食管鳞癌组织中P16、cyclinD1、CDK4的表达

目的 :探讨p16、cyclinD1、CDK4 蛋白在食管鳞癌发生中的意义及其相互间的作用。方法 :采用LSAB免疫组化染色法 ,对 43例食管癌手术标本的p16、cyclinD1、CDK4 蛋白进行标记。结果 :在鳞癌组织中 ,3种抗体的阳性物质存在于细胞核中和 /或胞浆中 ,且从正常鳞状上皮→癌旁不典型增生→鳞癌组织 ,p16的阳性率逐渐下降 ,而cy clinD1、CDK4 的阳性率却逐渐上升。正常上皮与癌组织之间的阳性率差异均具有显著性 (P <0 .0 5 ) ;随着癌分化程度下降 ,p16阳性率呈下降趋势 ,III级与I级鳞癌之间阳性率差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,但未检出cyclinD1、CDK4 与癌分化程度的关系。结论 :p16、cyclinD1、CDK4 蛋白表达的变化是食管癌发生中的早期事件 ,三者构成的调节通路障碍可能参与了癌的发生     

CyclinD1,p16,Rb蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达

目的 :研究cyclinD1,p16 ,Rb在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达与其发生、发展的关系 .方法 :用免疫组织化学法对 4 0例NSCLC及其癌旁正常肺组织中cyclinD1,p16 ,Rb蛋白表达进行检测研究 .结果 :4 0例NSCLC中cyclinD1,p16 ,Rb蛋白表达阳性率分别为 92 .5 % (37/ 4 0 ) ,4 7.5 % (19/4 0 ) ,75 .0 % (30 / 4 0 ) .p16 ,Rb阳性率表达随组织学分级降低而降低 ,有显著差异 (P <0 .0 5 ) .cyclinD1阳性率表达与组织学分级无关 .30例Rb阳性标本中 ,p16呈阴性表达或低水平表达 ;10例Rb阴性标本中 ,p16呈阳性或阴性表达者各占一半 .结论 :NSCLC的分子发病机制涉及cyclinD1过表达与P16 ,Rb的表达缺失或失活 ;p16和Rb表达阳性率与NSCLC分级呈正比 ;p16的表达可能受pRb的负调控 ;cyclinD1,p16 ,Rb的蛋白表达与NSCLC的具体病理分型无明确关系     

胆囊癌组织p16和cyclin D1表达

目的 :探讨细胞周期调控因子 p16和CyclinD1蛋白表达在胆囊癌发生发展中的作用及其对预后影响 .方法 :采用S P免疫组化法对 4 1例胆囊癌、7例胆囊腺瘤、14例胆囊炎组织中 p16 ,CyclinD1进行了检测 .结果 :胆囊癌组织中p16阳性率为明显低于胆囊炎组 (4 8.8%vs 92 .9% ,P <0 .0 1) ;胆囊癌 (6 8.3% )和腺瘤组 (5 7.1% )CyclinD1表达明显高于胆囊炎组 (6 8.3%vs 7.1% ,P <0 .0 5 ) .随着肿瘤恶性程度的增高和临床分期的进展 ,p16阳性率下降 ,CyclinD1阳性率有升高趋势 .p16在存活组的表达率显著高于死亡组(75 .5 %vs37.9% ,P <0 .0 1) .CyclinD1在存活组的表达率显著低于死亡组 (4 1.7%vs 79.7% ,P <0 .0 5 ) .p16与Cy clinD1的表达存在负相关性 .有 4 1.5 %的病例存在 p16和CyclinD1同时表达或失表达 .结论 :p16与CyclinD1异常表达在胆囊癌的发生、发展过程中起重要作用     

p21ras和Cyclin D1在肺癌组织中的表达及相互关系

目的　研究p2 1ras、CyclinD1在肺癌组织中的表达及其相互关系。方法　运用免疫组化S -P法检测p2 1ras、CyclinD1蛋白在 6 8例肺癌组织中表达情况。结果　p2 1ras在肺腺癌、肺鳞癌及小细胞肺癌中阳性表达率分别为 96 .6 7%、80 .6 5 %及 4 2 .86 % ,三者之间差异具有显著性 (P <0 .0 5 ) ;直径≤ 3cm的肿瘤p2 1ras全部为阳性表达 ,而直径 >3cm的肿瘤p2 1ras的阳性表达率为 83.82 % ,二者之间的差异具有显著性 (P =0 .0 5 ) ;p2 1ras在分化较好的肿瘤 (Ⅰ +Ⅱ级 )和分化较差的肿瘤 (Ⅲ级 )的阳性表达率分别为 89.80 %、6 8.4 2 % ,二者之间差异有显著性 (P <0 .0 5 )。CyclinD1在肺腺癌、肺鳞癌及小细胞肺癌中阳性表达率分别为 5 0 .0 0 %、4 1.94 %及 2 8.5 7% ,三者之间阳性表达率无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;CyclinD1表达水平与临床病理分期、淋巴结转移相关 (P <0 .0 5 ) ,而与其他临床病理因素无关。p2 1ras和CyclinD1表达无明显相关性 (P >0 .0 5 )。结论　p2 1ras表达可能与肺癌的组织学类型、分化程度有关 ;肺癌组织中CyclinD1表达可能与肿瘤淋巴结转移有关。     

细胞周期调控因子p16和CDK_4在肺癌中的表达

目的　探讨肺癌中细胞周期调控因子p16和CDK4的表达意义。方法　应用S P免疫组织化学方法研究 6 2例肺癌组织中p16和CDK4的表达情况。结果　 6 2例肺癌组织中p16和CDK4阳性率分别为 5 8.1%和 4 8.4 %。腺癌中p16的阳性率明显高于小细胞癌 (P <0 .0 5 ) ;淋巴结转移阳性组p16的     

星形细胞肿瘤中p27kipl、CyclinD1的表达及意义

目的　探讨 p2 7kipl、CyclinD1在星形细胞肿瘤中的表达及意义。 方法　应用免疫组织化学方法检测p2 7kipl、CyclinD1在 4 5例星形细胞肿瘤组织及 10例正常大脑组织中的表达情况。结果　 10例正常脑组织p2 7kipl阳性率为 80 .0 % (8/ 10 ) ,4 5例星形细胞肿瘤中 p2 7kipl阳性率为 35 .6 % (16 / 4 5 ) ;低度恶性星形细胞肿瘤(Ⅰ～Ⅱ级 ) p2 7kipl阳性率为 5 7.9% (11/ 19) ,高度恶性星形细胞肿瘤 (Ⅲ～Ⅳ级 ) p2 7kipl阳性率为 19.2 % (5 /2 6 ) ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。 4 5例星形细胞肿瘤CyclinD1阳性率为 4 2 .2 % (19/ 4 5 ) ,10例正常脑组织中CyclinD1无 1例阳性表达。p2 7kipl、CyclinD1表达均与星形细胞肿瘤的恶性程度有关 ,p2 7kipl表达与Cy clinD1表达呈显著负相关 (r =- 0 .775 ,P <0 .0 1)。结论　p2 7kipl蛋白表达的缺失可能与脑星形细胞肿瘤的发生、发展密切相关 ,p2 7kipl缺失与CyclinD1的过表达可能导致星形细胞肿瘤的发生。     

食管鳞癌组织中P16、cyclinD1、CDK4的表达

目的探讨p16、cyclinD1、CDK4蛋白在食管鳞癌发生中的意义及其相互间的作用.方法采用LSAB免疫组化染色法,对43例食管癌手术标本的p16、cyclinD1、CDK4蛋白进行标记.结果在鳞癌组织中,3种抗体的阳性物质存在于细胞核中和/或胞浆中,且从正常鳞状上皮→癌旁不典型增生→鳞癌组织,p16的阳性率逐渐下降,而cyclinD1、CDK4的阳性率却逐渐上升.正常上皮与癌组织之间的阳性率差异均具有显著性(P＜0.05);随着癌分化程度下降,p16阳性率呈下降趋势,Ⅲ级与Ⅰ级鳞癌之间阳性率差异有显著性(P＜0.05),但未检出cyclinD1、CDK4与癌分化程度的关系.结论p16、cyclinD1、CDK4蛋白表达的变化是食管癌发生中的早期事件,三者构成的调节通路障碍可能参与了癌的发生.     

膀胱移行细胞癌p~(16)、cyclin D_1蛋白免疫组织化学研究

目的 :　探讨p16、cyclinD1蛋白表达与膀胱移行细胞癌 (TCC)生物学行为的关系。方法　用免疫组化SP法检测 48例膀胱TCC组织中p16、cyclinD1蛋白的表达。结果　膀胱TCC组织中p16蛋白阳性表达率为 45 .8% ,与癌组织病理分级、临床分期密切相关 ,高分化、浅表性癌组织中p16蛋白阳性表达明显高于低分化、浸润性癌组织 (P <0 .0 5 )。cyclinD1蛋白阳性表达率为 6 2 .5 % ,浸润性癌组织阳性率明显高于浅表性癌组织 (P <0 .0 5 ) ,与癌组织病理分级无关。p16和cyclinD1蛋白表达呈负相关 (P <0 .0 1)。结论　p16和cyclinD1异常表达在膀胱TCC发生发展中起重要作用     

食管鳞癌组织中p16、cyclinD1、CDK4的表达

目的：探讨p16、cyclinD1、CDK4蛋白在食管鳞癌发生中的意义及其相互间的作用。方法：采用LSAB免疫组化染色法,对43例食管癌手术标本的p16、cyclinD1、CDK4蛋白进行标记。结果：在鳞癌组织中,3种抗体的阳性物质存在于细胞核中和／或胞浆中,且从正常鳞状上皮→癌旁不典型增生→鳞癌组织,p16的阳性率逐渐下降,而p16、cyclinD1、CDK4的阳性率却逐渐上升。正常皮皮与癌组织之间的阳性率差异均有显著性（P＜0．05）;随着癌分化程度下降,p16阳性率呈下降趋势,Ⅲ级与Ⅰ级鳞癌之间阳性率差异有显著性（P＜0．05）,但未检出cyclinD1、CDK4与癌分化程度的关系。结论：p16、cyclinD1、CDK4蛋白表达的变化是食管癌发生中的早期事件,三者构成的调节通路障碍可能参与了癌的发生。     

cyclinD1与非小细胞肺癌患者预后的关系

目的　探讨非小细胞肺癌 (Non smallcelllungcancer ,NSCLC)组织中细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的表达及其与预后的关系。方法　对 73例原发性NSCLC组织和 2 0例良性肺部疾病组织进行免疫组织化学染色检测其cyclinD1,并结合临床资料进行分析。结果　良性肺部疾病组织 2 0例中cyclinD1的阳性率为 15 %。 73例NSCLC组织中cyclinD1阳性表达率为 64 4% ,且在肺鳞癌、腺癌组织中表达的差异无显著性。有淋巴结转移组其CyclinD1阳性率明显高于无淋巴结转移组 ,P <0 0 5 ,Ⅰ～Ⅱ期cyclinD1表达的阳性率高于Ⅲ～Ⅳ期 ,P <0 0 5。结论　CyclinD1的过表达与NSCLC的发生、发展有密切相关 ,检测cyclinD1可以协助NSCLC的诊断和预后判断     

胃黏膜癌变过程中细胞周期调控基因Rb、Cyclin D1 及CDK4的表达及其意义

目的研究胃黏膜癌变过程中细胞周期调控基因Rb、Cyclin D1及CDK4的表达及其意义.方法采用免疫组化方法对50例胃癌,18例癌旁肠化生,7例癌旁轻中度不典型增生及9例重度不典型增生组织中细胞周期调控基因Rb、Cyclin D1 及CDK4的表达情况进行检测和比较.结果 Rb基因的过度表达在不典型增生及胃癌中检测到,在胃癌组织中的表达强度明显大于重度不典型增生病变(P<0.05),Cyclin D1 及CDK4的表达仅发现在胃癌组织中,胃癌组织中Cyclin D1表达阳性的13例病例中有5例同时表达Rb,2例同时表达CDK4;Rb阳性的17例胃癌组织中有3例同时表达CDK4.结论 Rb,cyclin D1和CDK4的过度表达可能参与胃癌的发生,Rb的过度表达出现在胃黏膜癌变过程的较早期阶段,Cyclin D1和CDK4的过度表达属于胃癌变过程中的较晚期的基因事件.     

p16、cyclin D1在原发性肺癌的表达及其临床意义

目的:观察并探讨p16、cyclin D1基因在原发性肺癌组织中的表达水平及其与肿瘤病理生物学行为等的关系.方法:采用S-P免疫组化方法检测68例原发性肺癌标本中p16、cyclin D1蛋白的表达.结果:原发性肺癌中p16蛋白表达阳性率显著低于癌旁组织(P＜0.05);cyclin D1在原发肺癌中的阳性率显著高于癌旁组织(P＜0.05).二者表达与肿瘤大小、淋巴结转移、病理分级及疾病分期密切相关(P＜0.05),且二者表达显著负相关(P＜0.05).结论:在原发型肺癌中存在抑癌基因p16编码蛋白的表达下调以及原癌基因cyclin D1表达上调,与肿瘤的进展密切相关.提示二者可能通过影响细胞周期调控在肺癌的发生发展过程中起重要作用.     

白藜芦醇诱导肺癌细胞凋亡和细胞周期阻滞的分子机制

目的探讨白藜芦醇对肺癌细胞系A549和H1299细胞增殖与细胞周期阻滞及细胞凋亡之间的联系。方法采用MTT法检测白藜芦醇对A549和H1299细胞增殖的影响;用Western印迹法检测白藜芦醇作用后A549和H1299中凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3、cleaved-caspase-7、cleaved-caspase-9、cleaved-PARP及细胞周期相关蛋白cyclin D1、cyclin D3和CDK2、CDK4、CDK6、p53、p18、p21、p27的表达情况;通过流式细胞仪技术检测白藜芦醇诱导A549和H1299细胞凋亡率以及细胞周期阻滞的影响。结果白藜芦醇对A549和H1299的生长均有抑制作用,呈浓度依赖性;经白藜芦醇处理后,A549和H1299的周期蛋白cyclin D1、cyclin D3和CDK2蛋白的表达水平上调,而周期蛋白CDK4、CDK6、p53、p18、p21、p27的表达水平下调;A549和H1299的凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3、cleaved-caspase-7、cleaved-caspase-9、cleaved-PARP的表达水平上调;流式细胞仪检测A549和H1299的细胞凋亡率随白藜芦醇的浓度上升而增加,流式细胞仪检测细胞周期即可观察到随白藜芦醇的浓度的增加,细胞周期明显阻滞于G1/S期。结论白藜芦醇可能是通过促进caspases通路的活化,从而促进细胞凋亡;周期蛋白cyclin D1、cyclin D3和CDK2蛋白的表达水平的上调和CDK4、CDK6、p53、p18、p21、p27的表达水平的下调可能是白藜芦醇诱导人肺癌细胞发生G1/S期阻滞的关键机制。     

皮肤鳞状细胞癌细胞周期调节因子的研究

采用免疫组化染色检测３０ 例皮肤鳞癌组织细胞周期蛋白Ｄ１（ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１） 、细胞周期蛋白依赖性激酶４（ＣＤＫ４） ,ｐ１６ 及Ｒｂ 的表达,阳性率依次为６６－７ ％ ,５３－３ ％ ,３３－３ ％ 和３６－７ ％ ;ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１ 及ＣＤＫ４ 于癌巢边缘细胞表达强于中央癌细胞,且其分化程度越低,阳性着色细胞越多,着色越深。提示细胞周期尤其Ｇ１ 期的正向调节因子的过度表达及负向调节因子的低表达在皮肤鳞状细胞癌的发生、发展中起重要作用。     

皮肤鳞状细胞癌细胞周期调节因子的研究

In order to investigate the relationship between the regulators of cell cycle and cutaneous squamous cell carcinoma(SCC), we used an immunohistochemical staining technique to examine the expression of cyclin D1, p16 and Rb in the paraffin embedded skin cancer tissues of 30 patients with SCC. The positive percentage of cyclin D1, CDK4, p16 and Rb was 66.7%, 53.3%, 33.3%, and 36.7%, respectively. The overexpression of cyclin D1 and CDK4 could be observed frequently in low grade of differentiated cells, especially in marginal cells of the cancer nest. The results indicate that the aberrant expression of positive and negative regulators of the cell cycle may be involved in the carcinogenesis and evolution of SCC.     

鼻咽癌细胞中外源性p16表达对CDK4,Cyclin D1及pRb的影响

目的：分析外源性ｐ１６表达对ＣＤＫ４,Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１及ｐＲｂ的影响,探讨其抑制细胞生长的机制。方法：绘制生长曲线,比较细胞倍增时间,分析ＨＮＥ１,＃４－２及＃３－２克隆中细胞增殖状况;利用流式细胞仪分析上述细胞中细胞周期分布的改变;结合Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ方法,分析外源性ｐ１６表达对ＣＤＫ４,Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１及ｐＲｂ的影响。结果：生长曲线示,ＨＮＥ－１倍增时间为２３．４ｈ,＃３－２和＃４     

益气化瘀补肾方对D-半乳糖诱导小鼠腰椎间盘衰老的影响

目的:观察益气化瘀补肾方对D-半乳糖诱导小鼠腰椎间盘衰老的影响。方法:8周龄雄性健康C57BL/6J小鼠30只,随机分为空白对照组、诱导盐水灌胃组及益气化瘀补肾方组。空白对照组皮下注射生理盐水,其余2组均皮下注射D-半乳糖复制腰椎间盘衰老模型;盐水灌胃组灌胃等容量生理盐水,益气化瘀补肾方组灌胃中药水溶液。连续给药10周后处死小鼠,取下腰部椎间盘,进行免疫组化分析以及实时定量RT-PCR检测。结果:免疫组化染色显示,益气化瘀补肾方可以明显降低软骨终板及纤维环中p16INK4a和p27KIP蛋白表达;实时定量RT-PCR分析发现,益气化瘀补肾方可显著增加Bmi1、CDK4和C-myc mRNA的表达,降低p16INK4a、cyclin D1、RB、p19ARF、Mdm2和p53 mRNA表达。结论:益气化瘀补肾方具有延缓D-半乳糖诱导小鼠腰椎间盘衰老的作用,并且这种延缓作用与调控衰老相关基因及细胞周期相关蛋白表达相关。     

Different patterns of cyclin D1/CDK4-E2F-1/4 pathways in human embryo lung fibroblasts treated by benzo[a]pyrene at different doses

Objective To investigate the roles of the cyclin D1/CDK4 and E2F-1/4 pathways and compare their work patterns in cell cycle changes induced by different doses of B[a]E Methods Human embryo lung fibroblasts （HELFs） were treated with 2 μmol/L or 100 μmol/L B[a]P which were provided with some characteristics of transformed cells （T-HELFs）. Cyclin D l, CDK4 and E2F-1/4 expressions were determined by Western blotting. Flow cytometry was used to detect the distribution of cell cycle. Results After B[a]P treatment, the proportion of the first gap （G 1） phase cells decreased. CDK4 and E2F-4 expression did not change significantly. In 2 μmol/L treated cells, a marked overexpression of cyclin D1 and E2F-1 was observed. However, in T-HELFs overexpression was limited to cyclin D1 only, and no overexpression of E2F-1 was observed. The decreases of G1 phase in response to B[a]P treatment were blocked in antisense cyclin D1 and antisense CDK4 transfected HELFs （A-D1 and A-K4） and T-HELFs （T-A-D1 and T-A-K4）. After 2 μmol/L B[a]P treatment, overexpression of E2F-1 was attenuated in A-D1, and E2F-4 expression was decreased significantly in A-K4. In T-A-D1 and T-A-K4, E2F-4 expression was increased significantly, compared with T-HELFs. The E2F-1 expression remained unchanged in T-A-D1 and T-A-K4. Condusions Cyclin DI/CDK4-E2F-1/4 pathways work in different patterns in response to low dose and high dose B[a]P treatment. In HELFs treated with 2 μmol/L B[a]P, cyclin D1 positively regulates the E2F-1 expression while CDK4 negatively regulates the E2F-4 expression; however, in HELFs treated with 100 μmol/L B[a]P, both cyclin D1 and CDK4 negatively regulate the E2F-4 expression.     

p16 gene expression in basal cell carcinoma

BACKGROUND: Basal cell carcinoma (BCC) develops predominantly in sun-exposed skin in fair-skinned individuals prone to sunburn. BCC typically occurs in adults. High exposure to ultraviolet (UV) radiation increases rate of developing BCC, a slowly growing tumor that occurs in hair-growing squamous epithelium and rarely metastasizes. In genetic studies, BCC patients have cell-cycle abnormalities of different parts of the signaling pathway. Retinoblastoma regulatory pathway is important in cell cycle arrest. In this pathway, p16INK4a, an inhibitor of Rb pathway, binds to CDK4 and CDK6 competitively with cyclin D1 to prevent phosphorylation of tumor suppressor pRB gene. Alteration of this pathway contributes to development of human cancers and also is effective in skin cancers. In this study, we analyzed mRNA expression using in situ RT-PCR and the role of immunohistochemical expression of p16INK4a in BCC. METHODS: Expression of p16 in ten samples of Iranian paraffin-embedded skin BCC were studied using in situ RT-PCR and immunohistochemistry on p16INK4a gene. RESULTS: Nuclear and cytoplasmic staining intensity of samples within tumor cells and normal skin tissue illustrates different mRNA and protein expression of p16 gene. mRNA of p16 gene and the expressed protein induce cell cycle proliferation and involve both tumor tissue as well as normal skin tissue. However, in this study it was found that there is significant protein and mRNA expression in BCC cells when compared to normal skin tissue (p<0.05). CONCLUSIONS: p16 gene is involved in the pathogenesis of human skin BCC in view of increased p16 mRNA and expressed protein within tumor cells.