淫羊藿苷通过影响MAPK信号通路抑制ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞增殖作用研究

研究淫羊藿苷(ICA)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用,以及对增殖细胞核抗原(PCNA)表达和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。以ox-LDL(50 mg·L-1)诱导VSMC增殖,采用MTT法检测ICA对ox-LDL诱导VSMC增殖的抑制作用;Real-time PCR和Western blot方法检测ICA对ox-LDL诱导增殖VSMC内细胞周期相关蛋白PCNA基因及蛋白表达的影响;Western blot方法检测ICA对ox-LDL诱导增殖VSMC内p38MAPK,ERK1/2,JNK信号通路相关信号蛋白磷酸化的影响。结果显示,经ox-LDL(50 mg·L-1)刺激后,VSMC增殖活性显著增强,细胞存活率显著提升,S期、G2/M期细胞显著增加,G0/G1期细胞显著减少;同时,PCNA基因及蛋白表达水平显著提升;不同浓度的ICA(40,20,10μmol·L-1)可显著抑制ox-LDL诱导的VSMC增殖,减少S期、G2/M期细胞,增加G0/G1期细胞,降低ox-LDL诱导的PCNA基因及蛋白的表达水平,下调ox-LDL诱导的p-p38和p-ERK1/2蛋白的表达,但不影响p-JNK蛋白的表达。上述结果表明,ICA对ox-LDL诱导的VSMC增殖具有抑制作用,可能通过降低PCNA表达和阻断p38MAPK和ERK1/2信号通路抑制VSMC增殖。     

小大黄对ox-LDL诱导血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:观察小大黄对氧化修饰型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导血管平滑肌细胞(SMC)增殖的影响。方法:采用体外培养的牛主动脉平滑肌细胞为模型,ox-LDL诱导SMC增殖。实验分为对照组、ox-LDL组和用药组(ox-LDL 不同剂量小大黄),应用MTT法、流式细胞仪分别测定细胞数量和细胞周期,用硫代巴比妥酸比色法测定细胞培养液中丙二醛(MDA)的水平。结果:小大黄能明显降低细胞培养液中MDA的水平,MTT检测显示用药组比ox-LDL组OD值降低,并呈浓度依赖性。流式细胞仪检测表明,用药组(S G2M)期细胞百分率降低。结论:小大黄能抑制ox-LDL诱导的SMC增殖,并具有抗脂质过氧化作用。     

川芎嗪抗动脉粥样硬化机制的研究

目的 研究川芎嗪对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL) 致人内皮细胞ECV304 损伤的保护作用及机制,探讨其在动脉粥样硬化防治中的意义.方法 ox-LDL诱导人血管内皮细胞损伤,以0.5 mg/ml川芎嗪干预24 h,试剂盒测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量以及细胞中超氧化物歧化酶(SOD) 、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果 川芎嗪对ox-LDL诱导的血管内皮细胞诱导的损伤有明显的抑制作用,主要是显著提高了血管内皮细胞抗氧化酶SOD 、GSH-Px的活性.结论 川芎嗪对ox-LDL导致內皮细胞损伤具有保护作用,机制与其抗氧化效应有关.     

红芪总黄酮对氧化低密度脂蛋白致内皮细胞损伤的保护作用

目的研究红芪总黄酮对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导脐静脉内皮细胞损伤的保护作用.方法建立ox-LDL致脐静脉内皮细胞损伤模型,化学比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(NOS)活性.结果红芪总黄酮可显著降低ox-LDL损伤脐静脉内皮细胞的LDH释放,使细胞分泌的NO含量升高,提高细胞内SOD及NOS活性.结论红芪总黄酮对ox-LDL诱导脐静脉内皮细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高脐静脉内皮细胞的抗氧化能力有关.     

茶多酚和银杏叶提取物联用体外抑制ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞凋亡

目的探讨茶多酚和银杏叶提取物联用对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的体外抑制作用,比较单个成分与两者联用组成复方的抑制效果。方法 CCK-8法检测药物对HUVEC的细胞毒性,选择药物作用质量浓度;分别给予不同质量浓度茶多酚和银杏叶提取物联用组、茶多酚组和银杏叶提取物组处理HUVEC后,ox-LDL诱导细胞凋亡,吖啶橙荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化,Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测HUVEC的凋亡率。结果低质量浓度(20μg/mL)茶多酚与银杏叶提取物联合使用组的细胞毒性明显低于单独用药组,二者联用对ox-LDL破坏细胞形态有保护作用,抑制ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞凋亡。结论茶多酚和银杏叶提取物联用可抑制ox-LDL诱导的HUVEC凋亡;茶多酚和银杏叶提取物联用的抑制效果好于银杏叶提取物或茶多酚单用。     

木贼有效部位抑制氧化低密度脂蛋白致内皮细胞凋亡及Caspase-3的表达

目的探讨木贼有效部位抑制氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC-ECV304)凋亡的可能机制。方法体外ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞损伤,用木贼有效部位进行干预;采用流式细胞术检测细胞凋亡率及Caspase-3蛋白;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测内皮细胞Caspase-3mRNA表达。结果 ox-LDL可明显诱导内皮细胞凋亡,上调Caspase-3mRNA及Caspase-3蛋白表达,木贼有效部位干预后细胞凋亡率明显下降(P0.05),Caspase-3mRNA及Caspase-3蛋白表达明显下调(P0.01)。结论木贼有效部位通过对凋亡相关基因的调控最终抑制Caspase-3蛋白的表达来减少内皮细胞的凋亡。     

24-乙酰泽泻醇A对ox-LDL诱导大鼠VSMCs增殖影响的机制研究

24-乙酰泽泻醇A作为泽泻的主要组成部分有抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)作用且AS与血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖密切相关,故该研究通过活体取材及培养大鼠腹主动脉VSMCs,50 mg·L-1ox-LDL诱导VSMCs建立细胞增殖模型,探讨24-乙酰泽泻醇A对ox-LDL诱导大鼠VSMCs增殖影响的作用机制。不同浓度24-乙酰泽泻醇A(5,10,20 mg·L-1)干预细胞增殖模型12,24,48 h,MTT检测VSMCs增殖情况,Western blot法检测VSMCs PCNA,cyclin D1,cyclin E,p21,p27蛋白表达的变化,RT-PCR检测VSMCs PCNA,p21和p27 mRNA表达情况。MTT结果显示ox-LDL诱导VSMCs的增殖(P0.05);ox-LDL促进VSMCs PCNA,cyclin D1,cyclin E蛋白表达的增加(P0.05),抑制p21,p27蛋白及mRNA的表达(P0.05);24-乙酰泽泻醇A可显著抑制ox-LDL诱导VSMCs的增殖(P0.05)及PCNA,cyclin D1,cyclin E蛋白表达,同时提高p21,p27蛋白及mRNA的表达量(P0.05),该现象随着24-乙酰泽泻醇A浓度的增加作用越明显。24-乙酰泽泻醇A可抑制ox-LDL诱导大鼠VSMCs的增殖,其机制可能通过抑制VSMCs细胞周期蛋白(cyclin D1,cyclin E,p21,p27蛋白等)表达有关。     

温肾化痰方对动脉粥样硬化模型大鼠主动脉血管平滑肌细胞凋亡及细胞内胆固醇酯的影响

目的:探讨温肾化痰方对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导的动脉粥样硬化模型大鼠主动脉血管平滑肌细胞凋亡及细胞内胆固醇酯的影响.方法:将大鼠主动脉血管平滑肌细胞分为正常组(10％Gibco)、对照组(ox-LDL 70 mg/L+10％Gibco)及低剂...     

基于NOS信号的艳山姜挥发油对ox-LDL诱导HAECs损伤的保护作用

目的:研究艳山姜挥发油(EOFAZ)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的保护作用。方法:体外传代培养HAECs,EOFAZ保护作用研究分为7组,分别为空白组(无血清ECM),模型组(200 mg·L~(-1)oxLDL),EOFAZ高质量浓度组(200 mg·L~(-1)ox-LDL+100μg·L~(-1)EOFAZ),EOFAZ低质量浓度组(200 mg·L~(-1)ox-LDL+10μg·L~(-1)EOFAZ),阿司匹林组(Asp,200 mg·L~(-1)ox-LDL+2.5×10~(-4)mol·L~(-1)Asp),卡维地洛组(Car,200 mg·L~(-1)ox-LDL+1×10-6mol·L~(-1)Car),阿托伐他汀钙组(Atorv,200 mg·L~(-1)ox-LDL+1×10-6mol·L~(-1)Atorv);一氧化氮合酶(NOS)信号研究分为5组,分别为空白组(无血清ECM),模型组(200 mg·L~(-1)ox-LDL),EOFAZ组(200 mg·L~(-1)ox-LDL+100μg·L~(-1)EOFAZ),NOS抑制剂组(200 mg·L~(-1)ox-LDL+100μmol·L~(-1)L-NAME或300μmol·L~(-1)L-NMMA),EOFAZ加NOS抑制剂组(200 mg·L~(-1)ox-LDL+100μg·L~(-1)EOFAZ+100μmol·L~(-1)L-NAME或300μmol·L~(-1)L-NMMA)。噻唑蓝(MTT)法分析细胞存活率,酶标仪法及Griess试剂法分别检测培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性和一氧化氮(NO)含量。化学法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测iNOS及eNOS mRNA表达水平。结果:与模型组比较,EOFAZ明显提高ox-LDL诱导损伤的HAECs的细胞存活率,抑制LDH外漏及iNOS活力(P0.05,P0.01),促进NO及eNOS的产生(P0.05,P0.01)。Real-time PCR分析表明,EOFAZ以及相关抑制剂显著下调iNOS mRNA表达水平(P0.05,P0.01),上调eNOS mRNA表达水平(P0.05)。结论:EOFAZ对ox-LDL诱导损伤的HAECs具有保护作用,其作用机制与调控eNOS和iNOS的表达水平有关。     

Corilagin对血管内皮细胞的保护作用及LOX-1蛋白表达的影响

目的 观察Corilagin对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的保护作用及其机制.方法 MTT法检测Corilagin对ox-LDL损伤HUVEC的保护作用,免疫荧光测定LOX-1的蛋白表达.结果 Corilagin对HUVEC无明显的毒性作用,Corilagin减弱ox-LDL对HUVEC的损伤作用,Corilagin下调ox-LDL诱导的HUVEC LOX-1蛋白表达.结论 Corilagin对ox-LDL损伤HUVEC具有一定的保护作用.     

草酸铵对僵蚕抗凝作用的影响

目的：研究草酸铵对僵蚕抗凝作用的影响。方法：以凝血酶时间(TT)为指标，用添加法比较不同浓度草酸铵对僵蚕提取液和凝胶分离液抗凝作用的影响。结果：添加草酸铵浓度在1．8～21．3mg／ml范围内，对固形物含量15．8～31．6mg／ml的提取液和14．6～29．1mg／ml的凝胶分离液的TT值增加成正相关。结论：草酸铵对僵蚕提取液、凝胶分离样品的抗凝作用均有增强作用，随提取液浓度降低影响增大，而随凝胶分离液浓度增大影响增大。     

蛇床子素抗凝血作用

目的:研究蛇床子素的抗凝血作用。方法:通过测定小鼠凝血时间(CT)、大鼠的凝血酶原时间(PT)和优球蛋白溶解时间(ELT),观测蛇床子素的抗凝作用。结果:蛇床子素能显著处长CT、PT,缩短ELT。结论:蛇床子素具有明确的抗凝血作用。     

中医药治疗黄褐斑现状

综述了1995－2001年中药内治、外治疗法及针灸治疗黄褐斑的特色和优势。     

蛇床子素抗凝血作用

目的：研究蛇床子素的抗凝血作用。方法：通过测定小鼠凝血时间（CT）、大鼠的凝血酶原时间（PT）和优球蛋白溶解时间（ELT），观测蛇床子素的抗凝作用。结果：蛇床子素能显著处长CT、PT，缩短ELT。结论：蛇床子素具有明确的抗凝血作用。     

苯唑青霉素对丁胺卡那毒素药动学的影响

 采用微量微生物法对丁胺卡那霉素（AMK）单用及AMK与苯唑青霉素（OXA）合用后，兔体内AMK血药浓度进行测定；药时数据用MCPKP软件经IBM计算机处理，并对两组药动学参数进行了统计学处理，结果表明OXA对AMK的药动学有显著的影响。     

基于细胞自噬探讨左归丸对肾虚仔鼠皮肤发育的影响

目的:研究左归丸对先天肾虚仔鼠发育过程中皮肤内细胞自噬的影响及其机制,探索补肾填精法在生长发育异常中的应用价值。方法:36只雌雄比例为2∶1的大鼠进行配对,复合应激法刺激孕鼠构建先天肾虚仔鼠模型,根据将孕鼠处理方式不同,分为正常组,肾虚组,左归丸低、高剂量组(2,8 g·kg^-1)。正常组不造模给予生理盐水灌胃,肾虚组造模给予生理盐水灌胃,左归丸低、高剂量组造模给予左归丸悬浊液灌胃。切取出生后21 d仔鼠的背部皮肤,苏木素-伊红(HE)染色观察仔鼠皮肤显微结构形态,测量真皮层和表皮层厚度,蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分别检测仔鼠皮肤分泌型糖蛋白3a(Wnt3a)和β-连环蛋白(β-catenin)mRNA和蛋白表达量,免疫双荧光检测皮肤内自噬指标微管相关蛋白轻链3(LC3)和人死骨片1-泛素结合蛋白p62(SQSTM1-p62)的表达。结果:正常组仔鼠皮肤层次清楚,结构正常,肾虚组真皮层胶原排列疏松,左归丸低、高剂量组皮肤组成基本正常;与正常组比较,肾虚组仔鼠在皮肤的表皮层增厚,真皮层变薄(P<0.05);与肾虚组比较,左归丸低、高剂量组皮肤的表皮层和真皮层厚度的改变明显恢复(P<0.05)。与正常组比较,肾虚组仔鼠Wnt3a和β-catenin蛋白和mRNA表达明显下降(P<0.05);与肾虚组比较,左归丸低、高剂量组Wnt3a和β-catenin蛋白和mRNA表达升高(P<0.05)。同时免疫荧光法检测发现与正常组比较,肾虚组的LC3的表达上调,SQSTM1-p62表达下调;与肾虚组比较,左归丸可以逆转SQSTM1-p62和LC3的异常表达(P<0.05)。结论:左归丸可以通过增加仔鼠皮肤内Wnt3a和β-catenin蛋白和mRNA的表达,下调皮肤细胞自噬水平,改善先天肾虚仔鼠皮肤异常发育。     

大黄素对急性胰腺炎胰腺组织TGFβ1表达的影响

目的通过分析中药大黄素对大鼠急性胰腺炎治疗前后胰腺组织细胞转化因子β1(TGFβ1)的表达、DNA合成及总蛋白含量的影响，从胰腺再生角度探讨大黄素治疗急性胰腺炎的作用机制。方法以雨蛙肽(caerulein)腹腔注射诱导大鼠急性胰腺炎模型，并于大黄素治疗前后6、24、48、72及96h处死大鼠。同时应用RT-PCR技术检测治疗前后胰腺组织TGFβ1mRNA表达，同位素体外掺入法测定胰腺组织DNA合成以及Lowry′s法测定胰腺组织总蛋白含量。结果大黄素治疗后血清淀粉酶显著下降。正常胰腺组织、胰腺炎诱导后6h未见TGFβ1mRNA表达。TGFβ124h后出现表达，72h时达高峰。大黄素治疗后6h即可检测到TGFβ1mRNA表达，且24、48h时表达均较非治疗组显著增强，并于48h时达最大值。同时胰腺炎诱导后72h，胰腺组织DNA合成显著下降，大黄素治疗后96hDNA合成明显增加，胰腺炎诱导后48h胰腺组织总蛋白含量下降，大黄素治疗后96h显著增加。结论大黄素治疗急性胰腺炎的作用机制可能是通过诱导细胞因子TGFβ1基因表达增强，调控细胞增殖和分化，刺激多种细胞外基质成分合成，增加胰组织DNA合成和蛋白含量，参与胰腺细胞修复、再塑过程。     

"软系"疗法的中医探讨

从中医角度探讨“软系”疗法的科学性,探求“软系”疗法疗效显著的原因。     

《诸病源候论》对皮肤病学的贡献

对《诸病源候论》在皮肤病方面的成就进行了较为系统的整理总结 ,该书着重讨论了皮肤病的命名、分类、病因病机 ,并阐发了《内经》“邪之所凑 ,其气必虚”理论和预防为主的思想。     

艾灸足三里对胃黏膜病变的作用机制研究

艾灸足三里在脾胃病的临床疗效肯定,其机制研究也随着现代医学的发展不断完善。大量研究证明,艾灸足三里促进胃黏膜修复的信号传导是通过神经实现的,其作用机制是系统而复杂的,既可以直接调节胃肠内分泌激素的水平,也可以作用于胃黏膜损伤的信号传导途径上。因此,艾灸足三里对于各种原因引起的胃黏膜病变及病变的各个阶段都有一定作用,且作用机制不尽相同。据现有研究,对未来艾灸足三里的机制研究进行展望。