化痰行瘀汤抗大鼠肝纤维化作用机制研究

[目的]探究化痰行瘀汤抗大鼠肝纤维化作用的可能机制。[方法]取清洁级健康成年Wistar大鼠60只,随机抽取10只作为正常对照组,剩余50只采用橄榄油溶液皮下注射四氯化碳（CCL4）法制作肝纤维化模型,确认造模成功后按随机数字表法分为5组,即模型对照组、复方鳖甲软肝片组、化痰行瘀汤低剂量组、化痰行瘀汤中剂量组、化痰行瘀汤高剂量组。5组分别以相应药物连续干预6W,6W后比较各组Ⅳ型胶原（C-Ⅳ）、层黏连蛋白（LN）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、骨桥蛋白（OPN）和转化生长因子β1（TGF-β1）蛋白、TGF-β1 m RNA的表达。[结果]与正常对照组比较,干预6W后复方鳖甲软肝片组、化痰行瘀汤中剂量组、化痰行瘀汤高剂量组能明显降低C-Ⅳ蛋白的表达（P〈0.05）;化痰行瘀汤各剂量组LN蛋白表达明显下降（P〈0.05）;化痰行瘀汤各剂量组与复方鳖甲软肝片组α-SMA表达都明显下降（P〈0.05）;复方鳖甲软肝片组、化痰行瘀汤低剂量组、化痰行瘀汤高剂量组OPN蛋白表达明显下降（P〈0.05）;化痰行瘀汤各剂量组TGF-β1蛋白表达明显减少（P〈0.05）;化痰行瘀汤高剂量组TGF-β1m RNA表达明显下降（P〈0.05）。[结论]化痰行瘀汤能有效改善肝纤维化,且与剂量存在一定相关性。     

肝纤溶颗粒与复方鳖甲软肝片对大鼠肝纤维化模型细胞凋亡及内质网应激相关因子表达影响研究

探究肝纤溶颗粒与复方鳖甲软肝片对大鼠肝纤维化模型细胞凋亡及内质网应激相关因子表达影响。方法48 只雄性清洁级SD 大鼠随机分为：正常对照组、模型对照组、复方鳖甲软肝片组及肝纤溶颗粒组,每组各12 只。除正常对照组外各组复制肝纤维化模型。于复制模型后的3 周各组大鼠同时给药,正常对照组与模型对照组大鼠给予生理盐水1.5 ml/kg 灌胃,1 次/d;复方鳖甲软肝片组给予33.3%复方鳖甲软肝片溶液1.5 ml/kg 重灌胃,1 次/d;肝纤溶颗粒组给予33.3%肝纤溶颗粒溶液1.5 ml/kg灌胃,1 次/d。各组连续用药6 周。实验开始后第3、6 和9 周对各组大鼠肝脏病理学、细胞凋亡数量、肝纤维化指标水平以及内质网应激相关指标进行检测。结果与其他各组相比,肝纤溶颗粒组纤维增生程度评分下降（ p<0.05）,肝凋亡数下降（ p<0.05）;透明质酸、层黏连蛋白、血清Ⅲ型前胶原、血清Ⅳ型胶原水平下降（p <0.05）;CHOP、ATF6 蛋白表达水平下降（ p<0.05）。结论肝纤溶颗粒组肝纤维化大鼠细胞凋亡数量和肝纤维化水平较复方鳖甲软肝片组下降,差异有统计学意义（ p<0.05）,肝纤溶颗粒能够改善肝脏病理变化,调节内质网应激相关指标,对临床有指导意义。     

表儿茶素对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠的干预作用

目的 研究表儿茶素对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的保护作用。方法 将80只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱组（0.1 mg/kg）、表儿茶素高剂量组（100 mg/kg）、表儿茶素低剂量组（25 mg/kg）。除正常对照组腹腔注射橄榄油外,其余各组均腹腔注射四氯化碳（CCl4） 建立肝纤维化模型。复制模型的同时开始给药,各给药组大鼠灌胃相应药物,正常对照组和模型组大鼠灌胃等容积生理盐水,每日1次,连续6周。末次给药后,称取肝湿质量,计算肝脏指数;采用微板法检测大鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT)水平;苏木精-伊红染色和Masson胶原染色观察肝脏病理学变化;Western blot法检测肝脏中平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen,collα1)蛋白的表达水平。结果 与模型组相比,表儿茶素能显著降低大鼠的肝脏指数和血清ALT、AST的含量;显著降低肝组织中α-SMA、collα1蛋白的表达;肝组织病理学指标明显改善。结论 表儿茶素对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化有一定的保护作用,其机制可能与抑制α-SMA、collα1的表达有关。     

一贯煎对CCl_4诱导的肝纤维化大鼠肝组织胶原代谢的影响

目的：探讨一贯煎对四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）诱导的肝纤维化大鼠肝脏胶原代谢的影响。方法：腹腔注射CCl49周制备大鼠肝纤维化模型,于造模第3周、第6周末各处死6只大鼠作动态观察,自第7周起将模型大鼠随机分为模型对照组和干预组。干预组于继续造模的同时给予一贯煎灌胃3周,正常组与模型对照组大鼠给予同体积蒸馏水灌胃。第9周末处死全部大鼠,采集肝组织标本,检测肝组织组织金属蛋白酶抑制剂1（tissue inhibitor ofmetalloproteinase-1,TI MP-1）、-2,基质金属蛋白酶13（matrix metalloproteinase-13,MMP-13）、-14,α平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）,Ⅰ型胶原（collagen typeⅠ,ColⅠ）等的蛋白表达以及MMP-2、-9的活性。结果：与正常大鼠比较,造模第3、6和9周时肝纤维化大鼠肝组织胶原纤维增生程度增加,肝组织α-SMA、ColⅠ、TI MP-1、TI MP-2、MMP-13、MMP-14蛋白表达和MMP-2、MMP-9活性逐渐升高（P〈0.05或P〈0.01）;与9周模型组比较,一贯煎组大鼠胶原纤维增生程度显著减轻（P〈0.05）,肝组织α-SMA、ColⅠ、TI MP-1、TI MP-2、MMP-13和MMP-14蛋白表达及MMP-2、MMP-9活性显著降低（P〈0.01）。结论：一贯煎可以抑制肝星状细胞活化,抑制胶原的合成,促进过度增生的胶原纤维的降解,从而抑制CCl4诱导大鼠肝硬化的形成。     

拉米夫定联合复方鳖甲软肝片治疗乙肝肝纤维化的疗效

目的探讨拉米夫定联合复方鳖甲软肝片对慢性乙肝患者肝纤维化指标及血清标志物的变化及其意义。方法将87例慢性乙肝肝纤维化患者随机分为拉米夫定＋复方鳖甲软肝片治疗（治疗组）及护肝片治疗（对照组）,观察肝功能变化及肝纤维化指标：透明质酸（HA）、IV型胶原（CIV）水平;将各组结果进行比较分析。结果护肝片治疗组疗效明显低于拉米夫定＋复方鳖甲软肝片治疗组（P〈0．01）,护肝片治疗组HA、CIV水平明显高于治疗组（P〈0．01）。结论拉米夫定联合复方鳖甲软肝片治疗慢性乙肝肝纤维化疗效较理想。     

灵甲方对血瘀型肝纤维化大鼠骨桥蛋白的干预研究

目的：了解灵甲方对血瘀型肝纤维化动物模型的防治肝纤维化作用,从OPN、PAI-1的蛋白表达层面探索其防治肝纤维化的机理。方法：将Wistar大鼠共70只,随机分为4组：正常对照组、灵甲方组、复方鳖甲软肝片组、血瘀组。除正常对照组外,其余3组均采用腹腔注射DMN同时尾静脉注射小牛血清白蛋白和去甲肾上腺素的方法,复制血瘀型肝纤维化大鼠模型共4周。4周后灵甲方组以灵甲方灌胃,每天1次,共治疗8周。复方鳖甲软肝片对照组4周后以复方鳖甲软肝片灌胃,每天1次,共治疗8周。8周结束后,取血检测ALT、AST、Alb、Glb;取肝组织,用Western blot检测OPN与PAI-1的蛋白表达。结果：与血瘀组比,灵甲方及复方鳖甲软肝片治疗后大鼠的ALT明显降低（P〈0.05）,且灵甲方组的AST较血瘀组降低明显（P〈0.01）;与血瘀组比,灵甲方治疗后大鼠的体重明显增加（P〈0.01）,复方鳖甲软肝片治疗后大鼠的体重亦有增加（P〈0.05）;与血瘀组比,灵甲方治疗后肝体比比值显著增高（P〈0.01）,脾体比比值降低（P〈0.05）,且灵甲方组较复方鳖甲软肝片治疗组在治疗后肝体比比值增加更明显（P〈0.05）。灵甲方治疗后OPN及PAI-1的蛋白表达水平均较血瘀组显著降低（P〈0.01）,灵甲方较复方鳖甲软肝片对OPN表达的抑制作用更强,差别有统计学意义（P〈0.05）。结论：灵甲方可能通过抑制OPN的表达间接降低PAI-1的蛋白表达水平,所以表现为对PAI-1蛋白表达水平的降低幅度较OPN大,从而使PAI-1对细胞外基质降解的抑制作用减弱,增加细胞外基质的降解,发挥抗纤维化作用。     

木疏胶囊抗大鼠肝纤维化机制研究

目的通过观察木疏胶囊对肝纤维化大鼠纤维化相关基因表达的影响,探讨木疏胶囊抗肝纤维化分子水平的作用机制。方法 Wistar大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,木疏胶囊预防组和治疗组,鳖甲软肝片预防组和治疗组。40%CCl4油溶液诱导大鼠肝纤维化模型。HE染色和Masson染色观察肝组织病理改变。RT-PCR法检测各组TGF-β1,α-SMA,col-Ⅰ,col-Ⅲ基因表达。结果 40%CCl4皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型,病理观察证实造模成功。与模型对照组比较,各用药组各指标PCR产物均显著降低（P〈0.01）,木疏胶囊预防组分别与鳖甲软肝片预防组和治疗组比较显示TGF-β,α-SMA,col-Ⅰ,col-Ⅲ基因表达的降低均有统计学差异（P〈0.01）,木疏胶囊治疗组分别与鳖甲软肝片预防组和治疗组比较,TGF-β,α-SMA,col-Ⅰ,col-Ⅲ基因表达的降低均有统计学差异（P〈0.05或P〈0.01）。结论木疏胶囊预防和治疗用药均可使肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1、α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ基因表达下降。     

鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化的作用及其机制研究

目的探讨鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)的作用及其机制。方法 SD雄性大鼠90只,随机分6组,每组15只,其中以40%CCl4处理(3 ml/kg)8周复制中毒肝纤维化模型(模型组),复制模型的同时分别用鳖甲煎改良方高剂量组28.4 g/(kg.d)、中剂量组14.2 g/(kg.d)、低剂量组7.1 g/(kg.d)灌胃治疗并且以复方鳖甲软肝片灌胃0.6 g/(kg.d)作阳性对照组治疗6周。以复制模型同样方式与用量于右后腿皮下注射橄榄油及生理盐水灌胃(10 ml/kg.d)作空白对照组。苏木精-伊红(HE)染色观察各组8周后肝纤维化变化程度,RT-PCR检测其转化生长因子β1(transforming growth factor beta one,TGF-β1)、Smad3及Smad7变化,免疫组化(S-P法)观测TGF-β1、smad3、smad7表达情况。结果 8周后,与模型组比较,鳖甲煎改良方高、中、低剂量组和复方鳖甲软肝片组肝小叶结构破坏明显减轻,部分肝细胞脂肪变性,炎性细胞浸润与少量胶原纤维形成;肝组织TGF-β1与Smad3的mRNA及蛋白表达显著减少(P<0.01),smad7 mRNA及蛋白表达明显增加(P<0.01)且鳖甲煎改良方高、中、低剂量组和复方鳖甲软肝片组疗效并无显著差异。结论鳖甲煎改良方能显著改善大鼠肝纤维化,其作用机制可能与鳖甲煎改良方调控TGF-β/smad信号通路有关。     

灵甲方对血瘀型肝纤维化大鼠骨桥蛋白的干预研究

目的:了解灵甲方对血瘀型肝纤维化动物模型的防治肝纤维化作用,从OPN、PAI-1的蛋白表达层面探索其防治肝纤维化的机理。方法:将Wistar大鼠共70只,随机分为4组:正常对照组、灵甲方组、复方鳖甲软肝片组、血瘀组。除正常对照组外,其余3组均采用腹腔注射DMN同时尾静脉注射小牛血清白蛋白和去甲肾上腺素的方法,复制血瘀型肝纤维化大鼠模型共4周。4周后灵甲方组以灵甲方灌胃,每天1次,共治疗8周。复方鳖甲软肝片对照组4周后以复方鳖甲软肝片灌胃,每天1次,共治疗8周。8周结束后,取血检测ALT、AST、Alb、Glb;取肝组织,用Western blot检测OPN与PAI-1的蛋白表达。结果:与血瘀组比,灵甲方及复方鳖甲软肝片治疗后大鼠的ALT明显降低(P<0.05),且灵甲方组的AST较血瘀组降低明显(P<0.01);与血瘀组比,灵甲方治疗后大鼠的体重明显增加(P<0.01),复方鳖甲软肝片治疗后大鼠的体重亦有增加(P<0.05);与血瘀组比,灵甲方治疗后肝体比比值显著增高(P<0.01),脾体比比值降低(P<0.05),且灵甲方组较复方鳖甲软肝片治疗组在治疗后肝体比比值增加更明显(P<0.05)。灵甲方治疗后OPN及PAI-1的蛋白表达水平均较血瘀组显著降低(P<0.01),灵甲方较复方鳖甲软肝片对OPN表达的抑制作用更强,差别有统计学意义(P<0.05)。结论:灵甲方可能通过抑制OPN的表达间接降低PAI-1的蛋白表达水平,所以表现为对PAI-1蛋白表达水平的降低幅度较OPN大,从而使PAI-1对细胞外基质降解的抑制作用减弱,增加细胞外基质的降解,发挥抗纤维化作用。     

环氧合酶-2在CCl4诱导大鼠肝纤维化形成中的作用

目的 探讨环氧合酶-2(cyclooxygenase-2, COX-2)在四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化形成过程中的作用.方法 用50% CCl4经腹腔注射,每周2次共8周诱导雄性S-D大鼠肝纤维化模型.将S-D大鼠随机分3组正常对照组给橄榄油腹腔注射;罗非昔布组在CCl4诱导肝纤维化模型的同时给予选择性COX-2抑制剂罗非昔布(按10 mg·d-1·kg-1体重溶于10 mL生理盐水中灌胃);模型对照组在CCl4诱导肝纤维化模型的同时给予同等体积的生理盐水灌胃.第8周末处死大鼠,病理组织学观察肝纤维化严重程度并评分,并通过Masson三色染色法将胶原染成蓝色,用图像分析仪自动分析胶原面积.用Western blot检测肝组织COX-2表达和Ⅳ型胶原.计数肝窦内α-SMA阳性的细胞数来观察肝星状细胞的活化.结果 与肝纤维化模型组相比,罗非昔布干预组肝组织纤维化严重程度明显减轻(平均积分分别为4.00±0.00 vs 2.89±0.60, P＜0.05)、胶原面积也减少(分别为30.7±8.9 vs 23.5±6.5, P＜0.05)、肝窦内平均α-SMA阳性细胞数明显减少(分别为12.5±1.3 vs 7.4±1.4, P＜0.01);Western blot分析提示与肝纤维化模型组相比,罗非昔布能降低Ⅳ型胶原表达、对COX-2表达无明显影响.结论 COX-2在肝纤维化的形成过程中发挥重要作用,选择性COX-2抑制剂罗非昔布具有减轻或阻止肝纤维生成的作用.     

miR-1247-3p激活TGF-β1信号介导肝星状细胞与肝纤维化的关系

目的 探讨miR-1247-3p对肝纤维化的影响,分析其对肝星状细胞增殖与活化的作用及分子机制。方法 四氯化碳（CCl₄）制备肝纤维化大鼠模型,并分离大鼠原代肝星状细胞。慢病毒转染处理细胞,分为空白对照组、miR-1247-3p mimic组和miR-1247-3p inhibitor组。检测miR-1247-3p、转化生长因子-β1（TGF-β1）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）水平及细胞增殖能力,并采用荧光素酶报告实验验证miR-1247-3p靶基因。结果 与对照组比较,CCl₄腹腔注射后大鼠肝组织出现纤维化增生,结构破坏,炎症细胞浸润,且随时间延长肝纤维化程度加重（P<0.05）;与对照组比较,模型组大鼠肝组织miR-1247-3p和TGF-β1表达水平均显著增加（P<0.05）;与空白对照组比较,miR-1247-3p mimic组肝星状细胞增殖能力和肝星状细胞α-SMA蛋白表达水平显著增加,miR-1247-3p inhibitor组显著降低（P<0.05）;与空白对照组比较,miR-1247-3p mimic组...     

环氧合酶-2及其抑制剂在肝纤维化中的作用及机制

目的 探讨环氧合酶-2及其选择性抑制剂塞来昔布在肝纤维化中的作用及部分机制,为肝纤维化的防治提供理论基础.方法 雄性Wistar大鼠50只,随机分为正常组(10只)、模型组(10只.每只大鼠腹腔注射0.025 mL CCL4+0.15mL植物油,每周3次)、实验组(30只,分3组即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,每组各10只.每只大鼠腹腔注射0.025 mL CCL4+0.15mL植物油,2 h后分别依不同组给予10 mg/kg、20 mg/kg和40mg/kg塞来昔布灌胃,每周3次).8周后,检测血清谷丙转氨酶(札T)、谷草转氨酶(aspartate transminase,AST).检测肝组织羟脯氨酸含量,同时通过免疫组织化学的方法测定各组大鼠α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)和环氧合酶-2(cyclooxygenasa-2,COX-2)的表达.结果 模型组大鼠血清ALT、AST和羟脯氨酸含量较对照组显著增高(P<0.05),而实验组大鼠血清ALT、AST和羟脯氨酸含量较模型组显著增高(P<0.05);正常大鼠α-sMA微弱表达,未见COX-2表达;模型组大鼠肝组织α-SMA和COX-2较正常对照组显著增高(P<0.05);使用COX-2抑制剂后,实验组大鼠α-SMA和COX-2表达水平较模型组显著增高(P<0.05).结论 环氧合酶-2的表达可能对肝纤维化存在保护作用,使用选择性COX-2抑制剂加重肝纤维化程度.     

软肝冲剂抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的：探讨软肝冲剂对大鼠肝纤维化模型的治疗作用。方法：50只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、软肝冲剂低剂量组（4g/kg/d）、软肝冲剂高剂量组（8g/kg/d）和鳖甲软肝片组（0.8g/kg/d）,每组10只大鼠。40%四氯化碳和40%酒精灌胃制备大鼠肝纤维化模型,各用药组大鼠给予相应药物灌胃8周。分别检测各组大鼠的肝功能,肝纤维化指标层粘连蛋白（LN）、透明质酸（HA）和肝组织羟脯氨酸（HYP）的含量。结果：软肝冲剂可明显改善肝纤维化大鼠模型的肝功能,降低LN、HA和肝组织HYP的含量;并且,软肝冲剂高剂量的效果明显优于软肝冲剂低剂量和鳖甲软肝片。结论：软肝冲剂对肝纤维化大鼠模型具有较好的治疗效果,但具体机制尚待进一步研究。     

中药正肝化瘀方对肝纤维化大鼠肝组织胶原代谢的影响

目的:观察正肝化瘀方对肝纤维化大鼠肝组织胶原代谢的影响。方法:采用四氯化碳+高脂低蛋白饮食制备大鼠肝纤维化模型,治疗组以正肝化瘀方灌胃,正常组、模型组予以等量生理盐水灌胃,6 w后取材检测。用Jamall氏法测定各组大鼠肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量,Western blot法检测各组大鼠肝组织α-SMA、Ⅰ型、Ⅳ型胶原蛋白的表达。结果:与模型组比较,治疗组大鼠肝组织Hyp含量及α-SMA、Ⅰ/Ⅳ型胶原蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01)。结论:正肝化瘀方的抗肝纤维化机制与减少肝组织胶原合成与沉积有关。     

索拉非尼抑制大鼠肝纤维化的实验研究

目的：研究索拉非尼对实验性大鼠纤维化过程的影响。方法：Wistar大鼠腹腔注射DMN诱导建立肝纤维化模型。造模后分别以高剂量（10mg/kg）、低剂量（3mg/kg）灌胃。观察各组大鼠肝脏大体变化;HE染色观察病理变化;Masson’s trichrome及Sirius Red染色观察肝细胞内胶原纤维水平,免疫组织化学法测定α-SMA表达。对肝纤维化程度分级,图象分析仪半定量分析。灌胃稀释剂作为对照。结果：肉眼观察治疗,结束后对照组及低剂量组肝脏表面出现单发或多发大小不等的肝纤维化结节,高剂量组大鼠肝脏肝纤维化程度较前两组明显减轻;光镜观察对照组可见肝细胞变性、坏死,纤维组织增生,肝内广泛假小叶纤维化,低剂量组病变程度同对照组类似,高剂量组肝细胞无明显变性,未见广泛再生结节和再分隔。对照组及低剂量组胶原染色面积胶原染色面积无明显差别,高剂量组胶原染色面积分别为模型组和低剂量组的52%、49%,较对照组均有显著差异（P〈0.05）;对照组及低剂量组α-SMA表达水平不同程度增加,高剂量组α-SMA表达明显减少。结论：索拉非尼能在病理水平减轻实验性模型大鼠的肝纤维化进程。     

肝心宁对大鼠肝纤维化α-SMA,MMP-13及TIMP-1蛋白表达的影响

目的研究肝心宁对肝纤维化大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、基质金属蛋白酶-13（MMP-13）及金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）蛋白表达的影响。方法将68只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组、肝心宁高剂量组、肝心宁低剂量组。采用四氯化碳皮下注射并饲以高脂低蛋白饲料和30%酒精诱导大鼠肝纤维化模型。各组分别处理,6周末用免疫组织化学染色法检测肝组织中α-SMA,MMP-13及TIMP-1蛋白表达情况。结果肝心宁高剂量组、肝心宁低剂量组和秋水仙碱组与模型组相比,α-SMA及TIMP-1均明显降低,P〈0.05;肝心宁高剂量组与肝心宁低剂量组和秋水仙碱组相比,α-SMA及TIMP-1均明显降低,P〈0.05;肝心宁高剂量组、肝心宁低剂量组和秋水仙碱组与模型组相比,MMP-13显著升高,P〈0.05;肝心宁高剂量组与肝心宁低剂量组和秋水仙碱组相比,MMP-13显著升高,P〈0.05。结论肝心宁抑制大鼠肝脏纤维组织的形成可能与其降低α-SMA,TIMP-1蛋白表达并增强MMP-13蛋白表达有关。     

姜黄素对肝纤维化大鼠肝组织中α-SMA、PDGF-BB和TGF-β1表达的影响

目的 观察姜黄素对肝纤维化大鼠肝组织中α-SMA、PDGF-BB和TGF-β1表达的影响，探讨姜黄素抗大鼠肝纤维化的作用机制。方法 用四氯化碳制作大鼠肝纤维化模型，同时分别予低（100mg/kg）、中（200mg/kg）、高（300mg/kg）剂量姜黄素灌胃，设立溶质对照组；分别于实验第4、7、21、42天，各组随机处死5只大鼠，取同部位肝组织行HE, V-G染色，并用免疫组化方法检测各组α-SMA、PDGF-BB和TGF-β1 的表达。结果 溶质对照组不表达或微量表达α-SMA、PDGF-BB和TGF-β1；模型组α-SMA、PDGF-BB和TGF-β1的表达随造模时间延长明显增强，姜黄素可显著减少α-SMA、PDGF-BB和TGF-β1的表达，其作用强度与剂量和时间有关。结论 姜黄素可抑制大鼠肝纤维化模型中PDGF-BB和TGF-β1的表达，这可能是其抗肝纤维化的作用机制之一。     

肝豆灵抑制Notch信号通路干预铜负荷致肝纤维化大鼠肝脏上皮-间质转化

目的 探讨肝豆灵抑制Notch信号通路干预铜负荷大鼠肝纤维化上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的作用机制。方法 将雄性SD大鼠40只随机分为正常组,模型组,肝豆灵小、中、大剂量组,除正常组给予正常饲料外,其他各组喂饲硫酸铜饮食复制铜负荷大鼠肝纤维化模型。检测血清丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase, AST）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）、透明质酸（hyaluronic acid,HA）水平及肝组织羟脯氨酸（hydroxyproline,Hyp）含量;分别采用苏木精-伊红染色和Masson染色观察肝组织病理损伤及胶原沉积状况;采用RT-PCR检测肝组织转化生长因子-β1（transforming growth factor beta 1, TGF-β1）、Jagged1、Notch1、Notch3、Snail mRNA,采用Western blot检测Hes1、E-cadherin蛋白表达水平,采用免疫组织化学法检测α-SMA表达水平。结果 与正常组比较,模型组血清ALT、AST、ALP、HA水平及肝组织Hyp、胶原纤维含量均显著升高（P<0.05）,肝组织TGF-β1、Jagged1、Notch1、Notch3、Snail mRNA表达水平以及肝组织Hes1、α-SMA蛋白表达水平显著升高（P<0.05）,E-cadherin蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）;与模型组比较,肝豆灵中、大剂量组E-cadherin蛋白表达水平显著升高（P<0.05）,其余上述指标均显著降低（P＜0.05）。结论 肝豆灵通过抑制Notch信号通路,干预EMT环节,减少肌成纤维细胞转化生成及活化增殖,降低胶原纤维沉积而抗肝纤维化。     

增损甘露消毒丹对肝纤维化大鼠血清PCⅢ、Ⅳ—C影响的实验研究

目的观察增损甘露消毒丹对肝纤维化大鼠血清Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（Ⅳ—C）及肝组织病理变化的影响,探讨增损甘露消毒丹抗肝纤维化的疗效及作用机理。方法采用四氯化碳（CCL4）皮下注射和乙醇灌胃等制备肝纤维化大鼠模型;设正常对照组,病理模型组,增损甘露消毒丹小、中、大剂量组和复方鳖甲软肝片对照组。造模成功后进行药物灌胃治疗,疗程结束后采用放射免疫法检测大鼠血清PCⅢ、Ⅳ—C的含量。采用HE染色法、胶原纤维染色法及网状纤维染色,观察肝纤维化程度。结果增损甘露消毒丹大、中剂量组、复方鳖甲软肝片组与病理模型组比较,血清PCⅢ、Ⅳ—C含量均降低,差异有显著性意义（P〈0．05）;增损甘露消毒丹大、中剂量组、复方鳖甲软肝片组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论增损甘露消毒丹可以抑制细胞外间质中胶原的生成,降低肝纤维化大鼠血清PCⅢ、Ⅳ—C的含量,并能明显减轻大鼠的肝纤维化程度、减少胶原纤维与网状纤维．对肝纤维化大鼠有良好的治疗作用。     

三甲益肝颗粒对大鼠肝纤维化的抑制作用

目的研究三甲益肝颗粒（SJG）对四氯化碳（CCl4）诱导的实验性大鼠肝纤维化的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法健康SD大鼠50只随机分为3组。模型组（18只）和SJG组（17只）均采用40％CCl4花生油溶液皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型,每周2次;对照组（15只）皮下注射生理盐水。从实验开始之日起,模型组给予蒸馏水灌胃,SJG组每天给予SJG灌胃。分别于6周末、8周末收获大鼠肝组织做Masson染色,检测胶原纤维的表达;免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。结果模型组胶原纤维所占面积多于对照组（P〈0．01）,SJG组胶原纤维所占面积少于模型组（P〈0．01）。正常对照组大鼠肝组织α-SMA仅在汇管区的小叶间动脉、静脉血管壁处表达,模型组α-SMA的表达多于正常对照组（P〈0．01）,SJG组α-SMA的表达较模型组减少（P〈0．01）,8周α-SMA的表达虽比6周有所增加,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论SJG可能抑制肝星形细胞的活化,抑制胶原纤维的沉积,从而有效地减轻肝纤维化的程度。