贝加尔唐松草内生真菌的分离及抗氧化活性研究

目的分离和鉴定贝加尔唐松草内生真菌,并检测其次级代谢产物的抗氧化活性。方法采用组织分离法从其根、茎、叶和种子中分离内生真菌,根据形态进行初步鉴定;用DPPH自由基清除法评价贝加尔唐松草内生真菌发酵产物的抗氧化活性。结果从贝加尔唐松草中共分离得到18株内生真菌,它们分属于曲霉属、顶孢霉属、镰刀菌属、香柱菌属、链格孢菌属、匍柄霉属。菌株发酵液的乙酸乙酯部位普遍具有抗氧化活性,其中Y-3对DPPH自由基清除活性较强,达到91.04%,仅次于Vc。结论贝加尔唐松草内生真菌的次级代谢产物具有抗氧化活性,是一种较好的天然抗氧化剂。     

粉背雷公藤内生真菌抗氧化活性的初步研究

目的：从粉背雷公藤新鲜植株中分离具有抗氧化活性的内生真菌。方法：采用组织块培养法分离内生真菌。利用体外清除DPPH自由基实验,测定内生真菌次生代谢产物的抗氧化能力。结果：共分离得到107株内生真菌,其中对DPPH自由基清除率在80%-90%的菌株有7株,大于90%的有7株。结论：粉背雷公藤内生真菌次生代谢产物在抗氧化剂开发方面具有一定的潜力。     

三白草体外抗氧化活性

目的:研究三白草体外抗氧化活性.方法:采用清除二苯代苦味酰基(DPPH)自由基和[2,2′-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐](ABTS)自由基测定法,对三白草提取物抗氧化活性进行评价.结果:正丁醇提取物清除DPPH自由基(IC50=16.94)的能力比BHT清除能力(IC50=18.71 mg·L-1)强,弱于阳性对照PG和BHA清除DPPH自由基的能力(IC50分别为0.89,3.2mg· L-1);清除ABTS自由基的能力(IC50=12.90 mg·L-1)弱于阳性对照PG和BHA清除ABTS自由基的能力(IC50分别为0.81,1.95 mg·L-1),比阳性对照BHT( IC50为7.72mg· L-1)清除ABTS自由基的能力略弱;石油醚提取物和乙酸乙酯提取物清除DPPH和ABTS自由基的能力均比阳性对照PG,BHT,BHA清除DPPH和ABTS自由基的能力弱.结论:三白草正丁醇提取物有抗氧化活性.     

雷公藤红素体外抗自由基活性研究

目的研究雷公藤红素的抗氧化活性,为其药理活性研究奠定基础。方法运用DPPH法、邻苯三酚自氧化法、芬顿-水杨酸法、ABTS法等4种体外抗氧化活性检测方法,检测雷公藤红素清除自由基的能力。结果雷公藤红素能清除DPPH自由基,超氧阴离子自由基、羟自由基、ABTS阳离子自由基,IC_(50)分别为0.16 mg·ml~(-1)、0.88 mg·ml~(-1)、0.43 mg·ml~(-1)、0.035 mg·ml~(-1),其对ABTS阳离子自由基清除作用最强,对超氧阴离子清除作用最弱。结论雷公藤红素具有体外抗氧化活性,但对上述4种自由基的清除程度不同。     

桑叶抗氧化活性成分的研究

目的：研究桑叶的抗氧化活性成分。方法：以桑叶为原料,经不同方法提取分离桑叶中的有效成分,利用核磁共振等波谱学方法进行结构鉴定,采用DPPH法和ABTS法测定其抗氧化活性。结果：从桑叶中分离鉴定了四个黄酮类化合物,分别为kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside（Ⅰ）、quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside（Ⅱ）、quer-citrin（Ⅲ）、morin-3-O-β-Dglucopyranoside（Ⅳ）;化合物Ⅲ和Ⅳ对DPPH自由基和ABTS自由基具有较好的清除能力,其半数清除率浓度（IC50）分别为109.3、20.1、9.2、3.6μg/ml,对DPPH自由基和ABTS自由基的清除率呈量效关系。结论：化合物Ⅲ和Ⅳ均有较好的抗氧化活性,其中化合物Ⅳ清除ABTS自由基的能力最强。     

一株产胞外多糖丹参内生真菌ZDH1-1的分离鉴定及其胞外多糖的提取工艺优化

目的对产胞外多糖的丹参内生真菌ZDH1-1进行菌种鉴定,并对其胞外多糖的提取工艺进行优化。方法采用形态鉴定结合ITS序列分析对内生真菌ZDH1-1进行鉴定;采用苯酚硫酸法对内生真菌ZDH1-1胞外多糖进行含量测定;在单因素试验基础上,以乙醇浓度、醇沉时间、醇沉温度为自变量,胞外多糖浓度为因变量,通过Box-Behnken设计对3个自变量各水平进行二项式拟合,优选内生真菌ZDH1-1胞外多糖的提取工艺。结果丹参内生真菌ZDH1-1胞外多糖的最佳提取条件为乙醇-真菌发酵液体积比4:1,乙醇沉淀时间10h,乙醇沉淀温度12℃,ZDH1-1胞外多糖浓度为4.50mg/m L,与预测值的偏差1.96%。结论优化的丹参内生真菌ZDH1-1胞外多糖提取工艺快速简便,稳定可靠,为丹参内生真菌多糖的开发利用提供参考。     

铁皮石斛茎非多糖与粗多糖体内外抗氧化活性的比较

目的 :明确铁皮石斛茎非多糖成分的抗氧化活性并与粗多糖进行比较,为非多糖成分的开发利用提供理论依据。方法:水提醇沉法制备铁皮石斛茎粗多糖,85%乙醇提取液合并醇沉上清液经制备后得到非多糖。以VC为阳性对照,采用ABTS法、DPPH自由基清除法及PMS-NBT-NADH法分别研究非多糖与粗多糖对ABTS自由基、DPPH自由基及超氧阴离子(O2·-)的清除能力。采用高糖高脂复合饮酒制备氧化损伤大鼠模型,灌胃给予铁皮石斛茎总提取物、非多糖、粗多糖(剂量均为1、2 g/kg,按生药计),6周后测定大鼠血清T-AOC、SOD及MDA。结果:在ABTS自由基、DPPH自由基、O2·-清除能力方面,非多糖优于粗多糖(非多糖的半抑制浓度IC50分别为0.357、1.545、3.535 mg/ml,粗多糖的IC50分别为6.597、2.077、4.916 mg/ml)。铁皮石斛茎总提取物、非多糖、粗多糖均能明显升高模型大鼠血清T-AOC值及SOD活力,降低MDA含量。结论:铁皮石斛茎非多糖成分在体内外均具有较强的抗氧化活性,并在清除ABTS自由基方面优于粗多糖,值得进一步开发并加以利用。     

南板蓝根内生真菌分离鉴定及其生物活性研究

目的 对南板蓝根Baphicacanthus cusia(Nees)Bremek.内生真菌进行分离鉴定,并考察其生物活性.方法 采用植物组织表面灭菌法分离纯化南板蓝根、茎和叶中的内生真菌,结合分子生物学与形态学进行种属鉴定.采用二倍稀释法测定真菌发酵物的抑制活性.采用总还原力、DPPH自由基和羟基自由基清除法测定真菌发...     

灯盏细辛的抗氧化活性研究

目的:研究灯盏细辛6个化合物的抗氧化活性.方法:以灯盏细辛为原料,采用有机溶剂提取法和色谱柱法对灯盏细辛中化学成分进行提取与分离,利用核磁共振等波谱学方法进行结构鉴定,体外法检测6个化合物对1-二苯基-2-苦味酰肼自由基清除法( DPPH),2,2′-联氨-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)自由基清除法(ABTS),O2·自由基和·OH自由基的清除能力,并以维生素C(Vc)为阳性对照,结果:6个化合物者对DPPH,ABTS,O-2·,·OH自由基均具有清除作用,且与浓度呈良好的量效关系,6个化合物清除自由基能力与Vc相似.结论:灯盏细辛中的6个化合物均具有较强的抗氧化活性.     

药用植物广藿香内生真菌的生物活性研究

目的:研究40株广藿香内生真菌的生物活性,为进一步发掘活性代谢产物提供理论依据。方法:采用SRB、PNPG和DPPH法分别测定内生真菌提取物的细胞毒、抑制α-葡萄糖苷酶和清除DPPH自由基等活性。结果:21株内生真菌对肿瘤细胞SF-268、MCF-7、NCI-H460、Hep G-2中的至少3种细胞具有抑制活性,IC_(50)值在0.03~20.30μg/mL之间,其中菌株A616的抑制活性最为显著,对4种肿瘤细胞的IC_(50)值分别为0.044、0.031、0.030、0.032μg/mL;13株内生真菌具有抑制α-葡萄糖苷酶活性,其中菌株A598的活性最为显著,其IC_(50)值为184.38μg/mL;15株内生真菌具有DPPH自由基清除活性,其中菌株A594、A598、A630显示出较强的DPPH自由基清除能力,IC_(50)值分别为36.33、20.63、59.93μg/mL。结论:广藿香内生真菌具有多种生物活性,值得进一步深入研究。     

基于高通量测序和组织分离法的虎耳草内生真菌多样性分析及其抗氧化活性研究

目的 结合高通量测序技术和传统可培养技术对虎耳草Saxifraga stolonifera内生真菌类群及多样性进行系统分析,并对其抗氧化活性进行初筛,为虎耳草内生真菌资源的开发与利用奠定基础,也为天然抗氧剂的筛选提供了菌种资源。方法 虎耳草内生真菌多样性的分析采用Illumina Miseq高通量测序技术和组织分离法,利用化学法检测虎耳草内生真菌对1,1-二苯基-2-苦基肼自由基（2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical,DPPH）、羟基自由基（hydroxyl radical,OH）和2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸[2,2′-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABT]等自由基的清除率,进而筛选出具有抗氧化活性的菌株。结果 高通量测序分析发现虎耳草内生真菌隶属于347属,其中Dactylonectria(15.68%)为根部优势菌属,茎部的优势菌属为Humicola(9.57%),而叶部优势菌属为炭疽菌属Colletotrichum(5.33%)。利用组织分离法从虎耳草...     

多叶棘豆清除自由基活性研究

目的:研究多叶棘豆的清除自由基活性。方法:分别以常用抗氧化剂L-抗坏血酸和生育酚为对照,采用清除DPPH和ABTS自由基的方法对多叶棘豆乙醇提取物不同极性部位,以及AB-8大孔吸附树脂柱不同乙醇浓度洗脱部位进行清除自由基能力的评价。结果:多叶棘豆提取物AB-8大孔吸附树脂柱的50%乙醇洗脱部位对DPPH自由基和ABTS自由基均有较强的清除能力,其清除DPPH自由基能力强于同浓度的L-抗坏血酸。结论:AB-8大孔吸附树脂柱层析技术对多叶棘豆的清除自由基活性物质有分离富集作用,以50%乙醇洗脱部位活性最为突出。     

防已黄芪汤的抗氧化活性研究

目的测定防己黄芪汤(防己、黄芪、白术、甘草)中甲醇提取物和三氯甲烷提取物的抗氧化活性。方法采用2,2-二苯基-1-苦味基肼自由基清除(DPPH)实验、还原力实验、羟基自由基清除实验对其抗氧化活性进行研究。结果清除DPPH活性研究表明,甲醇提取物与三氯甲烷提取物的抗氧化能力较弱。还原能力实验证明三氯甲烷提取物的抗氧化能力只略低于甲醇提取物。清除羟基自由基实验结果则表明两种提取物均具有很高的清除羟基自由基能力。结论试验结果表明,甲醇提取物及三氯甲烷提取物具有很好的清除羟基自由基能力。     

利用电子顺磁波谱技术研究红参对羟自由基的清除作用

目的 探索电子顺磁波谱（electron paramagnetic resonance，EPR）技术检测红参清除自由基活性的适合产生体系，并研究红参对羟自由基（?OH）的清除作用及其物质基础。方法 采用电子顺磁共振波谱仪检测不同浓度的红参提取液对?OH的体外清除作用，并用液质联用技术（LC-MS）分析红参中的主要皂苷成分，然后研究这些人参皂苷成分对?OH的清除作用。结果 确定了羟自由基的生成体系为：Fe²⁺ 0.1 mmol?L^-1、H₂O₂ 500 mmol?L^-1、DMPO 225 mmol?L^-1；不同浓度的红参提取液对?OH具有明显的清除作用，且其清除?OH的效力与浓度成正相关；LC-MS分析显示该红参提取液中主要含有Rh1、Rf、Rb3、F1、F2、Rg3、Rg5等成分，其中人参皂苷Rg5的清除自由基活性最强。结论 本研究建立了用EPR技术研究红参清除自由基活性的适合产生体系，红参具有明显的清除?OH的能力，且人参皂苷Rg5是其清除自由基的活性成分之一，确定了红参抗自由基的主要物质基础，为红参及人参皂苷Rg5的开发、应用提供了科学依据和理论基础。     

冠突散囊菌不同溶剂提取物体外抗氧化活性研究

目的：研究冠突散囊菌体外抗氧化活性。方法：采用萃取法对冠突散囊菌甲醇提取物萃取获得石油醚,乙酸乙酯和正丁醇3种提取物,并以维生素C（VC）为阳性对照,用清除二苯代苦味酰基（DPPH）自由基和（ABTS）自由基测定法,对冠突散囊菌3种提取物抗氧化活性进行测定。结果：冠突散囊菌石油醚提取物清除 DPPH和ABTS⁺自由基半数清除浓度（IC₅₀）分别为0.078,0.083 g·L^-1 ,乙酸乙酯提取物IC₅₀分别为0.21,0.13 g·L^-1;正丁醇提取物对DPPH和ABTS⁺自由基几乎没有清除作用;3种提取物清除DPPH和ABTS⁺自由基的能力均比阳性对照VC（IC₅₀分别为0.032,0.024 g·L^-1）弱。结论：冠突散囊菌石油醚和乙酸乙酯提取物均具有抗氧化活性,且石油醚提取物活性较强。     

金银花指纹图谱及其清除DPPH自由基的谱-效关系

目的:探讨金银花清除DPPH自由基的活性成分。方法:采用HPLC获得金银花甲醇提取液指纹图谱,并对色谱图进行融合处理;同时建立提取液对DPPH自由基的清除方程,采用双变量相关分析将DPPH自由基的半数清除率IC50与HPLC指纹图谱共有峰的标准化峰面积比值关联。结果:4(绿原酸),10(异绿绿原酸B),12(异绿原酸C)号共有峰含量变化与DPPH自由基清除活性显著负性相关(P0.05)。结论:金银花液相指纹图谱与清除DPPH自由基的谱效关系,对于金银花药用物质基础研究具有一定参考价值。     

藤梨根甲醇提取物的抗氧化活性及物质基础初步研究

目的研究藤梨根甲醇提取物的抗氧化活性,并初步分析其活性化学成分。方法以清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-二-(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基能力为指标,测定藤梨根甲醇提取物的体外抗氧化活性;采用高效液相色谱-质谱联用技术对藤梨根甲醇提取物化学成分进行分析。结果藤梨根甲醇提取物对DPPH、ABTS自由基具有良好的清除作用,半数有效浓度(EC50)分别为(26.275±1.464)mg/mL和(29.826±1.309)mg/mL;通过紫外光谱和质谱分析,初步鉴定了19个化学成分。结论藤梨根甲醇提取物具有很好的体外抗氧化活性,其主要活性成分为多羟基和不饱和双键的成分。     

刺五加根有效组分的抗氧化活性分析

目的:研究刺五加根有效组分在不同质量浓度下的体外抗氧化活性,筛选最佳有效组分,为刺五加根的研究和开发提供参考。方法:采用紫外分光光度法测定各组分中总黄酮和总皂苷含量,检测波长分别为510,550 nm。利用超氧阴离子自由基(O-2·)清除法,羟基自由基(·OH)清除法,1,1-二苯基-2-苦基肼基(DPPH)自由基清除法和亚铁还原能力实验(FRAP)法测定刺五加根不同有效组分的抗氧化活性。结果:不同有效组分的刺五加根在一定质量浓度范围内均有一定的抗氧化活性,且随着质量浓度的增加抗氧化能力越强。在O-2·清除法模型中,质量浓度为20 g·L~(-1)时,30%乙醇洗脱部位清除率(91.61±2.59)%。在·OH清除法模型中,质量浓度为1.0 g·L~(-1)时,30%乙醇洗脱部位清除率(90.29±2.06)%。在DPPH自由基清除法模型中,质量浓度为0.7 g·L~(-1)时,30%乙醇洗脱部位清除率清除率达(84.45±0.14)%。在FRAP法中,质量浓度为1.0 g·L~(-1)时,30%乙醇洗脱部位的FRAP值3 474±36.84。结论:刺五加根各有效组分均有一定的抗氧化活性,30%乙醇洗脱部位的抗氧化能力最强,可开发成天然的植物抗氧化剂。     

柴胡疏肝散醇提物的抗氧化活性

目的:研究柴胡疏肝散醇提物的体外自由基清除能力和体内抗氧化活性。方法:体外抗氧化实验测定了柴胡疏肝散醇提物对1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH)、羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O-2·)清除能力;体内抗氧化实验,小鼠随机分为正常组、模型组、柴胡疏肝散水提组(8.2 g·kg-1)、柴a组(1.6 g·kg-1)、柴胡疏肝散醇提物低、中、高剂量组(4.1,8.2,20.5 g·kg-1),除正常组外,其余组小鼠每天接受不可预见性温和应激,共28 d。造模1周后灌胃给药,研究柴胡疏肝散醇提物对小鼠的肝组织中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响,并与水提物做比较,评价其体内抗氧化活性。结果:体外抗氧化实验表明,柴胡疏肝散醇提物对DPPH,·OH和O-2·的清除率随着浓度的增大而增大,其对自由基清除率达到半数时的抗氧化剂浓度(EC50)分别为0.75 mg·L-1,35.01 g·L-1,52.17 g·L-1;体内实验表明,模型组小鼠肝脏中SOD,CAT酶活性显著低于正常组(P<0.01)。给药剂量越大,SOD,CAT酶活性越高,在本实验设定的给药浓度范围内,呈现一定的量效关系。与水提组相比,具有同等生药量的醇提物8.2 g·kg-1组SOD,CAT酶活性显著较高(P<0.05,P<0.01),说明醇提物的抗氧化作用较水提物高。结论:柴胡疏肝散醇提物具有较强的抗氧化生物活性。