以降酶法研究逍遥散在肝损伤大鼠的昼夜药动学

目的:研究昼夜给予逍遥散对肝损伤大鼠的药效动力学差异,为肝病患者服用逍遥散提供时间依据。方法:将大鼠sc 40%CCl4橄榄油溶液2 mL.kg-1每2 d 1次,首次sc 4 mL.kg-1,连续12 d,以AST降低量为药效指标,分别于早8点和晚8点单次ig逍遥散,通过测定降酶峰时、量效方程、时效方程,运用PKSolver 2.0统计距分析模块求算相关药动学和药效学参数。结果:逍遥散的降酶时-效曲线具有显著的双峰特性,其td,t1/2(ED),AUC,MRT分别为17.79 h,3.73 h,657.07 U.L-1.h-1,6.23 h(昼)和24.30 h,3.50 h,810.19 U.L-1.h-1,6.19 h(夜),昼夜td和AUC经统计学比较具有显著性意义。结论:逍遥散对肝损伤大鼠的药动学存在昼夜差异,在休息期末,活动期初(晚8点)给予逍遥散更为合理。     

板蓝根总生物碱中表告依春在发热大鼠体内的药动学-药效学结合模型研究

目的应用药动学与药效学结合模型,研究板蓝根总生物碱中主要成分表告依春在酵母致热大鼠体内的药动学和药效学之间的关系。方法给大鼠ig板蓝根总生物碱,不同时间取血并对体温进行观察,采用高效液相法测定血浆中表告依春的浓度,用一房室模型计算药动学参数,采用3种药动学与药效学拟合模型,分别对药效学参数进行拟合。结果表告依春在正常大鼠和发热大鼠体内的主要药动学参数t1/2、Cmax、AUC分别为:(4.94±0.84)h、(4.01±0.21)μg/mL、(28.37±2.42)μg.h/mL和(5.71±0.91)h、(4.15±0.25)μg/mL、(30.35±2.58)μg.h/mL。药理效应与效应室浓度之间的关系用间接反应中的药效产生抑制模型拟合较好,相应的药效学参数分别为Kin为(0.70±0.10)h-1,Kout为(0.54±0.12)h-1,R0为1.33±0.16,IC50为(0.94±0.66)mg/L。结论板蓝根总生物碱中表告依春在正常大鼠和发热大鼠体内的药动学行为无明显差异,表告依春在发热大鼠体内药动学与药效学间符合间接反应中的药效产生抑制模型。     

乙酰葛根素在大鼠体内的药动学研究

目的 考察乙酰葛根素ig和iv给药后葛根素在大鼠体内的药动学特征.方法 大鼠ig给予400 mg/kg或尾iv给予160 mg/kg乙酰葛根素.采用高效液相色谱(HPLC)法检测血浆样品中葛根素.结果 乙酰葛根素在大鼠体内代谢为葛根素,葛根素药动学过程符合二室模型,主要药动学参数:ig给药葛根素AUC0～∞为(44.76±4.13) mg·h·L-1,iv给药葛根素AUC为(36.67±5.3) mg·h·L-1,ig给予乙酰葛根素后大鼠体内葛根素的暴露水平(生物利用度)为48.12％,ig给药的Cmax为(12.07±0.15) μg/mL,tmax(1±0.33)h,t1/2为(2.52±0.21)h.结论 HPLC法可作为乙酰葛根素在大鼠体内药动学的检测手段,ig乙酰葛根素后,葛根素在大鼠体内的暴露水平得到显著提高.     

酶联免疫法研究天花粉蛋白突变体在猕猴体内的药动学

目的研究猕猴iv天花粉蛋白突变体(MTCS)的药动学。方法猕猴ivMTCS220μg/kg后,采用酶联免疫分析法(ELISA)测定动物血清中的药物质量浓度,血药浓度-时间数据用3P97药动程序拟合分析并计算药动学参数。结果MTCS在猕猴体内消除符合二房室模型。6只猕猴的平均消除半衰期(t1/2β)为(3.82±1.42)h,平均消除速率(CL)为(276.51±118.61)mL/(kg·h),药时曲线下面积(AUC0~24h)为(1124.1±189.5)ng·h/mL。结论用ELISA方法能准确测定动物血清中MTCS质量浓度和研究其药动学。     

紫丁香苷在大鼠体内的药动学研究

目的建立反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中紫丁香苷并进行药动学研究。方法大鼠血浆样品经甲醇沉淀蛋白,以甲醇-0.5%冰醋酸水溶液(30∶70)为流动相,用Diamonsil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm,Dikma)分离,检测波长为265 nm。结果紫丁香苷的线性范围为0.24～30.00μg/mL。日内、日间精密度RSD小于7.6%,准确度(RE)在±5.5%范围内。提取回收率大于70%。此法应用于大鼠尾静脉注射紫丁香苷(1.35 mg/kg)的药动学研究,AUC(0-t)为(3.26±0.60)μg.h/mL,t1/2为(0.41±0.04)h。结论该方法简便、专属性强,适用于紫丁香苷的药动学研究。     

川芎挥发油中藁本内酯在大鼠体内的药动学研究

目的 测定川芎挥发油中藁本内酯在大鼠体内的药动学.方法 采用RP-HPLC法,以蛇床子素为内标物测定大鼠口服川芎挥发油的β-环糊精包合物后藁本内酯的血药浓度,使用3P97药动学软件计算其药动学参数.结果 藁本内酯在大鼠体内符合二室模型,主要的药动学参数:t_(1/2)(α)为(1.429±1.161)h,t_(1/2)(β)为(6.877±2.275)h,t(peak)为(3.401±1.951)h,AUC为(70.87±25.92)μg/mL·h.结论 以蛇床子素为内标,RP-HPLC法能够准确、灵敏地测定藁本内酯在大鼠体内的药动学.     

痰热清注射液中主要活性成分在大鼠体内的药动学研究

目的 研究痰热清注射液在大鼠体内药动学特征.方法 以痰热清注射液中的主要活性成分黄芩苷、熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的血药浓度经时过程,表征痰热清注射液在大鼠体内药动学特征.大鼠单次iv给予(1.25、2.5、5.0 mL/kg)或多次iv给予(5.0 mL/kg)痰热清注射液,LC-UV法测定黄芩苷的血药浓度,LC-MS法测定熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的血药浓度.采用WinNonlin 6.3软件计算药动学参数.结果 单次iv痰热清注射液2.5 mL/kg后,黄芩苷、熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的t1/2分别为(48.19±12.74)、(56.19±33.33)、(109.96±58.39) min; AUC0～6h分别为(1 718.02±656.49)、(1 150.83±371.53)、(541.52±403.69) μg·min/mL;给药量在1.25～5.0 mL/kg时,3种成分的t1/2无剂量相关性,黄芩苷和熊去氧胆酸的AUC0～6h均与剂量呈良好的线性关系(r＞0.99),而鹅去氧胆酸的AUC0～6h与剂量呈正相关性.多次给予痰热清注射液5.0mL/kg后,黄芩苷、熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的AUC0～6h分别为(2 872.37±476.45)、(3 339.63±939.94)、(1 241.29±408.38)μg·min/mL;蓄积常数分别为83.3％、118.5％、168.0％.结论 单次给于痰热清注射液1.25～5.0 mL/kg后,黄芩苷和熊去氧胆酸在大鼠体内的消除过程是线性的,而鹅去氧胆酸可能是线性的.多剂量iv后,黄芩苷和熊去氧胆酸的血药浓度无明显蓄积现象,而鹅去氧胆酸有一定的蓄积倾向.     

大鼠股静脉给药五味子酚的药动学研究

目的建立测定大鼠血浆中五味子酚浓度的HPLC方法,并对五味子酚在大鼠体内的药动学特征进行研究。方法血浆样品经甲醇沉淀及乙醚萃取后,用HPLC-DAD进行测定分析。色谱柱为Eclipse XDB-C18Agilent(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(65∶35),检测波长254 nm;测定大鼠静脉注射五味子酚18 mg/kg后的血药浓度,并利用3P87软件拟合其药动学参数。结果五味子酚的血药浓度在0.1~2.5μg/mL线性关系良好(r2=0.999),最低检测限为10 ng/mL,在3个浓度水平下,方法的回收率为88%~110%,日间和日内RSD小于15%,符合生物样品分析要求。大鼠股静脉注射18 mg/kg后,血药浓度-时间曲线呈二室模型。主要药动学参数t1/2α、t1/2β、V、AUC、MRT分别为(0.22±0.11)h、(1.19±0.22)h、(12.81±2.91)L/kg、(1.32±0.19)μg/mL/h、(1.51±0.24)h。结论该方法简便、快速、稳定可靠,适用于五味子酚的体内分析。     

水飞蓟宾过饱和自微乳给药系统在大鼠体内的药动学研究

目的研究水飞蓟宾过饱和自微乳给药系统(S-SMEDDS)在大鼠体内的药动学特征。方法 12只雄性SD大鼠随机分为对照组和实验组,每组6只,对照组大鼠ig给予水飞蓟宾自微乳(SMEDDS)533 mg/kg,实验组大鼠ig给予水飞蓟宾-S-SMEDDS 533 mg/kg。采用Accusampler清醒动物自动采血装置于不同时间点采血,HPLC法测定大鼠ig水飞蓟宾-S-SMEDDS后水飞蓟宾的血药浓度,非房室模型的统计矩分析方法计算药动学参数。结果对照组和实验组的tmax分别为(1.00±0.40)、(1.50±0.84)h,Cmax分别为(5.68±0.52)、(16.10±4.06)μg/mL,AUC0→t分别为(27.30±3.29)、(82.64±12.36)μg.h.mL 1。结论将水飞蓟宾制成S-SMEDDS可进一步提高其口服生物利用度。     

pH依赖-时控型大黄素结肠定位微丸的药动学研究

目的:分析pH依赖-时控型大黄素微丸在大鼠体内的药动学过程.方法:采用HPLC法研究pH依赖-时控型大黄素微丸在SD大鼠体内的药动学行为.结果:主要药动学参数:大黄素溶液组:T1/2(0.85±0.32)h、Tmax(1.00±0.01)h、MRT0→∞(2.71±0.20)h、CL(4.84±0.41)L/(h·kg...     

逍遥散药味计量考证与商榷

目的：厘清《和剂局方》逍遥散药味计量,为逍遥散药效学研究和临床运用提供正确计量规范。方法：依据古医籍文献资料、古代度量衡考证资料及现代研究成果等,对逍遥散原方药味计量进行考证,确认规范换算标准。结果：逍遥散的计量按照宋朝度量衡规制中的“大制”进行折算,1两合41.3克。结论：长期以来对逍遥散药味计量的认识存在模糊混乱,使逍遥散药效学研究结果差异较大。只有使用药味规范计量才能使相关逍遥散药效学实验结果是可信的。     

逍遥散抗抑郁作用的BDNF/CREB信号机制

目的:探讨逍遥散抗抑郁作用的BDNF/CREB信号机制。方法:采用小鼠慢性温和不可预知应激(CUMS)结合孤养抑郁模型,逍遥散水煎液30g/kg灌胃给药4周,测定小鼠体重、自主活动及糖水消耗量的变化以评价药物的抗抑郁效应。ELISA法测定血清BDNF水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)测定小鼠海马及皮质部位CREB、BDNF mRNA表达,Western-blot方法测定小鼠脑内ERK1/2及磷酸化ERK1/2(pERK1/2)的蛋白表达量。结果:与模型组比较,逍遥散30g/kg能提高模型小鼠体重、自主活动及糖水消耗量,并有提高模型动物血清BDNF含量的趋势;逍遥散30g/kg显著增加模型小鼠海马BDNF、CREB mR-NA及皮质BDNF mRNA的表达量,对模型动物海马部位pERK1/2的表达量有提高趋势。结论:逍遥散对CUMS结合孤养的小鼠抑郁模型具有抗抑郁效应,作用机制与干预BDNF/CREB信号途径的关键分子的表达与功能有关。     

立论于肝脾同治研究逍遥散对老年性痴呆模型鼠行为学及神经可塑性的影响

目的:立论于肝脾同治研究逍遥散对老年性痴呆模型鼠行为学及神经可塑性生长相关蛋白(GAP-43)和突触素(SYN)的影响。方法:72只健康SPF级雄性大鼠,根据随机数子表法随机分为3组,假手术组、痴呆组和逍遥散组,每组各24只。痴呆组和逍遥散组进行老年痴呆AD大鼠的模型制备,假手术组:常规饲料饮水SPF级饲养;痴呆组:在空白组的基础上,给予等量0.2 m L/10 g无菌生理盐水灌胃;逍遥散组:在空白组的基础上,逍遥散水煎液,给予0.2 m L/10 g的逍遥散水煎液灌胃。1次/d,疗程6周。采用Y型迷宫进行大鼠的学习记忆行为检测,透射电子显微镜(TEM)观察海马CA1区突触结构,免疫组化检测海马CA1区生长相关蛋白(GAP-43)的表达情况,蛋白质印迹法(Western Blot)检测突触素(SYN)的表达情况。结果:1)与假手术组比较,痴呆组和逍遥散组中EN均增加(P0.05),CN均减少(P0.05);其中逍遥散组EN低于痴呆组(P0.05),CN则高于痴呆组(P0.05)。2)TEM下观察假手术组突触结构和形态正常,逍遥散组大鼠海马CA1区突触结构和形态均较痴呆组规则(P0.05)。3)与假手术比较,痴呆组和逍遥散组GAP-43和SYN表达均下调(P0.05),而逍遥散组中GAP-43和SYN的表达则高于痴呆组(P0.05)。结论:逍遥散(肝脾同治)有效改善老年性痴呆模型鼠的学习记忆行为学和突触结构形态,其机制可能与上调了生长相关蛋白(GAP-43)免疫组化8和突触素(SYN)神经可塑性相关蛋白有关。     

逍遥散类方及其分离组分抗抑郁作用的筛选研究

目的:研究比较逍遥散类方及其分离组分的抗抑郁作用,筛选最佳的抗抑郁复方及分离组分。方法:首先,以传统中药复方逍遥散、丹栀逍遥散、柴胡疏肝散水煎剂和阳性药(文拉法辛)为干预药物,采用大鼠强迫游泳实验评价各组药效。其次,将逍遥散、丹栀逍遥散和柴胡疏肝散复方及其分离所得的6个不同极性的组份,采用体外活性筛选实验,考察各复方及其分离组份对大鼠脑突触体摄取5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NA)和多巴胺(DA)的抑制作用。结果:与空白对照组比较,逍遥散水煎剂组、柴胡疏肝散水煎剂组、文拉法辛组均能够不同程度地缩短大鼠强迫游泳不动时间(P<0.05)。在待测样品的终反应浓度为10μg/mL的条件下,逍遥散水煎剂组X1、逍遥散分离组分X6、X7对大鼠脑突触体摄取单胺类神经递质有明显的抑制作用。结论:逍遥散及其分离组分X6、X7表现出良好的抗抑郁作用,可以作为筛选抗抑郁新药的理想组份。     

逍遥散对小鼠学习记忆能力的影响

目的:观察逍遥散对正常小鼠及记忆障碍小鼠学习记忆能力的影响,探讨其是否具有改善学习记忆能力的作用.方法:Morris水迷宫法观察逍遥散连续给药21d对正常小鼠空间学习记忆能力的影响;避暗法观察逍遥散对东莨菪碱、亚硝酸钠、乙醇及利血平所致记忆障碍模型小鼠学习记忆能力的影响.结果:Morris水迷宫实验表明,逍遥散30g/kg可明显提高正常小鼠空间学习记忆能力.避暗实验结果表明,逍遥散30、20g/kg对利血平所致记忆获得与亚硝酸钠所致记忆巩固障碍有保护作用,但对东莨菪碱、乙醇造成的小鼠记忆障碍作用不明显.结论:逍遥散具有一定增强和改善学习记忆能力的作用,其机制可能与影响单胺类递质及抗氧化、改善脑内血液循环有关.     

基于Arrowsmith工具探讨逍遥散抗抑郁作用机制

采用文献关联检索工具Arrowsmith从理论层面探讨逍遥散及其单味药抗抑郁的现代药理机制。利用Arrowsmith进行关联文献的检索和发现,从逍遥散单味药、整体复方及共有关联词对文献结果进行分析整理,借助Cytoscape绘图软件对逍遥散组成药材与抗抑郁作用机制进行关联性分析。逍遥散中不同的单味药可能通过调节TLR4、TRPV1、Caspase-3、PPARG、COX-2、NRF2、PI3K、ERK1、MAPK、p38 MAPK等靶点,涉及神经-内分泌-免疫等关键通路影响焦虑、束缚应激、脾虚、学习记忆等发挥抗抑郁作用。逍遥散抗抑郁的关键作用部位在海马区。逍遥散抗抑郁作用体现了中药多成分、多靶点、多途径的作用特点。通过Arrowsmith工具检索分析为深入阐释逍遥散抗抑郁作用机制提供科学依据,为中药复方研究提供研究方向和思路。     

昼夜给予逍遥散对肝损伤大鼠的保护作用

目的:研究昼夜不同时间给予逍遥散对CCl4诱发大鼠肝损伤保护作用的差异。方法:采用sc40%CCl4制备大鼠肝损伤模型,分别于早上8点和晚上8点ig逍遥散,连续12d,观测大鼠一般行为状态、体重、血清丙氨酸氨基转换酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转换酶(AST)、肝组织超氧化物岐化酶(SOD)和丙二醛(MDA)以及肝组织病理学变化。结果:与模型组比较,逍遥散能显著改善CCl4诱导大鼠肝损伤模型的体重曲线和行为状态;显著降低血清中ALT,AST含量;升高肝组织SOD的活性,降低MDA的含量;减轻肝脏病理损伤程度。同时,多数指标显示晚间给药和低剂量组的效果更好。结论:逍遥散具有明显的保肝降酶作用,其疗效与给药时间密切相关。     

逍遥散对抑郁大鼠海马CA1区PI3K/AKT信号通路的调节作用研究

目的:本研究旨在探讨逍遥散通过调节PI3K/Akt信号通路进而改善由谷氨酸引起的兴奋性损伤的机制。方法:100只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、逍遥散组和氟西汀组,利用CUMS方法造模成为抑郁模型大鼠,上述组别分别予以双蒸水、双蒸水、逍遥散药液、氟西汀溶液连续灌胃3周,后进行行为学观察及相关指标检测。采用旷场试验(OFT)和蔗糖偏好试验(SPT)评价逍遥散的抗抑郁作用;ELISA法测定海马组织中5-HT、NE水平;比色法检测各组大鼠海马CA1区谷氨酸水平;RT-qPCR检测海马CA1区NR2B、PI3K的mRNA水平;western blot检测海马CA1区NR2B、PI3K、P-AKT、Akt的蛋白表达。结果:逍遥散的体内干预可显著提高抑郁模型大鼠海马组织中的5-HT、NE水平、降低海马CA1区谷氨酸水平、增加了海马CA1区NR2B、PI3K及P-AKT/Akt比值,显著改善了大鼠的抑郁症状。结论:逍遥散可显著改善经慢性应激刺激后大鼠的抑郁样行为,其机制可能与降低谷氨酸兴奋性毒性,从而提高PI3K/Akt信号通路活性有关。     

逍遥散合西沙必利治疗便秘型肠易激综合征疗效观察

目的:观察逍遥散联合西沙必利治疗便秘型肠易激综合征的临床疗效.方法:将87例患者随机分为两组,治疗组46例口服逍遥散加减联合西沙必利,对照组41例口服西沙必利进行疗效对比.结果:治疗组总有效率为91.30%,对照组为82.93%,两组间比较有显著性差异,近、远期临床疗效及症状改善情况均优于对照组.结论:逍遥散联合西沙必利治疗便秘型肠易激综合征较单一促动力药优越.     

基于粪便代谢组学技术的逍遥散抗抑郁作用机制研究

目的应用核磁共振氢谱(1H-NMR)代谢组学技术研究慢性温和不可预知应激(CUMS)抑郁大鼠粪便中内源性代谢物及代谢通路的变化,并评价逍遥散的改善作用,探讨其抗抑郁作用机制。方法使用CUMS造模程序建立抑郁模型,采用1H-NMR技术结合多变量统计分析方法,研究CUMS抑郁大鼠粪便代谢物谱的变化、鉴定相关代谢标志物并构建代谢通路。结果在抑郁大鼠粪便样本中共筛选10种与抑郁相关的潜在生物标志物。与对照组比较,模型组天冬酰胺、天冬氨酸、乳酸和丙酸水平显著升高(P0.05、0.01),而苯丙氨酸、酪氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸和脯氨酸水平显著降低(P0.05、0.01)。与模型组相比,逍遥散能显著升高苯丙氨酸、酪氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺和脯氨酸的水平,能显著降低天冬酰胺、乳酸和丙酸的水平。与对照组比较,CUMS抑郁大鼠粪便中6条代谢通路发生了显著变化:包括(1)氨基酰t RNA生物合成,(2)丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,(3)精氨酸和脯氨酸代谢,(4)谷氨酸和谷氨酰胺代谢,(5)苯丙氨酸代谢以及(6)丙酮酸代谢。而逍遥散可显著回调(2)、(3)、(4)、(5)和(6)条代谢通路。结论逍遥散可能通过调控氨基酸代谢、糖代谢和肠道微生物的代谢等途径发挥抗抑郁作用。