亚麻子水提液对DPP-4及α-葡萄糖苷酶活性抑制实验研究

目的通过观察亚麻子水提液对二肽基肽酶-4（DPP-4）、α-葡萄糖苷酶抑制作用,为该药防治糖尿病提供实验依据。方法①以DPP-4酶、缓冲液、底物建立DPP-4抑制剂的体外筛选体系,对亚麻子水提液进行抑制实验,采用发色底物法测定吸光度（OD）,计算DPP-4抑制率及IC50值;②以蔗糖为底物建立α-葡萄糖苷酶活性抑制模型,采用葡萄糖氧化酶法测定亚麻子水提液对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,计算其抑制率和IC50值。结果①亚麻子具有轻度DPP-4抑制作用,其IC50值738.20mg/L;②亚麻子具有α-葡萄糖苷酶抑制作用,其IC50值为365.9mg/mL。结论亚麻子水提液可一定程度地抑制DPP-4及α-葡萄糖苷酶活性。     

双益方、组方单味中药及其有效成分对α-葡萄糖苷酶、二肽基肽酶-4抑制作用实验研究

目的:研究双益方、组方单味中药及其有效成分对α-葡萄糖苷酶、二肽基肽酶-4的抑制作用。方法:建立体外α-葡萄糖苷酶活性筛选模型,测定、计算各实验组对α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)抑制率和IC50值,检测各成分对α-glucosidase的抑制作用;建立二肽基肽酶4(DPP-4)抑制作用的体外筛选模型,研究双益方及其有效成分对DPP-4的抑制作用。结果:当双益方提取物浓度达到250μg·L-1时,对α-葡萄糖苷酶的抑制率为91.52%,其IC50值为(17.25±1.06)μg·L-1;双益方组方中药中,以黄芪对α-葡萄糖苷酶的抑制作用较好,其IC50值为(7.68±0.32)μg·L-1;双益方有效成分中,以1-脱氧野尻霉素对α-葡萄糖苷酶的抑制作用较好,其IC50值为(0.85±0.04)μg·L-1,与阿卡波糖(0.39±0.02)μg·L-1较为接近;黄芪、山茱萸、黄连、葛根、桑白皮、佩兰、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、熊果酸、马钱苷、小檗碱对DPP-4抑制作用10%;1-脱氧野尻霉素、双益方提取物、黄芪甲苷、葛根素对DPP-4抑制作用10%。选择对DPP-4抑制率10%的双益方提取物、单味药及有效成分进行DPP-4抑制率复筛,对DPP-4抑制作用顺序为磷酸西格列汀1-脱氧野尻霉素双益方提取物黄芪甲苷葛根素。对DPP-4的IC50分别为:1-脱氧野尻霉素(18.78±1.08)μg·L-1,双益方提取物(74.52±3.24)μg·L-1,黄芪甲苷(50.24±2.22)μg·L-1,葛根素(100.24±4.25)μg·L-1。结论:抑制α-葡萄糖苷酶及DPP-4活性可能是该复方治疗2型糖尿病的作用机制。     

五子降糖方对T2DM大鼠血糖、C-P及DPP-4活性影响的实验研究

[目的]探讨五子降糖方对二肽基肽酶Ⅳ(DPP-4)活性的影响,研究其发挥降糖作用的可能机制。[方法]选取SPF级雄性GK大鼠,适应性喂养1周后给予高脂饲料,连续喂养4周,测定血糖,以随机血糖11.1 mmol/L或餐后2 h血糖(2 h PG)16.7 mmol/L为成模标准,将成模2型糖尿病(T2DM)大鼠随机分为模型组、二甲双胍组(0.1 g/kg)、五子降糖方低、中、高剂量组(3.5、7.0、14 g/kg,折合生药量),同时另选Wstar大鼠为正常组,正常组与模型组灌胃等体积纯净水,灌胃前测定空腹血糖(FBG),灌胃后4周、8周测定FBG及2 h PG,8周后处死动物,检测血清C肽(CP)水平;采用发色底物法建立DPP-4抑制剂体外筛选模型,分别应用五子降糖方及其组方的各味单药菟丝子、女贞子、紫苏子、莱菔子、车前子水提物对DPP-4抑制剂体外筛选模型进行干预,以磷酸西格列汀片作为阳性对照药,测定A值,计算DPP-4抑制率,比较IC50差异。[结果]五子降糖方可降低T2DM大鼠FBG及2 h PG,增高血清C-P水平;对DPP-4抑制作用,五子降糖方IC50为(6 667.754±2 119.759)mg/L,其组成药物中莱菔子IC50为(382.554±7.750)mg/L,菟丝子IC50为(843.391±135.230)mg/L。[结论]五子降糖方可以降低T2DM FBG及2 h PG,改善胰岛β细胞功能,作用机制可能与DPP-4抑制作用有关,其中莱菔子、菟丝子可能是本方发挥DPP-4抑制作用的主要药物。     

石榴皮对幽门螺杆菌的体外抑菌实验研究

目的探讨石榴皮对幽门螺杆菌(H.pylori)甲硝唑耐药株及敏感株的体外抑制作用.方法琼脂稀释法检测H.pylori甲硝唑耐药株和敏感株对石榴皮水煎剂的最低抑菌浓度(M IC),并计算M IC50、M IC75、M IC90.结果石榴皮对H.pylori的M IC值范围为7.8 125~500 mg/mL;石榴皮对H.pylori甲硝唑耐药株和敏感株的M IC50分别为29.9 mg/mL和28.0 mg/mL,M IC75分别为65.1 mg/mL和59.1 mg/mL,M IC90分别为131.1 mg/mL和115.9 mg/mL;H.pylori甲硝唑耐药株和敏感株对石榴皮水煎剂的敏感性无统计学差异(相对中位数潜力1.072,95%的可信区间为0.763~1.513).结论石榴皮有良好的抑菌效果,H.pylori甲硝唑耐药株及敏感株都对其敏感.     

胡芦巴提取物化学成分含量测定及体外抗氧化研究

目的建立高效液相法测定胡芦巴提取物含量的方法,研究不同胡芦巴提取物对DPPH及羟基自由基(.OH)的清除效果。方法采用药典方法测定新疆、安徽产胡芦巴、胡芦巴醇提物及胡芦巴总皂苷(TFGs)中的胡芦巴碱;薯蓣皂苷元的含量测定,色谱柱为大连伊力特Hypersil ODS-1(4.6mm×250mm,5μm);流动相为甲醇-水(86∶14,v/v),流速1.0mL/min,检测波长203nm,柱温35℃;紫外法测定体外抗氧化作用。结果薯蓣皂苷元的色谱峰面积与浓度呈良好的线性关系,线性范围为43.2～864μg/mL(r=0.999 5);平均回收率(n=9)为100.3%。胡芦巴碱含量:胡芦巴(新疆)0.66%、胡芦巴(安徽)0.62%,胡芦巴醇提物1.78%、胡芦巴大孔树脂提取物(TFGs)0.47%;薯蓣皂苷元含量:胡芦巴(新疆)0.78%、胡芦巴(安徽)0.85%,胡芦巴醇提物4.94%、胡芦巴大孔树脂提取物(TFGs)7.58%;胡芦巴各提取物对DPPH的清除IC50值:TFGs为1.2mg/mL、胡芦巴醇提物为0.6mg/mL、胡芦巴碱提取物为5.0mg/mL;胡芦巴各提取物对羟自由基的清除IC50值:TFGs为6.5mg/mL、胡芦巴醇提物为3.3mg/mL、胡芦巴碱提取物为12.5mg/mL。结论采用HPLC法测定胡芦巴提取物中薯蓣皂苷元的含量,方法准确可靠、重现性好,可用于含量测定;胡芦巴各提取物具有清除DPPH和羟基自由基的作用。     

观辣树水提物体外抗乙肝病毒的实验研究

目的:通过HepG2.215细胞体外药物评价模型,观察观辣树水提物对乙肝病毒的抑制作用。方法:利用HepG2.215细胞模型,以噻唑兰染色法(MTT法)检测观辣树水提物对细胞的毒性作用,以酶联免疫(ELISA)法检测观辣树水提物对HepG2.215细胞乙肝表面抗原(HBsAg)、e抗原(HBeAg)分泌的抑制作用。结果:观辣树水提物在HepG2.215细胞上的最大实验浓度200mg/mL时对细胞的破坏率仅为48.65%,而对HBsAg的半数抑制浓度IC50为57.82mg/mL,治疗指数TI>3.46;对HBeAg的半数抑制浓度IC50为51.68mg/mL,治疗指数TI>3.87。结论:观辣树水提物体外对乙肝病毒有较好的抑制作用。     

多花筋骨草提取物抗氧化活性研究

目的:采用体外抗氧化实验,对多花筋骨草醇提物的抗氧化活性进行研究,为多花筋骨草的开发和应用提供参考数据。方法:用甲醇冷浸提取多花筋骨草,减压浓缩得到多花筋骨草醇提物,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)法、2,2'-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS+)法和总还原能力测定法,研究其提取物的抗氧化活性。结果:多花筋骨草醇提物对DPPH·、ABTS+均有清除活性,以及较强还原能力,且DPPH·清除活性(IC50值)为0.348 mg/mL、ABTS+清除活性(IC50值)为0.292 mg/mL,总还原能力(IC50值)为2.736 mg/mL。结论:多花筋骨草醇提物有较强的抗氧化活性,且抗氧化活性与醇提物质量浓度两者间存在一定量效关联。     

滋肾清肝方及其有效成分对二肽基肽酶-4抑制作用的实验研究

目的:研究滋肾清肝方及其有效成分(2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷,1-脱氧野尻霉素和决明子苷、红镰霉素龙胆二糖苷、橙黄决明素、甲基钝叶决明素、白藜芦醇)对二肽基肽酶4(DPP-4)活性的影响,研究其发挥降糖作用的可能机制。方法:建立DPP-4抑制剂的体外筛选模型,对酶量、底物浓度、最适p H和反应时间进行优化,选择磷酸西格列汀片作为阳性对照药,通过建立的筛选模型对以上成分进行筛选,计算抑制率及IC50。结果:红镰霉素龙胆二糖苷、决明子苷、橙黄决明素、甲基钝叶决明素对DPP-4的抑制率10%,白藜芦醇、2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、1-脱氧野尻霉素、滋肾清肝方提取物、磷酸西格列汀对DPP-4的IC50值分别为(48.805±12.874)、(2.845±0.428)、(0.305±0.002)、(1.628±0.324)、(0.003±0.0005)mmol/L。结论:滋肾清肝方及其有效成分具有不同程度的DPP-4抑制作用,抑制DPP-4可能为其调节血糖的作用机制。     

茯砖茶不同溶剂提取物抗氧化活性研究

目的 研究茯砖茶不同溶剂提取物体外抗氧化活性,并测定其总多酚、黄酮含量.方法 以抗坏血酸为阳性对照,采用二苯代苦味酰基（DPPH）、[2,2＇-连氨-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二氨盐]（ABTS）及铁离子还原/抗氧化能力（FRAP）三种抗氧化模型,评价茯砖茶80％乙醇（总提物）、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水5种不同溶剂提取物体外清除DPPH、ABTS＋自由基能力和对铁离子的还原/抗氧化能力.结果 茯砖茶乙酸乙酯提取物总多酚含量最高,正丁醇提取物黄酮含量最高,分别为（291.38±5.24）、（222.86±6.12）mg/g.茯砖茶不同溶剂提取物均具有一定的抗氧化活性,清除ABTS＋自由基和铁离子还原/抗氧化能力为：总提物＞乙酸乙酯提取物＞正丁醇提取物＞水提物＞石油醚提取物;清除DPPH自由基的能力为：乙酸乙酯提取物＞总提物＞正丁醇提取物＞水提物＞石油醚提取物.茯砖茶总提物和乙酸乙酯提取物均具有良好的抗氧化活性,清除DPPH自由基能力的半清除率浓度（IC50）分别为0.048、0.043 g/L,清除ABTS＋自由基能力的IC50分别为0.025、0.027 g/L.茯砖茶抗氧化能力与总多酚含量呈正相关.结论 茯砖茶提取物具有良好的抗氧化能力,为开发功能性抗氧化剂提供科学依据.     

八角茴香及其提取物莽草酸抗甲型流感病毒的体外研究

目的 检测八角茴香及其提取物莽草酸体外抗甲型流感病毒的作用.方法 MTT法测定药物对MDCK细胞的毒性;鸡胚扩增病毒,测定病毒在MDCK细胞上的TCID50;通过观察CPE的情况以及采用MTT法评价药物对病毒在细胞内生长的影响.结果 在MDCK细胞上八角水提物和莽草酸的最大无毒浓度（TC0）分别为10 mg/mL和0.1 mg/mL;病毒的TCID50为10-4/0.1 mL;在细胞模型上八角水提物对病毒有明显的预防和治疗效果,但莽草酸未表现出预防或治疗效果.结论 在体外实验中,八角水提物对H3N2型流感病毒有一定的预防和治疗作用,而其提取物莽草酸无此效果.     

复方大黄提取物体外的抑菌作用研究

目的观察复方大黄5种提取物对细菌和真菌的体外抑菌作用。方法将大黄和丁香按一定的比例混合作为原料药,先加水后,蒸馏提取挥发油(Ⅰ),下层水液进行浓缩后为(Ⅱ),药渣晾干后,再用50%、60%、70%乙醇进行提取分离、浓缩,得到50%(Ⅲ)、60%(Ⅳ)、70%(Ⅴ)醇提物共5种提取物,用试管二倍稀释法联合琼脂平板法,研究体外抑菌效果。结果复方大黄5种提取物对3种常见致病菌及一种真菌有不同程度的抑菌作用,其中,3种不同浓度的乙醇提取物中,以70%乙醇提取物的抑菌作用最强,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌的最小抑菌浓度(M IC)均为0.25 mg/m l,挥发油抑菌强度中等,大黄水提液无抑菌作用。结论复方大黄70%醇提物对4种受试菌的抑菌作用显著。     

石榴花提取物细胞水平抑制流感病毒的活性研究

目的 探讨石榴花提取物对流感病毒活性的抑制作用.方法 利用结晶紫摄取实验检测石榴花提取物对流感病毒诱导MDCK细胞毒的抑制作用;MTT法检测石榴花提取物最大细胞非毒浓度(Maximal non-cytotoxic concentration,MNCC).结果石榴花水提取物IC50为(63.04±27.04) μg/mL,石榴花醇提取物的IC50为(67.36±20.86) μg/mL.石榴花水提取物和醇提取物的MNCC分别为1 000 μg/mL和300 μg/mL.结论石榴花水提取物和醇提取物均可以剂量依赖方式抑制流感病毒诱导的细胞毒,具有抑制流感病毒作用.     

枸杞叶、桑叶水提物体外抑菌活性研究

目的：研究枸杞叶、桑叶水提物对常见的病原微生物的体外抑菌作用。方法：将枸杞叶和桑叶提取物用试管二倍稀释法联合琼脂平板法,进行体外抑菌试验。结果：枸杞叶水提物对金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度（ MIC ）为10 mg/mL,对表皮葡萄球菌MIC为20 mg/mL,对大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白假丝酵母菌MIC均＆gt;20 mg/mL;桑叶水提取物对金黄色葡萄球菌的MIC为20 mg/mL;对表皮葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌MIC均＆gt;20 mg/mL。结论：枸杞叶和桑叶水提物对金黄色葡萄球菌有抑菌作用,两者对革兰阴性菌、念珠菌抑菌作用不显著。     

石榴皮提取物对Caco-2细胞生长抑制作用实验

目的探讨石榴皮提取物对人源性结肠癌细胞Caco-2的体外抑制作用。方法培养人源性结肠癌细胞Caco-2,制作石榴皮提取物并配置成不同浓度的提取液,将这些不同浓度的石榴皮提取液加入到培养至对数生长期的Caco-2细胞中,一段时间后,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)对给予不同浓度石榴皮提取物的肿瘤细胞进行染色,观察不同浓度石榴皮提取物对Caco-2细胞生长抑制程度,并计算抑制率。结果石榴皮提取物在8 g/L时对Caco-2细胞有较强的抑制作用,24、48、72 h的细胞生长抑制率分别为(50.65±5.18)%、(57.21±2.07)%、(69.88±2.14)%;在72 h时对Caco-2细胞的IC50是2.89 g/L。结论石榴皮粗提物在高浓度时具有良好的抑制Caco-2细胞增殖的作用。     

水翁花不同极性提取物体外抗氧化活性实验性研究

目的:研究水翁花不同极性提取物体外抗氧化活性。方法:水翁花用95%乙醇回流提取后提取液用不同极性溶剂进行分离,用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法测定不同提取物体外抗氧化性。结果:水翁花的石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物及水层部位对DPPH自由基的抑制浓度(IC_(50))分别为0.0179 mg/mL、0.0262 mg/mL、0.0185 mg/mL和0.0212 mg/mL,均弱于维生素C的抗氧化性(IC_(50)为0.004 453 mg/mL)。结论:水翁花抗氧化活性最强部位为石油醚萃取物,正丁醇次之,乙酸乙酯萃取物最弱,但均弱于维生素C,表明水翁花具有一定的体外抗氧化活性。     

绿菇抗氧化活性研究

目的研究绿菇抗氧化活性.方法采用DPPH自由基清除法对野生食用菌绿菇提取物的体外自由基清除作用进行研究.结果绿菇的乙酸乙酯和正丁醇提取物活性较好,IC50分别为0.24,1.90 mg/mL.结论各提取部分均比芦丁(IC50=0.063 mg/mL)抗氧化活性弱.     

白花蛇舌草提取物对结肠癌细胞抑制作用的实验研究

目的探讨白花蛇舌草乙醇提取物对BALB/c小鼠CT-26结肠癌细胞株增殖的抑制作用.方法采用甲基噻唑蓝(MTT)法测定不同浓度白花蛇舌草乙醇提取物对CT-26细胞株的生长抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50).结果在同一浓度下,白花蛇舌草乙醇提取物对CT-26细胞的抑制作用随着作用时间的延长而增强,0.08 mg/mL的白花蛇舌草乙醇提取物作用CT-26细胞24 h、48 h、72 h,细胞抑制率分别为(16.67±9.35)%,(34.66±9.23)%,(40.07±9.16)%.白花蛇舌草乙醇提取物作用24 h、48 h、72 h的IC50值分别为0.315,0.155,0.115.在同一作用时间内,白花蛇舌草乙醇提取物对CT-26细胞的抑制率随着药物浓度的增加而增加,在72 h内不同浓度药物(0.06 mg/mL,0.08 mg/mL,0.10 mg/mL,0.12 mg/mL,0.14 mg/mL,0.16 mg/mL,0.18 mg/mL,0.20 mg/mL)作用下,细胞抑制率分别为(35.46±3.59)%,(40.07±9.16)%,(40.77±6.92)%,(52.81±1.87)%,(54.22±2.35)%,(68.72±3.71)%,(70.04±8.03)%,(71.84±3.12)%.结论白花蛇舌草乙醇提取物可以抑制BALB/c小鼠CT-26结肠癌细胞株的增殖,其对CT-26细胞增殖的抑制作用呈现时效和量效的关系.     

夏枯草提取物对α-葡萄糖苷酶抑制作用研究

目的 从夏枯草中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂.方法 采用水提和水提醇沉方法 得到夏枯草水提物、粗多糖、浸膏.通过PNPG比色法检测α-葡萄糖苷酶活性.结果 不同浓度夏枯草水提物、粗多糖对该酶抑制率与浸膏相比差异显著(P<0.01);夏枯草水提物、粗多糖IC50与浸膏IC50相比差异显著(P<0.01),夏枯草水提物与粗多糖IC50之间无显著性差异(P>0.05).结论 夏枯草提取物有抑制α-葡萄糖苷酶活性的作用.     

民族药材白花丹体外抗肿瘤活性研究

目的 探讨白花丹体外抗肿瘤作用的活性部位.方法 MTT染色法对白花丹五种溶剂提取物体外抗肿瘤活性进行了初步的研究.结果 氯仿提取物对乳腺癌细胞(Bre-04)、神经癌细胞(N-04)、肺癌细胞(LU-04)有较好的抑制生长作用,IC50分别为0.269 9 mg/ml、0.263 4 mg/ml、0.496 1 mg/ml,对肝癌细胞HepG2抑制作用差,IC50为0.937 9 mg/ml;白花丹石油醚提取部位对乳腺癌细胞(Bre-04)、神经癌细胞(N-04)、肺癌细胞(Lu-04)、肝癌细胞HepG2的IC50分别为0.590 2 mg/ml、0.572 5 mg/ml、0.793 8 ms/ml、0.637 4 mg/ml;乙酸乙酯提取物对肺癌细胞(Lu-04)有一定的抑制作用,IC50为0.734 3 mg/ml;水溶性提取物以及正丁醇提取物无明显抑制肿瘤作用.结论 白花丹氯仿提取部位、石油醚提取部位体外抗肿瘤作用较好,值得对其提取部位进一步分离纯化并研究其抗肿瘤作用机制.     

干巴菌抗氧化活性研究

目的 研究干巴菌的抗氧化活性.方法 采用DPPH自由基清除法对野生食用菌干巴菌提取物的体外自由基清除作用进行研究.结果 干巴菌的乙酸乙酯和甲醇提取物活性较好,IC50 分别为 0.025,1.69 mg/mL.结论 干巴菌乙酸乙酯提取部分比芦丁(IC50 = 0.063 mg/mL)抗氧化活性强.