理中丸对胃肠道Cajal间质细胞增殖作用的影响

目的：探讨理中丸对胃肠道Cajal间质细胞（Interstitial Cells of Cajal，ICC）增殖作用的影响，为该方对胃肠动力障碍性疾病治疗提供思路。方法：采用Ⅱ胶原酶消化法体外培养ICC，成功鉴定后，通过直接给药法和含药血清法研究理中丸对该细胞的影响。结果：1.MTT法提示：①直接给药法：理中丸中、高剂量组均有促进增殖作用，与空白组比较统计学意义显著（P〈0.01）；②含药血清法：给药各组均与空白血清组有显著性差异（P〈0.01），其中理中丸组10％，15％浓度有促进增殖作用，20％浓度组呈现对体外ICC有抑制增殖作用。2.流式细胞术检测药物干预对体外ICC的细胞周期变化，结果提示：①直接给药法：各组s期均较优于空白组，但没有统计学意义；②含药血清法：各组的ICC的S期增加均优于空白组，其中以15％组最为明显，但是没有统计学意义。结论：①直接给药法中理中丸低剂量组与空白组比较无统计学意义，中、高剂量组对ICC促进分裂，提高增殖率优于空白组；②理中丸10％、15％含药血清组能促进ICC的分裂，提高增殖率和细胞数量，而20％含药血清组的增殖率和增殖数都低于空白组，有抑制ICC的趋势；以上提示，理中丸在一定浓度、剂型方式下能调节细胞周期，促进细胞增殖。     

莪术醇联合5-氟尿嘧啶对大肠癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨莪术醇(curcumol)联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对大肠癌Lo Vo细胞增殖和凋亡作用的影响,以及药物处理后,Lo Vo细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)表达量的变化情况。方法:莪术醇(50 mg·L-1)单独或联合5-Fu(2 mg·L-1)作用大肠癌Lo Vo细胞,用噻唑蓝(MTT)比色法检测各组药物对细胞增殖的抑制作用,采用流式细胞术分析各组对细胞凋亡作用的影响,应用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中,增殖和凋亡相关蛋白PCNA,Bcl-2蛋白表达的变化情况。结果:与空白组比较,莪术醇,5-Fu单独给药以及联合用药,均可以有效抑制大肠癌Lo Vo细胞的增殖,促进细胞凋亡(P0.05),同时可以降低PCNA,Bcl-2蛋白的表达(P0.05);与单独给药组比较,联合用药后,凋亡的促进作用更为明显(P0.05)。与空白组比较,各药物组可以更有效的抑制PCNA,Bcl-2蛋白的表达(P0.05)。结论:莪术醇联合5-氟尿嘧啶能有效抑制人大肠癌Lo Vo细胞的增殖和凋亡,与单独用药组比较,联合用药可以使癌细胞的敏感性增强,极大程度的促进人大肠癌Lo Vo细胞凋亡,且这些机制可能与下调PCNA,Bcl-2蛋白表达有关。     

白术茯苓汤及提取组分对脾气虚大鼠肠道局部免疫功能的影响

目的:比较研究白术茯苓汤及其分离组分与组分配伍对脾虚大鼠肠道局部免疫的调节作用。方法:以灌服大黄厚朴枳实水煎液加饥饱失常法复制脾气虚证的动物模型,再给模型组分别灌服不同成分,用时设模型组和空白组对照。七天后称脾和胸腺湿重并计算脾指数及胸腺指数;用ELISA法检测大鼠肠道分泌性免疫球蛋白A(sIgA)的分泌水平。结果:治疗组各组脾指数除了低剂量组,皆与模型组比较差异有统计学意义(P0.05);治疗各组胸腺指数除了白术内酯Ⅲ中低剂量组、络合物各剂量组、组分配伍低剂量组,与模型组比较提高明显(P0.05);sIgA分泌水平治疗各组与模型组比较明显提高(P0.05)。结论:白术茯苓汤及各提取分离组分对脾气虚大鼠模型的肠道局部免疫功能有不同程度的促进作用,其中以白术茯苓汤及多糖组最明显;各组分配伍有协同增效作用。     

枳术丸汤剂含药血清对大鼠结肠Cajal间质细胞增殖及PI3K/Akt信号通路的影响

目的 探讨枳术丸汤剂含药血清对大鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)增殖以及对PI3K/Akt信号通路的影响.方法 20只大鼠随机分为枳术丸汤剂组、空白血清组,每组各10只,枳术丸汤剂组灌胃枳术丸汤剂5.8 g/kg,空白血清组灌胃等量蒸馏水,每天1次,连续7d,取血制备血清;分别设立不同浓度血清、不同干预时间、不同浓度...     

胃肠安对人胃癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用

目的:观察健脾中药胃肠安颗粒对人胃癌裸鼠皮下移植瘤的影响。方法:建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为生理盐水(生理盐水0.5 m L/只)组,胃肠安煎剂(生药35.49 g·kg-1)组,胃肠安颗粒(胃肠安颗粒3.54 g·kg-1)组,比较各组裸鼠瘤重情况,采用免疫组化法比较各组裸鼠瘤体Ki67抗原和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达,透射电镜检测各组瘤体细胞形态,脱氧核苷酸转移酶介导的末端标记法(TUNEL)检测各组瘤体细胞凋亡情况,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中肿瘤指标及酶学标志物。结果:胃肠安颗粒组和胃肠安煎剂组瘤体质量均低于空白组(P0.01);胃肠安颗粒组和胃肠安煎剂组PCNA,Ki67蛋白表达低于空白组(P0.01);透射电镜显示胃肠安颗粒组和胃肠安煎剂组皮下移植瘤细胞出现细胞凋亡、坏死并且凋亡指数均高于空白组,ELISA法显示胃肠安颗粒组与胃肠安煎剂组肿瘤标志物及酶学指标癌胚抗原(CEA),糖类抗原199(CA199),糖类抗原724(CA724),乳酸脱氢酶(LDH)和碱性磷酸酶(ALP)水平均低于空白组(P0.05)。结论:健脾中药胃肠安颗粒同胃肠安煎剂一样均可抑制人胃癌裸小鼠皮下移植瘤生长的作用,可能通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡促进其分化而实现,其具体的机制需作进一步的研究。     

独活寄生汤含药血清对佐剂性关节炎大鼠滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨独活寄生汤含药血清对佐剂性关节炎大鼠滑膜成纤维细胞(FLS)增殖和凋亡的影响。方法:采用SD大鼠制备独活寄生汤含药血清,弗氏完全佐剂诱导大鼠佐剂性关节炎,分离提取原代滑膜成纤维细胞。滑膜成纤维细胞分为6组,分别是空白组、模型组、甲氨喋呤组、独活寄生汤高、中、低剂量组,每组5个复孔,分别加入相应的药物。CCK8法检测各组细胞增殖率;荧光定量PCR和ELISA分别检测细胞Bax、Bcl-2、caspase3 m RNA和蛋白水平的表达变化。结果:空白组细胞在各时间点未见明显的变化;模型组细胞随时间延长,增殖抑制率升高(P0.05);甲氨喋呤组和独活寄生汤高、中、低剂量组细胞随干预时间的延长,增殖抑制率降低(P0.05)。与空白组比较,模型组细胞在各时间点的增殖抑制率均升高(P0.05);与模型组比较,甲氨喋呤组和独活寄生汤各剂量组细胞在各时间点的增殖抑制率均降低(P0.05),尤以高剂量组的抑制率更为明显。与空白组比较,模型组细胞Bax、caspase3 m RNA和蛋白水平降低,Bcl-2 m RNA和蛋白水平升高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,甲氨喋呤组和独活寄生汤中、高剂量组细胞Bax、caspase3 m RNA和蛋白水平升高,Bcl-2 m RNA和蛋白水平降低(P0.05,P0.01),高剂量组的作用更为明显。结论:独活寄生汤能抑制佐剂性关节炎大鼠滑膜成纤维细胞的增殖,其作用机制与下调抗凋亡蛋白Bcl-2,上调促凋亡蛋白Bax和caspase3的表达有关。     

安胃汤含药血清通过调节PI3K/Akt信号通路促进MC细胞凋亡的研究

目的:探讨安胃汤含药血清对MC细胞(MNNG诱导人胃黏膜上皮细胞系(GES-1)恶性转化)PI3K/Akt信号通路相关因子及细胞凋亡影响。方法:根据中药复方血清药理学实验方法,以MC细胞为研究对象,设立空白组(A组)、安胃汤组(B组)、安胃汤+阻断剂组(C组)、阻断剂组(D组)。含药血清处理12、24、48 h后的各组细胞采用流式细胞术检测细胞凋亡率;Western Blot和Real-time PCR检测PI3Kα、AKT、XIAP蛋白及mRNA的表达。结果:A组细胞凋亡率比较低,B、C、D组细胞凋亡率有所增加,C组细胞凋亡率增加最为明显;与A组相比,B、C、D 3组细胞内PI3Kα、AKT、XIAP基因及蛋白表达有所降低(P0.01或P0.05)。结论:安胃汤能促进MC细胞细胞凋亡,可能与其通过调控PI3K/Akt通路,下调XIAP基因及蛋白有关。     

合欢皮总皂苷对H22荷瘤小鼠细胞免疫功能的影响

目的:观察合欢皮总皂苷对H22荷瘤小鼠CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群、细胞因子白细胞介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,凋亡诱导因子(Fas),凋亡诱导因子配体(Fas L)和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的影响,探讨其对细胞免疫功能的干预机制。方法:昆明种小鼠60只随机分为正常组、模型组、环磷酰胺组、合欢皮总皂苷高、中、低剂量组,建立小鼠H22荷瘤模型。给药组分别按环磷酰胺20 mg·kg-1·d-1,合欢皮总皂苷4,2,1 mg·kg-1·d-1ip,连续治疗11 d后,检测抑瘤率,血清IL-2,TNF-α水平,免疫组化染色检测肿瘤细胞Fas,Fas L和PCNA蛋白的表达;苏木素-伊红(HE)染色观察肿瘤组织形态。结果:与模型组比较,合欢皮总皂苷高、中、低剂量组小鼠移植瘤的平均质量均显著下降(P0.05,P0.01),合欢皮总皂苷中剂量组能明显提高CD4+T细胞,CD8+T细胞数量(P0.05,P0.01),对CD4+/CD8+无影响,合欢皮总皂苷中、高剂量组IL-2水平明显上升(P0.05),TNF-α水平无变化,合欢皮总皂苷各剂量组Fas L,PCNA蛋白表达显著降低(P0.01),中、高剂量组Fas表达水平显著升高(P0.01)。结论:合欢皮总皂苷能够调节细胞免疫功能,其机制可能与其上调CD4+,CD8+T细胞亚群,促进IL-2分泌,提高Fas蛋白表达并抑制Fas L,PCNA蛋白表达有关。     

龙蛭汤含药血清对人脐静脉内皮细胞增殖及自噬的影响

目的探讨龙蛭汤促人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖的可能作用机制。方法采用400μmol/L过氧化氢(H_2O_2)干预人脐静脉内皮细胞4 h建立自噬模型,通过CCK-8法观察龙蛭汤含药血清对模型组细胞增殖的影响,观察HUVECs自噬微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)和Bcl-2同源结构域蛋白(Beclin-1)表达。结果与正常组比较,空白组细胞增殖OD值及相对增殖率差异无统计学意义(P0.05);与空白组和正常组比较,模型组HUVECs增殖OD值及相对增殖率降低,LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达均升高(P0.05);与模型组比较,龙蛭汤组HUVECs增殖OD值及相对增殖率及LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达上升(P0.05)。正常组和空白血清组细胞未见明显变化,模型组细胞胞质内双层膜样结构和空泡数量减少,龙蛭汤组细胞24 h后胞质内双层膜样结构增多,弯曲延展,包裹部分细胞器。结论龙蛭汤含药血清对H_2O_2诱导的HUVECs损伤细胞具有明显保护作用,其能维持细胞形态的完整和促进细胞增殖,其机制可能与上调细胞自噬水平相关。     

枳术丸对慢传输型便秘脾虚证模型小鼠肠道传导功能的影响

目的探讨枳术丸治疗慢传输型便秘脾虚证的可能作用机制。方法 57只小鼠随机分成正常组15只,模型组、枳术丸组和莫沙必利组各14只,除正常组外其余各组小鼠采用番泻叶灌胃、低纤维饮食、限食和限水法制备慢传输型便秘脾虚证小鼠模型。造模成功后,枳术丸组按9.0g/(kg·d)灌胃,莫沙必利组按2.5mg/(kg·d)灌胃,模型组及正常组给予0.1ml/10g蒸馏水灌胃,每天2次,连续7天。观察各组小鼠一般行为学、结肠黏膜病理改变,检测小鼠首粒粪便排出时间、6h排便数量及质量,血清钙离子浓度及在体结肠肌电慢波的变化。结果正常组小鼠反应敏锐,被毛浓密、柔软,食纳佳,大便正常。与正常组比较,模型组小鼠反应迟钝,外形瘦小,食纳不佳,大便干硬、量少、颗粒细小,首粒粪便排出时间明显延长,6h排便数量及质量均明显减少,血清钙离子浓度明显降低,慢波频率明显增快、振幅明显减小(P0.01);与模型组比较,枳术丸组和莫沙必利组小鼠反应较敏锐,被毛柔软,食纳佳,大便成形,首粒粪便排出时间明显缩短,6h排便数量及质量明显增加,血清钙离子浓度明显升高,慢波频率明显减慢、振幅明显增大(P0.05或P0.01)。与莫沙必利组比较,枳术丸组小鼠血清钙离子有所升高,慢波振幅增大(P0.05)。结论枳术丸能改善慢传输型便秘脾虚证小鼠排便情况,可能通过提高血清钙离子的浓度,从而调节其结肠慢波,增强肠道动力。     

《金匮要略·血痹虚劳病脉证并治》虚劳病精气神调治原则与方法

从中医精气神辨识角度认识虚劳病,总结虚劳病病因病机。通过观察面容、形态、神色、五官、舌象、脉象等辨识精气神状态,确立虚劳病精气神调治原则。在精气神辨识理论指导下,对《金匮要略·血痹虚劳病脉证并治》相关条文、方药进行解析,总结虚劳病相关治则治法。根据精气神调养原则,为虚劳病临床应用提供指导。     

五脏补血法理论及临床应用探讨

血液的生成与五脏关系密切,据此确立五脏补血法:养心补血法、健脾补血法、润肺补血法、滋肝补血法、益肾补血法。     

丹栀逍遥散及其提取物镇静催眠作用研究

目的探讨丹栀逍遥散原方及提取物镇静催眠作用。方法将小鼠分为14组,正常对照组、原方组及各组分低中高剂量组,通过测定小鼠自主活动次数,采用戊巴比妥钠延长睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量镇静催眠协同作用实验观察丹栀逍遥散原方及各提取物镇静催眠作用。结果丹栀逍遥散原方及提取物均无改变小鼠自主活动的功能,表明均无中枢兴奋性作用;丹栀逍遥散石油醚提取液高、中剂量具有显著延长戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间的作用(P<0.01或P<0.05),石油醚提取液高剂量能明显增加阈下剂量戊巴比妥钠睡眠小鼠个数(P<0.01)。结论丹栀逍遥散石油醚提取部位可能为丹栀逍遥散的中枢抑制作用的有效部位。     

谈人参在《伤寒论》中的应用

人参为五加科植物人参的根。最早见于《神农本草经》,列为上品,书云:“人参味甘微寒,主补五脏,安精神,定魂魄,止惊悸,除邪,明目,开心,益智。”其味甘、微苦,性微温。归脾(胃)、肺、心经。具有大补元气,补脾益肺,益气生津,宁心安神之功效。在《伤寒论》中,仲景应用人参共40次,入     

阴阳升降理论探析与启迪

通过梳理《内经》及相关医家关于阴阳升降的论述,探讨阴阳升降的内容及阴阳升降的不同内涵。从阐述人体生理变化和脏腑特点、阐述疾病的病机、解释治则治法和方药配伍应用等方面分析阴阳升降对临床的启迪作用。     

全蝎配伍蜂房之祛风攻毒作用探析

通过梳理古本草文献中全蝎、蜂房的有关记载和现代临床对该药对的配伍应用,探讨并阐释该药对祛风攻毒增效的作用机制,认为全蝎配蜂房,药力迅捷,内走脏腑,外达肢节,透骨搜风,既可祛风通络止痛,又可攻毒散结消痈.尤其适宜于治疗风湿顽痹、痈疽恶疮、癌肿等.     

小青龙汤因机证治浅析

小青龙汤为温阳宣肺、蠲痰涤饮之剂,凡见哮喘、咳嗽、痰、饱胀、喘息和四肢水肿等因"外感风寒,内有寒饮"所致者,均可辨证应用小青龙汤。临证应用时注意:①寒邪不必拘泥外感;②"三水"的变化要审清;③但见寒饮,有无表证均可用此方;④注意痰饮在临床上的变化;⑤临床见喘未必治喘,要临证辨别。用此方,要抓住以下临床指征:①面色:"三水"之面色--黧黑之色;②脉象:弦脉或浮紧;③舌象:舌苔多水滑;④痰涎:咳痰较爽,痰涎清稀,泡沫状。以上"但见一证便是,不必悉俱",有效之后,应中病即止。     

非酒精性脂肪肝诊治的问题及对策

目的探讨非酒精性脂肪肝临床治疗中有效对策。方法结合近代非酒精性脂肪肝治疗研究现状部分问题,运用中医辨证和辨病论治结合现代药理学研究进展方法,防治非酒精性脂肪肝。结果中西医结合防治此病有效。结论中西医结合辨证和辨病结合论治防治此病为有效对策。     

苦参碱和氧化苦参碱的分离纯化以及山豆根药材的薄层色谱鉴别

 目的 从山豆根中精制苦参碱和氧化苦参碱,并以此为化学对照品对山豆根药材进行薄层色谱鉴别。方法 利用硅胶柱色谱和重结晶的方法分离纯化苦参碱和氧化苦参碱,经理化数据和光谱解析等方法鉴定结构,采用TLC和高效液相色谱的方法检查其纯度,并利用TLC的方法对不同来源的山豆根商品药材进行鉴别研究。结果 从山豆根中分离纯化得到纯度98％以上的苦参碱和氧化苦参碱对照品各1.7 g和2.0 g,并以此为对照品有效地鉴别了正品山豆根药材及其混淆品。结论以苦参碱和氧化苦参碱作为山豆根的定性指标是合理的,采用TLC方法鉴别山豆根是可行的。     

亚健康状态的评估、诊断现状与对策

从量表或问卷评估法、症状组合法、记叙法等方面阐述亚健康状态评估与诊断的现状,归纳总结存在的难点;认为开展亚健康评估、诊断研究,可从健康测量角度出发,运用量表问卷和数据挖掘技术,结合多种手段控制临床质量,构建包括宏观和微观指标在内的综合评价体系。