草龙提取物及化学成分的抗菌活性研究

目的 研究草龙提取物及化学成分的抗菌活性.方法 采用琼脂稀释法测定草龙各个部位提取物及单体成分对金黄色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,大肠埃希菌及绿脓杆菌的抑菌效果.结果 醋酸乙酯提取物和正丁醇提取物有明显的抑菌的活性,水提取部位在高质量浓度下仅有一定的生物活性,石油醚提取物没有抑菌活性;从醋酸乙酯部位分得的没食子酸也有抑菌作用.结论 草龙醋酸乙酯部位和正丁醇部位有明显的体外抑菌作用,抑菌作用最强的是醋酸乙酯部位;没食子酸单体具有体外抑菌作用.     

川芎内生真菌次级代谢产物中1个新的内酯化合物

目的研究川芎内生真菌Alternaria sp. IS275代谢产物的化学成分。方法采用硅胶和葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱色谱、反相中压液相色谱、制备薄层色谱以及半制备高效液相色谱等分离技术,对川芎内生真菌发酵液的醋酸乙酯提取部位进行分离纯化,利用现代波谱学手段对分离的化学成分进行结构鉴定。结果从川芎内生真菌Alternaria sp. IS275代谢产物的醋酸乙酯提取部位分离得到1个新的内酯类化合物,鉴定为(+)-4,11-二羟基-2-十二烯-5-内酯。结论化合物1为首次从川芎内真菌中分离得到的新内酯化合物,命名为芎孢内酯A。     

桂郁金石油醚和醋酸乙酯部位化学成分的研究

目的 对桂郁金的石油醚和醋酸乙酯部位进行化学成分研究.方法 用硅胶柱层析和制备HPLC分离桂郁金石油醚和醋酸乙酯部位的化学成分,用现代波谱技术鉴定化学成分的结构.结果 从桂郁金的石油醚部位分离得到3个化合物,分别是ComosoneⅡ(1),5,10-双甲基-2-甲氧基-7-甲基-1,4-蒽二酮(2)和Curcuzedoalide(3);从醋酸乙酯部位分离得到2个化合物,分别是邻苯二甲酸二丁酯(4)和β-谷甾醇(5).结论 有4个化合物为首次从该植物中分得.     

山核桃外果皮提取物抗肿瘤活性研究

目的研究山核桃外果皮抗肿瘤活性部位。方法利用系统溶剂分离法,对山核桃外果皮进行部位分离,采用MTT法分别检测水提取物、甲醇提取物、石油醚提取物、醋酸乙酯提取物对小鼠肺癌细胞3LL、人乳腺癌细胞MCF-7、人肝癌细胞QGY-7701、人胃癌细胞BGC-823等4种肿瘤细胞株的生长抑制情况。结果水提取物对上述肿瘤细胞抑制作用均不明显,甲醇和石油醚提取物对4种肿瘤细胞有抑制作用,醋酸乙酯提取物对4种肿瘤细胞有明显的抑制效果,且呈一定的浓度-效应关系。结论山核桃外果皮的甲醇提取物、石油醚提取物及醋酸乙酯提取物具有一定的体外抗肿瘤作用。     

白桂木抗炎镇痛作用有效部位筛选

目的分离并筛选白桂木抗类风湿性关节炎的有效部位。方法通过连续ig给药白桂木根总提取物、石油醚部位、醋酸乙酯部位、氯仿部位提取物,分别采用小鼠二甲苯致耳肿胀、大鼠棉球所致肉芽肿、小鼠醋酸扭体法、小鼠热板法和小鼠腹腔毛细血管通透性评价活性。结果 白桂木醋酸乙酯部位抗炎镇痛作用较明显。结论白桂木醋酸乙酯部位可能是其治疗类风湿性关节炎的有效部位。     

白毛夏枯草止咳化痰化学部位初步生物活性筛选

目的:初步确定中药白毛夏枯草镇咳、祛痰作用的成分。方法:白毛夏枯草的提取物依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇进行萃取,得到3个部位。小鼠被灌胃给予石油醚部位2.1g.kg-1,醋酸乙酯部位1.47g.kg-1,正丁醇部位1.71g.kg-1,记录浓氨水引起小鼠咳嗽的潜伏期和5min内的咳嗽次数。此外,计算小鼠呼吸道排出的酚红量。同时,通过3个部位的HPLC图谱的色谱峰平行比较其化学成分。结果:3个部位中的醋酸乙酯部位能显著延长潜伏期,减少咳嗽次数,同时增加酚红的排出量。而且,木犀草素和芹菜素被证实存在在这个部位。结论:白毛夏枯草醋酸乙酯部位有镇咳、祛痰作用,其中含有的木犀草素和芹菜素可能是其中的2个活性成分。     

青龙衣不同萃取部位化学成分GC-MS分析

目的研究青龙衣乙醇提取物氯仿和醋酸乙酯萃取部位的化学成分。方法采用气质联用色谱法(GC-MS)对青龙衣乙醇提取物的氯仿和醋酸乙酯萃取部位进行分离测定,结合质谱数据库NIST98对分离的化合物进行结构鉴定,并应用色谱峰面积归一化法计算各成分的质数分数。结果共分离出65种成分,确认了其中56种主要成分,氯仿部位萘醌类成分有3种,占5.00%;酯类3种,占3.78%;烷烃类19种,占69.26%。醋酸乙酯部位萘醌类成分4种,占3.25%;酯类6种,占32.49%;烷烃类7种,占10.62%;杂环化合物5种,占11.70%。结论氯仿和醋酸乙酯萃取部位的化学成分分析结果有助于发现青龙衣的特征性成分,为针对性的提取分离化合物提供参考。     

泽漆的化学成分及其抗肿瘤转移活性研究

目的 研究泽漆石油醚、醋酸乙酯部位的化学成分及其抗肿瘤转移活性。方法 泽漆全草采用50%丙酮提取、系统溶剂萃取,综合运用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、HPLC制备色谱等方法分离纯化泽漆石油醚、醋酸乙酯部位的化学成分;采用根据理化性质和波谱分析方法鉴定其结构;通过MTT实验筛选出非细胞毒性的化学成分,进一步通过划痕实验来评价酚酸类化合物抗肿瘤转移的活性。结果 从泽漆石油醚、醋酸乙酯部位分离鉴定了8个化合物,分别鉴定为没食子酸（1）、咖啡酸（2）、间苯二酚（3）、连苯三酚（4）、没食子酸甲酯（5）、没食子酸乙酯（6）、杨梅素（7）、槲皮素（8）。抗肿瘤转移活性筛选结果表明,化合物1、5、6均能剂量相关性地提高抗肿瘤转移活性,其IC50分别为0.475、4.568、4.612 μmol/L。结论 化合物1、5、6显示出较好的抗肿瘤细胞转移活性,其中化合物1的作用最为显著。     

灯心草化学成分的研究(Ⅱ)

目的对灯心草Juncus effusus L.石油醚和醋酸乙酯提取物的化学成分进行研究。方法运用正相和反相硅胶柱层析对灯心草石油醚和醋酸乙酯提取物进行分离纯化,并用波谱技术鉴定其结构。结果从灯心草石油醚提取物分得2个甾体化合物stigmast-4-en-6β-ol-3-one(1),(24R)-stigmast-4-ene-3-one(2),从醋酸乙酯提取物分得两个二氢菲类化合物juncusol(3)和efffusol(4)。结论化合物1和2均为首次从灯心草属植物中分得。     

回心草化学成分研究

目的:研究回心草的化学成分。方法:回心草95%乙醇提取物依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇进行充分萃取,用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱反复对醋酸乙酯部位进行成分分离、纯化,通过波谱方法鉴定结构。结果:从回心草中共分离鉴定了8个化合物,分别为胡椒碱(1),咖啡酸甲酯(2),尿嘧啶苷(3),熊果酸(4),3β-羟基-5α,8α-氧桥-6,22-二烯(5),3β-羟基-5α,8α-氧桥-6,9(11),22-三烯(6),β-谷甾醇(7),胡萝卜苷(8)。结论:化合物1-6和8为首次从该植物分离得到。     

大戟科4种药用植物及其内生真菌脂肪酸组分研究

目的 :研究大戟科药用植物和其内生真菌相互关系 ,为探索大戟科植物生物活性物质来源 ,开发新药资源奠定基础。方法 :用气相色谱分析了大戟科乌桕、大戟、泽漆、重阳木 4种药用植物新鲜叶、茎及其 28株内生真菌的脂肪酸组分 ,并比较它们的差异。结果 :植物脂肪酸主要为α-亚麻酸、棕榈酸、亚油酸、油酸 ;内生真菌脂肪酸主要为亚油酸、油酸和棕榈酸。结论 :内生菌可以自主合成脂肪酸 ,因此可以作为分类鉴定的参考依据之一。植物及内生菌脂肪酸在α-亚麻酸含量上表现出极大的差异 ,推测可能和内生菌营养吸收及内生菌和宿主植物相互作用有关。     

新疆药用阿魏属植物内生真菌的生态分布与多样性

为了探索新疆药用阿魏属植物内生真菌的生态分布与多样性,采用微生物学研究方法与技术,从多伞阿魏、阜康阿魏、大果阿魏、新疆阿魏、里海阿魏及羊食阿魏的根、叶及茎中分离内生真菌;运用形态和分子生物学方法对其进行了鉴定;并使用Shannon-Wiener 多样性指数和Sorenson 系数,分析6种药用阿魏内生真菌的组成、分布、多样性及相似性.分离得到内生真菌337株,分属于38个属,其中,链格孢属、短梗霉属及镰刀菌属为优势菌群;在新疆阿魏中分离得到的内生真菌最多,阜康阿魏根中分离出来的内生真菌Shannon-Wiener多样性指数(H')最大,达到1.85;多伞阿魏叶和新疆阿魏叶的内生真菌菌群相似性最高,相似性系数达到0.75.结果显示,6种新疆药用阿魏植物中皆存在内生真菌;阿魏不同部位内生真菌的分布、多样性及相似性等均存在差异,具有一定的物种及组织专一性;为阿魏属植物内生真菌的深入研究奠定了理论基础.     

药用植物车前内生真菌分离及其抑菌活性初步分析

目的：研究药用植物车前可培养内生真菌多样性及其抑菌活性特征。方法：通过组织块法对内生真菌进行分离,并选择小麦全蚀病菌、枸杞黑果病菌、番茄灰霉病菌、黄瓜枯萎病菌和黄瓜立枯病菌5 种植物病原真菌和枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌4 种细菌作为指示菌,采用对峙法和改进的菌块法测定抑菌活性。结果：从车前根茎叶组织器官中分离出13 株内生真菌,以茎部最多,叶部次之,根部最少;经形态学初步分类鉴定归于2 个目,2 个科,5 个属;其中有11 株菌对1 种或多种植物病原真菌指示菌有不同程度的抑制作用,占菌株总数的84.6%,6 株内生真菌对1 种或多种供试细菌指示菌具有不同程度的抑制作用,占分离菌株总数的46.2%;3 株活性菌株PAEFS001、PAEFS007、PAEFS008 分别对5 种供试植物病原真菌指示菌具有明显抑制作用,菌株PAEFS001 属于束丝菌属,菌株PAEFS007 和PAEFS008 同属于曲霉属;1 株活性菌株PAEFS003 分别对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌2 种供试细菌指示菌有明显的抑制作用,属于梭孢霉属;药用植物车前内生真菌具有明显的抑菌活性,抑制植物病原真菌的范围较宽,对革兰氏阳性菌枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用明显,具有一定的选择性。结论：从药用植物车前内生真菌寻找新的抑菌活性物质是可行的,通过对其进行开发和利用,对提高药用植物车前的综合利用价值具有重要意义。     

基于高通量测序与UPLC-Q-TOF/MS技术的不同产地银杏叶内生菌与其主要化学成分相关性探究

目的 利用高通量测序,通过比较不同产地银杏叶内生菌的差异,并结合化学成分相关性分析,从微生态的角度区分不同产地银杏叶的品质差异。方法 以都江堰、平邑、崇明3个产地4—7月的银杏叶片为研究对象,采用16S rDNA、内转录间隔区（ITS）扩增子高通量测序方法分析叶片内生细菌、真菌的多样性及群落组成,再基于超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF/MS）对银杏叶主要化学成分含量进行检测,并对其内生菌多样性及主要化学成分含量进行相关性生物信息学分析。结果 3个产地银杏叶内生真菌的多样性和丰富度均为都江堰>崇明>平邑;内生细菌的多样性随着月份整体呈降低趋势,丰富度在6月份最高;不同产地叶片间优势内生真菌与优势内生细菌均一致。相关性分析发现,银杏叶片内生细菌与黄酮醇苷大多呈显著正相关,如假单胞菌（Pseudomonas）、罗姆布茨菌（Romboutsia）、葡萄球菌（Staphylococcus）等;银杏叶片内生真菌中,黄酮醇苷与链格孢属（Alternaria）、枝孢属（Cladosporium）、球腔菌属（Mycosphaerella）呈显著正相关。结论 通过高通量测序免培养的方法获得了较全面的内生菌信息,优于传统培养法。药用银杏在不同地域的内生优势菌较为一致,这可能与其稳定生成的次生代谢化合物有关。可通过属水平的群落结构区分3个产地银杏叶;化学成分与内生菌的相关性可以预测出与药效成分有关的菌群。研究结果为进一步筛选银杏叶内生菌提供了实验基础,为探讨药用银杏道地性的形成机制提供了新思路。     

濒危药用植物八角莲菌根的显微结构观察

内生真菌在其宿主植物生长过程中扮演着重要的角色。为了探讨濒危植物八角莲菌根的结构及内生真菌的分布情况,对其野生植株菌根进行了显微结构的观察。结果表明,野生八角莲植株与内生真菌关系密切,其根中定殖着2种不同形态的真菌;真菌主要分布于表皮层和皮层,其中皮层中分布着膨大的菌丝结构。研究结果为八角莲属植物菌根结构及其与宿主相互作用的系统研究提供了参考。     

药用植物内生真菌诱导子与宿主互作机制研究进展

药用植物内生真菌诱导子是一类由药用植物体内内生真菌产生且对宿主植物生长及次生代谢产物合成有一定诱导作用的物质。其可以是寡糖、多糖及植物激素等,多数来源于内生真菌的表面结构性成分和一些分泌物质。在与宿主植物互作时,对宿主植物的生长发育、次生代谢产物合成积累及抗性反应等有一定作用,两者互作机制较为复杂且相关研究较少。对已有相关研究成果进行归纳总结,从内生真菌诱导子种类、真菌诱导子与宿主间相互作用、作用机制研究进展3个方面进行综述,以期为后续深入研究内生真菌诱导子与宿主植物互作复杂关系,以及内生真菌诱导子的开发应用提供参考。     

无花果植物内生真菌FS11次生代谢产物化学成分的分离与鉴定

目的对植物内生真菌FS11(拟青霉属Penicilliopsis sp.)次生代谢产物的化学成分进行研究。方法在活性追踪下,采用硅胶柱层析、凝胶Sephadex LH-20柱层析、薄层层析以及重结晶等各种方法对粗品进行分离纯化,通过理化性质分析和波谱技术(1H-NMR、13C-NMR、DEPT和HSQC),确定化合物的结构,采用稀释法对化合物最小抑菌浓度(MIC)进行测定。结果从FS11次生代谢产物中分离获得5个化合物,分别为Gliotoxin①、Helvolic Acid②、2-苯甲基-3-[(1H-吲哚-3-基)甲基]六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-1,4-二酮③、对羟基苯甲酸④和甘露醇⑤。结论化合物1和3是首次从FS11中分离得到的,化合物3是首次从自然界分离得到的。其中,化合物1对测试菌的抗菌活性最好,其对金黄色葡萄球菌的MIC为0.78μg/ml(青霉素钠的MIC为0.78μg/ml)。     

皱边石杉内生真菌资源遗传多样性的ISSR分析

目的 采用ISSR标记技术从分子水平探讨皱边石杉内生真菌资源的遗传多样性,建立皱边石杉内生真菌资源遗传分化指纹图谱,为筛选可产石杉碱甲的目标菌株提供快捷的判别依据.方法 以从皱边石杉中分离的100株内生真菌为材料,建立其ISSR优化反应体系并分析其遗传多样性;TLC、HPLC检测发酵产物.结果 优化筛选的10条ISSR引物对皱边石杉内生真菌进行遗传多样性分析,共扩增出3 975条清晰条带,多态性条带占100％.遗传相似系数为0.59～0.96,在0.64水平,皱边石杉内生真菌可分为11类;在0.67水平,第Ⅰ类又可分为5个亚类.采用引物UBC868对13号菌株及皱边石杉基因组DNA扩增,在500、200 bp均具有清晰的扩增条带,发酵产物经TLC和HPLC检测,发现13号菌株与宿主植物皱边石杉同样可产生石杉碱甲.结论 皱边石杉内生真菌资源遗传多样性高,遗传距离较远,遗传基础较宽,与13号菌株同属一类的内生真菌可作为石杉碱甲生产的潜力菌株进行重点筛选和诱变.     

药用植物内生菌抗氧化活性研究进展

内生菌是存在于植物组织内部但不会对植物有明显负面影响的一类重要的生物资源。内生菌与宿主植物经过长期进化,通过产生各种特定的活性物质相互作用维系相对稳定的共生关系。药用植物内生菌成为筛选新的活性成分和先导化合物的重要途径,其中抗氧化活性物质是一类最受关注的活性成分。药用植物中抗氧化活性内生菌多样性丰富,特别是内生真菌和内生放线菌。从抗氧化活性内生菌与宿主植物的关系及生态学意义、抗氧化活性内生菌物种多样性和活性成分多样性等几个方面总结了植物内生菌抗氧化活性的研究进展,并对该领域今后的发展方向进行了展望。