蜂贝化瘀胶囊对2型糖尿病大鼠FasL基因表达和T细胞凋亡的影响

目的观察蜂贝化瘀胶囊对2型糖尿病大鼠FasL基因表达和T细胞凋亡的影响,比较中药治疗前后肾脏和视网膜病理变化的改变,并探讨其作用机制。方法建立2型糖尿病大鼠模型,通过RT-PCR、DNA凝胶电泳、流式细胞仪等技术,观察蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠FasL基因表达、T细胞凋亡的影响及电镜观察肾脏、视网膜病理变化。结果糖尿病模型组大鼠FasL基因表达和T细胞凋亡率明显高于正常对照组(P<0.05),而中药治疗组以上指标均明显降低(P<0.05),与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05);中药治疗组与西药治疗组相比较,T细胞凋亡率也明显降低(P<0.05);电镜结果显示,中药治疗组肾脏和视网膜病理变化较糖尿病模型组明显减轻。结论蜂贝化瘀胶囊可明显降低T细胞凋亡率,明显改善肾脏病理变化,其作用机理是通过控制功能基因FasL基因的表达,减少了T细胞凋亡,从而增强免疫功能来实现的。     

蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠肾脏保护作用的实验研究

目的:探讨中药蜂贝化瘀胶囊对糖尿病(DM)肾脏的保护作用及其机制。方法:将Wistar大鼠分为DM组和中药治疗组,DM大鼠模型由链脲佐菌素(STZ)加高热量饮食诱导。治疗8周后,测定各组大鼠尿量、24小时尿蛋白、尿素氮、血肌酐、糖化血红蛋白、血清丙二醛、T细胞凋亡率和淋巴细胞FasL mRNA表达,并观察肾脏组织病理学改变。结果:DM组的尿量、24小时尿蛋白、尿素氮、血肌酐、糖化血红蛋白、血清丙二醛、FasL基因表达和T细胞凋亡率均明显高于正常对照组(P<0.05),形态学观察DM组大鼠肾脏有弥漫性肾小球硬化,肾小球系膜区增宽,肾小管基底膜增厚等病理改变;而中药治疗组的以上指标与DM组比较均明显减轻(P<0.05),并与正常对照组无显著性差异(P>0.05)。结论:蜂贝化瘀胶囊对DM大鼠肾脏病变有较好的防治作用,其机制可能与该方剂能抑制脂蛋白非酶基糖化、抑制脂质过氧化、控制功能基因的表达,减少T细胞凋亡等作用有关。     

二黄糖肾康对糖肾病大鼠肾脏保护作用的研究

目的:探讨二黄糖肾康对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用的机制。方法:单侧肾切除大鼠加腹腔注射STZ(50mg/kg)复制糖尿病肾病大鼠模型,给二黄糖肾康提取液灌胃,8周后检测糖尿病肾病大鼠肾功能,用流式细胞术检测细胞凋亡及凋亡调控因子Fas/Fas-L表达。结果:二黄糖肾康能改善糖尿病肾病大鼠肾功能,细胞凋亡数目相对减少,Fas和Fas-L的表达显著减弱。提示:二黄糖肾康可能通过影响凋亡调控因子Fas和Fas-L的表达而抑制肾脏细胞凋亡,从而发挥肾脏保护作用。     

清心胶囊对病毒性心肌炎小鼠不同分期T细胞凋亡及凋亡蛋白表达的影响

目的:观察病毒性心肌炎(VMC)不同分期T细胞凋亡与凋亡蛋白表达的变化以及清心胶囊对这一环节的干预作用.方法:参照文献方法复制VMC急性期和恢复期BALB/c小鼠模型,给予清心胶囊治疗后,采用光镜和透射电镜观察心肌病理改变,Annexin v/PI双染色流式细胞术和透射电镜观察T淋巴细胞凋亡;流式细胞术检测Fas、FasL、bcl-2及Bax蛋白在T细胞上的表达.结果:(1)无论急性期还是恢复期,模型组小鼠心肌病变明显,治疗组心肌病理改变明显减轻,正常组心肌无明显病理改变.(2)与正常组比较,VMC急性期、恢复期小鼠脾T细胞的凋亡率均显著升高(P＜0.01);与模型组比较,无论急性期还是恢复期,治疗组小鼠脾T细胞的凋亡率均显著降低(P＜0.01),但与正常组比较,仍有显著性差异(P＜0.01).透射电镜下可见正常T细胞和凋亡T细胞的典型形态,模型组T细胞凋亡增多.(3)与正常组比较,急性期、恢复期模型组小鼠脾T细胞Fas、FasL表达均显著升高(P＜0.01),bcl-2表达均显著降低(P＜0.01);与模型组比较,急性期、恢复期治疗组小鼠脾T细胞FasL表达均显著降低(P分别＜0.01、0.05),bcl-2表达均显著升高(P分别＜0.01、0.05),Fas表达无统计学差异(P＞0.05);无论急性期还是恢复期,Bax表达各组间均无显著性差异(P＞0.05).结论:VMC急性期、恢复期均存在T细胞过度凋亡现象,这与Fas、FasL表达升高和bcl-2表达降低有关;清心胶囊能够显著抑制T细胞的过度凋亡,与其下调FasL表达和上调bcl-2表达有关.     

蜂贝化瘀胶囊对糖尿病微血管病变相关指标的影响

目的观察蜂贝化瘀胶囊对2型糖尿病(DM)大鼠微血管病变的作用及机理。方法将Wistar大鼠分为正常对照组、DM模型组、中药治疗组、中药对照组和西药对照组,测定各组大鼠血糖、血脂、脂质过氧化物、糖基化终末产物、醛糖还原酶(AR)及相关基因表达的变化。结果DM模型组大鼠血糖、甘油三酯、糖化血红蛋白、AR活性、丙二醛和T细胞凋亡率均明显上升,T细胞中Fas配体(FasL)、脂肪细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因表达均明显增高,中药治疗组大鼠以上指标显著降低,与DM模型组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论蜂贝化瘀胶囊能有效降低2型DM模型组大鼠的血糖、血脂、糖化血红蛋白、AR活性和丙二醛含量,减少相关基因表达和T细胞凋亡率,对2型DM微血管病变有较好的治疗作用。     

病毒性心肌炎小鼠T淋巴细胞凋亡的调控与清心胶囊的干预作用

目的:观察病毒性心肌炎(VMC)T细胞凋亡与凋亡蛋白表达的变化以及清心胶囊对这一环节的干预作用.方法:复制VMCBALB/c小鼠模型,给予清心胶囊治疗后,采用光镜和透射电镜观察心肌病理改变,Annexin v/PI 双染色流式细胞术和透射电镜观察T淋巴细胞凋亡;流式细胞术检测Fas、FasL、bcl-2及Bax蛋白在T细胞上的表达.结果:(1)模型组小鼠心肌病变明显,治疗组心肌病理改变明显减轻,正常组心肌无明显病理改变.(2)与正常组比较,VMC小鼠脾T细胞的凋亡率均显著升高(P＜0.01);与模型组比较,治疗组小鼠脾T细胞的凋亡率均显著降低(P＜0.01),但与正常组比较,仍有显著性差异(P＜0.01).透射电镜下可见正常T细胞和凋亡T细胞的典型形态,模型组T细胞凋亡增多.(3)与正常组比较,模型组小鼠脾T细胞Fas、FasL表达均显著升高(P＜0.01),bcl-2表达均显著降低(P＜0.01);与模型组比较,治疗组小鼠脾T细胞FasL表达均显著降低(P＜0.01),bcl-2表达均显著升高(P＜0.01、),Fas表达无统计学差异(P＞0.05);与正常组比较,治疗组小鼠脾T细胞FasL表达无显著性差异(P＞0.05),Fas、bcl-2表达仍有显著性差异(P＜0.05);而Bax表达各组间均无显著性差异(P＞0.05).结论:VMC发病过程中存在T细胞过度凋亡现象,这与Fas、FasL表达升高和bcl-2表达降低有关;清心胶囊能够显著抑制T细胞的过度凋亡,与其下调FasL表达和上调bcl-2表达有关.     

振肌胶囊对大鼠疲劳模型骨骼肌细胞凋亡的影响

用游泳方法建立大鼠疲劳模型,观察爱维治与不同剂量振肌胶囊对大鼠疲劳模型血清乳酸含量及骨骼肌细胞调亡的影响.结果显示:模型组与正常对照组相比大鼠血清乳酸含量明显增高(P＜0.05).中药常规剂量组、中药大剂量组与模型组相比,血清乳酸含量明显降低(P＜0.05).与模型组相比,各组骨骼肌细胞凋亡数目明显减少(P＜0.05),中药大剂量组与中药常规剂量组相比骨骼肌细胞凋亡数目亦明显减少(P＜0.05).爱维治(Actovegin)组与中药大剂量组相比肌细胞凋亡数目统计学上无差异(P＞0.01),推测中药振肌胶囊抗疲劳的机理可能与降低血清乳酸及防止骨骼肌细胞的凋亡有关,其机理有待进一步研究.     

益气化瘀法对体外培养子宫肌瘤细胞增殖凋亡相关蛋白表达影响的研究

目的:研究具有益气化瘀功效的中药复方化瘤方对体外培养子宫肌瘤细胞增殖相关蛋白(PCNA)、凋亡相关蛋白(Bcl-2、Fas/Fas-L)表达的影响。方法:制备化瘤方、宫瘤宁、米非司酮药物血清,采用免疫细胞化学方法检测药物作用后增殖细胞核抗原(PCNA),凋亡相关基因(Bcl-2)蛋白、Fas及其配体Fas-L变化。结果:3种药物血清均能明显下调PCNA、Bcl-2、Fas及其配体Fas-L蛋白在肌瘤细胞中的表达(P<0.001)。结论:中药复方化瘤方通过降低PCNA蛋白表达,直接抑制子宫肌瘤细胞增殖;调节Bcl-2、Fas-L蛋白表达诱导子宫肌瘤细胞凋亡。     

针灸对糖尿病造影剂肾病大鼠肾脏细胞凋亡基因Fas/FasL的影响

目的:通过观察针灸对糖尿病造影剂肾病大鼠肾脏细胞凋亡基因Fas/FasL的影响,探讨针灸对糖尿病造影剂肾病的保护机制。方法:雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、针刺组、艾灸组、联合组,每组8只。采用腹腔注射链脲佐菌素法制备糖尿病造影剂肾病大鼠模型。针刺组、艾灸组及联合组分别给予针刺、艾灸及针刺+艾灸联合治疗,3组均选取"三阴交""肾俞""脾俞",每日1次,连续7d。用HE染色法观察大鼠肾脏病理形态,醋酸铀-柠檬酸双染色法观察大鼠肾脏超微结构,脲酶法测定大鼠血清尿素氮(BUN)含量,苦味酸法测定大鼠血清肌酐(Scr)含量,氧化还原法检测大鼠肾脏组织一氧化氮合酶(NOS)活性,黄嘌呤氧化酶法检测大鼠肾脏组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法检测大鼠肾脏组织丙二醛(MDA)含量,比色法检测大鼠肾脏组织总抗氧化能力(T-AOC),Western blot法及荧光定量PCR法检测大鼠肾脏组织Fas、FasL蛋白及mRNA表达水平。结果:光学显微镜下,对照组大鼠肾小球、肾小管及间质无明显病理改变;模型组大鼠肾小球呈分叶状,肾小管上皮细胞多有局部坏死、空泡样变性。电镜下模型组大鼠肾小球血管袢基底膜增厚,肾小管上皮细胞胞质见大量空泡,线粒体严重肿胀,线粒体嵴排列紊乱、断裂或消失,可见凋亡样改变的细胞。针刺组和艾灸组肾脏病理改变基本同模型组;联合组大鼠肾脏病理改变有所改善。与对照组比较,模型组大鼠血清BUN、Scr含量明显升高(P<0.01);与模型组比较,艾灸组大鼠血清BUN含量明显降低(P<0.05),针刺组、联合组大鼠血清BUN、Scr含量明显降低(P<0.05);与针刺组比较,联合组大鼠血清BUN含量明显降低(P<0.05);与艾灸组比较,联合组大鼠血清BUN、Scr含量明显降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组大鼠肾脏NOS、SOD、T-AOC活性明显降低(P<0.05)、MDA含量明显升高(P<0.01);与模型组比较,针刺组、艾灸组大鼠肾脏NOS活性明显升高(P<0.01,P<0.05)、MDA含量明显降低(P<0.05),联合组大鼠肾脏NOS、SOD、T-AOC活性明显升高(P<0.01,P<0.05)、MDA含量明显降低(P<0.05);与针刺组和艾灸组比较,联合组大鼠肾脏NOS、SOD、T-AOC活性明显升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组大鼠肾脏Fas和FasL蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,艾灸组大鼠肾脏FasL蛋白及mRNA表达水平均降低(P<0.05),针刺组和联合组大鼠肾脏Fas和FasL蛋白及mRNA表达水平均降低(P<0.05,P<0.01);与针刺组和艾灸组比较,联合组大鼠肾脏Fas和FasL蛋白及mRNA表达水平均明显降低(P<0.05)。结论:针刺、艾灸均可降低糖尿病造影剂肾病大鼠肾脏的氧化应激反应,下调Fas/FasL表达,减少肾细胞凋亡,减轻肾损伤;针刺联合艾灸具有协同增效作用。     

参芎化瘀胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马CA1 区细胞凋亡 及Bcl-2,Bax蛋白表达的影响

目的:探讨参芎化瘀胶囊对血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠海马CA1区细胞凋亡及B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2),Bax蛋白表达的影响。方法:采用反复夹闭、再通双侧颈总动脉同时ip硝普钠制备大鼠血管性痴呆模型,应用Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组织化学SABC法检测Bcl-2,Bax蛋白表达。结果:①与正常组及假手术组相比,模型组大鼠海马CA1区凋亡细胞增多(P<0.01);与模型组比较,参芎化瘀胶囊治疗组大鼠海马CA1区凋亡细胞减少(P<0.01)。②与正常组及假手术组相比,模型组大鼠海马CA1区Bcl-2,Bax阳性细胞均增多(均P<0.01),Bcl-2/Bax降低(P<0.01);与模型组比较,参芎化瘀胶囊治疗组大鼠海马CA1区Bcl-2阳性细胞增多(P<0.01),Bax阳性细胞减少(P<0.01),Bcl-2/Bax增加(P<0.01)。结论:参芎化瘀胶囊可能通过上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,减少细胞凋亡,从而改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力。     

蜂贝化瘀胶囊治疗2型糖尿病视网膜病变的研究

目的探讨蜂贝化瘀胶囊治疗2型糖尿病视网膜病变的临床疗效。方法将63例患者分为3组。中药治疗组24例服用蜂贝化瘀胶囊,中药对照组22例服用参芪降糖颗粒,西药对照组17例服用降糖西药。观察患者眼底、血糖、糖化血红蛋白、血脂、胰岛素、丙二醛等指标的变化。结果中药治疗组眼底病变有明显好转,有效率为75%,中药对照组为68%,西药对照组为59%;中药治疗组血糖、糖化血红蛋白、胆固醇、丙二醛含量有明显下降(P均<0.05),与两对照组比较有显著性差异(P均<0.05)。结论蜂贝化瘀胶囊治疗2型糖尿病视网膜病变疗效肯定。其在改善眼底病变、降低血糖、抑制脂蛋白非酶基糖化、改善血脂方面均具有较好的疗效。     

胃癌前病变中Fas、Fas-L表达及与幽门螺杆菌感染的关系

目的探讨慢性萎缩性胃炎癌前病变不同病理改变胃上皮细胞的凋亡相关基因蛋白表达及与幽门螺杆菌感染的相关性。方法依胃黏膜肠化生、异型增生程度分为轻度组、中度组和中-重度组,应用快速尿素酶试验与W-S银染色法检测幽门螺杆菌感染情况,应用免疫组化SP法检测各组凋亡相关基因Fas、Fas-L的表达情况。结果中-重度组Fas基因蛋白的表达显著低于轻度组(P<0.05);中-重度组Fas-L基因蛋白的表达显著高于轻度组、中度组(P<0.01,P<0.05)。幽门螺杆菌阳性者Fas的表达显著高于幽门螺杆菌阴性者(P<0.01);中-重度组幽门螺杆菌阳性率显著低于轻度组及中度组(P<0.01)。结论癌前病变病理程度的变化与Fas、Fas-L表达变化有关,幽门螺杆菌的感染可以提高Fas的表达,Fas的表达变化可能是幽门螺杆菌相关性慢性萎缩性胃炎癌前病变细胞凋亡变化的原因之一。     

至生胶囊调节食管癌造模大鼠细胞凋亡及Fas, FasL蛋白表达的研究

目的:观察至生胶囊对食管癌造模大鼠细胞凋亡及Fas,FasL蛋白表达的影响,从分子生物学角度分析其作用机制。方法:选用健康Wistar大鼠,除空白组外,其余大鼠均ip甲基戊基亚硝胺(MANA)5 mg.kg-1,1次/周,连续18周造模。末次注射后将造模大鼠随机分为模型组、至生胶囊高(0.75 g.kg-1)、中(0.5 g.kg-1)、低(0.25 g.kg-1)剂量组、西药替加氟组(20 mg.kg-1),ig,1次/d,连续4周。原位末端标记法(TUNEL)检测对食管癌癌细胞凋亡的促进作用;免疫组化法检测大鼠食管细胞中Fas,FasL蛋白的表达。结果:至生胶囊可明显促进食管癌细胞的凋亡,高、中、低剂量组、化疗组均促进凋亡,与模型组比较均有统计学意义(P<0.05),高、中剂量组疗效明显优于化疗组、低剂量组(P<0.05),且呈一定量效关系。各药物治疗组Fas表达阳性率均有不同程度的升高,FasL表达阳性率均有不同程度的降低。结论:至生胶囊能促进食管癌细胞凋亡,其作用机制可能与其提高Fas表达、降低FasL表达有关;至生胶囊促进食管癌细胞凋亡及调节Fas,FasL表达的作用存在一定的量效关系,至生胶囊高剂量此种作用优于替加氟。     

心脑舒通胶囊对大鼠缺血再灌注脑损伤后细胞凋亡的影响

目的:探讨心脑舒通胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡,及其对凋亡调控因子蛋白表达的影响。方法:采用线栓法阻塞大脑中动脉致大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO),24 h后断头取脑,免疫组织化学法测定大脑皮层中Bax,Bcl-2,Fas,Fas-L以及caspase-3蛋白的表达,TUNEL法检测皮层区神经细胞凋亡。结果:缺血再灌注模型组大脑皮层内Bax,Fas,Fas-L和caspase-3蛋白明显升高,Bcl-2蛋白表达和Bcl-2/Bax明显降低,与假手术组比较,均有显著性差异(P<0.01)。心脑舒通胶囊能明显降低缺血侧大脑皮层内Bax蛋白表达,增加皮层内Bcl-2蛋白表达和Bcl-2/Bax;减少皮层内Fas和Fas-L蛋白表达,降低皮层内caspase-3蛋白和基因表达,显著减少凋亡的神经细胞数量,与模型组比较,有统计学意义(P<0.01)。结论:心脑舒通胶囊保护受损的脑组织,其机制可能与降低脑组织神经细胞凋亡,调节凋亡调控因子的蛋白表达有关。     

肾衰胶囊对慢性肾功能衰竭大鼠细胞凋亡的影响

目的:探讨肾衰胶囊对慢性肾功能衰竭大鼠细胞凋亡的影响.方法:用Wistar大鼠灌服腺嘌呤造模,分高、低剂量组及尿毒清组治疗,原位末端标记法检测肾组织细胞凋亡,免疫组化检测Fas、Bcl-2肾内表达水平.结果:高剂量组肾功能指标改善与尿毒清组比较,差异均有显著性.对慢性肾功能衰竭大鼠肾小管上皮细胞凋亡有明显抑制作用,抑制Fas基因表达,提高Bcl-2基因表达.结论:肾衰胶囊能明显抑制细胞凋亡,调节Fas/Bcl-2.提示这可能是其延缓肾功能衰竭进展的作用机理之一.     

参芎化瘀胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马CA_1区超微结构的影响

目的:探讨参芎化瘀胶囊对血管性痴呆大鼠海马CA1区超微结构的影响。方法:采用反复夹闭、再通双侧颈总动脉同时ip硝普钠法制备大鼠血管性痴呆模型。SD大鼠随机分为:假手术组、痴呆模型组(模型组)、喜得镇组和参芎化瘀胶囊治疗组。以Morris水迷宫检测行为学,透射电镜观察各组大鼠海马CA1区神经元超微结构的改变。结果:①模型组与假手术组相比认知能力明显下降(P0.01),喜得镇组、参芎化瘀胶囊组与模型组相比认知能力明显改善(P0.05,P0.01)。②模型组海马CA1区神经元大量固缩,染色质凝集,异染色质边集,线粒体肿胀。喜得镇组海马CA1区神经元有少量染色质凝集,线粒体肿胀。参芎化瘀胶囊组海马CA1区多数神经元细胞核染色质分布比较均匀,胞质内线粒体及其他细胞器基本正常。结论:参芎化瘀胶囊可改善血管性痴呆模型海马CA1区损伤的超微结构,对神经元有保护作用,从而改善血管性痴呆大鼠的认知能力。     

参芎化瘀胶囊对血管性痴呆模型大鼠学习记忆行为的作用

目的:观察参芎化瘀胶囊对血管性痴呆模型大鼠学习记忆行为的影响。方法:将60只健康SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、喜得镇0.6 mg·kg-1治疗组、复方丹参270 mg·kg-1治疗组和参芎化瘀胶囊480 mg·kg-1治疗组6个组。均ig给药,每日1次,术前预防给药7 d,术后继续给药28 d。采用反复夹闭、再通双侧颈总动脉同时ip硝普钠制备大鼠血管性痴呆模型,应用Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆行为。结果:与正常组及假手术组相比,模型组大鼠逃避潜伏期时间延长(P<0.01,P<0.01),撤走安全平台后穿越平台的次数及在原平台象限停留时间均减少(均P<0.01)。与模型组比较,各药物治疗组大鼠逃避潜伏期时间缩短(P<0.05,P<0.01),撤走安全平台后穿越平台的次数及在原平台象限停留时间均增多(均P<0.05)。参芎化瘀胶囊组大鼠逃避潜伏期时间较喜得镇组短(P<0.05),与复方丹参组之间差异无显著性。结论:参芎化瘀胶囊能改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力。     

温阳解毒化瘀颗粒对肝衰竭IETM大鼠TLR4 mRNA,TNF-α及肝细胞凋亡的影响

目的:研究Toll样受体4(TLR4) mRNA及其下游炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与肝衰竭肠源性内毒素血症(IETM)大鼠肝细胞凋亡的关系,并探索温阳解毒化瘀颗粒对内毒素介导的肝细胞凋亡的调控机制。方法:SPF级雄性SD大鼠85只,随机分为正常组,模型组,TLR4单克隆抗体组和温阳解毒化瘀颗粒组(8.925 g·kg^-1)。采用D-半乳糖胺(D-Gal)腹腔注射建立肝衰竭IETM模型,TLR4单克隆抗体组和温阳解毒化瘀颗粒组在造模前5 d给予温阳解毒化瘀颗粒溶液灌胃,正常组、模型组以等容积蒸馏水代替,直至处死。各组分别在24,48,72 h随机处死大鼠并采集标本。检测24,48,72 h各组时间点血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝组织TLR4 mRNA表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肝组织TNF-α表达,流式细胞仪检测肝细胞凋亡率。结果:与正常组比较,模型组ALT,AST升高,肝组织病理损伤程度明显加重,TLR4mRNA,TNF-α表达均增高(P<0.05,P<0.01),肝细胞凋亡率明显上升(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,温阳解毒化瘀颗粒组ALT,AST显著降低(P<0.01),肝组织病理损伤程度明显减轻(P<0.05),TLR4 mRNA,TNF-α表达显著下降(P<0.01),肝细胞凋亡率亦显著降低(P<0.01)。结论:TLR4 mRNA,TNF-α在肝衰竭时与肝细胞凋亡呈正相关,温阳解毒化瘀颗粒能够改善肝衰竭IETM大鼠肝功能,减轻肝细胞损伤,减少肝细胞凋亡,其机制可能与其下调肝脏TLR4 mRNA表达,抑制TNF-α释放,降低肝细胞凋亡率有关。     

糖肾平胶囊对STZ诱导糖尿病肾病大鼠肾脏保护及其对TGF-β_1/p38MAPK信号转导通路的影响

目的:探讨糖肾平胶囊对链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及其TGF-β1/p38MAPK信号通路影响。方法:雄性Wistar大鼠74只,随机分为正常组10只,模型组64只。模型组大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)(45mg/kg),模型成功的大鼠按体质量随机分为模型组、厄贝沙坦组、糖肾平胶囊低、高剂量组。每周称体质量,隔周分笼收集24h尿液检测24h尿蛋白定量。第14周,处死大鼠取血检测血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)、甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)含量;肾组织行HE、Mallory、六胺银染色,观察肾组织的病理形态;肾组织原位杂交、RT-PCR、免疫组化观察转化生长因子β1(TGF-β1)、p38MAPK、Caspase-3 mRNA及蛋白表达。结果:模型组大鼠尿蛋白及血清BUN、Scr、TG、MDA含量显著增高(P0.01),NO、SOD含量显著降低(P0.01),肾固有细胞胞浆有大量TGF-β1、p38MAPK、Caspase-3 mRNA及蛋白表达;与模型组比较,各治疗组肾脏病理损害明显减轻,尿蛋白及血清BUN、Scr、TG、MDA含量显著降低(P0.01),NO、SOD含量明显增高(P0.01),肾固有细胞胞浆内TGF-β1、p38MAPK、Caspase-3 mRNA及蛋白表达明显减少(P0.01),糖肾平治疗组呈剂量依赖关系。结论:糖肾平胶囊可能通过调控糖尿病肾病肾组织TGF-β1/p38MAPK信号表达,减轻足细胞在内的肾固有细胞凋亡,进而降低24h尿蛋白定量、改善肾功能、降低TG和MDA含量;升高NO、SOD含量;减轻肾脏病理损害,起到明显的糖尿病肾病肾脏保护及延缓病程进展的作用。