刺五加的体细胞胚胎发生研究

目的用不同质量浓度2,4-D和外植体类型对刺五加体细胞胚胎诱导进行研究,为刺五加的资源保护和遗传工程提供理论依据。方法以刺五加的萌发3周幼苗和层积处理种子合子胚的胚根、下胚轴和子叶为外植体,考察不同激素对刺五加体细胞胚胎发生的影响。结果来自层积处理种子合子胚的外植体接种于附加0.5 mg/L2,4-D的MS或1/2MS培养基中体细胞胚胎诱导率(57.1%)和数量(3.3)最高。体胚在原培养基中即可发育成熟,转入降低2,4-D质量浓度的培养基后更有利于新体胚的产生和原有体胚的成熟。刺五加体胚的发育历程与合子胚相似。结论刺五加可以通过来自合子胚的外植体实现体细胞胚胎发生,体胚诱导率取决于2,4-D质量浓度和外植体的发育程度。     

当归愈伤组织诱导及植株再生研究

目的：探究当归愈伤组织诱导、增殖、胚状体分化和植株再生的条件,为当归工厂化育苗和转基因育种奠定基础。方法：以胚轴和子叶为外植体,1/2 MS或MS为基本培养基,添加不同浓度的蔗糖、不同种类和浓度的激素,诱导当归愈伤组织。研究不同的继代方法和次数、ABA、IBA及蔗糖浓度对愈伤增殖和胚状体分化的影响。结果：愈伤组织第1~5次的继代及胚状体分化培养基可采用1/2 MS+IBA 2 mg·L-1+3%蔗糖,愈伤组织第6次之后的继代和胚状体分化培养基可采用1/2 MS+IBA 2 mg·L-1+KT 02 mg·L-1+3%蔗糖培养基,愈伤组织生长良好,但胚状体的分化量还有待进一步提高。结论：建立了较为完善的当归胚状体再生植株的技术体系。     

刺五加叶柄的体细胞胚胎发生研究

目的 以来源广泛、原植物药用成分量可测定的刺五加叶柄为外植体,研究刺五加体细胞胚胎发生情况,为实现药用成分高产刺五加的快速繁殖奠定基础.方法 以3年生植株萌发15 d以内的刺五加复叶叶柄为外植体,考察2,4-D和BA对刺五加体细胞胚胎发生的影响.结果 28 d培养后,2,4-D 1.5 mg/L+BA 1.0 mg/L处理的叶柄外植体中71.4%直接产生或经由愈伤组织间接产生了8.5个体胚.两种产生方式均可在诱导培养基中进行,但间接发生比例较少.转入相同或降低2,4-D质量浓度的培养基后,体胚渐次发育成熟.同时新的体胚也在逐渐产生,经由间接途径产生的体胚所占比例也随之上升.结论 刺五加可以通过萌发15 d以内的复叶叶柄外植体实现体细胞胚胎发生,体胚诱导率取决于2,4-D和BA的质量浓度.     

黄花乌头体细胞胚胎发生及其植株再生

目的 对不同植物激素及其配比对黄花乌头体细胞胚胎诱导及植株再生进行研究，为药用植物黄花乌头的资源开发提供理论依据。方法 以黄花乌头的茎、叶、胚轴、胚根和子叶为外植体考察不同植物激素对黄花乌头愈伤组织诱导、体细胞胚胎发生及植株再生的影响。结果 外植体接种于MS 2，4-D 1mg／L 6-BA 0．5mg／L的培养基上愈伤组织诱导率最高，愈伤组织在MS 2，4-D 0．2rng／L 6-．BA 0．5mg／L的培养基上连续继代几次后，分化出淡绿色具有圆锥状或原球状突起的胚性愈伤组织。胚性愈伤组织能够在MS 6-BA2 mg／L的培养基上形成不定芽，该芽能够在MS＋IBA 0．5mg／L的培养基上生根．形成完整的再生植株。结论 利用体细胞胚胎发生技术可以成功地得到再生植株，从而为濒危植物黄花乌头的资源开发和保护提供新途径。     

杜仲胚轴、子叶直接诱导不定芽及再生体系的建立

目的探索杜仲胚轴、子叶不定芽诱导条件,建立杜仲再生体系。方法分别以杜仲种胚、胚轴切段、子叶切段、芽为外植体,将它们接种到一系列含有不同激素质量浓度的培养基中。结果在外植体的选择上,胚轴优于子叶。对于杜仲胚轴的伸长生长,以MS培养基附加2.0mg/LGA效果最好。在含有0.1mg/LNAA及0.8mg/L6-BA的MS培养基中,杜仲胚轴可直接诱导产生不定芽,诱导率达到47%。在壮芽及生根培养中,分别采用附加1.0mg/L6-BA、0.1mg/LNAA的MS培养基及附加1.5mg/LIBA、20mg/L蔗糖的1/2MS培养基效果最好,经28、14d,芽苗生长系数及生根率分别达到2.48和91.7%。结论建立了稳定高效的杜仲再生体系,为外源基因导入杜仲奠定了基础。     

三七叶器官获得胚状体和再生植株的研究

目的：研究和改进三七组培技术。方法：以三七叶片和叶柄的愈伤组织为外植体,以MS+2,4-D 1.5 mg·L^-1为基本培养基,再分别添加LFS,BA,KT或ZT各0.5 mg·L^-1,于暗处培养,诱导胚状体发生,再在光下培养,诱导胚状体萌发成苗。结果与结论：只有添加LFS的培养基能诱导胚状体发生,45～60 d是高峰期,最终发生率达85％左右,叶片愈伤组织优于叶柄愈伤组织。胚状体在光下培养,多数可以转绿萌发,30％可以发育成健壮的再生植株。     

怀槐愈伤组织形成与异黄酮积累

目的 :考察怀槐愈伤组织形成与总异黄酮积累的关系。方法 :不同培养基诱导怀槐子叶和下胚轴产生愈伤组织 ,紫外分光光度术测定愈伤组织中总异黄酮并含量。结果 :NAA /BA及含 2 ,4-D组合有利子叶愈伤组织的诱导 ;MS ,N6 ,B5培养基适宜子叶形成愈伤组织 ,而SH较适宜下胚轴产生愈伤组织。愈伤组织具有异黄酮合成能力 ,含有NAA激素组合诱导的子叶愈伤组织总异黄酮含量较高 ,而 2 ,4-D/BA组合诱导的下胚轴愈伤组织总异黄酮含量较高 ,高浓度 2 ,4-D/KT组合抑制子叶和下胚轴愈伤组织积累异黄酮。愈伤组织根据发育的形态特征可分为 4种类型 ,以黄色、疏松、颗粒状的Ⅱ型愈伤组织中总异黄酮含量最高。结论 :培养基与激素组合影响愈伤组织的形成及发育形态特征 ,并反映在愈伤组织异黄酮合成差异上 ,获得的黄色、疏松颗粒状愈伤组织为后续的细胞液体悬浮培养及异黄酮合成代谢的调控研究奠定了基础。     

莫邪菊的离体培养研究初报

目的为建立莫邪菊的离体培养体系。方法以成熟果实中的种子为外植体，探讨不同生长调节剂对离体培养中愈伤组织诱导、不定芽的分化和试管苗生根的影响。结果培养基配方为MS＋2，4-D2．0mg／L＋6-BA0．2mg／L时，种子破壳萌发率为70％，胚轴处愈伤组织诱导率为100％；MS＋6-BA2．0mg／L为合适的丛生芽诱导和增殖培养基配方；培养基为MS0时生根率为95％，生根效果好且配方简单，移栽的试管苗成活率可达95％。绪论该试验建立的离体培养体系可用于莫邪菊的离体培养。     

檀香体胚发生及影响因素的研究

目的 探讨檀香胚性细胞发生体胚的技术。方法 以檀香实生苗的下胚轴为材料，MT为基本培养基，附加不同种类的植物激素。结果 基本培养基以MT或MS为好；IAA与BA结合有利于胚性愈伤组织的形成，诱导率可达36．7％；体胚发生，以MT＋IAA（NAA）0.2mg/L BA1mg/L培养基较好，能诱导体胚发育，长出正常茎叶；BA浓度为0.5-1.0mg/L时，既有利于体胚发生，又能保证一定的增殖速度。结论 成功地诱导出檀香胚性愈伤组织，通过体细胞胚胎发生生长出正常茎叶，为利用生物技术的手段进行檀香人工种子的研究奠定基础。     

不同生长素对西洋参成熟种胚及离体子叶体细胞胚发生影响研究

目的:观察不同生长素包括24,-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、吲哚乙酸(IAA)对西洋参完全成熟种胚及离体子叶诱导体细胞胚发生的效应。方法:以陕西留坝西洋参的完全成熟裂口种子所获得的完整种胚及离体子叶为实验材料,接种到添加不同浓度24,-D、NAAI、AA的MS培养基中进行离体培养。结果:三种生长素诱导体细胞胚的能力为:IAANAA24,-DI,AA最高诱导率达100%;NAA、24,-D最佳浓度分别为2.0 mg/L和0.5 mg/L;离体子叶的体细胞胚发生率相对较低;2,4-D处理(30 d内)时间越长诱导率越高。结论:IAA诱导体细胞胚发生的能力最强,较高浓度的NAA和2,4-D抑制体细胞胚的发生,体细胞胚发生需要持续的生长素作用。     

体外培养刺五加生产刺五加苷B、E的研究

目的 探讨2,4-D和培养基对刺五加愈伤组织和体细胞胚胎生产刺五加苷B、E的影响,建立有利于刺五加苷B、E积累的刺五加体外培养体系.方法 将来自同一外植体的刺五加愈伤组织和体细胞胚胎分别诱导增殖或产生次级体胚,HPLC法测定培养物中刺五加苷B、E含量和培养物质量,考察培养物类型、培养基种类和激素对刺五加苷B、E生产的影响.结果 体细胞胚胎的质量虽略低于愈伤组织的质量,但体细胞胚胎生产刺五加苷B、E的能力优于愈伤组织.2,4-D对刺五加苷B、E含量影响较小,仅改变了培养物的质量.MS培养基处理中培养物的刺五加苷B、E产量优于1/2MS培养基.结论 刺五加体外培养物可以生产刺五加苷B、E,其产量取决于培养物类型、培养基种类和2,4-D浓度.     

太子参快速繁殖研究

采用组织培养对太子参快速繁殖研究结果表明：选定茎尖为最佳外植体，适宜丛生芽诱导培养基为MS＋6－BA2.0mg/L NAA0.2mg/L和MS＋6－－BA4.0mg/L NAA0.4mg/L，适宜愈伤化培养基为MS＋2，4－D4.0mg/L Kt0.5mg/L和MS＋2，4－D3.0mg/L Kt 0.5mg/L,适宜生根培养基为1／2MS＋NAA 0.3mg/L.     

土贝母组织培养的研究

目的:研究土贝母茎段、叶片外植体愈伤组织的诱导和培养方法及其与土贝母皂苷积累的关系。方法:在MS或B₅培养基上,试验不同种类、不同含量的植物生长物质及其组合对土贝母茎段和叶片愈伤组织诱导和增殖的影响。结果:茎段愈伤组织诱导的最佳培养基配方是MS附加2,4-D 2.0 mg.L^-1,NAA 0.5 mg.L^-1和BA 1.0mg.L^-1;叶片愈伤组织诱导的最佳培养基配方是MS附加2,4-D 0.5 mg.L^-1和NAA 2.0 mg.L^-1。愈伤组织在MS附加2,4-D 2.0 mg.L^-1,NAA 0.5 mg.L^-1和BA 1.0 mg.L^-1的培养基上积累土贝母皂苷的含量最高;在B5附加2,4-D2.0 mg.L^-1,NAA 0.5 mg.L^-1和BA 1.0 mg.L^-1的培养基上经多次继代培养后,可形成较为均一、稳定的愈伤组织系。结论:建立了土贝母茎段、叶片外植体愈伤组织的诱导和培养方法,为植物组织细胞培养生产土贝母皂苷提供实验依据。     

植物生长调节剂对多花黄精芽体外发生过程中性状的影响

目的 研究不同植物生长调节剂组合对多花黄精芽体外发生过程中每块外植体上的平均芽数、叶片发生频率、根的自然发生率及生根外植体上的平均根数、根茎发生率等性状的影响；探索通过组织培养快速繁殖该植物的最佳途径。方法 多花黄精的不定芽切块在MS BA1．0mg／L 2，4-D0．5mg／L的培养基上可被诱导产生颗粒状愈伤组织，将该愈伤组织继代于不同植物生长调节剂组合的MS培养基上，2个月后观察并统计不同植物生长调节剂组合对各性状的影响。结果 TDZ1．5mg／L 2，4-D1．0mg／L对芽增值最有利，平均每块外植体上可长出8．6个芽；BAl．0～2．0mg／L NAA1．0～2．0mg／L促进叶片形成，95％以上的外植体长出形态正常的叶片；在BA2．0mg／L NAA1．0mg／L，的培养基上，根的自然发生率最高，达到51．9％，但不及单独生长素如NAA、IAA、TBA或2，4-D等以0．5～1．0mg／L，对根的诱导作用，后者可使90％以上的再生芽生根，且根生长繁茂；BA2．0mg／L 2，4-D1．0～2．0mg/L组合最适合根茎生长，直径大于0．5cm的根状茎超过100％。结论 多花黄精的体外快速繁殖可通过如下途径实现：TDZ1．5mg/L 2，4-D1．0mg/L诱导不定芽扩增，BA1．0～2．0mg／L NAA1．0～2．0mg/L诱导健康叶片的发育，1／2MS NAA，IAA，TBA或2，4-D0．5～1．0mg/L诱导再生芽生根；BA2．0mg/L 2，4-D1．0～2．0mg/L用于以繁殖药用器官为目的的根茎的生长。     

灵发素对三七胚状体发生及其成苗的影响

以MS为基本培养基,加入适量的2,4-D和灵发素(LFS),于暗处培养,三七茎段愈伤组织可诱导出胚状体,2～3个月内发生机率可达90%左右.MS 2,4-D 1.5 mg/L LFS 2mg/L于光下培养,约有30%以上的胚状体能发育成健壮的全苗.     

铁皮石斛原球茎的诱导与增殖影响因素研究

目的:研究铁皮石斛原球茎诱导与增殖的最适培养基配方。方法:以铁皮石斛种胚为材料,以MS培养基为基本培养基,研究不同植物激素6-苄基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)和激动素(KT)或其组合及马铃薯提取液(PE)、香蕉提取液(BE)、苹果提取液(AE)和椰乳(CM)等有机添加物对铁皮石斛原球茎诱导和增殖的影响。结果:6-BA与NAA配比不利于种胚萌发,萌发度均低于MS培养基;添加10%的PE、CM有利于原球茎诱导;2,4-D对原球茎的生长和增殖不利,一定浓度的BA、KT和NAA有利于原球茎的增殖;KT浓度为1.0 mg/L时,原球茎40 d增殖倍数最高,达9.0;PE、CM、AE都能不同程度的促进原球茎的增殖,以10%的CM效果最好。结论:适宜铁皮石斛原球茎的诱导培养基为MS+10%CM+1.0 g/L AC;适宜铁皮石斛原球茎增殖的培养基为MS+1.0mg/L KT+0.2mg/L NAA+10%CM。     

半夏愈伤组织的诱导及增殖效应

以半夏Pinellia ternata (Thunb ) Breit 的幼嫩叶柄为外植体,接种于附加 NAA、2,4- D、KT、6-BA及其组合的MS培养基上,均能产生愈伤组织。研究结果表明,MS+ 1. 5 mg/L KT + 2. 0 mg/L 2,4- D 对半夏愈伤组织的诱导效果最好。MS+ 0 2 mg/L 6- BA+0 .5 mg/L NAA增殖培养的愈伤组织较适合于器官的分化,MS+0 5 mg/L 6 -BA +1 0 mg/L 2,4 D增殖培养的愈伤组织较适合于做细胞悬浮培养的材料。