鼠痘病毒的分离和鉴定

从一些病鼠中分离出鼠痘病毒SY株。经鸡胚绒毛尿囊膜接种、组织培养、电镜观察和血清学试验鉴定,符合鼠痘病毒的特征。     

鼠痘病毒电镜观察及其感染细胞的超微病变研究

利用怀疑患鼠痘的病鼠脾组织液感染鸡胚绒毛尿囊膜,在电镜下发现3种类型发育不同时期的鼠痘病毒和被感染细胞发生超微病变。这些观察结果对鉴定鼠痘病毒病原、了解鼠痘病毒增殖过程,以及预访鼠痘疾病发生、控制其流行具有重要理论和实际意义。     

Wistar大鼠自发感染痘病毒的研究

在30只Wistar大鼠(无合格证)中暴发了酷似小鼠脱脚病的疾病。发病率高达33.3％(10/30)。病鼠的皮肤经组织学检查,发现其病理变化呈现痘病毒的特征性改变。病鼠的肝、脾匀浆接种于SPF鸡胚绒毛尿囊膜,出现痘斑并连续传至第4代,经电镜检查发现有成熟的病毒粒子和许多幼稚型病毒粒子。病毒形态与痘病毒一致,有囊膜,直径在170～212.5nm之间。病变的肝、脾组织和经传代接种的鸡胚绒毛尿囊膜的匀浆上清液,对鸡红细胞均呈阳性凝集反应,接种于豚鼠角膜呈阴性反应,用小鼠痘病毒ELISA试剂盒检测病鼠血清呈阴性反应。     

封闭群FMMU白化豚鼠与短毛三色豚鼠血液成分比较

３０只无合格证的Ｗｉｓｔａｒ大鼠发生了酷似小鼠脱脚病的疾病，发病率高达３３．３％（１０／３０）。取病鼠的皮肤经组织学检查，发现其病理变化呈痘病毒感染的特征性改变。病鼠的肝、脾奖浆接种于ＳＰＦ鸡胚绒毛尿囊膜后，出现痘斑并已连续传至第４代，经电镜检查有成熟的病毒粒子和许多幼稚型病毒。病毒开矿与痘病毒一致，有囊膜，直径在１７０－２１２．５ｎｍ之间。异常肝、组织和经传代接种鸡胚绒毛尿囊膜的匀浆上清液，对鸡     

鼠痘病毒的分离

在实验动物疾病中,鼠痘是危害最大的一种病毒性疾病。作者于1981年5月开始,在常年发生尾部坏死、坏疽,短尾、断尾,眼结膜炎,面部、鼻端,躯体发生痘样病变、脚肿并断脚的鼠群中进行病源分离工作。采集典型自然发病鼠体毒进行人工接种感染,继代,同居感染,鸡胚细胞感染继代,细胞毒回归鼠体,测定细胞毒的毒价和保存期,细胞毒负染电镜检查,细胞毒包涵体检查,以及鸡胚绒毛尿囊膜感染等方面的实验研究,分离到鼠痘病毒。现将结果报告如下。材料与方法 (一)自然发病鼠鼠毒人工接种感染 1.鼠毒来源:采集某小鼠群中典型发病鼠三批(代号Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ)共34只的背部、口部,鼻部,尾     

畸胎组织中分获一株病毒的鉴定

从一例畸胎组织标本中分离培养出一株。根据病毒在鸡胚绒毛尿囊膜上增殖、细胞感染范围试验、中和试验以及母血和畸胎血特异性ＩｇＧ和ＩｇＭ检查试验结果，确认该病毒为Ⅱ型单纯疱疹病毒。     

骨髓间质干细胞移植治疗DKO鼠后肌组织的超微结构改变

目的 观察Duchenne型肌营养不良症模型DKO小鼠经骨髓间质干细胞(MSC)移植治疗后肌组织的超微结构改变情况。方法 用体外培养纯化的第五代SD大鼠MSC经尾静脉移植治疗DKO鼠．在移植后15w取鼠后肢腓肠肌组织进行透射电镜超微结构的观察。结果 传5代后的MSC均一性好，免疫源性低：移植治疗后DKO鼠的运动功能有所改善，生存时间也有延长。肌组织的超傲结构观察发现，肌细胞膜断裂、膜下组织分离水肿、核中移、局部肌原纤维松散、炎症细胞浸润和结缔组织增生等病变情况较对照鼠有改善．并出现肌膜下多个幼稚核融合现象。结论 MSC具有强大的可塑性，通过血循环可趋向病变肌组织并参与鼠肌萎缩组织的修复与再生作用。     

Wistar系大鼠群暴发性痘病的研究

在一群Wistar大鼠中发现一起类似小鼠脱脚病的疾病暴发.发病率高达44.5%,病死率为11.3%。在病鼠皮肤、卵巢和子宫细胞中,以及接种病料的鸡胚绒毛尿囊膜(CECM)上皮细胞中检发现大量A型包涵体。病料可诱导大、小鼠患病,可致CECM形成痘斑,使培养的IBRS_2细胞系发生CPE。用含毒IBRS_2细胞培养上清或CECM痘斑组织匀浆回归同系健康大鼠和小鼠,均可复制本病。SPA协同凝集试验证明,所分离病毒的抗原性与致病因子的相同.电镜下病毒粒子形态与痘病毒相似,有囊膜,直径250～350nm。     

鼠诺沃克病毒特征及其检测技术

鼠诺沃克病毒-1(MNV-1)是一个新认知的鼠病原体,可引起固有免疫系统应答组分缺陷鼠的致死性感染,是目前唯一一个能够在细胞以及小动物体中复制的诺沃克病毒。通过病毒分离、免疫组化、RT-PCR技术,均可检测鼠诺沃克病毒-1。     

从小鼠肺中分离仙台病毒和检出仙台病毒抗原的研究

我们用鸡胚，鸡胚细胞和猴肾细胞成功地从自然和人工感染仙台病毒的小鼠肺中分离出仙台病毒。其中分离率以鸡胚尿囊腔接种法最高，猴肾细胞次之．鸡胚细胞较低。比较了病毒分离法．免疫酶法及间接免疫荧光法共检查了自然和人工感染仙台病毒的小鼠肺标本45份．检出率依次为37．78％，33．33％和26.67％，各方法间的符合率均达到80％以上。仙台病毒抗原检出方法简单，快速，可供实际应用。     

小鼠痘病毒的聚合酶链反应检测法

根据正痘病毒属血凝素基因保守区设计了一对引物，建立了鼠痘病毒的聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测法。结果表明，扩增产物长度为８４６ｂｐ，经限制性内切酶分析证实为鼠痘病毒。用本法可检出０．１ｐｇ鼠痘病毒基因。     

鼠痘病毒潜伏感染的研究

对经实验前后的普通级和清洁级Ｋ Ｍ,ＢＡＬＢ／ｃ,Ｃ５７ＢＬ小鼠,分别用ＩＦＡ,ＥＬＩＳＡ、ＰＡＰ和ＡＢＣ法方法检测小鼠血清中的ＬＣＭＶ、ＥＨＦＶ、ＭＰＶ、ＭＨＶ,仙台病毒抗体和抗原,电镜检查组织中的病毒颗粒。结果显示：未经实验及经实验１５ｄ和３０ｄ后的抗体和抗原。电镜检查组织中的病毒颗粒。经实验６０天后检测普通级ＫＭ和ＢＡＬＢ／ｃ小鼠鼠痘各品系小鼠血清病毒抗体均为阴性,经实验６０于后检测普通级Ｋ     

痘苗病毒真核表达载体pMJ601的转化与鉴定

目的 对痘苗病毒表达载体ｐＭＪ６０１进行转化与鉴定,为进一步实施痘苗病毒为载体的基因治疗作必要的准备。方法 利用感受态细胞的制备及转化、质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳、限制性内切酶酶切等多种基因工程技术对质粒ｐＭＪ６０１进行转化及鉴定。结果 琼脂糖凝胶电泳清楚地显示了ｐＭＪ６０１质粒３条带和Ｂａｍ ＨＩ或Ｈｉｎｄ Ⅲ酶切后的线性条带。结论 痘苗病毒表达ｐＭＪ６０１的转化与鉴定,为痘苗病毒载体系统的基因治     

检测鼠痘组织原位杂交法的建立

目的：建立用组织原位杂交检测鼠痘的方法。方法：利用已知引物序列,以从感染鼠痘的陈旧组织中提取的病毒DNA做模板,在进行PCR扩增的同时用地高辛进行标记,将扩增的DNA片段作为探针用于组织原位杂交,结果：血清学检查确诊为鼠痘的标本中出现蓝紫色杂交阳性信号,阴性及特异性对照中未出现阳性信号,结论：组织原位杂交是一种适合基层病理检测单位的快速诊断方法。     

HIV/AIDS合并病毒性肝炎的临床研究

目的了解HIV/AIDS合并感染病毒性肝炎患者的基本情况。方法对新疆医科大学第一附属医院感染性疾病中心从2001～2010年诊治的395例HIV/AIDS患者的临床资料,通过构成比等方法对所有病例进行回顾性分析。结果合并感染病毒性肝炎的病例占34.17%,其中3.29%的病例为HIV/HBV/HCV的混合感染。感染途径以静脉药瘾为主;肝功能异常的病例为44.89%;54.07%的病例HBV-DNA/HCV-RNA检测为阳性。结论 HIV/AIDS合并病毒性肝炎的传播途径以静脉药瘾为主,可出现各级的肝功能损害,但无明显差异。     

生物素-亲合素斑点免疫金渗滤试验检测血清中登革病毒4型抗原

目的建立用斑点免疫金渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）检测血请中登革病毒抗原的方法。方法一株ＤＶ４型特异性单克隆抗体点加于硝酸纤维膜上,以捕获血清中的ＤＶ４抗原。借助黄病毒组反应性单克隆抗体、生物素化革抗鼠ＩｇＧ抗体、金标ＳＰＡ和金标亲合素,建立用ＤＩＧＦＡ检测血清中登革病毒抗原的方法。结果常规ＤＩＧＦＡ检测的敏感性高于病毒分离,而生物素一亲合素ＤＩＧＦＡ（ＢＡ－ＤＩＧＦＡ）的敏感性又高于常规的ＤＩＧＦＡ。常规ＤＩＧＦＡ可检测到５、０ＴＣＩＤ５０的病毒抗原,ＢＡ－ＤＩＧＦＡ可检测到４３ＴＣＩＤ５０的病毒抗原。结论作者建立的ＢＡ－ＤＩＧＦＡ简便、快速、敏感、特异,可用于快速诊断登革病毒４型感染。     

乙型肝炎病毒与丙型肝炎病毒重叠感染重症化探讨

目的:探讨HBV、HCV重叠感染时,病毒之间的相互关系及对病情转归的影响。方法:用ELISA法检测180例患者乙肝病毒血清学指标(HBV-M)和丙肝病毒抗体(抗-HCV),用PCR和RT-PCR体外扩增法检测HBV-DNA和HCV-RNA。结果:HBV、HCV重叠感染LC和HCC的发生率远远高于单纯HBV或HCV感染,HBV、HCV重叠感染患者中HBV-DNA和HBsAg的阳性率明显低于单纯HBV感染者。结论:HBV重叠感染HCV后,对肝细胞的损害加重,重叠感染患者病情的发展及转归可能主要与HCV有关,是HBV、HCV作用相互叠加的结果。     

五种国产与进口小鼠病毒ELISA抗体检测试剂盒的比较研究

目的评价国产小鼠病毒抗体ELISA检测试剂盒。方法选择国产与进口小鼠淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)、肝炎病毒(MHV)、仙台病毒(SV)、腺病毒(MAV)、细小病毒(MPV)ELISA抗体检测试剂盒,进行敏感性、特异性、精密性、稳定性、可信度试验比较。结果国产与进口试剂盒:同种试剂盒之间灵敏度相差最低为2倍,差异显著(P<0.05),最高为16倍,差异极显著(P<0.01);特异性试验显示每种试剂盒,与其他4种病毒均无交叉反应;精密性试验显示5种试剂盒批内平均变异系数均小于10%;稳定性试验显示5种试剂盒相对偏差均小于25%;分别选择已知36份小鼠血清进行检测,国产和进口LCMV、MHV、SV、MPV符合率均为100%;国产MAV符合率为86.1%,进口MAV符合率均为100%,二者之间差异极显著(P<0.01)。结论除国产MAV试剂盒敏感性、可信度低于进口外,国产LCMV、MHV、SV、MPV试剂盒与进口同种试剂盒相比,在敏感性、特异性、精密性、稳定性和可信度方面均良好。     

荔枝核提取物体外抗病毒活性及其机制研究

目的:研究荔枝核提取物(LSE)的体外抗病毒活性,并初步研究其抗病毒的作用机制.方法:采用细胞病变效应(CPE)减少法和MTY法检测LSE对柯萨奇B3病毒(Cox B3)、呼吸道合胞病毒(RSV)以及单纯疱疹病毒1型和2型(HSV-1和HSV-2)的体外抗病毒活性,并通过观察直接杀病毒作用、对宿主细胞的保护作用、抑制病毒吸附作用以及在病毒感染后不同时间加入实验,对LSE抑制HSV-1的作用机制进行探讨.结果:LSE有一定的细胞毒性,它不能抑制Cox B3在宿主细胞内的增殖,但对RSV、HSV-1和HSV-2表现出明显的浓度依赖性抗病毒活性,其IC<,50>值分别为32.3,27.9和20.4μg/mL.该提取物预培养Vero细胞后不能保护细胞免受HSV-1感染,但它对HSV-1有直接的灭活作用.LSE可影响HSV-1对Vero细胞的吸附,当浓度为31.3μg/mL时对病毒吸附的抑制率为51%.ISE对HSV-1在细胞内的增殖表现出很强的抑制活性.结论:LSE具有较强的体外抗RSV和HSV活性,它对HSV的抑制作用可能通过多种方式和途径实现.