树舌多糖GF注射液对小鼠HepA瘤细胞可溶性蛋白质组影响的实验研究

目的：研究树舌多糖GF注射液对小鼠HepA瘤细胞可溶性蛋白质组的影响。方法：应用SDS—PAGE分离瘤组织的可溶性蛋白，同时应用PDQest软件分析电泳结果。结果：在可溶性蛋白的SDS—PAGE中，与空白组相比，肿瘤组有3个蛋白质组分条带表达下调，11个蛋白质组分条带表达上调。树舌多糖GF注射液可以使肿瘤细胞3条表达下调的蛋白质组分条带和8条表达上调的蛋白质组分条带恢复至正常水平。结论：树舌多糖CF注射液对小鼠HepA瘤细胞可溶性蛋白质组有质和量的影响。     

小鼠HepA癌细胞PTEN蛋白表达及树舌多糖GF的影响

目的：探明小鼠HepA癌细胞PTEN蛋白表达及树舌多糖GF的影响。方法：昆明种小鼠随机分为三组：肿瘤组、树舌多糖组和阴性对照组。肿瘤组、树舌多糖组接种后各组肌肉注射给药，正常组和肿瘤组给与生理盐水，树舌多糖组给与树舌多糖GF；采用超速离心技术制备、SDS—PAGE分离细胞可溶性蛋白；Western blot和Dotblot技术检测各组样品PTEN蛋白的表达量。结果：树舌多糖组检测PTEN结果为阳性，肿瘤组检测P1EN结果为阴性。结论：树舌多糖GF抗肿瘤的作用靶点之一可能为抑癌基因PTEN。     

树舌多糖GF对HepA癌细胞c-Myc mRNA丰度的影响

目的:探明树舌多糖(GAPS)GF对HepA瘤细胞c-Myc mRNA丰度的影响.方法:接种HepA瘤后的小鼠随机分为3组:模型组、树舌多糖组和猪苓多糖组,树舌多糖组和猪苓多糖组小鼠分别注射树舌多糖GF和猪苓多糖.应用原位杂交技术检测各组小鼠HepA癌细胞中c-Myc mRNA的丰度.结果:树舌多糖组、猪苓多糖组中c-Myc表达量均显著低于模型组(P＜0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组间无显著性差异.结论:树舌多糖GF抑制c-Myc基因的转录可能是其抗肿瘤的作用机制之一.     

树舌多糖GF对HepA瘤细胞C-myc基因表达的影响

目的:探明树舌多糖GF对HepA瘤组织C-myc基因表达的影响。方法:应用免疫组化和原位杂交方法检测小鼠HepA瘤细胞中C-myc基因的mRNA与蛋白的表达情况。结果:与荷瘤组比较,树舌多糖组、猪苓多糖组中C-myc基因的mRNA与蛋白的表达量均明显降低(P﹤0.01),其中树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论:树舌多糖GF可通过降低C-myc mRNA量及C-myc蛋白的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖。     

树舌多糖GF对小鼠HepA瘤Rb基因表达的影响

为探明树舌多糖GF对小鼠HepA瘤Rb基因表达的影响。本实验用链霉菌抗生素蛋白 -过氧化酶免疫组化法来测定瘤组织中Rb蛋白含量 ,通过多媒体图像分析系统分析实验结果。结果表明 :树舌多糖GF组、猪苓多糖组与荷瘤对照组比较 ,差异均非常显著 (P <0 .0 1) ,即树舌多糖GF、猪苓多糖明显增强HepA瘤组织中Rb基因的表达 ;树舌多糖组与猪苓多糖组比较 ,差异非常显著 (P <0 .0 1) ,即树舌多糖GF更能显著增强Rb基因表达 ,优于猪苓多糖。因此可初步认为 ,作用于抑癌基因Rb并使之表达增强 ,是树舌多糖GF抗瘤作用机制之一。     

树舌多糖GF对HepA瘤细胞Ras蛋白表达的影响

研究应用免疫组化技术对HepA瘤细胞中Ras蛋白表达量进行分析 ,以进一步探讨树舌多糖抗肿瘤的机制。目的 :为探明树舌多糖GF对HepA瘤组织Ras蛋白表达的影响。方法 :用SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细胞中Ras蛋白的表达。结果 :树舌多糖组、猪苓多糖组中Ras蛋白的表达量均显著低于模型组 (P <0 .0 1) ,树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论 :初步认为树舌多糖GF可通过降低Ras蛋白的表达 ,而抑制HepA瘤细胞的增殖。     

免疫印迹技术分析树舌多糖GF对H22肝癌移植瘤PTEN蛋白表达的影响

目的探明树舌多糖(GAPS)GF对H22肝癌移植瘤PTEN蛋白表达的影响。方法昆明种小鼠随机分为两组:肿瘤组和树舌多糖组,接种后各组肌肉注射给药,分别给与生理盐水和树舌多糖GF。连续10 d,于末次给药24 h,处死小鼠,剥离肿瘤组织。Western blot技术检测各组样品PTEN蛋白的表达量。结果肿瘤组检测结果为阴性,树舌多糖组检测结果为阳性。结论树舌多糖GF抗肿瘤的作用靶点之一可能为抑癌基因PTEN。     

树舌多糖GF对小鼠HepA瘤Rb基因表达的影响

为探明树舌多糖GF对小鼠HepA瘤Rb基因表达的影响。本实验用链霉菌抗生素蛋白－过氧化酶免疫组化法来测定瘤组织中Rb蛋白含量，通过多 体图像分析系统分析实验结果。结果表明：树舌多糖GF组、猪苓多糖组与荷瘤对照组比较，差异非常显著（P＜0．01），即树舌多糖GF更能显著增强Rb基因表达，优于猪苓多糖。因此可初步认为，作为于抑癌基因Rb并使之表达增强，是树舌多糖GF抗瘤作用机制之一。     

树舌多糖GF对HepA瘤细胞Rb基因表达的影响

目的 探讨树舌多糖GF对小鼠HepA瘤细胞Rb基因表达的影响。方法 本实验用链霉菌抗生素蛋白－过氧化酶免疫组化法来测定细胞中Rb蛋白含量，通过多媒体图像分析系统分析实验结果。结果 树舌多糖GF组、猪苓多糖组与荷瘤对照组比较，差异均非常显著（P＜0．01），即树舌多糖GF、猪苓多糖能促使HepA瘤细胞中Rb基因表达明显增强；树舌多糖组与猪苓多糖组比较，差异非常显著（P＜0．01），即树舌多糖GF更能明显增强Rb基因表达，优于猪苓多糖。结论 树舌多糖GF抗瘤作用机理之一是作用于抑癌基因Rb并使之表达增强。     

树舌多糖GF对HepA瘤细胞N-ras基因表达的影响

目的:探明树舌多糖GF对HepA瘤组织N-ras基因表达的影响.方法:运用原位杂交法、SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细包中N-ras mRNA量及N-Ras蛋白的表达量.结果:树舌多糖组、猪苓多糖组中N-ras mRNA量及Ras蛋白的表达量均显著低于荷瘤组(P＜0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异.结论:初步认为树舌多糖GF可通过降低N-rasmRNA量及Ras蛋白的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖.     

树舌多糖GF对HepA瘤细胞N—ras、C—myc蛋白表达的影响

目的:探明树舌多糖GF对HepA瘤组织N-ras、c-myc蛋白表达的影响.方法:运用SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细胞中N-ras、C-myc蛋白的表达量.结果:树舌多糖组、猪苓多糖组中N-ras、C-mye蛋白的表达量均显著低于荷瘤组(P<0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异.结论:树舌多糖GF可通过降低N-ras、C-myc蛋白的表达,抑制He-pA瘤细胞的增殖.     

原位杂交法检测树舌多糖GF对HepA瘤细胞N—ras基因mRNA表达的影响

目的:探明树舌多糖GF对HepA瘤细胞癌基因N-ras mRNA水平的影响.方法:应用地高辛标记探针原位杂交技术,检测树舌多糖GF对HepA瘤细胞中癌基因N-ras mRNA丰度的作用.结果:树舌多糖组、猪苓多糖组中mRNA表达量均显著低于模型组(P<0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异.结论:树舌多糖GF可通过调节N-ras基因mRNA的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖.     

SDS-PAGE分析树舌多糖GF对H22小鼠血清蛋白质组的影响

目的：观察移植性肿瘤H22对动物血清蛋白表达的影响,并探讨树舌多糖GF注射液（GASPGF）抑制肿瘤的血清蛋白质组学机制。方法：小鼠随机分为正常组、肿瘤组、GAPSGF组。通过SDS-PAGE技术对各组血清进行分离,利用PDQuest6．1软件对各组图谱进行对比分析,观察其改变。结果：分离得到正常组样品组分20个,肿瘤组24个,GAPSGF组22个。肿瘤组与正常组相比,多出8条带,缺失4条。GAPSGF组能使在肿瘤组多表达的3条带和缺失的2条带恢复正常组水平。结论：树舌多糖GF能通过影响移植性肿瘤动物的血清蛋白质组达到抗肿瘤作用。     

树舌多糖GF对HepA瘤细胞p16基因表达的影响

为探明树舌多糖GF对小鼠HepA瘤细胞 p16基因表达的影响。本实验用链霉菌抗生素蛋白 -过氧化酶免疫组化法来测定细胞中p16蛋白含量 ,通过多媒体图像分析系统分析实验结果。结果表明 :树舌多糖GF组、猪苓多糖组与荷瘤对照组比较 ,p16表达增加均非常显著 (P <0 .0 1) ,树舌多糖组与猪苓多糖组比较 ,差异非常显著 (P <0 .0 1)。因此可初步认为使抑癌基因p16表达增强 ,是树舌多糖GF抗瘤作用机制之一。树舌多糖GF作用后小鼠HepA瘤细胞中 p16、Rb基因表达增强 ,共同作用可启动细胞周期的负反馈调节 ,细胞周期的负调节增强 ,从而阻止无限制从G1期进入S期 ,抑制细胞增殖失控 ,起到抗肿瘤作用。     

树舌多糖GF对HepA瘤细胞p16基因表达的影响

为探明树舌多糖GF对小鼠HepA瘤细胞p16基因表达的影响，本实验用链霉菌抗生素蛋白－过氧化酶免疫组化法来测定细胞中p16蛋白含量，通过多媒体图像分析系统分析实验结果，结果表明，树舌多糖GF组，猪苓多糖组与荷瘤对照组比较，p16表达增加均非常显著（P＜0．01），树舌多糖组与猪苓多糖组比较，差异非常显著（P＜0．01），因此可初步认为使抑癌基因p16表达增强，是树舌多糖GF抗瘤作用机制之一，树舌多糖GF作用后小鼠HepA瘤细胞中p16，Rb基因表达增强，共同作用可启动细胞周期的负反馈调节，细胞周期的负调节增强，从而阻止无限制从G1期进入S期，抑制细胞增殖失控，起到抗肿瘤作用。     

树舌多糖GF抑制肝癌细胞SMMC7721增殖及对CDK2基因表达的影响

目的:探明树舌多糖GF(Ganoderma appanatum polysaccharides GF,GAPSGF)对肝癌细胞SMMC7721增殖及CDK2表达的影响。方法:不同浓度树舌多糖GF处理肝癌细胞SMMC7721,采用MTT法检测树舌多糖GF对肝癌细胞SMMC7721增殖抑制作用;实时定量聚合酶链反应(Real-TimePCR)检测CDK2 mRNA表达;蛋白印迹法(Western blot)检测CDK2蛋白表达情况。结果:树舌多糖GF对肝癌细胞SMMC7721具有明显的生长抑制作用。其中树舌多糖GF2.5μg/mL组与树舌多糖GF10μg/mL组作用显著,且CDK2的mRNA和蛋白表达下降。结论:树舌多糖GF可能通过降低CDK2表达,抑制肝癌细胞SMMC7721增殖。     

树舌多糖GF对小鼠HepA瘤TNF-α含量的影响

为探明树舌多糖GF对小鼠HepA瘤组织中TNF -α含量的影响 ,本实验用链霉菌抗生素蛋白—过氧化酶免疫组化法来测定组织中TNF -α含量 ,通过多媒体图文分析系统分析实验结果。结果表明 :树舌多糖GF组、猪苓多糖组与荷瘤对照组比较 ,均有显著差异 (P <0 .0 1) ,即树舌多糖GF、猪苓多糖能明显增加HepA瘤组织中TNF -α的含量 ;树舌多糖组与猪苓多糖组比较 ,无显著差异 (P >0 .0 5 )。因此可初步认为作用于TNF -α并使之含量增加 ,是树舌多糖GF抗瘤作用机制之一。     

树舌多糖GF对小鼠HepA瘤TNF—α含量的影响

探明树舌多糖GF对小鼠HepA瘤组织中TNF—α含量的影响，本实验用链霉菌抗生素蛋白-过氧化酶免疫组化法来测定组织中TNF—α含量，通过多媒体图文分析系统分析实验结果。结果表明：树舌多糖GF组、猪苓多糖组与荷瘤对照组比较，均有显著差异(P＜0．01)，即树舌多糖GF、猪苓多糖能明显增加HepA瘤组织中TNF-α的含量；树舌多糖组与猪苓多糖组比较，无显著差异(P＞0.05)。因此可初步认为作用于TNF—α并使之含量增加，是树舌多糖GF抗瘤作用机制之一。．     

树舌多糖GF对HepA瘤细胞MDM-2基因表达的影响研究

应用免疫组化技术对HepA瘤细胞中MDM-2基因的表达量进行分析,以探讨树舌多糖抗肿瘤的分子机制.目的:研究树舌多糖GF对HepA瘤细胞MDM-2表达的影响.方法:应用SP免疫组化染色技术和多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细胞中MDM-2的表达.结果:树舌多糖组中MDM-2的表达量均显著低于模型组(P＜0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异.结论:初步认为树舌多糖GF可通过降低MDM-2的表达而抑制HepA瘤细胞的增殖.     

树舌多糖GF对肝癌细胞的增殖抑制作用及对RB基因mRNA表达的影响

目的:研究树舌多糖GF对肝癌细胞的增殖抑制作用以及对RB基因mRNA表达的影响.方法:利用CCK-8法观察树舌多糖GF对肝癌细胞增殖抑制作用,并筛选出有效剂量;以SMMC7721为研究对象,在mRNA水平探究其对RB基因表达的影响.结果:CCK-8法表明,树舌多糖GF各剂量组和对照组比较,OD490nm均明显降低,有显著性差异(P＜0.01),其中树舌多糖GF2.5 μg/mL、5μg/mL、10μg/mL剂量组对SMMC7721细胞增殖的抑制效果最强,抑制率分别是20.01％、20.47％、24.44％.结论:树舌多糖GF可明显上调RB基因的mRNA表达水平,从而实现对肝癌细胞的增殖抑制作用.