针刺对兔膝骨性关节炎软骨TGF-β1、TNFα的影响作用

目的:探讨针刺对兔膝骨性关节炎软骨细胞因子TGF-β1、TNFα的影响作用。方法:将新西兰大白兔30只随机分为2组,即造模组,正常组。正常组不予任何处理,造模组建立左膝骨性关节炎模型,造模成功后再随机分3组,即模型组,针刺组,西乐葆组,模型组不作任何处理,针刺组行针刺治疗,西乐葆组予西乐葆灌胃给药。实验结束后处死全部新西兰兔,取左膝股骨内侧髁关节软骨和关节液进行观察和检测。结果:模型组兔膝关节软骨的Mankin′s评分明显升高(P<0.01),针刺组和西乐葆组Mankin′s评分降低(P<0.01),两者比较差异无显著性意义(P>0.05)。ELISA检测结果显示:模型组关节液中TNFα水平明显升高(P<0.01),TGF-β1水平明显降低(P<0.01)。与模型组相比,针刺组和西乐葆组软骨细胞中TNFα的水平均降低(P<0.01),而针刺组TGF-β1水平则明显升高(P<0.01)。结论:针刺可通过降低关节液中TNFα和升高TGF-β1的水平而发挥对膝骨性关节炎的防治作用。     

壮骨1号方对大鼠骨性关节炎的抗损伤作用

目的:观察壮骨1号方对大鼠骨性关节炎的抗损伤作用及病理形态学的影响。方法:SD大鼠,以0.05ml(1.6U)/关节剂量,双侧膝关节注射4%木瓜蛋白酶-泊洛沙姆温敏型原位凝胶控释剂复制大鼠骨性关节炎模型。选成功模型鼠48只,随机分为骨性关节炎模型组、壮骨1号方2.20 g/kg、1.10g/kg、0.55 g/kg组、壮骨关节丸组和氨基葡萄糖组,另设正常对照组,每组8只,按设定剂量每天灌胃1次,连续治疗8周。测定关节液前列腺素E2(PGE2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;测定关节软骨诱导型一氧化氮合成酶(iNOs)mRNA、转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达;观察关节软骨病理组织学变化并进行病理损伤评价。结果:模型组大鼠关节液PGE2和TNF-α含量明显升高(P<0.01),治疗8周后,壮骨1号方2.20、1.10 g/kg组关节液PGE2和TNF-α含量明显降低(P<0.01)。模型组大鼠软骨iNOs mRNA、TGF-β1 mRNA表达明显增强(P<0.05或P<0.01),壮骨1号方2.20,1.10,0.55 g/kg治疗8周后,iNOs mRNA、TGF-β1 mRNA表达均减弱(P<0.05或P<0.01)。模型组大鼠关节软骨病理损伤明显,病理总评分为2.75±1.03,用壮骨1号方2.20,1.10g/kg治疗8周后,关节软骨损伤明显减轻,病理总评分分别为1.62±0.91和1.87±0.64(P<0.05或P<0.01)。结论:壮骨1号方具有一定的抗软骨损伤作用,能延缓软骨退行性变的进程,这种抗损伤作用可能与通过壮骨1号方的补益肝肾功能,调节PGE2、TNF-α、iNOS、TGF-β1的作用相关。     

蠲痹胶囊醇提工艺对大鼠骨性关节炎模型的影响

目的比较醇提工艺和水煎工艺生产的蠲痹胶囊(熟地黄、肉苁蓉、骨碎补等)防治大鼠膝骨性关节炎的差异。方法 90只SD大鼠,除空白组10只外,其余采用4%木瓜蛋白酶制备膝骨性关节炎模型,随机分为模型组,壮骨关节丸组,水煎工艺和醇提工艺蠲痹胶囊的低、中、高剂量组。给药30 d后,各组大鼠称重,检测血清及关节腔液中环氧化酶-2(COX-2)、一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)水平;病理学检查取各组胫骨平台关节软骨,分别进行HE、AB-PAS染色及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)免疫组化染色,观察各组关节软骨形态及炎性因子表达。结果醇提工艺蠲痹胶囊比水煎工艺更能显著降低膝骨性关节炎和大鼠血清及关节液中COX-2、NO、i NOS及TNF-α、IL-1β含有量,延缓软骨降解。结论蠲痹胶囊醇提工艺取代水煎工艺是合理的。     

复方补筋片对肾虚血瘀型膝骨性关节炎IL-1β、TNF-α干预作用的研究

目的:观察复方补筋片对肾虚血瘀型膝骨性关节炎患者血清和关节液中IL-1β、TNF-α水平的影响,探讨复方补筋片的作用机理,为本院制剂的推广与开发应用提供科学依据。方法:收集漳州市中医院2010年6月～2011年6月骨伤科门诊和康复科门诊就诊符合纳入条件的肾虚血瘀型膝骨性关节炎患者,共60例。将纳入患者用随机数字表分为两组,治疗组口服漳州市中医院本院制剂复方补筋片;对照组口服壮骨关节丸组,治疗周期均为4周,所有患者分别在治疗前及治疗周期结束1周内测定血清和关节液中IL-1β、TNF-α含量。结果:1.在降低肾虚血瘀型膝骨性关节炎患者血清和关节液中IL-1β、TNF-α含量比较,(P0.05),有差异性,治疗组疗效优于对照组。2.治疗组与对照组在临床疗效方面比较,(P0.05),有差异性,治疗组疗效优于对照组。结论:复方补筋片可能通过降低关节滑液中IL-1β、TNF-α含量,从而保护膝关节软骨及软骨下骨、改善膝骨性关节炎患者的症状。     

牛膝总皂苷对兔膝骨关节炎软骨组织形态变化及关节液中IL-1β、TGF-β1含量的影响

目的：观察牛膝总皂苷对兔膝骨关节炎软骨组织形态变化及关节液中细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)和转化生长因子β1(TGF-β1)含量的影响。方法：将36只新西兰兔,随机分为空白组、模型组、硫酸氨基葡萄糖组(60 mg?kg-1)、牛膝总皂苷高中低(200,100, 50 mg?kg-1)剂量组。采用改良Hulth法复制兔膝骨关节炎模型。药物干预2个月后,采用ELISA法检测各组兔膝关节液中IL-1β、TGF-β1的水平,分别于光镜及透射电镜下观察各组兔关节软骨的组织形态学变化。结果：与空白组比较,模型组兔膝关节液中IL-1β的含量明显增高(P<0.05),TGF-β1的含量明显降低(P<0.05);与模型组比较,各给药组IL-1β的含量明显降低(P<0.05),TGF-β1的含量显著增高(P<0.05)。光镜下观察关节软骨组织形态变化,结果表明TSA呈剂量依赖的抑制了软骨组织的退变。各组兔KOA软骨组织结构Mankin评分的结果表明,与空白组比较,模型组评分明显增加(P<0.05);与模型组比较,各给药组评分明显减小(P<0.05)。透射电镜下观察关节软骨细胞形态学变化,结果表明TSA具有呈剂量依赖的保护软骨细胞的作用。结论：TSA能抑制细胞因子IL-1β的表达,提高转化生长因子TGF-β1的表达,具有保护软骨组织缓解软骨退变的作用。     

桉油β-环糊精包合物对膝骨性关节炎NO及iNOs影响的实验研究

目的:通过观察桉油β-环糊精包合物对膝骨性关节炎血清及关节液NO及关节软骨iNOs影响的实验研究,探讨其治疗作用机理及膝骨性关节炎的发病机制。方法:按照Hulth造模方法将30只新西兰大白兔造成膝骨性关节炎模型,并随机分为正常组、模型组、壮骨关节丸对照组、桉油β-环糊精包合物治疗组,给药8周后测定血清、关节液一氧化氮(NO)含量,动物处死后对软骨及滑膜组织的匀浆进行一氧化氮合酶(iNOS)的测定。结果:显示桉油β-环糊精包合物治疗组关节液NO含量降低的程度与壮骨关节丸对照组比较,差异显著(P<0.05),软骨及滑膜组织中iNOS的含量同对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:表明桉油β-环糊精包合物通过抑制iNOS的表达,降低NO含量,减少软骨细胞凋亡,促进软骨基质合成及抑制其分解,抑制滑膜炎症,延缓关节软骨退变,促进了关节软骨的修复。     

补肾中药对膝骨关节炎软骨TGF-β1表达的影响

目的:探讨补肾中药对膝骨关节炎软骨TGF-β1表达的影响.方法:48只雌性SD大鼠,造模成功后,随机分为4组:中药组、芬必得组、模型组、正常对照组.2、4周分别处死6只,原位杂交法检测膝骨关节炎关节软骨TGF-β1表达.结果:中药组TGF-β1表达明显强于其他组.结论:通过上调TGF-β1表达,补肾中药具有一定修复和延缓膝骨关节炎关节软骨退变的作用.     

荣骨定痛膏对骨性关节炎大鼠IL-1β、NO及氧自由基代谢的影响

目的:探讨荣骨定痛膏对骨性关节炎模型大鼠白介素1β(IL-1β)、一氧化氮(NO)及氧自由基代谢的影响。方法:采用注射4%木瓜蛋白酶复制骨性关节炎大鼠模型,通过观测膝关节功能,血清IL-1β、关节液NO与NOS、关节组织氧自由基代谢等指标,探讨荣骨定痛膏对骨性关节炎的治疗作用及作用机制。结果:荣骨定痛膏可明显减小骨性关节炎大鼠关节滑膜肿胀厚度,扩大膝关节的活动范围,降低血清IL-1β、关节液NO及NOS的水平,提高滑膜组织中SOD的活性而降低MDA的含量。结论:荣骨定痛膏对骨性关节炎模型大鼠具有一定治疗作用,抑制IL-1β诱导的NO的产生而发挥抗氧化、抑制滑膜细胞的凋亡是其治疗骨性关节炎的作用机制之一。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨阳和汤对兔膝骨关节炎的影响

目的基于Wnt/β-catenin信号通路探讨阳和汤对兔膝骨关节炎模型的作用机制。方法将4～6月龄新西兰兔随机分为空白组、模型组、西乐葆组和阳和汤组,每组6只。除空白组外,其余各组膝关节腔内注射木瓜蛋白酶造模。造模成功后,阳和汤组予阳和汤灌胃,西乐葆组予西乐葆灌胃,空白组和模型组予生理盐水灌胃,每日1次,连续给药2周。灌胃前后分别测量4组兔膝关节皮温、周径,进行膝关节Lequesne MG评分。停药1周后采集标本,ELISA法检测关节液中IL-1β、TNF-α、MMP-13含量;光镜下观察关节软骨病理改变并进行Mankin's评分;免疫组化检测软骨组织Wnt4、β-catenin表达情况。结果与空白组比较,模型组膝关节皮温、周径和Lequesne MG评分,关节软骨病理切片Mankin's评分及Wnt4、β-catenin表达,关节液IL-1β、TNF-α、MMP-13含量均明显升高(P0.05);与模型组比较,阳和汤组膝关节周径、Lequesne MG评分,软骨病理切片Mankin's评分及Wnt4、β-catenin表达,关节液IL-1β、TNF-α、MMP-13含量均明显降低(P0.05)。结论阳和汤能抑制骨关节炎炎症反应,修复软骨损伤,其机制可能与降低炎症因子TNF-α和IL-1β的表达,抑制Wnt/β-catenin信号通路和改善MMP-13有关。     

腰痛宁胶囊对腰椎骨性关节炎患者血清IL-1β、TGF-β1的影响

目的观察腰痛宁胶囊对腰椎骨性关节炎患者血清中白细胞介素-1β(IL-1β)及转化生长因子-β1(TGF-β1)水平的影响,从细胞因子角度探究该药的作用机理。方法采用随机、双盲、对照研究方法,将108例患者,分为治疗A组(腰痛宁胶囊4粒组),治疗B组(腰痛宁胶囊6粒组)以及对照组(痹痛宁胶囊组),每组36例;收集治疗前后患者血清,采用酶联免疫吸附法检测IL-1β、TGF-β1水平变化。结果三组治疗后以改良日本整形外科学会(JOA)评分标准均较治疗前均升高;治疗后,三组患者的IL-1β水平降低,TGF-β1水平升高,且治疗B组作用较治疗A组和对照组明显,差异有统计学意义(P<0.01)。而治疗A组与对照组的变化幅度接近,差异无统计学意义(P>0.05)。结论腰痛宁胶囊可以通过抑制患者IL-1β的表达,升高TGF-β1的水平,达到减轻炎性反应,这可能是该药治疗腰椎骨性关节炎的作用机制之一。     

壮骨颗粒对退变性膝骨性关节炎关节液中IL-1β、TNF-α水平的干预作用

目的 探讨壮骨颗粒对退变性膝骨性关节炎患者关节液中自细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响.方法 选择期退变性膝骨性关节炎完成实验的60例患者,在知情同意下,按Doll氏分组法分为壮骨颗粒组30例、硫酸氨基葡萄糖组15例、透明质酸钠组15例,各组分别给药4周,比较治疗前后关节液中IL-1β、TNF-α水平的变化.结果 治疗后,壮骨颗粒组膝关节液中IL-1β、TNF-α水平明显降低,与硫酸氨基葡萄糖组、透明质酸钠组比较差异有统计学意义.结论 壮骨颗粒对退变性膝骨性关节炎膝关节中IL-1β、TNF-d水平有影响.     

仙仲注射液对兔早期膝骨性关节炎组织形态学改变及关节滑液白介素-1β、前列腺素E2的影响

[目的]评价仙仲注射液对兔早期膝骨性关节炎组织形态学改变及关节滑液白介素-1β(IL-1β)、前列腺素E2(PGE2的影响.[方法] 120只日本大耳白兔随机分为空白组、模型组(生理盐水每周0.5ml,1次)、海诺特组(海诺特每周0.5mL,1次)、仙仲Ⅰ、Ⅱ组(仙仲注射液0.5 mL/次,每周1次和2次),均为关节腔给药.给药8周后观察滑膜、软骨的阿尼林蓝(Mallory)染色组织形态学病理改变,并检测关节滑液白介素-1β和前列腺素E2含量.[结果]组织形态学变化:Mallory染色见海诺特组和仙仲Ⅰ组全层未钙化,软骨蓝绿染色胶原保存完整;滑膜及软骨软骨组织学改变评分标准(Makin)评分表明海诺特组效果与仙仲Ⅰ组相当(P0.05),仙仲Ⅰ、Ⅱ组及海诺特组与模型组相比均有显著改善(P<0.05).关节液中白介素-1β(白介素-1β)、前列腺素E2(前列腺素E2):海诺特组及仙仲Ⅰ、ⅡII组均降低(PM).05).[结论]仙仲注射液对早期膝骨性关节炎关节退变具有-定修护作用.     

肾康丸对高糖培养的大鼠系膜细胞TGF-β1及FN的影响

目的:观察肾康丸对高糖培养大鼠系膜细胞(MC)分泌转化生长因子(TGF-β1,及纤连蛋白(FN)分泌mRNA表达的影响,探讨其防治DN的分子机制。方法:体外培养大鼠MC,将细胞分为6组:低糖组、高糖组、正常血清组、开搏通组、肾康丸高、低剂量组。培养72 h后,采用双抗夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测高糖对MC分泌TGF-β1和FN的影响;采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)法检测高糖对TGF-β1和FN mRNA的表达的影响;同时研究药物血清对上述指标的影响。结果:高糖可以促进MC分泌TGF-β1和FN,并提高MC中TGF-β1和FN mR-NA的表达,肾康丸可以明显抑制上述作用。结论:肾康丸可以通过TGF-β1途径抑制MC基质分泌。     

壮骨颗粒对兔膝骨性关节炎白介素-1和肿瘤坏死因子的影响

目的:观察壮骨颗粒对兔膝骨性关节炎中白介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子(TNF)表达水平的影响,探讨其治疗骨性关节炎的机制。方法:将50只兔随机分为4组,采用Hulth法造成骨关节炎的病理模型,以壮骨颗粒浓缩液喂食饲养,于治疗后3周、6周分别抽取关节液,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),分别测定兔膝关节液中IL-1及TNF表达水平。结果:治疗后3周,膝关节关节液中即可明显检测到IL-1及TNF的表达,各治疗组数值与对照组比较均见下降,3周、6周时下降差异有统计学意义。结论:壮骨颗粒能降低骨性关节炎中IL-1及TNF的表达水平,壮骨颗粒可能通过影响IL-1及TNF等细胞因子而对骨性关节炎起到治疗作用。     

固本活血壮骨颗粒对糖尿病大鼠BMD及骨组织IL-1、TGF-β1表达的影响

目的:观察固本活血壮骨颗粒对糖尿病大鼠模型BMD及骨组织IL-1、TGF-β1表达的影响。方法:6月龄SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性药物对照组、固本活血壮骨颗粒大、中、小剂量组。除正常对照组外,其余各组均采用左下腹腔内注射新鲜配制1%链脲佐菌素STZ(柠檬酸缓冲液,p H值4.4)65 mg/kg体重造模。各组予相应药物及生理盐水灌胃12周。结果:固本活血壮骨颗粒可提高糖尿病模型BMD水平,促进成骨细胞增殖因子TGF-β1表达,抑制破骨细胞增殖因子IL-1表达。结论:固本活血壮骨颗粒可以通过调节成骨细胞增殖因子TGF-β1和破骨细胞增殖因子IL-1的表达,来促进骨形成,减少骨吸收,提高骨质量,从而达到防治糖尿病性骨质疏松症的效果。     

基于TGF-β1及其Smad信号转导探讨膝骨关节炎大鼠肺功能下降的机制

目的观察膝骨关节炎(Knee osteoarthritis,KOA)大鼠肺功能变化,及肺组织TGF-β1,Smad-4,7表达量的变化,探讨KOA大鼠肺功能下降的机制。方法 20只Wistar大鼠按随机数字表法分为正常对照组(NC)和模型对照组(MC),每组各10只。MC组大鼠采用关节腔注射木瓜蛋白酶和L-半胱氨酸方法制成KOA大鼠模型。用动物肺功能仪检测大鼠肺功能,采用免疫组化法检测肺组织TGF-β1,Smad-4,Smad-7,采用ELISA法检测白细胞介素(Interleukin,IL)-17,IL-4。结果①与NC组比较,KOA大鼠关节软骨Mankin评分明显升高,FEV1、FEF50、FEF75、PEF明显降低,TGF-β1,Smad-4,IL-17表达量明显升高,Smad-7,IL-4明显降低(P<0.01或P<0.05)。②Spearman相关分析结果显示,肺功能参数FEV1与TGF-β1、Smad-4、Mankin评分呈明显负相关,FEF50与Smad-4呈明显负相关性,FEF75与TGF-β1、Mankin评分呈明显负相关,PEF与Smad-4呈负相关,Mankin评分与TGF-β1、Smad-4、Smad-7、IL-17、IL-4呈显著相关性,肺指数与TGF-β1、Smad-4呈明显正相关,与Smad-7、IL-4呈明显负相关(P<0.05或P<0.01)。结论KOA大鼠在发生关节软骨病变的同时,伴有肺功能下降。其机制可能是TGF-β1/Smads信号通路异常表达,致炎因子上调,抑炎因子下调,引发免疫失衡,加重炎症反应,介导软骨与肺组织损伤,最终导致肺功能下降。     

健骨伸筋汤对大鼠膝关节炎关节软骨病理改变及关节液IL-1β及NO含量的影响

目的观察健骨伸筋汤对大鼠膝关节炎关节软骨病理改变及关节液IL-1β及NO含量的影响。方法 45只雌性SD大鼠随机分为5组,每组9只。通过改良的Hulth法制成肾虚型大鼠的膝骨性关节炎模型,2周后,对空白对照组、模型组生理盐水灌胃;治疗组分低、高浓度进行中药灌胃,于灌胃后第7周、13周各组随机挑选一半观察大鼠膝关节炎关节软骨病理改变及关节液IL-1β及NO含量的变化。结果造模后大鼠膝关节软骨评分远高于空白对照组,软骨破坏严重,差异有统计学意义(P0.01);经治疗后,评分均有所降低,IL-1β和N O含量有所改善,说明治疗对膝关节软骨有修复作用,健骨伸筋汤低剂量组、高剂量组与壮骨关节丸组比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论健骨伸筋汤可降低IL-1β和NO含量,有一定的关节软骨保护作用,可一定程度地延缓膝骨关节炎动物模型软骨的退变。     

中药活脑康对脑缺血大鼠脑组织TGF-β1蛋白表达影响的实验研究

目的：探讨脑缺血大鼠脑组织TGF-β1的变化及中药活脑康的保护作用。方法：应用免疫组化方法，测定正常对照组（A）、假手术组（B）、模型组（C）、活脑康治疗组（D）、步长脑心通组（E）对TGF-β1表达的影响。结果：与A、B组比较，C、D、E组TGF-β1表达增多（P〈0．001）。结论：活脑康能提高TGF-β1蛋白表达，减少脑缺血区细胞凋亡的发生。     

养阴润目丸对干眼症大鼠结膜上皮细胞IL-1β、ICAM-1、p-p38MAPK的影响

目的:探讨养阴润目丸对干眼症大鼠结膜上皮细胞白介素-1β(IL-1β)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶p38抗体(p-p38MAPK)的影响。方法:将健康雄性SD大鼠60只随机分成正常组、假手术组、养阴润目丸组、新泪然组、模型组,分别用A、B、C、D、E组表示,每组12只。A组不作处理;B组只切开阴囊,不切除睾丸;C、D、E 3组切除睾丸及附睾制备干眼症大鼠模型。造模成功7d后,各组分别给药治疗。采用Western blot方法观察给药3个月后干眼症大鼠结膜上皮细胞IL-1β、ICAM-1、p-p38MAPK的表达。结果:A、B组结膜上皮细胞中IL-1β、ICAM-1、pp38MAPK蛋白含量低,即无阳性表达,而C、D、E组结膜上皮细胞中IL-1β、ICAM-1、p-p38MAPK蛋白含量较多,呈阳性表达;C、D组结膜上皮细胞中IL-1β、ICAM-1、p-p38MAPK蛋白含量明显低于E组(P0.01);C、D组两组间差异不显著(P0.05)。结论:养阴润目丸能够下调干眼症大鼠结膜上皮细胞中IL-1β、ICAM-1、p-p38MAPK蛋白含量;干眼症的发病机制与炎症及p38MAPK信号通路相关。     

骨刺消巴布剂对兔膝骨性关节炎IL-1β和TNF-α的影响

目的：探讨骨刺消巴布剂对兔膝骨性关节炎模型关节液中IL-1β和TNF-α水平的影响。方法：选用健康日本大耳白兔40只,随机分为骨刺消巴布剂组（A组）,奇正消痛贴组（B组）,空白对照组（C组）,正常组（D组）。A、B、C组通过改良经典的Videman固定法制备兔膝骨性关节炎模型,A、B组外敷相应药物,C、D组不做任何处理,于造模成功后第1天和药物治疗后第5周测关节液中IL-1β、TNF-α含量。结果：造模后A、B、C组IL-1β和TNF-α与D组比较显著高表达（P〈0.01）,而3组之间比较无统计学意义;治疗5周后,A组、B组与C组比较,IL-1β和TNF-α含量下降（P〈0.05）,C组IL-1β和TNF-α表达稍有下降,但无统计学意义。结论：骨刺消巴布剂可能通过降低关节液IL-1β和TNF-α的含量,对膝骨性关节炎起到治疗作用。