活化B淋巴细胞与NS_1瘤细胞融合瘤苗的抗肿瘤免疫治疗

目的：观察活化Ｂ淋巴细胞与ＮＳ１骨髓瘤细胞融合瘤苗对荷ＮＳ１瘤ＢＡＢＬ／Ｃ小鼠免疫治疗作用。方法：用灭活ＮＳ１瘤细胞及其裂解物免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠活化的Ｂ淋巴细胞;以５０％ＰＥＧ为融合剂,将免疫脾Ｂ淋巴细胞与野生型ＮＳ１骨髓瘤细胞融合,经ＨＡＴ选择性培养、筛选融合细胞,以融合细胞作为瘤苗,免疫治疗荷ＮＳ１瘤小鼠２次。结果：融合细胞体在宿主体内的致瘤性降低;融合细胞瘤苗免疫治疗荷瘤小鼠的肿瘤组织体积逐渐减小、最终完全消失,小鼠存活期显著延长。结论：活化的Ｂ淋巴细胞与ＮＳ１细胞融合瘤苗能有效诱导小鼠体内的抗肿瘤反应。     

小鼠脾来源树突状细胞与NS1骨髓瘤细胞融合体的抗肿瘤作用

观察ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾来源树突状细胞与肿瘤细胞融合体的抗肿瘤效应。方法以灭活的ＮＳ１细胞免疫活化ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠,取其ｓＤＣ与ＮＳ１骨髓瘤细胞融合,并筛选出融合细胞,用此融合细胞作为瘤苗,免疫治疗皮下荷ＮＳ１瘤的小鼠２次,间隔１周。     

小鼠脾来源树突状细胞与NS_1骨髓瘤细胞融合体的抗肿瘤作用

目的：观察ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾来源树突状细胞（ｓｐｌｅｅｎｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｓ,ｓＤＣ）与肿瘤细胞融合体的抗肿瘤效应。方法：以灭活的ＮＳ１细胞免疫活化ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠,取其ｓＤＣ与ＮＳ１骨髓瘤细胞融合,并筛选出融合细胞;用此融合细胞作为瘤苗,免疫治疗皮下荷ＮＳ１瘤的小鼠２次,间隔１周。结果：融合细胞瘤苗本身无致瘤性。用融合细胞瘤苗免疫治疗荷瘤小鼠后,其瘤体消失,且在观察期６０ｄ内未见肿瘤转移和复发。结论：脾来源树突状细胞与ＮＳ１细胞融合瘤苗免疫荷瘤小鼠后,激发其体内存在的抗ＮＳ１肿瘤效应。     

分泌抗人喉癌单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及临床意义

用喉癌抗原免疫疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ－１小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选获得４株分泌抗人喉癌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，均收集到腹水型ＭｃＡｂ，并验证其滴度高，纯化效果好，特异性强。     

建立分泌抗人精液抑制素杂交瘤细胞株及其单克隆抗体的研究

用人精液抑制素免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ－１小鼠骨髓瘤细胞融合，获得４株分泌抗人精液抑制素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为ＩＢ１０，ＩＧ５，ＩＡ４和ＩＡ６。     

检测人血型抗A和抗B单克隆抗体的制备

用人Ａ型及Ｂ型红细胞分别免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取免疫脾细胞与同系ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，经克隆筛选出８株抗Ａ５和５株抗Ｂ杂交瘤细胞株，用小鼠腹水单克隆抗体分别做凝集试验，亲和力测定，标本检测及ＣＰＶ，ＰＨＡ，ＣｏｎＡ对单克隆抗体效价的影响。结果表明除Ａ４和Ｂ４株外，其余各株凝集效价均在１：１２８０以外，亲合力与抗Ａ，抗Ｂ血清相似，标本检测符合率为１００％，结果提示，用含ＰＨＡ，ＣｏｎＡ，ＣＰＶ的     

建立分泌抗人精液抑制素杂交瘤细胞株及其单克隆抗体的研究

用人精液抑制素免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ—１小鼠骨髓瘤细胞融合，获得４株分泌抗人精液抑制素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为ＩＢ１０，ＩＧ５，ＩＡ４和ＩＡ６。其分泌抗元体均为ＩｇＧ１型，均不与大鼠ＬＨ，ＦＳＨ和ＰＲＬ产生交叉反应，杂交瘤细胞染色体平均为８６～１０３条。细胞经反复冻存、复苏和传代，仍稳定的分泌特异性抗体。     

人子宫内膜癌单克隆抗体的制备及鉴定

1　实验资料人子宫内膜腺癌细胞ＡＮ3ＣＡ来自中国典型培养物保藏中心 .培养基及牛血清购自Ｇｉｂｃｏ公司 ;ＨＲＰ酶标抗体及ＡＢＣ试剂盒购自Ｚｙｍｅｄ公司 ;ＢＡＬＢ/ｃ小鼠购自中国医学科学院实验动物中心 .把人子宫内膜腺癌细胞ＡＮ3ＣＡ与Ｆｒｅｕｎｄ佐剂混合后免疫 8ｗｋ龄ＢＡＬＢ/ｃ小鼠 .加强免疫 4次 .用聚乙二醇 (Ｍｒ 4 0 0 0 ,Ｍｅｒｅｋ) ,按常规方法将免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞ＳＰ2 / 0 Ａｇ8.6 35细胞融合 .杂交瘤细胞培养于 10 0ｍＬ·Ｌ-1牛血清 ＨＡＴ ＲＰＭＩ选择性培养基 .采用酶联免疫吸附实验 (ＥＬＩＳＡ)…     

建立分泌抗猪精液抑制素杂交瘤细胞株及其McAb的研究

用猪精液抑制素免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ－１小鼠髓瘤细胞融合，获得３株分泌抗猪精液抑制素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为２Ｄ、５Ｄ和６Ｇ，其分泌的抗体均为ＩｇＧ１型，不与大鼠ＬＨ、ＦＳＨ和ＰＲＬ产生交叉反应，杂交瘤细胞染色体平均为８５－１００条。细胞经反复冻存、复苏和传代，仍稳定分泌特异性抗体。     

建立分泌抗猪精液抑制素杂交瘤细胞株及其McAb的研究

用猪精液抑制素免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ－１小鼠骨髓瘤细胞融合，获得３株分泌抗猪精液抑制素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为２Ｄ、５Ｄ和６Ｇ，其分泌的抗体均为ＩｇＧ１型，不与大鼠ＬＨ、ＦＳＨ和ＰＲＬ产生交叉反应。杂交瘤细胞染色体平均为８５～１００条。细胞经反复冻存、复苏和传代，仍稳定分泌特异性抗体。     

检测人血型抗A和抗B单克隆抗体的制备

用人Ａ型及Ｂ型红细胞分别免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取免疫脾细胞与同系ＳＰ２／０骨 髓瘤细胞融合，经克隆筛选出８株抗Ａ和５株抗Ｂ杂交瘤细胞株，用小鼠腹水单克隆抗体分 别做凝集试验。亲和力测定、标本检测及ＣＰＶ、ＰＨＡ、ＣｏｎＡ对单克隆抗体效价的影响。结果表 明除Ａ４和Ｂ４株外，其余各株凝集效价均在１：１２８０以上；亲合力与抗Ａ、抗Ｂ血清相似；标本 检测符合率为１００％。结果提示：用含ＰＨＡ、ＣｏｎＡ、ＣＰＶ的杂交瘤细胞注射小鼠，所产生的单 克隆抗体效价比单独用杂交瘤细胞产生的单克隆抗体均高出２倍。     

抗脲激酶单克隆抗体的研制和初步鉴定

用上海生物化学制药厂赠送的脲激酶（Ｈ－ＵＫ），免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取脾细胞与骨髓瘤细胞ＮＳ－１融合，用高纯度Ｈ－ＵＫ包被筛选阳性克隆，获得抗Ｈ－ＵＫ单克隆抗体ＮＵＫ－１和ＮＵＫ－２两细胞株。酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测效价为１０４～１０５，经亚类测定分属ＩｇＧ１和ＩｇＧ２。为研究脲激酶的结构和导向治疗血栓提供了可能。     

河豚毒素单克隆抗体的制备及特性

河豚毒素（ＴＴＸ）与角孔ｑｉ血蓝蛋白（ＫＬＨ）结合生成完全抗原，用此抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠（５～６周龄），取２只小鼠脾细胞与ＳＰ２／Ｏ骨髓瘤细胞融合，ＥＬＩＳＡ法检测阳性克隆，共检出５株高效价抗ＴＴＸ阳性克隆细胞，对此抗ＴＴＸ单克隆抗体分析结果表明：（１）单抗对ＴＴＸ有很高的抑制作用。１０＾－９水平的毒素就可抑制单抗５０％左右的Ａ值。（２）抗体属ＩｇＧ１亚类，ＩＣ５０为２．５～５μｍｏｌ／Ｌ。（     

抗人氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体的制备和生物学性质

用经Ｃｕ＾２＋氧化装饰４ｈ和２４ｈ的小鼠低密度脂蛋白（ｍｕｒｉｎｅＯ－ＬＤＬ）混合物免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，于融合前３天用经Ｃｕ＾２＋氧化修饰４ｈ和２４ｈ人低密度脂蛋白（ｈｕｍａｎ Ｏ－ＬＤＬ）的混合物加强免疫，取免疫鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤ＳＰ２／０细胞融合，获得５株抗人氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体，命名为ＨＯＬ１、ＨＯＬ２、ＨＯＬ３、ＨＯＬ４、ＨＯＬ５。这些单抗均有较高的抗体效价，抗体类型为Ｉｇ     

分泌抗人促甲状腺激素（hTSH）单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用ＳＰ２／０骨髓瘤细胞与经人促甲状腺激素（ｈＴＳＨ）免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞融合，融合率６０．４％，抗体阳性率４．３％，经３－４次克隆化，筛出３株稳定分泌ＴＳＨＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株。用放射免疫分析法（ＲＩＡ）检测小鼠腹水，抗体效价为１０＾－４时，抗体结合率为４５．５％。用ＥＬＩＳＡ方法检测小鼠腹水，抗体效价达１０＾－５。其中３株细胞做琼脂糖免疫双扩散试验，均显示为ＩｇＧ１，亚类。染色体计数     

人脑肌酸激酶单克隆抗体的制备及鉴定

用事故死亡者脑组织中提纯的人脑肌酸激酶（ＣＫ－ＢＢ）对ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠进行免疫，应用杂交瘤技术将免疫小鼠脾细胞分别与２种骨髓瘤细胞（ＮＳ－１，６５３）融合，筛选得到８株能稳定分泌ＩｇＭ抗体的杂交瘤细胞。对分泌抗体经酶联免疫电泳转移试验（Ｗｅｓｔ－Ｂｌｏｔ）进行了鉴定，其中４种抗体能特异地与ＣＫ－ＢＢ的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳带结合。提示这些单克隆抗体有可能应用于肌酸激酶的结构功能研究和临床检查中。     

人脑肌酸激酶单克隆抗体的制备及鉴定

用事故死亡者脑组织中提纯的人脑肌酸激酶（ＣＫ－ＢＢ）对ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠进行免疫，应用杂交瘤技术将免疫小鼠脾细胞分别与２种骨髓瘤细胞（ＮＳ－１，６５３）融合，筛选得到８株能稳定分泌ＩｇＭ抗体的杂交瘤细胞。对分泌抗体经酶联免疫电泳转移试验（Ｗｅｓｔ－Ｂｌｏｔ）进行了鉴定，其中４种抗体能特异地与ＣＫ－ＢＢ的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳带结合。提示这些单克隆抗体有可能应用于肌酸激酶的结构功能研究和临床检验中。     

高效电融合技术建立能分泌抗分枝杆菌单克隆抗体的杂交瘤细胞系

用细胞电穿孔融合仪，摸索最佳电融合参数，对５种分枝杆菌超声粉碎菌体混合抗原免疫的１只ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞和ＮＳｌ骨髓瘤细胞进行了电融合。在最佳电融合参数下，获得１．７５个杂交瘤细胞克隆／１０５个脾细胞的最佳融合率。采用间接ＥＬＩＳＡ法筛选，经克隆化，获２２株分泌抗分枝杆菌单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的阳性杂交瘤细胞株。并对其中１１株进行了初步研究。     

制备抗二性霉素B单克隆抗体对HAT浓度的选择

目的：对不同ＨＡＴ浓度下抗二性霉素Ｂ的杂交瘤细胞株的生长情况进行了观察。方法：用二性霉素Ｂ免疫ＢＬＡＢ／Ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／Ｏ小鼠骨髓瘤细胞融合，在不同ＨＡＴ浓度下培养杂交瘤细胞，结果：常规ＨＡＴ浓度筛选杂交瘤细胞，细胞大多数在８天～１０天死亡，而Ｈ．Ｔ浓度不变，Ａ为０．１１８μｇ／ｍｌ和０．１３２μｍ／ｍｌ杂交瘤细胞均长良好，并用间接ＥＬＩＳＡ筛选到二株抗二性霉素Ｂ的杂交瘤细胞，结论：在制     

抗沙眼衣原体主要外膜蛋白种特异性单克隆抗体

用人工合成沙眼衣原体主要外膜蛋白（ＭＯＭＰ）氨基端１／４肽链免疫８周龄雄性ＢＡＬＢ／ｃ小鼠３只，第１４天用Ｌ１／４４０／Ｂｕ原体加强免疫，第２４天将免疫反应良好的１只小鼠脾细胞与ＮＳ－１瘤细胞融合。用１／４ＭＯＭＰ和Ｌ１原体抗原包被的聚丙乙烯板检测上清中抗体，淘汰与鹦鹉热衣原体种（ＥＡＥ株）、肺炎衣原体种（ＡＴＣＣＶＲ１３１０株）以及正常组织培养细胞（ＢＧＭＫ）有交叉反应的克隆，最后得到４株抗沙眼衣原体特异性单克隆抗体（ＭＡｂｓ），其抗体属ＩｓＧ１和ＩｇＧ２ａ亚类。微量免疫荧光试验（ｍｉｃｒｏ－ＩＦ）发现４株ＭＡｂｓ均与本实验室制备的沙眼衣原体Ｌ１、Ｌ２、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｅ原体及Ｌ２包涵体抗原发生反应，并与沙眼衣原体所有１５个标准血清型结合，其腹水ＭＡｂｓ滴度≥１：１２８００。免疫印迹试验显示４株ＭＡｂｓ均与沙眼衣原体分子量为４００００的ＭＯＭＰ反应。