壮药鸡血藤提取物毒性作用及体外抗肿瘤作用的实验研究

目的:观察鸡血藤提取物(MHD)的毒性及体外抗肿瘤作用。方法:采用常规小鼠急性毒性试验方法、MTT法观察鸡血藤提取物对人胃癌细胞株7901,人肝癌细胞株7404,人宫颈癌细胞株Hela细胞增殖的抑制作用。结果:MHD在大于20μg/ml浓度时对Hela细胞抑制率30%,有一定的抑制作用,其结果具有统计学意义。结论:MHD可能具有一定抑制Hela肿瘤细胞增殖及其诱发的移植性肿瘤作用。     

马甲子急性毒性抗肿瘤作用及对免疫功能影响的初步研究

目的:评价马甲子乙酸乙酯提取物(Ethyl Acetate Extract of Paliurus ramosissimus,EAEPR)的急性毒性、体内抗肿瘤药效及对免疫功能的影响,为其进一步开发提供初步药理学依据。方法:复制荷H22和HT-29小鼠实体瘤模型,灌胃给予EAEPR(1.6、0.8、0.4g/kg)连续14d,检测肿瘤生长情况和对免疫器官的影响;上述剂量灌胃给予6d,以鸡红细胞所致小鼠溶血素抗体生成实验观察其对体液免疫的影响,2,4二硝基氯苯(DNCB)所致小鼠耳肿胀实验观察其对细胞免疫的影响;灌胃给予小鼠的急性毒性试验。结果:EAEPR 3.2、1.6g/kg对H22和人结肠癌HT-29荷瘤小鼠肿瘤生长均有明显抑制作用,也可显著抑制鸡红细胞所致小鼠溶血素抗体生成和NDCB所致小鼠耳肿胀;小鼠急性毒性试验最大给药量为652g生药/kg,未见明显急性毒性反应。结论:马甲子乙酸乙酯提取部位具有较高安全性,能显著抑制体内H22和S180肿瘤的生长,并对特异性免疫有抑制作用。     

木芙蓉根提取物的急性毒性及体外抗肿瘤活性的实验研究

目的观察木芙蓉根提取物的急性毒性反应,筛选其体外抗肿瘤活性部位。方法采用最大灌胃给药量法观察木芙蓉根总提取物的急性毒性;采用MTT比色法检测木芙蓉根不同提取物对急性早幼粒细胞白血病细胞株HL-60、慢性粒细胞白血病细胞株K562、K562耐阿霉素细胞株、人恶性淋巴瘤细胞株CA-46、人乳腺癌细胞株MCF-7、人胃癌细胞株AGS增殖的抑制作用。结果给小鼠灌胃最大给药量(相当于233.74 g生药·kg-1体重),无毒性反应出现;木芙蓉根乙酸乙酯萃取物对除CA-46外的多种肿瘤细胞株的增殖均有较强的抑制作用,且抑制作用随药物浓度的增加而增强;正丁醇提取物、乙醇萃取物和水提物对上述各种肿瘤细胞增殖的抑制作用均较弱。结论木芙蓉根提取物的急性毒性很小,木芙蓉根乙酸乙酯提取物是主要的抗肿瘤活性部位。     

苗药青龙方不同提取物的镇痛抗炎作用实验研究

目的:探索苗药青龙方不同极性溶剂提取物的镇痛和抗炎活性。方法:以热板法和醋酸扭体法进行镇痛实验、二甲苯致小鼠耳肿胀实验,对青龙方的水提取物、乙醇提取物进行镇痛抗炎作用实验研究。结果:水提取物能提高小鼠痛阈值,对醋酸致小鼠扭体反应有一定抑制作用,对二甲苯致小鼠耳廓肿胀具抑制作用;乙醇提取物显著提高小鼠痛阈值,对醋酸致小鼠扭体反应具显著抑制作用,对二甲苯致小鼠耳廓肿胀有明显抑制作用。结论:同剂量下,乙醇提取物的镇痛抗炎作用优于水提取物的镇痛抗炎作用。     

凤尾草提取物对不同肿瘤细胞生长抑制作用研究

目的:研究凤尾草提取物对不同肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法:采用MTT法及Trypan Blue拒染法检测凤尾草提取物对体外培养的人肝癌细胞株BLE-7402、小鼠黑色素瘤细胞株B16-BL6、人白血病细胞株HL-60细胞增殖的抑制作用。结果:凤尾草提取物在5～80μg·mL-1剂量的范围内对上述3种细胞株均有明显的抑制作用。结论:凤尾草提取物在体外对多种肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用。     

新疆多伞阿魏对胃癌细胞SGC-7901增殖抑制作用研究

目的:研究新疆多伞阿魏提取物对胃癌细胞株SGC-7901增殖抑制作用及作用机制。方法:采用二苯基四氮唑溴盐比色法(MTT法)检测新疆多伞阿魏不同提取物对SGC-7901细胞增殖的抑制作用,筛选出抑制作用最强的提取物W3。光镜下观察W3不同浓度对SGC-7901细胞形态的影响,TUNLE凋亡染色实验检测W3诱导SGC-7901细胞凋亡作用,流式细胞仪进一步检测其对细胞凋亡率的影响。结果:多伞阿魏提取物W3能显著抑制SGC-7901细胞增殖,同时具有诱导细胞凋亡作用,且呈剂量依赖关系。结论:多伞阿魏提取物W3抑制胃癌细胞增殖作用可能与诱导细胞凋亡有关。     

穿破石水提取物和醇提取物急性毒性实验研究

目的探讨穿破石水提取物和醇提取物急性毒性。方法急性毒性试验采用小鼠最大耐受量(MTD)灌胃法,观察一次性口服灌胃(i.g)给药后,连续观察14 d,记录小鼠的毒性反应及死亡情况。结果穿破石水提取物急性毒性试验小鼠MTD>228.6 g/kg。穿破石醇提取物急性毒性试验小鼠MTD>80 g/kg。实验中,动物饮食和活动正常,毛色光泽,生长良好,未见任何中毒表现,无死亡。14 d后处死小鼠,肉眼观察各器官均无异常。结论穿破石水提取物和醇提取物对小鼠无急性毒性。     

半边旗提取物5F注射液对淋巴肉瘤荷瘤小鼠的抑瘤作用及急性毒性研究

目的:观察半边旗提取物5F注射液体内抗肿瘤活性及急性毒性。方法:建立荷瘤鼠动物模型,采用荷瘤小鼠瘤重、抑瘤率观察提取物5F注射液对小鼠移植性淋巴肉瘤抑制作用;观察5F注射液对荷艾氏腹水癌小鼠的生命延长率;小鼠腹腔注射不同剂量5F注射液,用药后观察小鼠1W的反应,用Bliss计算LD50。结果:提取物5F注射液对小鼠移植性淋巴肉瘤有抑瘤作用:对荷艾氏腹水癌的小鼠生命有延长作用;提取物5F注射液对小鼠的LD50为414.4mdkg。结论:半边旗有效成分5F具有一定的体内抗肿瘤活性;对小鼠的毒性作用较低。     

重楼醇提取物对胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察重楼醇提取物对胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用MTT法检测重楼醇提取物对胃癌细胞增殖影响的情况;采用流式细胞术考察不同浓度重楼醇提取物作用胃癌SGC-7901细胞后,细胞周期和细胞凋亡的变化。结果:不同浓度的重楼醇提取物作用于胃癌SGC-7901细胞后,细胞克隆率显著降低,且与剂量呈依赖关系。细胞周期分析显示:重楼醇提取物能够导致S期阻滞,G2/M期细胞比例显著下降,Alinenv-FITC法检测发现7μg·m L-1的重楼醇提取物作用胃癌SGC-7901细胞24h后的凋亡细胞比例为23.28%,明显高于正常对照组,且存在剂量依赖性。结论:重楼醇提取物对胃癌SGC-7901细胞生长有明显抑制作用,并可诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡。     

川楝子不同提取部位药效及毒性的比较研究

目的:探讨川楝子不同提取部位的部分药效和急性毒性作用。方法:采用冰乙酸或甲醛致痛复制小鼠疼痛模型,角叉菜胶致足肿胀和二甲苯致耳肿胀等炎症模型,对川楝子的乙酸乙酯提取物、石油醚提取物、80%乙醇提取物及水提取物的镇痛和抗炎等作用进行了研究。结果:川楝子乙酸乙酯提取物40 g/kg剂量能显著抑制冰乙酸所致小鼠扭体反应和甲醛所致鼠足疼痛反应,减轻二甲苯诱导的小鼠耳廓肿胀度,并可显著增加小鼠的睾丸重量,减轻其体重;川楝子乙醇提取物20 g/kg剂量组能显著降低角叉菜所致诱导的小鼠足肿胀程度及二甲苯诱导的耳廓肿胀度;川楝子石油醚提取物对甲醛所致的疼痛反应有明显的抑制作用,同时还可显著增加小鼠睾丸和肾上腺指数;川楝子水提物无明显镇痛和抗炎作用。测得小鼠灌服川楝子乙酸乙酯提取物的LD50为82.85 g/kg。未测出其它溶媒提取物对小鼠的LD50,测得小鼠灌胃川楝子石油醚提取物、酒精提取物及水提物的最大耐受量分别为:133.2 g/kg,122.0 g/kg,52.0 g/kg。在此剂量下各组动物均未出现明显异常。结论:川楝子乙酸乙酯提取物具有显著的抗炎和镇痛作用,同时也有较强的急性毒性作用;提示川楝子的有效成分可能在乙酸乙酯提取物部分,其毒性成分和有效物质可能为同一类物质。     

辽东楤木叶总皂苷对人胃癌BGC细胞凋亡的影响

目的:探讨辽东楤木叶总皂苷(ETS)对人胃癌BGC细胞凋亡的影响。方法:采用MTT比色法测定辽东楤木叶总皂苷在体外对人胃癌BGC细胞增殖的影响;激光共聚焦显微镜观察FITC-Annexin V/PI双染法检测辽东楤木叶总皂苷作用于人胃癌BGC细胞后引起细胞凋亡的形态特征。结果:MTT比色法结果表明,辽东楤木叶总皂苷各剂量组能不同程度抑制人胃癌BGC细胞的增殖,激光共聚焦FITC-Annexin V/PI双染法检测辽东楤木叶总皂苷可诱导人胃癌BGC细胞出现凋亡早、中、晚期的细胞形态。凋亡早期仅细胞膜呈绿色,细胞核不染色;凋亡中、晚期则细胞膜呈绿色,细胞核呈红色。结论:辽东楤木叶总皂苷能够有效抑制癌细胞增殖、诱导凋亡,具有明显的抗肿瘤作用。     

硇砂提取物治疗小鼠Lewis肺癌的效果初步评价

目的评价硇砂提取物治疗小鼠Lewis肺癌的效果及对免疫系统的毒性.方法采用MTT法及流式细胞仪分别检测Lewis肺癌细胞的增殖和细胞周期,采用小鼠Lewis肺癌皮下移植肿瘤模型观察硇砂提取物的抗肿瘤作用,通过小鼠碳粒廓清和迟发性变态反应考察硇砂提取物对免疫系统的毒性.结果硇砂提取物可剂量依赖性抑制Lewis肺癌细胞的增殖,使细胞周期停止于S期.硇砂提取物水溶液连续瘤内给药8 d对小鼠Lewis肺癌皮下肿瘤的抑瘤率为46.7%,但同时灌胃给药对肿瘤的抑瘤率仅为15.7%.硇砂提取物水溶液皮下注射或灌胃给药对小鼠碳粒廓清能力及迟发性变态反应均无明显影响.结论硇砂提取物的抗肿瘤作用与给药途径有关,其对机体自身的免疫功能无明显影响.     

藤梨根提取物对人胃癌BGC细胞凋亡及Bax蛋白表达的影响

目的：探讨藤梨根提取物对人胃癌BGC-823细胞凋亡的影响及其调控机制。方法：体外培养对数生长期胃癌BGC-823细胞,采用不同浓度的藤梨根提取物作用于人胃癌BGC-823细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡,采用免疫组织化学方法检测Bax蛋白表达。结果：藤梨根作用于BGC-823,在8～32mg·mL^-1时呈不同程度的促进凋亡;藤梨根提取物大、中、小剂量组对人胃癌BGC-823细胞中Bax表达水平上调。结论：藤梨根提取物对人胃癌BGC-823细胞的增殖具有明显抑制作用,在实验浓度范围内呈浓度依赖性促进细胞凋亡,这可能与激活Bax蛋白表达有关。     

姜黄素与吉非替尼联合应用对胃癌SGC-7901细胞增殖及裸鼠移植瘤生长的影响

目的：探讨不同浓度的姜黄素与吉非替尼联合应用对体内胃癌裸鼠移植瘤及体外胃癌细胞SGC-7901生长的影响。方法：将胃癌细胞SGC-7901制成细胞悬液后接种于裸鼠皮下,制备胃癌裸鼠模型。将裸鼠模型随机分为生理盐水组及姜黄素与吉非替尼联合应用低剂量组、中剂量组、高剂量组,腹腔注射给药,每周一次。用药4次后,处死裸鼠,剥取肿瘤组织,称取质量,计算肿瘤抑制率。用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中c-myc的表达。低剂量、中剂量、高剂量姜黄素与吉非替尼联合作用SGC-7901细胞,Western blot方法检测细胞内c-myc的表达,MTT检测细胞的增殖力,细胞黏附实验与transwell法检测细胞的侵袭能力,流式细胞术检测细胞的周期及凋亡率。结果：与生理盐水组比较,中剂量组及高剂量组的抑瘤率分别为（40.26±4.25）%、（44.81±5.74）%,两组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。免疫组织化学显示,中剂量、高剂量姜黄素与吉非替尼联合应用明显抑制c-myc的活化。中剂量、高剂量姜黄素与吉非替尼联合作用SGC-7901细胞后,c-myc表达量明显降低,细胞增殖及侵袭能力明显受到抑制,G0/G1期细胞数明显升高（P〈0.05）,S期细胞数明显降低（P〈0.05）,细胞凋亡率明显高于对照组（P〈0.05）。结论：一定剂量的姜黄素与吉非替尼联合可体内抑制胃癌裸鼠移植瘤的生长及体外抑制SGC-7901细胞的增殖、侵袭能力及促进细胞凋亡,其抑制胃癌生长的机制可能是通过降低c-myc蛋白的表达,从而影响c-myc参与调控的癌细胞增殖,转移过程。     

消痰散结方对裸鼠人胃癌细胞增殖相关蛋白表达的影响

目的:探讨消痰散结方抑制胃癌细胞增殖的作用机制。方法:采用OB胶粘贴法建立裸鼠人胃癌MKN-45原位移植瘤模型,随机分成模型组,消痰散结低、中、高剂量组,5-Fu组,每组8只,观察消痰散结方干预胃癌组织NF-κBP65蛋白、COX-2蛋白表达的影响及相关性。结果:①消痰散结方中、高剂量组、5-Fu组NF-κBP65蛋白的阳性表达与模型组相比P0.05,有统计学意义;②消痰散结方中剂量组COX-2蛋白阳性表达率与模型组相比P0.05,有统计学意义,消痰散结方高剂量组COX-2蛋白阳性表达率与模型组相比有显著统计学差异,P0.01;③胃癌细胞中NF-κBP65蛋白与COX-2蛋白表达存在正相关(r=0.952,P0.01)。结论:胃癌MKN-45细胞中存在着活化的NF-κB及高表达的COX-2蛋白,并且存在线性相关,消痰散结方可能通过其抑制NF-κB活性,阻断了NF-κB对COX-2的活性调控,使胃癌细胞增殖受到抑制,从而阻断胃癌发展,控制胃癌复发与转移。     

裸鼠人胃癌细胞核转录因子NF—κBP^65蛋白与端粒酶逆转录酶（hTERT）蛋白的表达及关系

目的：通过观察胃癌细胞核转录因子NF-κBP^65蛋白与端粒酶逆转录酶（hTERT）蛋白的表达及关系，探讨消痰散结方抑制胃癌细胞增殖的作用机制。方法：采用OB胶粘贴法建立裸鼠人胃癌MKN-45原位移植瘤模型，随机数字表法分成模型组，消痰散结低、中、高剂量组，5-Fu组，每组8只，观察消痰散结方干预对胃癌组织NF-κBP^65蛋白、hTERT蛋白表达的影响及相关性。结果：①消痰散结方中、高剂量组、5-Fu组NF-κBP^65蛋白的阳性表达与模型组相比，P〈0．05，有统计学意义；②消痰散结方中剂量组、5-Fu组hTERT蛋白的阳性表达率与模型组比较明显降低，P〈0．05，有统计学意义；消痰散结方高剂量组hTERT蛋白的阳性表达率与模型组有显著差异，P〈0．01；③胃癌细胞NF-κBP^65蛋白与hTERT蛋白表达呈显著正相关（r=0．929，P〈0．01）。结论：胃癌MKN-45细胞中存在着活化的NF—κB及高表达的hTERT蛋白，并且存在线性相关，消痰散结方可能通过其抑制NF—κB活性，阻断了NF—κB对hTERT的活性调控，使胃癌细胞增殖受到抑制，从而阻断胃癌发展，控制胃癌复发与转移。     

中药蛇六谷石油醚萃取物诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的实验研究

目的:研究中药蛇六谷石油醚萃取物诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的机制。方法:以MTT法检测蛇六谷石油醚萃取物对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响;Western Blot法检测细胞凋亡相关蛋白Survivin、Bcl-2、Bax、Cleaved-Caspase-9的表达。结果:该提取物对人胃癌SGC-7901细胞增殖存在明显的抑制作用,且呈剂量-效应关系。Western Blot实验结果显示该提取物能明显下调Survivin蛋白、Bcl-2蛋白的表达,上调Bax蛋白、Cleaved-Caspase-9蛋白酶的表达;结论:该提取物诱导SGC-7901细胞凋亡的机制可能与影响上述蛋白的表达。     

柳叶蜡梅提取物对人胃癌SGC-7901细胞的作用机制研究

目的:探讨柳叶蜡梅提取物在体外对人胃癌细胞株SGC-7901的增殖抑制作用及其可能的机制。方法:应用细胞培养、噻唑蓝(MTT)比色法、光镜观察、扫描和透射电镜观察、Hoechst33258/PI染色等技术研究柳叶蜡梅提取物对SGC-7901细胞的抑制作用。结果:柳叶蜡梅提取物可明显抑制SGC-7901细胞生长,随着药物浓度的增加,呈现剂量依赖性效应;光镜及扫描透射电镜观察显示,药物处理组细胞表面微绒毛减少并发泡、细胞核固缩、染色质凝聚等形态学特征;细胞核经Hoechst33258染色出现颗粒状荧光,而PI染色无红色荧光出现。结论:柳叶蜡梅提取物对人胃癌SGC-7901细胞具有明显的抑制作用,其机制可能与细胞凋亡相关。     

山茱萸提取物抗肿瘤作用及机制探讨

目的:研究山茱萸提取物的抗肿瘤作用及其作用机制。方法:取生长良好接种10~14 d的Lewis肺癌C57BL小鼠,制备Lewis肺癌细胞,通过噻唑蓝(MTT)法检测山茱萸提取物对癌细胞的抑制情况,流式细胞仪检测山茱萸提取物对细胞周期和细胞凋亡的影响;激光共聚焦显微镜检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)及p53蛋白表达;用健康C57BL小鼠腋下接种Lewis肺癌细胞悬液,接种成功后按山茱萸提取物100,200,400 mg·kg~(-1)剂量ig给药2周,检测小鼠体内瘤的质量、肺转移灶数;酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定小鼠血清中癌胚抗原的含量。结果:与空白组比较,山茱萸提取物可明显抑制肿瘤细胞的增殖(P0.05),山茱萸提取物对Lewis肺癌细胞处理48 h后,细胞周期阻滞在G0/G1期(P0.05,P0.01);与空白组比较,山茱萸提取物400 mg·kg~(-1)组Bcl-2蛋白表达显著降低,Bax及p53蛋白表达显著升高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,山茱萸提取物400 mg·kg~(-1)组小鼠体内瘤的质量、肺转移灶数均显著降低,小鼠血清中癌胚抗原含量明显降低(P0.05)。结论:山茱萸提取物在体内外对Lewis肺癌细胞均有抑制作用,其作用机制与诱导肿瘤细胞的凋亡和干扰细胞周期分布有关。