循经论治法对急性痛风性关节炎大鼠的Toll样受体4/NF-κB信号通路影响机制研究

目的:探讨循经论治法对急性痛风性关节炎大鼠的Toll样受体4/NF-κB信号通路的作用及机制。方法:50只雄性SPF级Wistar大鼠随机分为正常对照组(A)、急性痛风性关节炎模型组(B)、常规中药治疗组(C)、常规中药治疗联合引经药组(D)、秋水仙碱组(E),共5组,每组10只,正常对照组采用采用右侧大鼠第1跖趾关节处注射生理盐水,其他实验组在相同部位注射尿酸钠溶液方法建立急性痛风性关节炎模型,所有分组大鼠共灌胃给药7 d,1日2次,灌胃3 d后予以动物模型制备,后继续给药至第7 d处死。期间进行一般观察,关节局部肿胀测定,步态观察。用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,荧光定量RT-PCR分析Toll样受体4(TLR4)mRNA、NF-κB p65mRNA、白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA转录水平,HE染色观察组织病理学改变,免疫组化法检测Toll样受体4(TLR4)、NF-κB p65、白细胞介素-1β(IL-1β)的表达。结果:与正常对照组(A)相比急性痛风性关节炎模型组(B)关节局部肿胀明显,跛行步态,血清中白细胞介素-1β(IL-1β)的含量升高P0.05,Toll样受体4(TLR4)mRNA、NF-κB p65mRNA、白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA出现较高转录水平P0.05,HE染色观察组织见大量炎性细胞增生,浸润。免疫组化法检测Toll样受体4(TLR4)、NF-κB p65、白细胞介素-1β(IL-1β)的表达升高P0.05。常规中药治疗联合引经药组(D)相对于其他用药组具有减少关节局部肿胀,减轻跛行步态,血清中白细胞介素-1β(IL-1β)的含量降低P0.05,Toll样受体4(TLR4)mRNA、NF-κB p65mRNA转录水平降低P0.05,HE染色观察组织见炎性细胞增生,浸润减少。免疫组化法检测Toll样受体4(TLR4)、NF-κB p65的表达降低P0.05,但相对于秋水仙碱组(E)血清中白细胞介素-1β(IL-1β)的含量降低无差异性P0.05,其中秋水仙碱组(E)的白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA表达及免疫组化法检测白细胞介素-1β(IL-1β)的表达降低程度较常规中药治疗联合引经药组(D)幅度大P0.05。结论:循经论治法对急性痛风性关节炎大鼠的Toll样受体4/NF-κB信号通路的具有一定的作用。     

萆薢总皂苷对尿酸钠诱导THP-1细胞Toll样受体/核转录因子-κB(TLR/NF-κB)信号通路的影响

目的:研究萆薢总皂苷(TSD)对尿酸钠(MSU)诱导THP-1细胞Toll样受体/核转录因子-κB(TLR/NF-κB)信号通路的影响,探讨其抗痛风性关节炎的可能作用机制。方法:佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞,分为正常组,模型组,TSD低、中、高质量浓度组(1,3,10 mg·L~(-1))和秋水仙碱组(0.2 mg·L~(-1)),除正常组外,其余各组均用400 mg·L~(-1)MSU刺激6 h,诱导体外炎症反应。噻唑蓝(MTT)比色法检测TSD对细胞活力影响;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清液炎性因子如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的分泌水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TLR4,髓样分化因子88(MyD88)及NF-κB蛋白表达;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测TLR4,NF-κB及IL-1β前体(Pro-IL-1β)mRNA表达水平;免疫荧光法检测NF-κB p65的核位移情况。结果:0～32 mg·L~(-1)TSD对细胞活力基本无影响;与正常组比较,模型组炎性因子TNF-α及IL-1β的分泌水平显著升高(P0.01),通路关键蛋白(TLR4,MyD88及NF-κB)和基因(TLR4,NF-κB及Pro-IL-1β)的表达显著升高(P0.01);与模型组比较,1～30 mg·L~(-1)TSD可显著下调炎性因子TNF-α及IL-1β的分泌(P0.01),通路关键蛋白(TLR4,MyD88及NF-κB)和基因(TLR4,NF-κB及Pro-IL-1β)的表达明显降低(P0.05,P0.01),细胞核内NF-κB p65叠加减少,部分转位至胞浆,抑制NF-κB p65核转位。结论:TSD可能通过下调TLR4,NF-κB及Pro-IL-1βmRNA的表达,减少炎性因子TNF-α及IL-1β分泌而发挥抗炎作用。     

雷公藤内酯醇对AD细胞模型核因子κB表达及炎性因子释放的影响

目的 观察雷公藤内酯醇(triptolide,T10)对β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)1-42激活的小胶质细胞核因子κB(nuclear factor,NF-κB)表达及炎性因子释放的影响.方法 用10 μmol/L Aβ1-42作用12h建立小胶质细胞活化-AD炎症细胞模型.用不同浓度的T10 (10-11,10-10,10-9,10-8 mol/L)预孵育小胶质细胞12 h,然后加入10 μmol/L Aβ1-42共孵育12 h,ELLSA法检测上清肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-α)、白介素(interleukin,IL-1β)的含量,Western blot检测NF-κB的表达.结果 与Aβ组相比T10可减少Aβ1-42诱导的小胶质细胞TNF-α、IL-1β的释放和NF-κB的表达,差别具有显著性.结论 雷公藤内酯醇可抑制AD细胞模型中小胶质细胞NF-κB的活化,该抑制作用可能参与了T10在AD治疗中的神经保护机制.     

醒脑静注射液对重型颅脑损伤患者血浆白细胞介素-1β和S-100β含量的影响

目的:观察重型创伤性脑损伤(severe traumatic brain injury,sTBI)患者血浆IL-1β与S-100β蛋白含量变化,以及醒脑静注射液对IL-1β与S-100β蛋白含量的影响。方法:51例sTBI患者随机分成醒脑静治疗组(A组,n=26)和对照组(B组,n=25)。B组采用脱水、止血、必要时手术等治疗,A组在上述治疗的基础上给予醒脑静注射液治疗。两组均于伤后6h、24h、3d、7d、15d等各时间点采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血浆IL-1β与S-100β蛋白含量,并与健康成年人作为正常对照组比较(C组,n=12);分析各时间点两组血浆IL-1β与S-100β蛋白含量与格拉斯哥昏迷评分(GCS)的相关性。结果:伤后各时间点A、B两组sTBI患者血浆IL-1β与S-100β蛋白含量明显高于C组(P?0.01),但两组间IL-1β与S-100β蛋白含量在伤后6h差异无统计学意义(P<0.05)。醒脑静注射液治疗后各时间点A组血浆IL-1β与S-100β蛋白含量低于B组(P?0.05)。A、B组于伤后各时间点血浆IL-1β与S-100β蛋白含量均与GCS评分呈负相关;与B组比较,出院时A组预后较好。结论:醒脑静能够降低sTBI患者血浆IL-1β与S-100β含量,改善预后,具有脑保护作用,其脑保护机制可能与醒脑静能减轻血浆IL-1β和S-100β蛋白介导的损伤性脑细胞炎症反应有关。     

黄连解毒汤对Aβ25-35诱导的HT22细胞NF-κB活化及炎症因子水平的影响

目的:探讨黄连解毒汤对β-淀粉样蛋白25-35(β-amyloid protein 25-35,Aβ_(25-35))诱导的HT22细胞核转录因子-κB(NF-κB)活化及炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β),IL-6,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法:培养HT22细胞,HT22细胞分为空白组、模型组、多奈哌齐组(0.000 9 g·kg-1)和黄连解毒汤低、高剂量组(2.7,8.1 g·kg-1),空白组、模型组加入空白血清,各药物组分别加入含药血清1 h后,模型组和各药物组细胞分别加入Aβ_(25-35)(40μmol·L-1),24 h后运用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测p-NF-κB p65表达水平;免疫荧光法检测分析各组NF-κB p65核移位情况;用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测IL-1β,IL-6,TNF-α蛋白含量及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测IL-1β,IL-6,TNF-αmRNA的表达情况。结果:与空白组比较,模型组的IL-1β,IL-6,TNF-α蛋白分泌及其mRNA表达增多,NF-κB活化水平增高(P0.05);与模型组比较,黄连解毒汤低、高剂量组及多奈哌齐组的炎性因子及mRNA表达量均减低(P0.05),并且能抑制NF-κB活化。结论:黄连解毒汤可降低Aβ_(25-35)诱导HT22细胞炎症反应,从而减轻Aβ_(25-35)神经毒性作用,作用机制可能与抑制NF-κB活化有关。     

参附注射液抗运动性疲劳小鼠的实验研究

目的 观察参附注射液对运动性疲劳小鼠血液转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响,探讨其对运动性疲劳的作用机制.方法 采用小鼠游泳运动建立疲劳模型,随机分为安静组(A)、运动即刻组(B)、运动后24 h组(C)、参附注射液安静组(D)、参附注射液运动即刻组(E)、参附注射液运动后24 h组(F),A、D组休息状态,B、C、E、F组游泳训练.用ELASE检测小鼠外周血内TGF-β1的含量.结果 A、C、D、F组小鼠外周血液有微弱的TGF-β1阳性表达.与A、C、D、F组相比,B、E组的TGF-β1 表达显著增多(P<0.01).另外,与B组相比,E组TGF-β1阳性表达明显减轻.结论 TGF-β1是产生运动性外周疲劳的主要机制之一,参附注射液可能通过调节血液中的TGF-β1的表达,来延缓或消除运动性疲劳.     

益气滋肾清利法对CPN大鼠模型肾组织TGF-β_1表达的影响

目的:探讨益气滋肾清利法对慢性肾盂肾炎(CPN)大鼠模型肾组织转化生长因子β1(TGFβ-1)表达的影响。方法:通过短暂结扎大鼠单侧输尿管和膀胱内接种E.coli O111B4的方法复制CPN模型,分为A组(正常组)、B组(模型组)、C组(中药组)和D组(西药组)。灌胃治疗,其中A、B组生理盐水1mL,C组益气滋肾清利方水煎剂1mL,D组左旋氧氟沙星生理盐水1mL,每日1次,共60天;60天后免疫组化检测肾组织TGFβ-1的表达及RT-PCR检测TGFβ-1mRNA的含量。结果:免疫组化及RT-PCR均显示各组TGFβ-1mRNA表达均较正常组增加,B组明显高于C和D组(P<0.01),但C组与D组无明显差异。结论:益气滋肾清利法可抑制慢性肾盂肾炎(CPN)大鼠模型肾组织TGFβ-1的表达。     

岗梅根化学成分的研究

目的研究岗梅Ilexasprella根的化学成分。方法采用硅胶、凝胶和RP-HPLC等色谱方法对岗梅根的化学成分进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果从岗梅根的70%乙醇提取物中分离得到10个三萜及其皂苷类化合物,分别鉴定为28-O-β-D-glucopyranosyl pomolic acid(1)、冬青苷XXIX(ilexo-side XXIX,2)、冬青苷B(ilexoside B,3)、刺参苷F(monepaloside F,4)、长圆冬青苷B(oblonganoside B,5)、3-O-β-D-xylopyranosyl-3β-hydroxyurs-12,18(19)-dien-28-oic acid 28-β-D-glucopyranosyl ester(6)、毛冬青皂苷B(ilexsapo-nin B,7)、randialic acid B(8)、毛冬青酸(ilexolic acid,9)和19-去氢乌索酸(19-dehydroursolic acid,10)。结论化合物1~9均为首次从该植物中分离得到。     

三草降压汤对自发性高血压大鼠心脏NF-κB/NLRP3/IL-1β信号通路的影响

目的观察三草降压汤(Sancao Jianya decoction,SCD)对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)心脏组织的NF-κB/NLRP3/IL-1β通路相关因子的表达。方法 50只雄性SHR大鼠,随机分为模型组、卡托普利组、SCD高剂量组、SCD中剂量组、SCD低剂量组,10只WKY大鼠作为对照组,分别灌胃给药8周后取材。检测各组大鼠动脉压、左心室重量指数(left ventricular mass index, LVMI)、心脏组织病理变化;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β, IL-1β)含量;Western blot法检测心脏组织中核因子κB(nuclear factorκB, NF-κB)、NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3, NLRP3)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1, Caspase-1)、IL-1β蛋白表达;荧光定量PCR法检测NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、IL-1βmRNA的含量。结果与空白组相比较,模型组血压、LVMI、心肌病理损害、TNF-α、IL-1β含量、NF-κB/NLRP3/IL-1β通路相关因子的表达均显著增加(P0.05);与模型组相比,SCD高、中剂量组、卡托普利组均出现不同程度的血压下降、LVMI减低、心肌病理损害减轻(P0.05),各治疗组大鼠均出现不同程度TNF-α、IL-1β含量、NF-κB/NLRP3/IL-1β通路相关因子的表达下降。结论 SCD可调节NF-κB/NLRP3/IL-1β通路相关因子的表达、抑制炎症反应、保护高血压心脏损害,该通路可能是其发挥降压作用的分子学机制。     

竹根七化学成分的研究

目的研究竹根七Tupistra chinensis Baker的化学成分。方法竹根七60%乙醇提取物采用D101大孔树脂、硅胶、反相C_(18)、SephadexLH-20和半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到15个化合物,分别鉴定为tupichigenin B (1)、1β, 2β, 3β, 4β, 5β, 7α-hexahydroxy-spirost-25(27)-ene-6-one (2)、spirost-25 (27)-ene-1β, 2β, 3β, 4β, 5β, 6β, 7α-heptol(3)、(20S, 22R)-3β,5β-diol-spirost-25(27)-en-5-O-β-D-glucopyranoside (4)、3-epiruscogenin (5)、ranmogenin A (6)、5β-furost-Δ25(27)-en-1β, 2β, 3β, 4β, 5β, 7α, 22ξ, 26-octaol-6-one-26-O-β-D-glucopyranoside (7)、tupisteroide B (8)、25(R)-1β-hydroxy-spirost-5-en-3α-yl-O-β-D-glucopyranoside (9)、aspidoside A (10)、齐墩果酸(11)、1β, 2β, 3β, 4β, 5β, 7α-hexahydroxy-spirost-25(27)-ene-6-one衍生物Ⅱ(12)、tupichinin A(13)、β-豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(14)、3-epi-diosgenin-3-β-D-glucopyranoside (15)。结论化合物15为首次从开口箭属植物中分离得到,化合物9～12为首次从该植物中分离得到。     

豨莶草醇提物调控TLRs/NF-κB通路及NLRP3炎症小体干预痛风性关节炎的机制研究

目的探讨豨莶草醇提物通过Toll样受体(TLRs)/核因子κB(NF-κB)信号通路及NOD样受体蛋白3(NLRP3)干预痛风性关节炎(GA)的作用机制。方法采用脂多糖(LPS)联合尿酸钠结晶(MSU)刺激急性单核细胞白血病细胞(THP-1)源性巨噬细胞,建立GA炎症细胞模型;以豨莶草醇提物300、200、100μg·mL^-1不同浓度进行干预。采用CCK-8法检测细胞活力;ELISA法检测细胞上清中白细胞介素-1β(IL-1β)的水平;qRT-PCR法检测TLRs/NF-κB信号通路相关基因(TLR2、TLR4、MYD88、IRAK-1、TRAF-6、TAK-1、NF-κB、IL-1β)及NLRP3 m RNA的表达;Western Blot法检测NF-κB、NLRP3、IL-1β蛋白的表达。结果与对照组比较,豨莶草醇提物300、200、100μg·mL^-1浓度对THP-1巨噬细胞活力均无明显影响(P>0.05);模型组的IL-1β水平明显升高(P<0.05),TLRs/NF-κB信号通路相关基因及NLRP3 mRNA表达水平均明显上调(P<0.05),NF-κB、NLRP3、IL-1β蛋白表达水平明显上调(P<0.05)。与模型组比较,豨莶草醇提物300、200、100μg·mL^-1浓度组的细胞IL-1β水平明显降低(P<0.05),TLRs/NF-κB信号通路相关基因及NLRP3 mRNA表达水平均不同程度下调(P<0.05),NF-κB、NLRP3及IL-1β蛋白表达水平亦不同程度下调(P<0.05)。结论豨莶草醇提物可能通过调控TLRs/NF-κB信号通路及抑制NLRP3炎症小体活化,减少炎症因子的产生与释放,进而减轻痛风性炎症反应。     

补脾益气方对哮喘模型大鼠肺组织核因子KappaB抑制剂的激酶β表达的影响

目的:探讨补脾益气方对哮喘模型大鼠肺组织核因子Kappa B(NF-κB)抑制剂的激酶β(the kinase of nuclear fac-tor-kappa B inhibitor β,IKKβ)的调控作用及对白介素8(IL-8)含量的影响。方法:SPF级雄性Wistar大鼠随机分为对照组(A)、哮喘组(B)、补脾益气方治疗组(C)。卵蛋白致敏和激发复制出哮喘模型,按照10 g.kg-1体重给予C组大鼠中药ig 1次/d,共21d。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织IKKβ的mRNA表达水平,采用免疫组化检测肺组织IKKβ的蛋白表达水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液IL-8的含量。结果:①肺组织IKKβ的mRNA的表达:B组显著高于A组(P<0.01);C组显著低于B组(P<0.05)。②肺组织IKKβ的蛋白表达水平:B组显著高于A组(P<0.01);C组显著低于B组(P<0.01)。③肺泡灌洗液IL-8含量:B组显著高于A组(P<0.01);C组显著低于B组(P<0.01)。结论:哮喘组大鼠肺组织IKKβmRNA和蛋白的表达水平显著增强,补脾益气方能有效抑制其表达,降低肺泡灌洗液IL-8含量,证明补脾益气方能有效抑制IKKβ信号转导的途径。     

补肾壮骨胶囊对骨性关节炎患者关节液IL-1β和TNF-α水平的影响

目的:探讨补肾壮骨胶囊对骨性关节炎(OA)患者关节液中IL-1β和TNF-α水平的影响。方法:50例患者随机分为两组,每组25例,A组给予补肾壮骨胶囊和硫酸氨基葡萄糖胶囊口服,B组给予硫酸氨基葡萄糖口服,同时选择25名健康对照者(C组)。分别检测患者在用药前及用药1个疗程后IL-1β和TNF-α的水平,以及C组IL-1β和TNF-α的水平。结果:用药前A、B两组患者IL-1β和TNF-α水平与C组比较均增高,有显著性差异(P<0.05),A组与B组之间无显著性差异(P>0.05)。用药1个疗程后,A、B两组患者IL-1β和TNF-α的水平均有所下降,A组较B组下降明显(P<0.05)。结论:补肾壮骨胶囊能有效降低OA患者关节液中IL-1β和TNF-α水平,提高疗效。     

益气化痰解毒中药对脂肪肝大鼠肝组织NF-κB活性的影响

目的:探讨益气化痰解毒中药治疗脂肪肝药效学机制。方法:采用高脂饮食加白酒灌胃建立大鼠脂肪性肝炎模型,以东宝肝泰作对照,观察益气化痰解毒中药对脂肪肝大鼠肝组织核因子-κB(NF-κB)活性变化、肿瘤坏死因子(TNFa)、转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。结果:大鼠第10周出现严重的内毒素血症;模型组大鼠比正常组NF-κB、TNFa、TGF-β1水平均明显升高(P<0.01);中药能抑制NF-κB活化,降低TNFa、TGF-β1的含量,均明显优于东宝肝泰(P<0.05)。结论:益气化痰解毒中药具有较强抗脂肪性肝炎效应,其作用机制与其抑制NF-κB过度活化有关。     

补中益气汤灌胃大鼠血清对TGF-β1介导A549细胞MRP1表达影响随机平行对照研究

[目的]观测补中益气汤灌胃大鼠血清对TGF-β1介导A549细胞MRP1表达影响。[方法]血清药理学法,制备灌胃大鼠血清:使用随机平行对照方法,将20只SPF级SD大鼠,按随机数字表法分为2组,10只/组,补中益气汤组以2m L生药量5.67g/kg灌胃,空白血清组等量生理盐水,1次/d,连续3d,末次灌胃1h后,腹主动脉取血,提取上清。血清干预:取人肺腺癌A549细胞,接种于培养瓶中,37℃,5%CO2培养箱中培养;细胞密度达70%,饥饿12h,空白组(A组)加空白血清;TGF-β1组(B组)加空白血清及TGF-β1;补中益气汤+TGF-β1组(C组)加补中益气汤血清及TGF-β1,培养48h。观测MRP1蛋白表达(免疫细胞化学法和Western blot法)、MRP1基因表达(Realtime PCR法)。[结果]MRP1主要在细胞膜表达,各组细胞中均可见棕黄色阳性产物表达,TGF-β1组(B组)和补中益气汤+TGF-β1组(C组)棕黄色颗粒阳性表达量均高于空白组(P0.05);补中益气汤+TGF-β1组(C组)低于TGF-β1组(B组)(P0.05);Western blot结果与组化结果一致。Realtime PCR结果为TGF-β1组(B组)和补中益气汤+TGF-β1组(C组)基因表达水平均高于空白组(P0.05);补中益气汤+TGF-β1组(C组)低于TGF-β1组(B组)(P0.05)。[结论]补中益气汤血清干预TGF-β1诱导A549细胞EMT过程,细胞中MRP1在蛋白和基因水平均降低。     

消脂汤对FFA诱导NASH细胞模型的影响及其相关机制

目的:探讨消脂汤对游离脂肪酸(FFA)诱导的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)细胞模型的作用及机制。方法:用0.5μmol·L-1FFA诱导Hep G2细胞建立NASH细胞模型,用消脂汤及非诺贝特干预NASH细胞模型;油红O染色观察细胞内脂滴含量;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测核转录因子-κB(NF-κB)p65,IκB激酶(IKKβ),IκB磷酸化激酶[Phospho-IKKα/β(Ser176/180)],胰岛素受体底物1磷酸化蛋白[Phospho-IRS-1(Ser~(307))],胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白表达。结果:FFA刺激24 h后,模型组内脂滴含量,细胞上清液中TNF-α,IL-6含量高于正常组(P0.01),IKKβ,p-IKKα/β(Ser176/180),p-IRS-1(Ser~(307)),NF-κB(核蛋白)表达明显增加(P0.01),IRS-1蛋白表达减少(P0.05),各给药组p-IKKα/β(Ser176/180),p-IRS-1(Ser~(307)),NF-κB p65(核蛋白)表达减少(P0.01),尤其是消脂汤高浓度组较非诺贝特p-IKKα/β(Ser176/180),p-IRS-1(Ser~(307))蛋白表达显著减少(P0.01),各给药组IRS-1蛋白表达明显增加(P0.05)。结论:消脂汤可改善FFA诱导的NASH细胞模型中脂质沉积及炎症反应,其机制可能与抑制细胞内IKKα/β,IRS-1 Ser~(307)的磷酸化及IKKβ,NF-κB p65(核蛋白)表达有关。     

益肾固本膏方对肾阳虚哮喘模型大鼠肾上腺皮质类固醇合成酶及糖皮质激素受体亚型的影响

目的:研究益肾固本膏方对肾阳虚哮喘模型大鼠皮质类固醇合成酶11β-羟基类固醇脱氢酶1[hydroxysteroid(11-beta)dehydrogenase 1,HSD11B1)]、11β-羟化酶1(CYP11B1)及糖皮质激素受体亚型GRα、GRβ的影响.方法:将40只大鼠随机分为空白对照组,模型对照组,益肾固本膏...     

荔枝核总黄酮对结肠癌细胞株HT29的抑制作用及相关机制

目的:探讨不同浓度的荔枝核总黄酮(total flavone of Litchi Semen,TFLS)对人的结直肠癌细胞株HT29的体外抑制作用及对该细胞系中核转录因子-κB(Nuclear factor-kappa B,NF-κB);Toll样受体4(Toll-like receptors,TLR4);白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL~(-1)β)mRNA和蛋白表达的影响。方法:体外培养HT29细胞株,给予TFL(0,0.16,0.32,0.64,1.28,2.56 g·L~(-1))干预,给药后24,48,72 h,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法分别检测TFLS对HT29增殖的影响,采用逆转录PCR检测各组NF-κB,TLR4,IL~(-1)βmRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NF-κB,TLR4,IL~(-1)β蛋白表达情况。结果:MTT检测结果显示TFL对HT29增殖呈良好的时间依赖性和剂量依赖性,以作用72 h,质量浓度为2.56 g·L~(-1)抑制率最高。与空白组比较,TFL组作用72 h后,HT29细胞系中NF-κB,IL~(-1)β基因和蛋白表达水平均降低,尤以TFL 0.64,2.56 g·L~(-1)组较明显(P0.05)。TFL组TLR4基因表达较空白组差异明显(P0.05),蛋白表达差异不明显。结论:TFL在体外对HT29细胞系的增殖具有抑制作用,NF-κB可能为TFL抑制HT29细胞系增殖的关键因子。     

绣球防风化学成分的研究

目的对绣球防风Leucas ciliata的化学成分进行研究。方法利用正相硅胶、RP-18柱色谱、葡聚糖凝胶SephadexLH-20等方法进行分离纯化,根据波谱数据鉴定化合物的结构。结果从绣球防风乙醇提取物中分离得到12个化合物,通过光谱数据分析,分别鉴定为苜蓿素(1)、crisilineol(2)、胡萝卜苷(3)、stigmast-5-ene-11-ol-3-O-β-glucoside(4)、5,7-dimethoxy-2-methyl-4-chromanone(5)、3′,5′,5,7-tetramethoxy-4′-O-β-glucoside flavone(6)、5-hydroxy-3′,4′-dimethoxy-7-O-β-glucoside flavone(7)、acteoside(8)、3,4-dihydroxy-β-phenylethoxy-O-α-L-arabinopyranosyl-(1′′′′→2″)-α-L-rhamnopyranosyl-(1′′′→3″)-4″-O-caffeoyl-β-D-glucopyranoside(9)、3-hydroxy-4-methoxy-β-phenylethoxy-O-α-L-arabino-pyranosyl-(1′′′′→6″)-α-L-rhamnopyranosyl-(1′″→3″)-4″-O-caffeoyl-β-D-glucopyranoside(10)、leucasin A(11A)和leucasin B(11B)。结论化合物11A和11B为一对差向异构体,并且为新化合物,其余10个化合物均为首次从该属植物中分离得到。     

麝香乌龙丸对佐剂关节炎大鼠滑膜衬里层病理形态及bFGF、TGF - β1表达的影响

目的 观察麝香乌龙丸对佐剂关节炎(AA)大鼠滑膜衬里层病理形态及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子β1( TGF -β1)表达水平的影响,探讨麝香乌龙丸治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是否与调节bFGF、TGF -β1水平有关.方法 将健康Wistar大鼠30只,随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、麝香乌龙丸组(C组),采用弗氏完全佐剂法建立模型,麝香乌龙丸灌胃1周后,HE染色、光镜下观察各组滑膜衬里层病理变化、衬里层滑膜细胞层数,免疫组织化学法检测各组滑膜衬里层bFGF、TGF-β1表达.结果 C组光镜下衬里层病理改变,滑膜细胞增生较模型组减轻,C组衬里层细胞增生与B组比较明显下降(P＜0.05);B组bFGF、TGF -β1表达明显高于A组(P＜0.05),C组bFGF、TGF-β1表达较B组降低(P＜0.05).结论 麝香乌龙丸治疗类风湿关节炎的机理可能与调节bFGF、TGF-β1的表达水平有关.