实验性脾虚及冷束缚应激大鼠十二指肠电-机械活动变化与胃肠肽关系研究

目的 研究实验性脾虚大鼠与冷束缚应激大鼠引起胃肠功能紊乱可能的共同机理。方法 本研究采用高灵敏度双银球电极－应变片记录了实验性脾虚大鼠及冷束缚应激大鼠十二指肠的电－机械活动。结果 发现实验性脾虚大鼠及冷束缚应激大鼠十二指肠电活动的慢波平均频率降低，振幅降低（P＜0．001）；实验性脾虚大鼠及冷应激大鼠运动频率降低，振幅增加（P＜0．001），离散度增加（P＜0．001），MMC周期缩短。结论 实验性脾虚大鼠及冷束缚应激大鼠十二指肠电－机械活动紊乱。其电－机械活动变化与十二指肠SP，VIP等胃肠肽含量改变可能具有机制上的密切联系。     

电针单穴与腧穴配伍对肠易激综合征模型大鼠结肠功能的影响

目的 通过对比观察电针单穴（上巨虚）和腧穴配伍（天枢+上巨虚）对便秘型肠易激综合征（IBS-C）模型大鼠结肠功能调整作用的差异性，初步探讨天枢配伍上巨虚是否有协同作用。方法 选用Wistar大鼠90只，分为空白组（10只）和造模组（80只），造模组大鼠采用慢性和急性应激相结合方法连续干预10 d制备IBS-C模型；造模结束后，造模组大鼠通过腹壁撤回反射（AWR）半定量评分结合应激后大便颗粒数与空白组差异有统计学意义，以此筛选制备成功的模型，再随机分为模型组（10只）、上巨虚组（10只）、腧穴配伍组（10只）；2个治疗组连续电针干预治疗14 d，对各组大鼠记录结肠痛敏阈值以及结肠肌电；采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清中乙酰胆碱（ACh）含量；免疫蛋白印迹法检测近端结肠中胆碱乙酰转移酶（ChAT）蛋白表达。结果 与空白组相比，模型组痛敏阈值降低（P <0.000 1）、结肠慢波频率以及振幅均升高（P <0.001或P <0.01）、血清ACh含量以及近端结肠ChAT蛋白含量均降低（P <0.01）；与模型组相比，电针干预治疗后，结肠痛敏阈值升高（P <0.0...     

六磨汤对慢传输型便秘大鼠结肠肌电及肌间神经丛内-氧化氮合成酶的影响

目的观察六磨汤对慢传输型便秘(slow transit constipation,STC)大鼠结肠肌电及肌间神经丛内一氧化氮合成酶(NOS)的影响,探讨其治疗STC的效应机制。方法将60只SPF级Wistar大鼠随机分成正常组20只,造模组40只。造模组通过饲喂含复方苯乙哌啶饲料建立STC大鼠模型,造模成功后再随机分成生理盐水组、六磨汤组各20只。生理盐水组用生理盐水灌胃干预,六磨汤组用六磨汤煎剂灌胃干预。应用活性炭灌胃法及胃肠电放大器分别检测大鼠肠道传输功能、结肠肌电,采用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸黄递酶(NADPH-d)组织化学染色法检测肌间神经丛内NOS表达。结果六磨汤组首粒黑便排出时间比生理盐水组显著缩短(P0.05),结果接近正常组(P0.05)。六磨汤组结肠肌电慢波频率、振幅、频率变异系数及振幅变异系数与生理盐水组比较,差异均有统计学意义(P0.05),结果接近正常组(P0.05)。六磨汤组结肠肌间神经丛内NOS阳性表达比生理盐水组明显减少(P0.05),与正常组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论六磨汤能够显著改善STC大鼠结肠传输功能,这可能与其调节结肠肌电节律性与提高结肠肌电稳定性,降低结肠肌间神经丛内NOS阳性表达水平有关。     

从慢传输型便秘大鼠结肠c-kit/SCF的基因表达及信号传导通路探讨四磨汤的调节机制

目的:研究四磨汤对慢传输结肠的c-kit/SCF的基因表达及信号传导通路影响,探索理气中药改善结肠动力的作用机制。方法:选取120只SD大鼠,随机分为正常组30只,造模组90只,造模组饲喂含复方苯乙哌啶的饲料,造模成功后,将90只大鼠再随机分为3组,一组为空白对照组,一组为盐水对照组(安慰剂组),一组为四磨汤治疗组,每组30只。停药7 d后,分别从四组中各抽取10只大鼠,测首例黑便排出时间。结肠肌电检测,验证"四磨汤"对STC大鼠结肠肌电的影响效应。通过Realtime-PCR检测,分别检测c-kit和SCF的mRNA在STC结肠组织中的表达情况。计算机辅助图像分析表达情况。结果:四磨汤组大鼠首粒黑便排出时间较对照组和安慰剂组明显缩短(P0.05);较正常组有所延长(P0.05)。四磨汤组大鼠肌电频率、振幅、频率变异系数、振幅变异系数与正常组相比无统计学意义(P0.05),模型组大鼠肌电频率低于正常组(P0.05),振幅、频率变异系数、振幅变异系数高于正常组,有统计学意义(P0.05)。c-kit mRNA相对含量四磨汤组高于对照组及安慰剂组(P0.05),低于正常组(P0.05)。SCF mRNA相对含量四磨汤组高于对照组及安慰剂组(P0.05),低于正常组(P0.05)。结论:STC模型大鼠的结肠c-kit和SCF基因表达下调,c-kit/SCF系统受损。四磨汤能够显著提高c-kit mRNA、SCF mRNA相对含量,显著抑制造模药物对大鼠结肠慢波的影响,是通过调节c-kit,SCF基因表达及相应的信号通路来治疗慢传输型便秘的。     

温经汤对运动性月经失调大鼠的防治作用研究

目的：观察温经汤对运动性月经失调大鼠的防治作用。方法：将30 只大鼠随机分为空白组、造模组、温经汤组,每组各10 只。采用力竭游泳运动复制水上运动项目女运动员月经不调大鼠模型。温经汤组给予温经汤灌胃,空白组、造模组灌蒸馏水,共给药4 周。酶联免疫吸附法（ELISA） 检测大鼠孕酮（P）、雌二醇（E2）、睾酮（T）、促黄体素（LH）、卵泡刺激素（FSH） 含量。结果：与空白组比较,造模组大鼠FSH 含量下降,差异有统计学意义（P＜0.05）,温经汤组大鼠FSH 含量略高于空白组,但差异无统计学意义（P＞0.05）。与造模组比较,温经汤组大鼠FSH 明显上升,差异有统计学意义（P＜0.05）。LH 含量各组间比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,单纯从数值上看,温经汤组大鼠LH 含量最高,造模组大鼠LH 含量最低。与空白组比较,造模组大鼠P 含量显著减少,差异有统计学意义（P＜0.01）,温经汤组大鼠P 含量稍有下降,差异无统计学意义（P＞0.05）;与造模组比较,温经汤组大鼠P 明显上升,差异有统计学意义（P＜0.05）。与空白组比较,造模组大鼠T 水平降低,差异有统计学意义（P＜0.05）,温经汤组稍下降（P＞0.05）。与造模组比较,温经汤大鼠T 含量数值增高,但差异无统计学意义（P＞0.05）。与空白组比较,造模组大鼠E2 含量显著减少,差异有统计学意义（P＜0.01）,温经汤组大鼠E2 含量下降,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：温经汤对运动性月经失调有防治作用。     

实验性脾虚证胃肠动力学与胃肠肽关系的研究

目的:观察实验性脾虚证与胃肠肽之间的关系。方法:采用银球三电极和高灵敏度应变片传感器分别记录实验性脾虚证(以厚朴、枳实、大黄煎剂造模)大鼠胃窦、十二指肠、空肠电和机械活动;采用放射免疫分析方法分析了上述部位免疫反应(immunoreactive,ir)胃肠肽(ir-SP、ir-VIP、ir-CGRP)含量的变化。结果:脾虚组大鼠各部位运动节律均低于对照组和治疗组(P<0.05),其电活动的最小振幅均低于对照组和治疗组(P<0.05)。运动节律与运动总振幅指数的相关性因部位不同而异。脾虚大鼠十二指肠运动亢进,幅值增高,小肠运动一个移行性综合运动(MMC)周期缩短。脾虚大鼠胃窦ir-SP、ir-VIP 含量明显低于对照组(P<0.05)。脾虚组十二指肠 ir-SP 和 ir-VIP 含量均明显高于对照组(P<0.05),而空肠只有 ir-SP 含量高于对照组(P<0.05)。脾虚组十二指肠 ir-SP 含量明显低于治疗组(P<0.05)。各部位 ir-CGRP 含量比较均无显著性差异(P>0.05)。结论:脾虚大鼠胃及小肠上段 ir-SP、ir-VIP 含量的改变可能与脾虚证胃肠动力失调、吸收不良、泄泻及津液涸竭等症状有一定关系,加味四君子汤对大鼠实验性脾虚证胃肠肽分泌异常及胃肠电——机械活动的修复均有一定调理作用。     

千金子制霜前后对大鼠消化间期复合肌电及胃肠激素的影响

目的观察千金子制霜前后石油醚提取物对大鼠十二指肠消化间期复合肌电(IMC)活动及组织匀浆P物质(SP)和血管活性肠肽(VIP)含量的影响,探讨制霜缓解千金子毒性的机制。方法将24只SD大鼠随机分为空白组、千金子生品石油醚提取物组和千金子霜品石油醚提取物组,每组8只。各给药组给予相应剂量(10 g原药材/kg)药液灌胃,空白组给予等量生理盐水灌胃。采用BL-420F生物机能实验系统测定千金子制霜前后大鼠十二指肠IMC慢波频率、振幅及峰电位数目;ELISA检测大鼠十二指肠组织匀浆SP和VIP含量。结果与空白组比较,千金子制霜前后均能兴奋大鼠胃肠肌电活动,十二指肠组织匀浆SP和VIP含量明显降低(P0.01),制霜后各指标强度均小于生品(P0.01)。结论千金子可能通过影响大鼠SP、VIP的分泌,进而影响消化道平滑肌胃肠电变化,引起胃肠道平滑肌收缩/舒张失衡,肠黏膜免疫调节紊乱,而制霜后使其水平趋于正常,从而改善胃肠道动力及胃肠道刺激性。     

益气化瘀解毒法对慢性萎缩性胃炎伴异型增生大鼠DNA甲基化酶3b基因的影响

目的观察益气化瘀解毒法对慢性萎缩性胃炎伴异型增生模型大鼠DNA甲基化酶3b(DNMT3b)基因的影响。方法将60只SPF级健康雄性Wistar大鼠随机分为造模组50只、空白组10只。造模成功后将造模组剩余的33只大鼠随机分为模型组、维酶素组、消痞颗粒组,每组11只。模型组予0.9%氯化钠注射液,维酶素组予维酶素悬浊液,消痞颗粒组予消痞颗粒中药制备药液,各组均每日灌胃1次,连续治疗12周后检测各组大鼠DNMT3b蛋白表达量。结果维酶素组、模型组DNMT3b蛋白表达量较空白组均明显升高(P0.01);消痞颗粒组与空白组比较差异无统计学意义(P0.05)。维酶素组、消痞颗粒组DNMT3b蛋白表达量较模型组降低(P0.01);消痞颗粒组低于维酶素组(P0.01)。结论中医益气化瘀解毒法可以逆转胃黏膜异型增生,其作用机制可能是通过下调DNMT3b而实现的。     

实验性脾虚证胃肠动力学与胃肠肽关系的研究

采用银球三电极和高灵敏度应变片传感器分别记录实验性脾虚证大鼠胃窦、十二指肠、空肠电和机械活动；采用放射免疫分析方法（RIA）分析了上述部位免疫反应（immunoreactive，ir）胃肠肽ir-SP、ir－VIP、ir－CGRP含量的变化。结果表明，脾虚组大鼠各部位运动节律均低于对照组和治疗组（P＜0．05），其电活动的最小振幅均低于对照组和治疗组（P＜0．05）；十二指肠运动亢进，幅值增高，MMC周期缩短；胃窦ir-SP、ir－VIP含量明显低于对照组（P＜0．05）；十二指肠ir－SP和ir－VIP含量均明显高于对照组（P＜0．05）；而空肠只有ir-SP含量高于对照组（P＜0.05）；十二指肠ir-SP含量明显低于治疗组（P＜0．05）；各部位ir—CGRP含量比较均无显著差异（P＞0．05）。     

清热化滞颗粒促胃肠动力作用机制研究

目的:探讨清热化滞颗粒对胃肠动力的影响。方法:测定实验大鼠胃蛋白酶的活性、胃酸含量;小鼠小肠推进率、小鼠血浆胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)、生长抑素(SS)和血管活性肠肽(VIP)的水平。结果:清热化滞颗粒能提高大鼠胃蛋白酶活性并对盐酸阿托品负荷小鼠小肠推进功能具有促进作用,与空白对照组及药物对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);模型建成后,小鼠血浆SS的含量增加,MTL、GAS含量降低;灌喂清热化滞颗粒后SS降低,MTL、GAS增加,且与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:清热化滞颗粒治疗小儿积滞化热证的作用机制可能与其通过调节胃肠激素,促进胃肠蠕动,从而促进胃肠动力有关。