人参三七川芎提取物对自然衰老大鼠血管外膜重构的干预机制

目的观察自然衰老大鼠血管外膜的重构特点,并探讨人参三七川芎提取物的干预作用。方法将85只20月龄的自然衰老Wistar大鼠按体重水平分层后随机分为衰老组、人参三七川芎醇提物低、中、高剂量组(下称中药低、中、高剂量组)及氯沙坦对照组(Losartan组),每组17只,另选14只2月龄青年Wistar大鼠作为青年组。中药高、中、低剂量组分别给予不同剂量的人参三七川芎醇提物[1493.4、746.7、373.4mg/(kg·d)]灌胃给药,Losartan组给予氯沙坦钾混悬液[10 mg/(kg·d)]灌胃,衰老组及青年组给予同体积蒸馏水灌胃,均每日1次。干预15周后,采用HE染色法观察各组大鼠胸主动脉壁形态;采用苦味酸天狼猩红染色法观测血管壁胶原种类、分布和含量;放射免疫分析法检测血浆肾素活性(plasma renin activity,PRA)、血浆血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)浓度及外膜组织AngⅡ含量;生物化学分析法检测外膜组织羟脯氨酸水平;实时荧光定量多聚酶链式反应(real-time PCR,RT-PCR)检测外膜组织血管紧张素Ⅱ1型受体(angiotensinⅡreceptor 1,AT_1R)、血管紧张素Ⅱ2型受体(angiotensinⅡreceptor 2,AT_2R)mRNA水平;Western blot法检测外膜组织AT_1R、AT_2R蛋白表达水平。结果与青年组比较,衰老组血管外膜增厚,外膜厚度/管径增高,胶原纤维堆积,Ⅰ型胶原面积增加,Ⅲ型胶原面积减少,Ⅲ型胶原/Ⅰ型胶原降低(P0.05),血浆PRA及AngⅡ降低(P0.01,P0.05),外膜组织AngⅡ及羟脯氨酸含量增高,AT_1R mRNA及蛋白表达下调,AT_2R mRNA及蛋白表达上调(P0.01,P0.05)。与衰老组比较,中药低、中、高剂量组均可改善衰老血管形态学改变;中药中、高剂量组及Losartan组外膜厚度/管径均减小,中药高剂量组及Losartan组Ⅰ型胶原面积减少,Ⅲ型胶原面积增加,Ⅲ型胶原/Ⅰ型胶原明显升高,血管外膜羟脯氨酸含量明显降低(P0.05,P0.01);中药中、高剂量及Losartan组外膜组织中AngⅡ水平降低(P0.01,P0.05);衰老组、中药各剂量组、Losartan组各组间PRA比较,差异无统计学意义(P0.05)。与衰老组比较,各治疗组AT_1R mRNA表达均增加(P0.01),中药中、高剂量组AT_2R mRNA表达亦增加(P0.05);中药高剂量组及Losartan组AT_1R蛋白表达升高(P0.01,P0.05);中药中、高剂量组AT_2R蛋白表达亦升高(P0.05)。结论衰老大鼠血管出现外膜重构,表现为外膜增厚,胶原堆积,Ⅰ型、Ⅲ型胶原比例紊乱等,其机制可能与局部肾素血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)激活有关;人参三七川芎提取物可能通过对外膜局部AngⅡ、AT_1R等多靶位的干预,改善外膜重构,进而延缓血管衰老。     

丹蒌片抗痰瘀互结型动脉粥样硬化大鼠炎症反应及机制

目的观察丹蒌片对痰瘀互结型动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)大鼠炎症因子以及脂蛋白相关磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2,LP-PLA2)和分泌型磷脂酶A2(secretory phospholipase A2,s PLA2)表达的影响,分析其可能机制。方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、丹蒌低剂量组(低剂量组)、丹蒌高剂量组(高剂量组),每组8只。正常组大鼠喂食基础饲料12周,余4组均采用高糖高脂饮食联合维生素D3腹腔注射复制大鼠痰瘀互结型AS模型。模型组、西药组、低剂量组、高剂量组分别给予生理盐水、阿托伐他汀钙混悬液[1.8 mg/(kg·d)]、丹蒌片低剂量[450 mg/(kg·d)]、高剂量混悬液[900 mg/(kg·d)]灌胃干预8周。观察大鼠一般情况。灌胃结束后,处死大鼠取血清,检测大鼠血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C、IL-6、TNF-α、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein,MCP-1)、氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)、LP-PLA2、s PLA2,HE染色观察大鼠胸主动脉病理学改变,Western blot和荧光定量PCR法分别检测大鼠胸主动脉内LP-PLA2、s PLA2蛋白及mRNA表达。结果与正常组比较,模型组大鼠精神萎靡,反应迟钝,胸主动脉可见典型的AS斑块,血清TC、TG、LDL-C、IL-6、TNF-α、MCP-1、ox-LDL、LP-PLA2、s PLA2水平升高(P0.05),胸主动脉LP-PLA2、s PLA2蛋白及mRNA表达升高(P0.05)。干预8周后,3个给药组大鼠均变活跃,胸主动脉HE染色见斑块消退。与模型组比较,3个给药组TC、TG、LDL-C、IL-6、TNF-α、MCP-1、ox-LDL、LP-PLA2水平降低(P0.01,P0.05),西药组血清s PLA2水平降低,大鼠胸主动脉LP-PLA2、s PLA2蛋白及mRNA表达降低(P0.01,P0.05);低剂量组胸主动脉LPPLA2蛋白及mRNA表达降低(P0.01,P0.05);高剂量组胸主动脉LP-PLA2、s PLA2蛋白及mRNA表达降低(P0.01,P0.05)。结论丹蒌片可能通过抑制LP-PLA2的表达,减少ox-LDL生成,从而发挥其抗炎、抗AS的作用。     

新血府逐瘀汤对动脉粥样硬化模型大鼠免疫因子TGF-β、VCAM-1表达的影响

目的:观察新血府逐瘀汤对AS大鼠主动脉病理形态学改变及转化生长因子-β(TGF-β)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响,探讨新血府逐瘀汤抗动脉粥样硬化(AS)的可能机制。方法:健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组,模型组,立普妥组,新血府逐瘀汤低剂量组及新血府逐瘀汤高剂量组。除空白组外,其他各组复制AS模型,中药低剂量组9g/(kg·d)、中药高剂量组18g/(kg·d)灌胃;立普妥组2mg/(kg·d)水溶液灌胃;对照组及模型组灌服等容积生理盐水,连续8周;HE染色镜下观察胸主动脉病理学改变,免疫组织化学法检测胸主动脉TGF-β、VCAM-1表达,并进行相关性分析。结果:与模型组比较,新血府逐瘀汤高剂量组可显著提高TGF-β表达(P0.01),降低VCAM-1表达(P0.05),两者存在显著负相关性(P0.01)。结论:新血府逐瘀汤在一定程度上可通过上调保护性因子TGF-β以抑制免疫炎症反应,发挥抗动脉粥样硬化的作用。     

补益肾气法干预不同周龄自发性高血压大鼠大动脉管壁结构的组织形态学研究

目的:通过观察不同周龄自发性高血压大鼠(SHR)经补益肾气法干预前后大动脉的组织形态学变化,评价补益肾气法对高血压病大动脉管壁结构的保护作用。方法:标准尾部测压法测量尾动脉收缩压;苏木素-伊红(HE)染色法对比观察动脉管壁形态结构变化;透射电镜法观察各大动脉的胶原排列情况。结果:(1)血压结果:模型对照组SHR大鼠随着周龄的增加,收缩压不断上升,差异非常明显。补肾中药组SHR和氨氯地平组SHR大鼠随着周龄的增加,收缩压不断下降,差异明显。正常对照组WKY大鼠随着周龄的增加,收缩压变化较小,差异不明显。(2)苏木素-伊红(HE)染色结果:正常组大鼠胸主动脉、颈动脉管壁的形态结构均大致正常;模型对照组SHR胸主动脉、颈动脉出现不同程度的血管重构情况,血管损伤程度随周龄增加呈逐渐加重的趋势;补肾中药组SHR与氨氯地平组SHR胸主动脉、颈动脉也存在血管重构表现,血管损伤情况也存在随增龄逐渐加重现象,但是与同龄模型对照组SHR相比血管损伤情况明显减轻;同龄补肾中药组SHR与氨氯地平组SHR比较,血管损伤的差异不明显。(3)透射电镜结果:正常组的主动脉及颈动脉的血管壁细胞结构完整、形态正常;补肾中药组、氨氯地平组和模型对照组的主动脉、颈动脉可见不同程度的血管壁细胞结构损伤。补肾中药组和氨氯地平组SHR胸主动脉、颈动脉血管损伤情况存在随增龄逐渐加重现象,但是与同龄模型对照组相比血管损伤情况明显减轻;同龄补肾中药组与氨氯地平组SHR比较,血管损伤的差异不明显。结论:随着年龄增加,SHR大鼠动脉组织形态变化明显,动脉硬化呈逐渐加重趋势,通过补益肾气药物干预,SHR动脉硬化程度可见明显减轻,补益肾气法可以在降压的同时保护大动脉管壁,减轻动脉组织形态学改变的程度,有效延缓动脉硬化的进程。     

保肺定喘汤对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺血管重构的干预作用

目的观察保肺定喘汤对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary diseases,COPD)大鼠肺血管重构的干预作用,探讨其作用机制。方法 50只雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、中药组、西药组和中西医结合组,每组10只。采用气道滴注脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)联合香烟烟雾暴露的方法制备大鼠COPD模型。正常对照组、模型组用生理盐水灌胃,中药组则予保肺定喘汤灌胃[12.4 g/(kg·d)],西药组雾化吸入布地奈德混悬液[50μg/(kg·d)],中西医结合组同时予相同剂量保肺定喘汤灌胃及布地奈德雾化吸入。观察肺血管病理形态学变化;检测管壁内胶原纤维及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;检测各组大鼠肺动脉增殖细胞核抗原(PCNA)及血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠肺小动脉管壁增厚、管腔变小,管壁内胶原纤维及α-SMA表达增加(P0.01,P0.05),PCNA、VEGF表达增加(P0.01)。与模型组比较,各药物组均能使肺小动脉管壁变薄、管腔变大,管壁内胶原纤维及α-SMA表达减少(P0.01,P0.05);PCNA、VEGF表达下降(P0.01,P0.05)。结论保肺定喘汤能有效减轻COPD大鼠肺血管重构,其机制可能通过调节调节肺小动脉α-SMA、PCNA及VEGF表达有关。     

益气活血方对内毒素诱导小鼠炎症及内皮损伤的影响

目的研究益气活血方对内毒素(LPS)诱导小鼠炎症及内皮损伤的干预作用。方法 50只8～12周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、LPS组、益气活血方组[1.29 g/(kg·d)]、吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC,NF-κB抑制剂)组(50 mg/kg)、益气活血方[1.29 g/(kg·d)]+PDTC(50 mg/kg)组,每组10只。益气活血方组及益气活血方+PDTC组中药灌胃2周,其余组等体积生理盐水灌胃,结束后次日PDTC组及益气活血方+PDTC组腹腔注射PDTC,1 h后除空白对照组外其余各组腹腔注射LPS (20 mg/kg)刺激6 h。采集小鼠血清及主动脉,ELISA检测血清炎性因子TNF-α、IL-6浓度,qRT-PCR、Western Blot分别检测黏附因子VCAM-1、ICAM-1及促凝血因子PAI-1、TF的mRNA、蛋白表达水平,并用Western Blot检测NF-κB通路磷酸化水平。结果与空白对照组比较,LPS组血清TNF-α、IL-6浓度,主动脉VCAM-1、ICAM-1、PAI-1、TF mRNA及蛋白表达水平均升高(P0.01),NF-κB通路基团P65、IκB磷酸化水平亦明显升高(P0.01);与LPS组比较,益气活血方组、PDTC组及益气活血方+PDTC组血清TNF-α、IL-6浓度,VCAM-1、ICAM-1、PAI-1、TF mRNA及蛋白水平,P65、IκB磷酸化水平均明显降低(P0.05,P0.01);益气活血方+PDTC组与益气活血方组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论益气活血方通过抑制NF-κB通路活性发挥抗LPS诱导小鼠炎症及内皮损伤的作用。     

人参三七川芎提取物延缓衰老小鼠血管老化的实验研究

目的探讨衰老小鼠血管老化所导致的血管壁结构和功能的改变以及人参、三七、川芎提取物的干预作用。方法建立自然衰老小鼠模型,小鼠随机分为衰老模型组、人参三七川芎提取物高、中、低剂量组、维生素E组,另设青年对照组,观察各组主动脉形态学改变,检测血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管组织抗超氧阴离子、晚期糖基化终末产物(AGEs)、基质金属蛋白酶(MMP-2)与其抑制剂(TIMP-2)含量以及MMP-2/TIMP-2比值。结果人参三七川芎提取物能够改善衰老小鼠主动脉形态学衰老变化,HE染色见内皮细胞脱落减少,平滑肌细胞(SMC)增生减少,Masson染色显示中药各组胶原纤维相对含量降低(P0.05),中药高剂量组SMC相对含量降低(P0.05)。中药高、中、低剂量组血管组织抗超氧阴离子含量显著增高,AGEs含量明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。中药各剂量组小鼠血管组织MMP-2水平降低,TIMP-2水平显著升高,MMP-2/TIMP-2比值明显增高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论人参三七川芎提取物能够改善衰老小鼠主动脉形态学衰老变化,降低血管组织中活性氧的生成,减少AGEs生成,抑制MMP-2的活性,调节MMP-2/TIMP-2的平衡,从而最终降低衰老小鼠血管的僵硬度,减少血管重构,延缓小鼠血管老化的发生。     

祛瘀化痰方对动脉粥样硬化大鼠心血管损伤的保护作用

目的探讨祛痰化瘀方对动脉粥样硬化大鼠心血管及心肌病理变化和心电图的影响。方法采用维生素D3结合高脂饲料法建立大鼠动脉粥样硬化(AS)模型,观察大鼠胸主动脉、心肌病理形态学改变,比较造模前后心电图变化。结果在光镜下观察模型组的胸主动脉血管壁结构已不清晰,病变区域可见浅染无定形物、钙化颗粒物,大量的斑块形成;心肌细胞空泡变性坏死,坏死处有炎细胞浸润,有脂肪空泡形成,心肌纤维横纹不清,大部分肿胀断裂,组织结构破坏严重。中药低剂量组和中药高剂量组能明显改变模型大鼠的组织结构病理改变。心电图数据显示,模型组的ST段(0.100±0.021)显著抬高,QT间期(203.00±52.19)和QRS时程(70.00±28.87)明显延长,与空白对照组比较差异显著(P0.01或P0.01或P0.05),且QRS波形变宽;中药低剂量组的QT间期(155.09±17.32)、高剂量组的QT间期(171.09±44.54)较模型组明显缩短(P0.01或P0.05),中药低剂量组的ST段(0.032±0.015)、高剂量组的ST段(0.050±0.021)均恢复到近正常水平,与模型对照组比较有显著性差异(P0.001),且QRS波宽度明显变窄。结论祛瘀化痰方可阻止动脉粥样硬化大鼠斑块的形成,保护主动脉血管及心肌组织中粥样硬化斑块的损伤,改善异常心电图的发生。     

苏木乙酸乙酯提取物对野百合碱诱导肺动脉高压大鼠肺动脉压、血浆BNP及肺小动脉的影响

目旳研究苏木乙酸乙酯提取物对野百合碱诱导肺动脉高压大鼠肺动脉压、血浆脑钠肽(BNP)及肺小动脉的影响。方法采用完全随机化的分组方法将50只健康雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、苏木乙酸乙酯高剂量组、苏木乙酸乙酯低剂量组、阿魏酸钠组,每组10只。除空白组外,其余组大鼠采用腹腔注射野百合碱方法制备肺动脉高压模型。实验第15天开始,空白组和模型组给予羧甲基纤维素钠溶液10 mL/(kg·d)灌胃,苏木乙酸乙酯高、低剂量组分别给予苏木乙酸乙酯提取物溶液1472 mg/(kg·d)[生药量2.3 g/(kg·d)]、736 mg/(kg·d)[生药量1.15 g/(kg·d)]灌胃,阿魏酸钠组给予阿魏酸钠0.3 g/(kg·d)灌胃,持续至实验第28天。实验期满检测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP),测定血浆BNP水平,HE染色观察肺组织及肺小动脉病理形态学变化,计算管壁厚度/血管直径、管壁面积/血管面积。结果造模各组大鼠mPAP、血浆BNP水平、肺小动脉管壁厚度/血管直径、管壁面积/血管面积均明显高于空白组(P均<0.05),苏木乙酸乙酯高剂量组、苏木乙酸乙酯低剂量组和阿魏酸钠组大鼠上述各指标均明显低于模型组(P均<0.05);苏木乙酸乙酯低剂量组大鼠mPAP、血浆BNP水平均明显低于苏木乙酸乙酯高剂量组(P均<0.05),苏木乙酸乙酯高剂量组和苏木乙酸乙酯低剂量组肺小动脉管壁厚度/血管直径、管壁面积/血管面积均明显低于阿魏酸钠组(P均<0.05)。结论苏木乙酸乙酯提取物能降低肺动脉压力及血浆BNP水平,减轻肺小动脉的病理损伤。     

新塔花对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型中TLR4/NF-κb信号通路的影响

目的观察新塔花水提物抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制并对Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κb(NF-κb)信号通路及相关细胞因子的影响并探讨其机制。方法 40只8周龄ApoE小鼠随机分为模型组、阿托伐他汀组[3 mg/(kg·d),溶于0.5 mL蒸馏水]、新塔花水提物高剂量组[32 g/(kg·d)]、新塔花水提物低剂量组[9 g/(kg·d)],每组10只;同品系C57小鼠10只为空白组。所有小鼠给予高脂饲料普通环境饲养。适应性喂养1周后,实验组给予一定剂量药物灌胃,空白组和模型组给予等量蒸馏水灌胃,每周根据小鼠体质量变化调整灌胃剂量。12周后处死小鼠,采集血清及主动脉。胸主动脉用于苏木素伊红(HE)染色;血清用于酶联免疫双抗夹心(ELISA)法和血脂4项检测:三酰甘油(TAG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C);升主动脉用于免疫组织化学(IHC)法检测TLR4、NF-κb蛋白水平。结果血脂检测他汀组、高剂量组、低剂量组具有明显的降脂效果(P 0.01),高剂量组和低剂量组具有一定的降低胆固醇效果(P 0.05);ELISA见模型组细胞黏附因子(ICAM)比空白组明显升高(P 0.01),他汀组、高剂量组、低剂量组低于模型组(P 0.01);模型组基质金属蛋白酶-9(MMP-9)较空白组明显升高(P 0.01),他汀组、高剂量组、低剂量组低于模型组(P 0.01);免疫组化(IHC)结果模型组高于空白组免疫组化分析模型组TLR4、NF-κb表达水平均高于空白组(P 0.01),他汀组、高剂量组和低剂量组TLR4、NF-κb表达水平均低于模型组(P 0.01)。结论新塔花具有预防AS的作用,其机制可能与调控TLR4/NF-κb信号通路有关。     

火麻仁油对衰老模型小鼠皮肤相关指标的影响

目的:观察火麻仁油对衰老模型小鼠皮肤相关指标的影响.方法:采用D-半乳糖颈背部皮下注射(sc)复制小鼠亚急性衰老模型,造模1h后各给药组灌胃(ig)给与不同剂量试验药物,共42 d,同时分别观察火麻仁油高、中、低剂量(12.0,6.0,3.0 mL·kg-1)对衰老模型小鼠皮肤匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、脂褐质(Lpf)、羟脯氨酸(Hyp)、皮肤水分含量的影响;对比各组实验动物相同部位皮肤的组织病理学形态,表皮及真皮厚度,真皮胶原纤维排列松密情况、弹力纤维面积及形态的差别变化.结果:火麻仁油高剂量组MDA,LPf平均含量分别为7.13 nmol·mg-1和0.83 μg· g-1,中剂量组MDA平均含量为7.29 nmol·mg-1,与模型组相比均有显著下降(P＜0.05);高、中剂量组SOD活性平均值分别为21.95 U·mg-1和21.45 U·mg-1;而Hyp含量平均值分别为8.31 μg· mg-1和7.92 μg· mg-1,它们与模型组相比均有显著提高(P ＜0.01,P＜0.05);高、中剂量组也显著升高皮肤水分的水平(P＜0.01～P＜0.05),低剂量对上述指标的影响无统计学意义.火麻仁油能改善和促进衰老模型小鼠毛发的生长,病理观察真皮厚度和毛囊数均有增加;胶原纤维、弹力纤维的数量和形态均有明显的改善.结论:火麻仁油能够对模型小鼠发挥抗皮肤衰老和抗氧化作用.     

慢肾康宁对肾间质纤维化大鼠内质网应激PERK-ATF4通路的影响

目的 探讨慢肾康宁对肾间质纤维化大鼠肾脏组织的保护作用及机制.方法 60只雄性Wistar大鼠,随机选取7只为正常组,其余53只采用2.5％腺嘌呤悬浮液灌胃建立肾间质纤维化模型,21d后将50只造模成功的大鼠随机分为模型组、氯沙坦组[10 mg/(kg·d)]、慢肾康宁低剂量组[7.5g/(kg·d)]、慢肾康宁中剂量组[15 g/(kg·d)]、慢肾康宁高剂量组[30g/(kg·d)],每组10只,分别给予相应药物灌胃,正常组和模型组以等量蒸馏水灌胃,连续30d.实验结束后,检测各组大鼠血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、24小时尿蛋白定量(24hMTP),估算肾小球滤过率(eGFR),HE和Masson染色观察肾组织病理变化,免疫组织化学方法检测肾组织内质网应激标志性蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78),TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡水平,实时定量PCR测定肾组织GRP78、转录激活因子4(ATF4)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP) mRNA表达水平.结果 与模型组比较,氯沙坦组和慢肾康宁各剂量组SCr、BUN、24hMTP均显著下降(P＜0.01),eGFR上升(P＜0.01).病理观察,模型组可见肾小管上皮细胞凋亡、坏死、脱落,肾小管扩张、炎性细胞浸润,肾间质内腺嘌呤代谢产物沉积和胶原纤维增生,氯沙坦组和慢肾康宁各组较模型组病理变化轻.与模型组比较,各给药组GRP78表达水平及细胞凋亡水平均下降(P＜0.05或P＜0.01).各给药组GRP78、ATF 4、CHOP mRNA表达水平较模型组降低(P＜0.05).结论 慢肾康宁对肾间质纤维化大鼠肾脏组织内质网应激PERK-eIF2α-ATF4-CHOP通路过度表达有很好的抑制作用,具有肾脏保护功能,这可能是它减轻肾间质纤维化的重要机制之一.     

血府逐瘀汤对自发性高血压大鼠血管重塑的影响

目的观察血府逐瘀汤对自发性高血压大鼠(SHR)血管形态学的影响并对其可能存在的降压机制进行探索。方法将40只SHR按随机数字表法随机分成模型对照组,硝苯地平片组,血府逐瘀汤(中药)高、中、低剂量组5组;另取8只Wistar大鼠作为空白对照组,上述动物均灌胃给予相应药物,其中空白和模型对照组给予等量蒸馏水,连续6周。每周于固定时间采用无创血压计检测大鼠尾动脉收缩压;放射免疫分析法测定血浆血管紧张素Ⅱ、醛固酮、6-酮前列环素及TXB2含量;HE染色显微镜拍照后检测胸主动脉中膜厚度、血管内径并计算壁腔比。结果与空白组比较,模型组大鼠灌胃蒸馏水6周收缩压持续升高,血浆TXB2含量、胸主动脉中膜厚度、壁腔比比值均显著升高(P0.01)。与模型组比较,硝苯地平片组,中药高、中、低剂量干预后大鼠收缩压均显著下降(P0.05或P0.01);中药高、中剂量组大鼠血浆血管紧张素Ⅱ、醛固酮含量显著升高(P0.05);中药高、中、低剂量组大鼠血浆TXB2活性显著降低(P0.01);中药高、中剂量组大鼠胸主动脉中膜厚度、壁腔比比值均显著降低(P0.01)。结论血府逐瘀汤能够显著降低自发高血压大鼠收缩压,改善高血压血管重塑。其降压机制可能与阻断血管紧张素Ⅱ与其受体结合以及纠正TXA2和PGI2失衡有关。     

黑逍遥散对阿尔茨海默病大鼠海马基因表达谱的影响

目的观察黑逍遥散对Aβ25-35诱导阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠模型海马基因表达谱的影响。方法选择雌性SD大鼠,以海马注射Aβ25-35淀粉样蛋白建立AD模型,并设立假手术组、模型组、西药组及中药高、中、低剂量组,每组14只。大鼠造模7天后连续灌胃[3 m L/(kg·d)]28天,假手术组与模型组给予生理盐水,西药组给予石杉碱甲片水溶液[0.02 mg/(kg·d)],中药高、中、低剂量组分别给予黑逍遥散水煎液[17.00、8.50、4.25 g/(kg·d)]。灌胃结束后处死大鼠解剖取得大鼠海马组织,并提取组织RNA,利用大鼠基因表达谱芯片筛选差异表达的基因,而后对获得的部分剂量依赖性变化的差异表达基因进行qRT-PCR验证。结果与假手术组比较,模型组583个基因表达上调,579个下调,wisp1、crebbp、igfbp-1、znf483、zfp37及zic4 mRNA表达升高,casq2、bcl-2 mRNA表达降低(P0.05)。与模型组比较,中药高、中、低剂量组276个基因表达上调,170个下调,其中71个基因剂量依赖性上调表达,70个基因剂量依赖性下调表达,西药组igfbp-1、znf483、zfp37及zic4 mRNA降低,casq2、bcl-2 mRNA升高(P0.01);中药高剂量组wisp1、crebbp、igfbp-1、znf483、zfp37及zic4降低(P0.01),casq2、bcl-2 mRNA升高(P0.01);中药中剂量组crebbp、igfbp-1、znf483、zfp37及zic4降低(P0.01,P0.05),casq2、bcl-2 mRNA升高(P0.01,P0.05);中药低剂量组igfbp-1、znf483、zfp37及zic4 mRNA降低(P0.01)。与中药高剂量组比较,中药中剂量组crebbp、zfp37、zic4 mRNA升高(P0.01),igfbp-1、bcl-2 mRNA降低(P0.01,P0.05);中药低剂量组crebbp、znf483、zfp37 mRNA升高(P0.01,P0.05),igfbp-1、bcl-2、zic4 mRNA降低(P0.01)。与中药中剂量组比较,中药低剂量组casq2、bcl-2、zic4 mRNA降低(P0.01,P0.05)。结论黑逍遥散可通过调控zfp37、znf483、zic4表达影响AD发生;通过抑制wnt信号通路相关基因wisp-1、crebbp、igfbp-1、casq2的表达而影响Aβ代谢和Tau蛋白异常磷酸化。     

参连复脉颗粒对自发性高血压大鼠心房纤维化及心房易损性的影响

目的探讨参连复脉颗粒对自发性高血压大鼠心房纤维化及心房易损性的影响及可能作用机制。方法将50只24周龄的雄性自发性高血压大鼠随机分为模型组、氯沙坦钾组、参连复脉低剂量组、参连复脉中剂量组和参连复脉高剂量组各10只,选择24周龄雄性正常血压京都威斯特大鼠10只为正常组。参连复脉低、中、高剂量组分别给予参连复脉颗粒0.81 g/(kg·d)、1.62 g/(kg·d)、3.24 g/(kg·d)灌胃,氯沙坦钾组给予氯沙坦钾片4.5 mg/(kg·d)灌胃,模型组和正常组给予等剂量0.9%氯化钠溶液灌胃,均连续4周。干预结束后,测量各组大鼠血压、心率,超声心动图检测左心房内径,记录各组大鼠房颤诱发率及持续时间,Masson染色观察各组大鼠左心房间质胶原纤维分布情况并计算心房间质胶原纤维容积分数,Western blot法检测各组大鼠左心房肌组织中转化生长因子β_1(TGF-β_1)、Smad3蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组大鼠SBP、DBP及房颤诱发率、心房胶原纤维容积分数、左心房组织中TGF-β_1和Smad3蛋白表达量均明显增高(P均0.05),左心房内径明显增大(P0.05)。与模型组比较,氯沙坦钾组大鼠SBP,参连复脉中剂量组和氯沙坦钾组大鼠房颤诱发率,参连复脉各组和和氯沙坦钾组大鼠心房胶原纤维容积分数、左心房组织中TGF-β_1和Smad3蛋白表达量均明显降低(P均0.05),参连复脉中、高剂量组和氯沙坦钾组大鼠左心房内径均明显缩短(P均0.05)。结论自发性高血压大鼠心房纤维化明显,心房易损性增加,参连复脉颗粒可能通过抑制心房组织TGF-β_1/Smad3蛋白的表达,改善自发性高血压大鼠心房纤维化,预防房颤发生。     

六味地黄汤对小鼠肝微粒体色素P450的影响

目的:观察六味地黄汤对肝微粒体色素P450酶系的影响,并对单味中药与其复方对色素P450酶系的影响进行比较分析。方法:ICR小鼠50只,雌雄各半,随机分成空白组(0.9%氯化钠注射液),肝药酶诱导剂组(苯巴比妥钠)、肝药酶抑制剂组(西米替丁)、六味地黄汤低剂量组[5.63g/(kg·d)]、六味地黄汤高剂量组[11.26g/(kg·d)],每组10只。苯巴比妥钠组为皮下注射给药,剂量为0.08g/(kg·d),其余组均为灌胃给药,西米替丁组剂量0.4g/(kg·d),其他中药组剂量均为20m L/(kg·d),1次/d。共10d。末次给药1h后处理动物,取肝组织制备肝微粒体,ELISA法测定细胞色素P450的含量,进行统计比较。结果:与空白组比较,六味地黄汤低、高剂量组色素P450含量均明显增加(P0.05或P0.01);高剂量组增加优于低剂量组(P0.05)。肝药酶抑制剂组色素P450含量较空白组明显增加(P0.01);肝药酶诱导剂组色素P450含量较空白组明显减少(P0.05)。结论:六味地黄汤对肝微粒体色素有诱导作用,且高剂量组的作用强于低剂量组。     

补阳还五汤对慢性脑缺血大鼠脑组织形态学的影响

目的:探讨补阳还五汤对慢性脑缺血大鼠脑组织形态学的影响。方法:SD大鼠,采用双侧颈总动脉结扎法复制慢性脑缺血大鼠模型。大鼠随机分为5组,即假手术组(给予等体积的生理盐水)、模型组(给予等体积的生理盐水)、补阳还五汤低剂量组[中药低剂量组,剂量为20 g/(kg·d)]、补阳还五汤高剂量组[中药高剂量组,剂量为40 g/(kg·d)]、阳性对照组[金纳多组,剂量为0.045 g/(kg·d)],每组10只大鼠,连续给药4周。结果:HE染色及焦油紫染色显示慢性脑缺血大鼠模型脑组织疏松,顶叶皮质轻度缺血性改变,神经元减少,细胞排列松散,海马CAI区神经细胞数目明显减少,排列紊乱;而各给药组大鼠脑组织损伤程度、细胞减少数目均有所缓解。结论:补阳还五汤能保护慢性脑缺血大鼠海马CAI区神经细胞,改善神经细胞的死亡。     

穴位埋线对衰老模型大鼠慢性应激下海马神经元结构的影响

目的:通过观察穴位埋线对衰老模型大鼠慢性应激下海马神经元结构的影响,探讨慢性应激对衰老机体的促衰老作用及穴位埋线的抗衰机制。方法:雄性SD大鼠随机分为空白组、衰老组、应激组、埋线组,每组12只。采用D-半乳糖溶液腹腔注射制作衰老模型,采用长期制动应激造成慢性应激,埋线组分别于"百会""肾俞""内关""肝俞"交替埋线8次,1次/周。HE染色,于光镜下对大鼠海马锥体细胞进行计数,并于电镜下观察海马神经元细胞结构的变化。结果:光镜下空白组大鼠海马锥体细胞排列整体密集,形状规则;衰老组大鼠海马锥体细胞排列较稀疏;应激组海马锥体细胞排列稀疏,形态不规则;埋线组大鼠海马锥体细胞排列较密集。衰老组、应激组大鼠海马锥体细胞数量明显少于空白组(P0.05,P0.01),应激组与衰老组相比,其海马锥体细胞数量减少更为显著(P0.01),而埋线组海马锥体细胞数量明显升高(与应激组比较P0.01)。电镜下观察,空白组神经元形态正常,衰老组神经元体积明显缩小,应激组神经元呈现极度不规则形态,埋线组的神经元异常形态得到明显改善。结论:衰老模型大鼠的海马神经元数量和结构呈现增龄性老化现象,慢性应激可加重对海马神经元的损害,加速脑衰老;穴位埋线可拮抗应激性衰老机体海马神经元的进一步损害,从而延缓脑衰老。     

泽兰多糖对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用

目的探讨泽兰多糖对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用。方法以小鼠脑、肝组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含有量为指标,维生素C为对照药物,考察小鼠灌胃高、中、低剂量[100、200、300 mg/(kg·d)]多糖对腹腔注射D-半乳糖致衰老模型的影响。结果与模型组比较,多糖组T-SOD、GSH-PX、CAT活性均显著提高(P0.05,P0.01),MDA含有量均显著降低(P0.01)。结论泽兰多糖对D-半乳糖致衰老小鼠有较强的抗氧化作用,值得进一步开发。     

睡眠剥夺复合冠状动脉左前降支结扎建立心力衰竭气虚血瘀证大鼠模型的评价

目的对采用睡眠剥夺复合冠状动脉左前降支结扎的方法建立心力衰竭大鼠气虚血瘀证模型进行评价。方法 70只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、睡眠剥夺组、心肌梗死组以及益气活血颗粒高、中、低剂量组,每组10只。睡眠剥夺组给予无规律性睡眠剥夺8周,模型组以及益气活血颗粒高、中、低剂量组大鼠给予睡眠剥夺3周后进行冠状动脉左前降支结扎,手术后第2天继续睡眠剥夺5周建立心力衰竭气虚血瘀证模型,心肌梗死组仅给予冠状动脉左前降支结扎,空白对照组正常饲养。手术后第2天益气活血颗粒高、中、低剂量组分别给予益气活血颗粒4.0、2.0、1.0g/(kg·d)灌胃,其余各组给予生理盐水1ml/100g灌胃,持续5周。比较各组大鼠体重、抓力、脉搏幅度、自主活动、舌象、心功能、心室重构指标、血液流变学指标以及腹主动脉血流速度。结果与空白对照组比较,模型组大鼠体重、抓力、脉搏幅度及自主活动总路程和平均速度明显下降,心室重构指标升高,心功能、室壁厚度指标和腹主动脉血流速度则明显下降,不同切变率下的血液黏度和血浆黏度明显升高,舌面R(红)、G(绿)、B(蓝)相对值均有明显降低(P0.05或P0.01)。与模型组比较,益气活血颗粒高剂量组可以增加大鼠体重、抓力、脉搏幅度、室壁厚度,降低心室重构、血液流变学指标,改善大鼠心功能和自主行为活动,提高腹主动脉血流速度,大鼠舌面R、G相对值明显升高(P0.05或P0.01)。结论采用睡眠剥夺复合冠状动脉左前降支结扎的方法可以促使心力衰竭大鼠表现出明显的气虚血瘀证外在客观表现,高剂量的益气活血颗粒的有效干预反证此模型的科学性和可靠性。