-8h、24h去除白细胞,进行红细胞C3b受体（EBC—C3b）花环试验和红细胞免疫复合物（RBC-m）花环试验。数据采用SPSS19．0软件进行统计学分析处理。结果随着时间的延长,RBC—C3b有减低的趋势,采血后1h-2h、6h,8h和24h两两比较,差异均具有统计学意义（P〈0．01）;RBC—IC却随着时间的延长有增高的趋势,1h-2h和6h-8h比较,无统计学意义（P〉0．05）,而1h-2h和24h、6h-8h和24h比较,差异均具有统计学意义（P〈0．01）。结论去除白细胞时间延长,红细胞免疫功能减低。     

新型微波解冻装置解冻冰冻红细胞的方法学评价

目的应用新型微波解冻装置解冻冰冻红细胞,检测质量控制指标,并对新型微波解冻装置和红细胞制备效果进行评价。方法应用新型微波解冻装置解冻以甘油为保护剂-80℃保存的红细胞,用不同浓度的洗涤液洗涤去除甘油,以红细胞回收率、游离血红蛋白含量、残余甘油含量、体外溶血试验和无菌试验为质量检测控制项目。结果新型微波解冻装置能快速冰冻红细胞,解冻后红细胞质量指标均达到《全血及成分质量要求》（GB18469-2001）的要求,在红细胞回收率方面有明显提高,并且缩短了制备时间。结论新型微波解冻装置能快速解冻冰冻红细胞,质量符合标准,为解决血液长期储存、保障供血和稀有血型患者输血及自身输血提供了新的方法和手段,特别在野战、自然灾害等特殊条件下急救能发挥作用,值得推广应用。