重组β-防御素2多肽对脓毒症大鼠肺组织细胞凋亡的影响

目的：观察重组β-防御素2多肽预处理对脓毒症大鼠肺组织细胞凋亡的影响。方法：SPF级SD大鼠48只随机分成对照组和防御素组，采用盲肠结扎穿孔术（CLP）复制脓毒症模型，防御素组在CLP前48h经气管插管气道滴注10^7PFU重组腺病毒（含有β-防御素2编码基因），而对照组则同法给予对照腺病毒（不合β-防御素2编码基因）。分别于CLP后0、12、36和72h处死大鼠，取肺组织，采用透射电镜，末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡，采用电镜、苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织病理变化。结果：TUNEL检测显示，对照组大鼠CLP后12、36和72h肺组织细胞凋亡指数显著增加（P〈0．01）；与对照组相比，防御素组CLP后相应时间点肺组织细胞凋亡指数显著降低（P〈0．05）。HE染色可见，两组大鼠CLP后12、36和72h肺泡及肺泡间质充血、水肿，炎症细胞渗出，肺泡腔不同程度狭窄。与对照组相比较，防御素组相应时间点肺组织内炎症细胞渗出减少，间质水肿减轻。结论：重组β-防御素2多肽预处理能抑制脓毒症肺组织的细胞凋亡，对急性肺损伤（ALI）具有保护作用。     

不同剂量脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的凋亡机制

目的研究不同剂量脂多糖(LPS)诱导的不同程度急性肺损伤(ALI)的细胞凋亡机制。方法雄性Sprague-Dawley大鼠20只,随机分为4组,每组5只,分别在七氟烷麻醉下经尾静脉注射1 mL 0.9%氯化钠溶液(对照组)或LPS 5、10、20 mg/kg(分别为LPS5组、LPS10组和LPS20组)。6 h后处死大鼠,通过苏木精-伊红染色观察大鼠肺组织形态学改变,肺组织湿/干比值(W/D值)评估肺组织水肿,脱氧核苷酸末端转移酶介导的生物素化dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)染色法检测肺组织细胞凋亡,Western印迹法检测肺组织中天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和凋亡诱导因子(AIF)的表达水平。结果光学显微镜下可见对照组大鼠肺组织无明显损伤,LPS5组大鼠肺组织结构轻微破坏,LPS10组和LPS20组大鼠肺组织损伤严重。LPS5组、LPS10组、LPS20组的W/D值均显著高于对照组(P值均<0.05),且随着LPS剂量的增加,LPS5组、LPS10组、LPS20组的W/D值依次增大,两两比较的差异均有统计学意义(P值均<0.05)。对照组大鼠肺组织基本未见到凋亡细胞,LPS5组、LPS10组、LPS20组大鼠肺组织的细胞凋亡率均显著高于对照组(P值均<0.05),凋亡细胞以肺泡上皮细胞为主。LPS5组大鼠肺组织中活化Caspase-3的相对表达量显著高于对照组(P<0.05),而LPS10组和LPS20组与对照组间的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。LPS5组大鼠肺组织中活化AIF的相对表达量较对照组有增加的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),但LPS10组和LPS20组活化AIF的相对表达量均显著高于对照组(P值均<0.05)。结论不同剂量LPS诱导的ALI中,5 mg/kgLPS诱导的较轻的ALI主要激活了Caspase-3凋亡途径,而10和20 mg/kg LPS诱导的较严重的ALI则主要活化AIF凋亡信号,这为ALI的抗凋亡治疗提供了潜在的靶点。     

灯盏花素肺部给药抗LPS致大鼠急性肺损伤的作用研究

目的 从组织因子（TF）的途径研究灯盏花素肺部给药抗内毒素（LPS）致大鼠急性肺损伤（ALI）的作用．方法 健康SD大鼠120只随机分成5组（n=24）：正常组、生理盐水组、灯盏花素组、LPS组和灯盏花素＋LPS组；观察2、6、12h的肺组织病理形态学变化、肺组织湿／干比、肺组织MPO活力、肺组织蛋白含量、血浆和支气管肺泡灌洗液（BALF）中TF含量．结果 与LPS组相比，灯盏花素＋LPS组大鼠肺组织损伤减轻，肺组织湿／干比下降（P〈0.05），肺组织MPO活力下降（P〈0．05），BALF蛋白含量减少（P〈0．05）．血浆和BALF中TF含量明显下降（P〈0．05）．结论 灯盏花素肺部给药对肺组织TF的产生具有抑制作用，能够减轻LPS致大鼠的ALI的损伤程度．     

远程缺血预处理对大鼠体外循环后肺泡上皮细胞凋亡与相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响

目的评价远程缺血预处理(RIPC)对大鼠体外循环(CPB)后肺泡上皮细胞凋亡与相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响。方法成年雄性SD大鼠60只,随机分为3组(每组n=20):假手术组(S组)、CPB组和RIPC+CPB组。S组行麻醉和穿刺但不行CPB;CPB组采用尾动脉插管灌注,右颈静脉插管引流建立CPB模型;RIPC+CPB组实施CPB前对后肢进行RIPC(通过驱血带阻断后肢血流10min,复灌10min,两侧后肢交替进行,每侧进行3次)。麻醉复苏后2h处死大鼠并取肺组织,光镜下苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织的病理学改变,TUNEL法检测肺泡上皮细胞凋亡情况,Western blot法检测Bax和Bcl-2蛋白表达水平。结果与S组比较,CPB组和RIPC+CPB组肺泡上皮细胞凋亡指数升高,Bax和Bcl-2蛋白表达上调,Bax/Bcl-2比值上升(P<0.05);与CPB组比较,RIPC+CPB组肺泡上皮细胞凋亡指数下降,Bax蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调,Bax/Bcl-2比值下降(P<0.05)。HE染色显示RIPC+CPB组肺组织细胞的形态学损伤轻于CPB组。结论 RIPC对大鼠CPB后的肺泡上皮细胞有明显的保护作用,其机制可能与调节凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达从而抑制细胞凋亡有关。     

穗花杉双黄酮调控miR-140-5p介导脂多糖致急性肺损伤的机制研究

目的 探究穗花杉双黄酮对脂多糖（lipopolysaccharides ,LPS）致大鼠急性肺损伤（acute lung injury ,ALI）的保护作用及机制研究。方法 将60只大鼠随机分为4组：对照组、模型组、阳性对照组、实验组。模型组、阳性对照组和实验组大鼠均通过气道滴注3.00 mg/kg LPS 100μl,空白对照组气道滴注等体积的生理盐水,6 h后阳性对照组大鼠腹腔注射地塞米松（2.5 mg/kg）,实验组大鼠腹腔注射穗花杉双黄酮（2.5 mg/kg）,对照组和模型组注射等体积生理盐水。48 h后称重测定大鼠肺组织湿/干比;苏木精-伊红染色( hematoxylin-Eosin staining,HE )观察各组大鼠肺组织病理结构;ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin 6,IL-6）和白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）水平;RT-PCR检测miR-140-5p在肺组织中的表达情况;蛋白印迹法（western Blot,WB）检测肺组织中Toll样受体4（Toll Like Receptor 4,TLR4）、核因子活化B细胞κ轻链增强子（nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells,NF-κB）蛋白表达水平。RT-PCR检测肺组织中miR-140-5p的表达情况。利用LPS刺激肺上皮细胞A549,加入穗花杉双黄酮RT-PCR检测miR-140-5P的表达,利用LPS刺激肺上皮细胞A549,加入miR-140-5P抑制剂、mimic-NC干预,RT-PCR检测TLR4、NF-κB的表达。结果 实验组肺组织湿/干比明显低于模型组（P＜0.05）;HE染色结果显示实验组大鼠肺组织结构相比于ALI模型组大鼠炎症细胞明显减少,肺泡间隔明显减轻;ELISA结果显示实验组大鼠肺组织中TNF-α、IL-6和IL-1β水平均明显低于模型组（P＜0.05）;WB结果发现实验组大鼠肺组织中TLR4、NF-κB表达量明显低于模型组;RT-PCR结果显示实验组大鼠肺组织和细胞中miR-140-5P表达均明显高于模型组（P＜0.05）,而miR-140-5P mimic能明显抑制TLR4、NF-κB的表达（P＜0.05）。结论 穗花杉双黄酮能明显缓解LPS诱导的大鼠ALI,降低肺损伤病理进程中血清TNF-α、IL-6和IL-1β的含量,对ALI起保护作用,其作用机制可能是通过促进了miR-140-5P的表达,从而减低ALI炎症过程中关键炎症信号TLR4、NF-κB的表达。     

星状神经节阻滞对体外循环大鼠海马神经元凋亡的影响

目的:观察星状神经节阻滞(SGB)对体外循环(CPB)下大鼠海马神经元凋亡的影响.方法:将40只SD大鼠随机分为4组,即假手术组(S组)、SGB组、CPB组、SGB+CPB组,于CPB后2h处死大鼠,取大脑组织和海马组织.苏木精—伊红(HE)染色检查海马神经元损伤情况;TUNEL法检测海马组织细胞凋亡;免疫组化法检测B...     

黄芪注射液对急性肺损伤大鼠肺组织中存活素表达的影响

目的 探讨黄芪注射液对急性肺损伤大鼠肺组织中存活素表达的影响.方法 将36只SD大鼠按随机数字表分为3组,各组注药均从尾静脉注入.对照组注入生理盐水1ml;模型组应用脂多糖5 mg/k溶解于1ml生理盐水注入;干预组在模型组基础上应用黄芪注射液治疗.24h后处死,收集右上肺组织固定包埋,常规HE染色,观察肺组织病理变化.用免疫组化和图像分析系统定量检测肺组织中存活素表达.用TUNEL原位凋亡法检测肺组织细胞凋亡,并计算凋亡指数.结果 干预组肺组织炎症改变明显轻于模型组.急性肺损伤大鼠肺组织存活素表达为对照组最高,其次为干预组,模型组最低;而肺组织细胞凋亡指数为模型组最高,其次为干预组,最低为对照组,差异均有统计学意义.存活素与凋亡指数呈负相关性.结论 黄芪注射液可能通过调控ALI大鼠肺组织中存活素表达,从而抑制肺组织细胞凋亡,而且黄芪注射液可能有改善ALI肺组织的病理改变.     

红景天苷对脂多糖所致小鼠急性肺损伤治疗的作用机理

目的 研究红景天苷(SDS)及其衍生物对脂多糖(LPS)所致小鼠急性肺损伤(ALI)的治疗作用。方法 将30只C57小鼠随机分为3大组(n=10):生理盐水对照组(NS组)、LPS组和LPS+SDS组。将LPS以尾静脉穿刺注射来建立动物模型,给药剂量为5 mg/kg。建模成功后,LPS+SDS组腹腔注射SDS,给药剂量40 mg/kg。NS组和LPS组注射相同剂量的无菌生理盐水。观察各组实验动物状态,24 h后摘除眼球取血,收集血清和肺组织标本。检测肺湿/干重比(W/D)值,苏木精-伊红(HE)染色来观察肺组织的形态学改变,Masson染色评估肺组织纤维化情况,使用全自动生化仪检测小鼠血清LAC、CK、LDH、HBDH、AST、UA、UREA、ALT值。结果 形态学检查结果显示,LPS组肺组织呈现炎症水肿,并发点状的出血融合灶及大量炎性细胞弥漫性浸润,肺泡间隔组织呈显著的炎性增厚,肺泡间囊空腔间隙变窄、结构消失。SDS+LPS组小鼠肺实质损伤后无明显损害,肺组织结构趋于正常,肺泡腔炎症反应、支气管腔炎性细胞浸润及炎症渗出物量改善较为明显。生化指标检测结果显示,LPS+SDS组的LDH、...     

大鼠急性肺损伤过程中STAT-3的活化对caspase-3表达的影响

目的 探讨大鼠急性肺损伤（ALI）过程中信号转导和转录活化因子-3（STAT-3）的活化对caspase-3表达的影响.方法 60只成年雄性SD大鼠随机分为4组：对照组（n=6）,脂多糖组（LPS组,n=24）,酪氨酸蛋白激酶（JAK）抑制剂 AG490组（n=6,AG490用0.4%二甲亚砜溶解）,AG490＋LPS组（n=24）;LPS、AG490＋LPS组在注射LPS后1、2、4、6 h又被分为4个亚组（每组n=6）.分别采用Western blotting检测各组大鼠肺组织中磷酸化STAT-3（pSTAT-3）的表达并采用免疫组织化学法测定caspase-3的表达情况.结果 注射LPS1、2、4、6 h后STAT-3被明显活化（P〈0.05）,而相对应的AG490＋LPS组中STAT-3活性较LPS组减弱（P〈0.05）.同时LPS组中caspase-3表达较相应的AG490＋LPS组明显减少（P〈0.01）.结论 大鼠ALI过程中STAT-3通路的激活可减低caspase-3的表达.     

内毒素复合油酸二次打击致大鼠急性肺损伤模型的建立

目的研究腹腔注射内毒素（LPS）和（或）静脉注射油酸（OA）的方法致大鼠急性肺损伤（ALI）模型的不同特点及其可能机制。方法将24只雄性Wistar大鼠随机分为4组,每组6只。对照组（C组）：腹腔注射生理盐水10ml/kg;内毒素组（LPS组）：腹腔注射1%LPS10mg/kg;油酸组（OA组）：静脉注射OA0.15ml/kg;内毒素＋油酸组（LPS＋OA组）：腹腔注射1%LPS10mg/kg,30min后静脉注射OA0.15ml/kg。观察120min内各组大鼠平均动脉压和心率变化率的改变。120min后处死动物采集标本。分别检测肺组织核转录因子κB（NF-κB）P65、血清IL-6、肺组织髓过氧化物酶（MPO）含量、动脉血气指标和肺组织湿-干重比（W/D）,HE染色观察肺组织病理学改变。结果与C组比较,LPS组肺组织NF-κBp65水平、MPO含量及血清IL-6含量显著增加,肺组织W/D比值及血气分析结果无显著性差异,病理组织学改变轻微;OA组肺组织NF-κBp65水平和MPO含量及血清IL-6含量无显著改变,肺组织W/D比值升高,pH值和PaO2降低,PaCO2升高,肺脏出现严重的肺泡上皮细胞损伤和肺泡结构破坏。LPS＋OA组肺组织NF-κBp65水平、MPO含量和W/D比值及血清IL-6含量显著增加,pH值和PaO2降低,PaCO2升高,肺泡破坏严重,大量组织液渗出。结论内毒素复合油酸可以产生协同作用,产生大量致炎细胞因子,并造成大鼠严重的肺脏病理生理改变,临床ALI/ARDS发病过程更为接近,是一种研究ALI发病机制及早期干预的较理想的动物模型。     

术中肺保护策略对行肺切除患者术后肺功能的影响

目的 研究术中肺保护策略对行肺切除患者术后肺功能的影响.方法 50名择期行肺叶或全肺切除的患者,被随机分为试验组和对照组.试验组采用肺保护策略:单肺通气潮气量为5～6 mL/kg(预测体重,PBW),吸入氧浓度0.4～0.7,术中输液补足出血量并以2.0～3.0mL/kg·h(实测体重,MBW)维持.对照组的通气和输液不予限定.测定术前和术后第1、3、5日的第1秒用力呼气容积(FEV1.0),呼气峰流速(PEF),及动脉血气分析,并记录氧合指数(01).结果 肺保护策略干预的患者术后FEV1.0(P=0.002),PEF(P=0.004)和OI(P=0.005)都要明显优于对照组.结论 术中肺保护策略可以改善择期行肺叶切除术的患者术后的肺功能和氧合指数,有利于患者术后的恢复.     

移植肺保护的研究进展

肺移植已成为治疗终末期肺疾病的有效方法之一。作者结合近几年文献，针对术后原发性移植物无功能(PGF)所采取的肺保护方法如低温、肺通气、肺保存等作一系统性回顾，旨在为临床移植肺保护提供更好的方法和策略。     

单侧肺移植治疗终末期间质性肺病

目的探讨单侧肺移植治疗终末期间质性肺病的手术方法、效果及围手术期的处理措施.方法4例终末期间质性肺病患者包括2例肺淋巴管平滑肌瘤病和2例矽肺,均接受单侧肺移植,其中1例由非血缘供体肺叶移植.术后均接受抗排异免疫治疗及抗感染治疗.结果手术死亡率及术后早期（术后＜90 d）死亡率均为零.术后肺动脉压力、血氧分压及二氧化碳分压均较术前有明显改善（P＜0.01）.随访率为100%.1例术后4个月死亡,1例术后生存2年3个月死亡,其余2例仍在随访中.结论肺移植是目前治疗终末期间质性肺病的唯一有效手段.肺水肿、排异反应、感染、呼吸道并发症以及过度通气等是引起术后呼吸功能不全的主要原因.围手术期的处理是保证肺移植手术成功的关键.     

Thoracoscopic lung biopsy for diffuse infiltrative lung disease

Thoracoscopic lung biopsy is becoming the procedure of first choice for the diagnosis of many localized and diffuse lung diseases. We have performed thoracoscopic lung biopsy for 17 patients with diffuse infiltrative lung disease, in Kurume University Hospital. There were 13 females and 4 males with a mean age of 48 years (range: 19-71 years). Thoracoscopic surgical biopsy was performed in the right lung in 12 and in the left lung in 5. Adequate lung tissue from each case was obtained for pathological examination. The mean surgical biopsy time was 49 min (range: 25-72 min) and bleeding was negligible. The mean duration for chest tube drainage was 2.6 days. No postoperative complication such as prolonged air leakage occurred. A specific diagnosis from the biopsy was achieved in 13 (76.4%) of the 17 cases. In only 6 (35.2%) of the 17 cases, the pathological diagnosis was the same as that from the thoracoscopic biopsy. In these 6 cases, the same diagnosis was obtained only in those with idiopathic interstitial pneumonitis or diffuse panbronchitis. Thoracoscopic lung biopsy was safe and useful for diagnosis for diffuse infiltrative lung disease.     

肺挫伤及肺撕裂伤的CT诊断

目的分析肺挫伤及肺撕裂伤的CT表现，提高对肺挫伤及肺撕裂伤的认识。方法搜集连续4个月收治的肺挫伤及肺撕裂伤患者35例，其中男31例，女4例；车祸伤18例，坠落伤6例，撞伤6例，棍击伤2例，挤压伤2例，刀刺伤1例。均行胸部平扫，层厚5．0-10．0mm。结果肺挫伤33例，CT表现为：肺纹理增粗、紊乱、模糊33例；小点状、小片絮状影9例；磨玻璃影5例；斑片状、片条状影24例以及叶段分布的大片影3例；以上各种表现混合存在，且合并肺不张3例。肺撕裂伤5例：其中肺气囊肿4例：3例与肺挫伤并存，1例多发，圆形或扁形，可见小气液平面；肺血肿2例，表现为边缘光滑的椭圆形结节影，最大径4.0cm，其中1例也与肺挫伤并存。结论结合病史，CT能明确肺挫伤及肺撕裂伤的诊断。     

放射性肺损伤肺成纤维细胞的活化机制研究

目的 通过研究大鼠放射性肺损伤模型,探讨肺成纤维细胞在放射性肺损伤的作用及机制,为临床预防和治疗放射性肺损伤提供新的思路.方法 建立Wistar大鼠半胸照射的放射性肺损伤实验动物模型,35只Wistar大鼠常规分为A～F、N组共7组,每组5只大鼠.A～F组在接受相同剂量照射后分别在放疗后1 d,1、2、4、8和12周处死,N组在实验第1天处死作为正常对照组,分别以免疫组化检测双侧肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 照射后照射野内肺成纤维细胞(阳)免疫组化α-SMA呈强阳性,与对照组有显著差异(P=0.001);对侧未照射肺组织也可见散在分布梭形样形态的间质细胞,α-SMA阳性表达且与正常对照组有显著差异性(P=0,001).结论 肺内成纤维细胞无论射野内或射野外肺FB照射后均活化成为功能活跃的肌纤维母细胞(MF),由此猜测具有增殖和分泌活性的MF可能有部分来源于肺外,通过血液传递分布于肺组织照射野内或野外,可能参与了淋巴细胞性放射性肺损伤的发生.