柯萨奇B3m病毒感染新生乳鼠致急性病毒性心肌炎模型的研究

目的 探讨制备柯萨奇B3m病毒感染Balb/C新生乳鼠急性病毒性心肌炎模型的实验途径。方法 地柯萨奇B3m亲心肌株病毒进行增毒，滴定TCID50后感染Balb/C新生乳鼠。CVB3m病毒感染组3窝共21只，对照组3窝共20只。感染组每只乳鼠腹腔内接种1000TCID50CVB3m病毒液0.04ml，对照组每只乳鼠腹腔内接种1640维持液0.04ml。观察感染乳鼠的发病及心肌病理变化。结果 感染组乳鼠在感染CVB3m后48～72h发病，心肌病理变化以多形核细胞、单核细胞和巨噬细胞浸润为主要特征，心肌小血管壁内皮细胞受损，心肌细胞变性、肿胀；对照组乳鼠未见发病。结论 柯萨奇B3m病毒是急性心肌炎的重要病原体，其毒力及接种量与发病密切相关，本模型为研究急性病毒性心肌炎的发病机制及抗病毒药物的筛选奠定了基础。     

白芍总苷对柯萨奇B3病毒感染大鼠原代心肌细胞的血清药理学干预

目的探讨白芍总苷（TGP）对柯萨奇B3病毒（CVB3）感染大鼠原代心肌细胞有无保护作用。方法取SD乳鼠心室肌制备大鼠原代心肌细胞,培养72h后,用不同剂量的TGP含药血清干预100 TCID50 CVB3感染心肌细胞,对比分析干扰素组、双黄连组、正常对照组。观察细胞病变,24h后测定细胞上清液中的cTnⅠ、CK、LDH以及用MTT法检测细胞存活率。结果TGP高剂量组可减轻心肌细胞病变,减少cTnⅠ、CK、LDH的释放。结论TGP对CVB3感染大鼠原代心肌细胞有保护作用。     

反义寡核苷酸抑制柯萨奇病毒B_3致病作用的实验研究

目的 :观察在细胞培养系统和小鼠体内反义寡核苷酸 (AODN)抑制柯萨奇病毒B3(CVB3)致病作用。方法 :观察细胞病变效应 (CPE) ,常规微量法滴定病毒的50 %组织细胞感染量 (TCID50)以及观察感染小鼠心肌组织的病理改变。结果 :1 AODN可推迟和减轻CVB3 感染细胞CPE ,且随AODN浓度增高 ,对CPE的抑制作用增强 ;培养上清中病毒滴度随AODN浓度升高而降低。2 随AODN剂量增加 ,感染小鼠心肌组织病毒滴度逐渐降低 ;心肌细胞病变程度逐渐减轻 ;心肌炎发病率也逐渐降低。结论 :AODN可能通过抑制CVB3 复制来保护Vero细胞和小鼠心肌组织抵抗感染。     

草苁蓉提取物对感染柯萨奇B3病毒的大鼠心肌细胞抗氧化作用的影响

[目的]探讨草苁蓉提取物对柯萨奇B3病毒感染的大鼠心肌细胞的抗氧化作用。[方法]取新生SD大鼠的乳鼠心室肌制备搏动心肌细胞,培养48h后接种10^3TCID50柯萨奇B3病毒做为实验性病毒性心肌炎模型。[结果]草苁蓉提取物明显减轻感染柯萨奇B3病毒的心肌细胞病变,使细胞搏动增强,明显降低心肌细胞内的丙二醛含量,显升高超氧化物歧化酶活性。[结论]草苁蓉提取物对感染柯萨奇B3病毒的SD大鼠培养心肌细胞具有显的抗氧化作用。     

抗FasL抗体在小鼠病毒性心肌炎治疗中的作用

目的：探讨抗FasL抗体对小鼠柯萨奇B3（CVB3）病毒性心肌炎心肌细胞凋亡及病毒滴度的调节作用。方法：随机将80只Balb／c小鼠分为空白对照组、病毒对照组、IgG对照组及抗FasL抗体治疗组,于感染后第10天每组处死8只并取其心脏,光镜检查的心肌病理变化,原位末端标记法（TUNEL）检测小鼠心肌组织的细胞凋亡,用空斑形成技术（PFU法）测定心肌病毒滴度。结果：抗FasL抗体治疗组小鼠死亡率、心肌病变积分、心肌细胞凋亡率、心肌病毒滴度均明显低于病毒对照组及IgG对照组（P均〈0．01）。结论：抗FasL抗体可降低小鼠CVB,病毒性心肌炎心肌内病毒滴度、减少心肌细胞凋亡和心肌损伤．     

玉丹荣心丸抗急性病毒性心肌炎的实验研究

目的观察中成药玉丹荣心丸对B组柯萨奇病毒(CVB)感染Balb/c小鼠所致急性病毒性心肌炎的治疗效果的研究。方法Balb/c鼠腹腔接种1000 TCID50/0.1ml CVB,经过两周的持续注射成功获得急性病毒性心肌炎的动物模型。将动物随机分为病毒对照组、药物组,药物组使用中成药玉丹荣心丸进行灌胃给药,而病毒对照组不使用任何药物,28天后观察小鼠心肌组织的病理改变。结果药物组小鼠心肌组织的病理改变轻微,并有好转迹象,而病毒对照组病理改变严重,有死亡。结论玉丹荣心丸对B组柯萨奇病毒感染所致的急性病毒性心肌炎有很强的治疗效果。     

心肌康对慢性病毒性心肌炎小鼠心肌细胞的保护作用

目的 观察心肌康对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞的保护作用.方法 对清洁级Balb/c小鼠采用柯萨奇病毒(CVB3)腹腔注射染毒,制成慢性病毒性心肌炎动物模型,按照随机数字表法分为三组:A组为病毒性心肌炎(VMC)组、B组为心肌康组、C组氯沙坦组.另设20只腹腔接种不含病毒的Eagle's液小鼠为正常对照组,观察心肌康对模型鼠的生存率的影响及对CVB3 RNA表达、Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的影响.结果 心肌康组、氯沙坦组小鼠的生存率明显高于病毒对照组,心肌康对CVB3感染鼠有保护作用,心肌康组对感染鼠的治疗作用要优于氯沙坦组.结论 心肌康可通过下调CVB3 RNA表达、抑制胶原增生而对心肌细胞产生保护作用.     

双黄连抗柯萨奇B3型病毒感染大鼠原代心肌细胞的效应

目的观察双黄连抗柯萨奇B3病毒感染原代大鼠心肌细胞的作用,并初步探讨其机制.方法选用出生1～3天的Sprague-Dawley大鼠,取其心室肌组织,制备原代大鼠心肌细胞,培养72 h后,用不同浓度的双黄连对抗100TCID50柯萨奇B3型病毒感染细胞,观察细胞病变,测定感染36 h后细胞上清液中的病毒滴度及肌酸磷酸激酶.结果 0.5、 0.25、0.125 g/L双黄连均可明显减轻心肌细胞病变,降低细胞上清液的病毒滴度, 减少感染心肌细胞肌酸磷酸激酶的释放(分别和病毒对照组相比,P<0.01).结论双黄连对柯萨奇病毒感染的新生大鼠原代心肌细胞有保护作用.     

牛磺酸对增减大鼠心肌细胞感染柯萨奇B3病毒的影响

目的 探讨牛磺酸对由柯萨奇Ｂ３病毒感染的大鼠心肌细胞的抗病毒和保护作用,为该药的临床应用提供理论依据。方法 取新生ＳＤ大鼠的乳鼠心室肌肌制备博动心肌细胞,培养４８ｈ后接种１０＾３ＴＣＩＤ５０的柯萨奇Ｂ３病毒做为实验性病毒性心肌炎模型。结果牛磺酸明显减轻感染柯萨奇Ｂ３病毒心肌细胞的病变,使细胞博动增强;提高心肌细胞的琥珀酸脱氢酶活性,降低乳酸脱氢酶活性;抑制心肌细胞感染柯萨奇Ｂ３病毒后导致的乳酸脱     

小鼠病毒性心肌损伤过程中炎症介质表达异常及其组织学改变的研究

目的 :研究小鼠柯萨奇病毒 B3感染过程中炎症介质动态表达与心肌组织损伤间的关系。方法 :于Balb/ c小鼠腹腔接种 1× 10 8TCID50 柯萨奇病毒 B3(CVB3)液 ,诱发心肌损伤的发生 ,在 CVB3感染后观察 2 1天 ,分别在第 3、6、9、12、15、18和 2 1天 ,采集外周血作肿瘤坏死因子 (TNF-α)和一氧化氮合酶 (NOS)分析 ,并留取心肌组织进行病理组织学观察。结果 :对照组心肌无改变 ,实验组小鼠心肌细胞出现肿胀 ,横纹不清 ,胞质染色嗜酸性增强 ,胞核出现核固缩及核碎裂、变性、坏死崩解 ,胞核和细胞轮廓消失 ,周围出现炎性细胞浸润 (主要是单核细胞和淋巴细胞 ) ,间质内可见较多的胶原纤维 ,可见钙化灶 ;超微结构的电镜观察 ,可见线粒体肿胀、嵴断裂、严重空泡样变及细胞核异形变、染色质浓缩边聚。在病毒感染过程中 ,NOS和 TNF-α异常升高并呈动态的双峰型改变 ,第 2峰与心肌的损伤密切相关。结论 :柯萨奇病毒 B3感染引起心肌细胞损伤 ,可能与炎症介质、细胞因子的参与有关     

牛磺酸对培养大鼠心肌细胞感染柯萨奇B_3病毒的影响

[目的 ]探讨牛磺酸对由柯萨奇B3 病毒感染的大鼠心肌细胞的抗病毒和保护作用 ,为该药的临床应用提供理论依据 .[方法 ]取新生SD大鼠的乳鼠心室肌制备搏动心肌细胞 ,培养 48h后接种10 3TCID5 0的柯萨奇B3 病毒做为实验性病毒性心肌炎模型 .[结果 ]牛磺酸明显减轻感染柯萨奇B3 病毒心肌细胞的病变 ,使细胞搏动增强 ;提高心肌细胞的琥珀酸脱氢酶活性 ,降低乳酸脱氢酶活性 ;抑制心肌细胞感染柯萨奇B3 病毒后导致的乳酸脱氢酶和谷草转氨酶释放 .牛磺酸提高正常心肌细胞和感染柯萨奇B3 病毒的心肌细胞存活率 ,其作用具有剂量依赖性 .[结论 ]牛磺酸对感染柯萨奇B3 病毒的大鼠搏动心肌细胞具有一定的抗病毒和保护心肌细胞的作用     

生脉散合炙甘草汤加减液对感染柯萨奇B_3病毒的培养大鼠心肌细胞的影响

[目的 ]探讨生脉散合炙甘草汤加减液对病毒性心肌炎的影响 ,为该药的临床应用提供实验依据 .[方法 ]取新生SD大鼠心室肌培养搏动心肌细胞 48h后 ,添加 10 3 TCID50 的柯萨奇B3 病毒作病毒性心肌炎模型 .实验分 4个组进行 ,即正常组、病毒组、干扰素组、生脉散合炙甘草汤加减液组 .[结果 ]生脉散合炙甘草汤加减液明显减轻心肌细胞感染病毒后病变 ,改善细胞搏动 ,明显降低心肌细胞释放酶(乳酸脱氢酶、磷酸肌酸激酶 )活性 ,减轻超微结构的病变 .[结论 ]生脉散合炙甘草汤加减液对感染柯萨奇B3 病毒的SD大鼠培养心肌细胞具有明显的抗病毒和保护作用     

贯众水提取液对感染柯萨奇B_3病毒的培养大鼠心肌细胞的影响

[目的 ]探讨贯众水提取液对感染柯萨奇B3 病毒的大鼠心肌细胞的抗病毒和保护作用 .[方法 ]实验取新生SD大鼠的乳鼠心室肌制备搏动心肌细胞 ,培养 48h后接种 10 3 TCID50 的柯萨奇B3 病毒做为实验性病毒性心肌炎模型 .[结果 ]贯众水提取液和炙甘草汤的同时加药组和 1h后加药组大鼠心肌细胞释放的乳酸脱氢酶和天冬氨酸转氨酶活性明显降低 ,感染 12h后加药组效果明显减弱 ,而 2 4h后加药组则无效 .[结论 ]贯众水提取液对感染柯萨奇B3 病毒的SD大鼠培养心肌细胞具有抗病毒和保护作用 ,应早期应用     

CVB3对不同营养状态的HeLa细胞mTOR信号通路调控的影响

目的:探讨不同营养状况对柯萨奇病毒B3 (CVB3) 感染HeLa 细胞后mTOR 信号通路调控的影响。方法:HeLa 细胞的培养方法:非饥饿法用常规含10% 胎牛血清细胞培养液换液培养24 h 后次日再用CVB3 干预; 饥饿法用不含胎牛血清的培养基换液培养24 h 后次日再干预。将HeLa 细胞分为非饥饿法病毒组与对照组、饥饿法病毒组与对照组4 组, 采用RT-PCR 检测不同时间点HeLa 细胞CVB3 外壳蛋白、mTOR 和p70S6K mRNA 表达。结果:非饥饿法:病毒组mTOR, p70S6K mRNA 表达与对照组比较仅在12, 24 h, 差异有统计学意义(P<0.05), 而饥饿法病毒组各时间点均低于对照组( 均P<0.05);饥饿法病毒组和对照组HeLa 细胞mTOR 表达均高于非饥饿法( 均P<0.05), 而p70S6K mRNA 差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:CVB3 使HeLa 细胞mTOR-p70S6K 信号通路表达下调, 饥饿法mTOR 表达高于非饥饿法。     

病毒性心肌炎发生的凋亡机制及参白口服液的作用研究

目的研究病毒性心肌炎(VMC)心肌细胞凋亡及其相关调控因素的变化及参白口服液的影响.方法给BALB/C小鼠接种嗜鼠心肌柯萨奇B3病毒(CVB3m)诱发VMC,在接种后3、7、14、20、30 d对照观察心肌细胞凋亡(TUNEL法)和相关调控基因c-myc、Bcl-2蛋白表达(免疫组化技术)、细胞因子TNF-α、IL-6(ELISA法)的变化情况.结果CVB3m可引起VMC心肌细胞凋亡,c-myc、Bcl-2的阳性表达和TNF-α、IL-6的变化参与心肌细胞凋亡的发生.结论心肌细胞凋亡及其相关调控因素参与VMC的发生和发展,参白口服液有良好的防治作用.     

柯萨奇B3病毒抗原决定簇的多态性和致病性

目的分析由各脏器分离出的柯萨奇B3病毒(CVB3)抗原决定簇的异同,并探讨其与致病性的关系. 方法利用自制的26种柯萨奇B3病毒mAb(CVB3- McAb)与心脏、肝脏、肾脏及肺脏分离出的CVB3株进行免疫荧光分析,观察各分离株抗原决定簇的变化,并将各分离株再次注入动物体内,观察心、肝、肾及肺的病理改变. 结果 CVB3在不同器官的细胞中繁殖后,其抗原决定簇发生改变, CVB3-McAb 2A4, 2B2, 2D3, 2D4与肝、肺、心、肾分离株均发生反应;26种CVB3-McAb中有4种不与心脏分离株反应;有15种不与肝脏分离株反应;有21种不与肺脏分离株反应;有11种不与肾脏分离株反应. 且各分离株对器官的致病程度亦有差异. 结论 CVB3各分离株抗原决定簇有差异;病毒抗原决定簇的不同是影响其致病性的重要因素之一.     

Effect of Astragalus Membranaceus on Ca￣(2＋）Influx and CVB3 RNA Replication in Cultured Neonatal Rat Heart C

ＥｆｆｅｃｔｏｆＡｓｔｒａｇａｌｕｓＭｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓｏｎＣａ￣（２＋）ＩｎｆｌｕｘａｎｄＣＶＢ３ＲＮＡＲｅｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎＣｕｌｔｕｒｅｄＮｅｏｎａｔａｌＲａｔＨｅａｒｔＣｅｌｌｓＩｎｆｅｃｔｅｄｗｉｔｈＣＶＢ３ＧＵＯＱｉ（郭棋）；ＰＥ...