基于指纹图谱与化学计量学的白芍酒炙前后差异性标志物研究

目的 基于HPLC指纹图谱与化学计量学探究白芍Paeoniae Radix Alba酒炙前后化学成分的差异性,筛选差异性标志物,为探究白芍酒炙前后炮制机制及建立质量控制标准提供参考。方法 采用HPLC建立白芍饮片酒炙前后指纹图谱,标定共有峰并进行指认与相似度评价,以白芍饮片酒炙前后共有峰峰面积为指标,运用层次聚类分析（hierarchical cluster analysis,HCA）、主成分分析（principal component analysis,PCA）和正交偏最小二乘-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA）等方法对白芍酒炙前后进行区分,并筛选出差异性标志物进行定量分析。结果 生白芍与酒白芍HPLC指纹图谱相似度较高,但其酒炙前后峰面积有所差异;HCA与PCA可明显把生白芍与酒白芍分为2类,表明白芍酒炙前后化学成分存在一定差异;根据OPLS-DA分析筛选出峰1（没食子酸）、2（氧化芍药苷）、3、7（芍药苷）、8（没食子酰芍药苷）为酒炙前后主要差异性标志物;对其中可指认且含量较高的...     

硫熏白芍的质量评价

以全国市场抽验的不同程度硫熏白芍及课题组自制的不同硫熏时间白芍为样本,通过比较白芍的硫熏程度与其性状,芍药苷、芍药苷亚硫酸酯的含量及其指纹图谱的变化,评价硫磺熏蒸对白芍质量的影响。该研究采用《中国药典》方法评价了硫熏白芍的性状,测定了其芍药苷含量,用LC-MS分析了芍药苷转化产物,建立基于HPLC的白芍指纹图谱检测方法,并以相似度评价了质量差异。结果显示硫磺熏蒸使白芍颜色变白,特有气味消失,产生刺鼻酸气,并对芍药苷含量有显著影响,随硫熏程度加剧,芍药苷含量明显下降,部分转化为芍药苷亚硫酸酯,而且这种变化是不可逆的。指纹图谱也有明显变化。说明硫熏对白芍质量产生了严重影响,应严格限定白芍的硫熏工艺。由实验可见,可以通过测定芍药苷亚硫酸酯的含量来控制白芍的硫熏程度。     

正交法优化白芍炮制工艺的研究

目的:通过正交设计实验法优化白芍炮制工艺,筛选出最佳提取工艺。方法:采用正交试验法,对乙醇提取白芍中芍药内酯苷和芍药苷的工艺条件进行研究,以芍药内酯苷和芍药苷含量为综合考察指标;对炮制方法酒炙、蜜麸制、酒润麸炒等主要影响因素进行考察,用HPLC法分析比较不同炮制法对白芍总苷(芍药内酯苷和芍药苷)含量变化的影响。结果:最终确定的较佳酒炙方法为:闷润时间为60min,炮制酒量为15%(每100g药材加15ml酒),烘制温度100℃,烘制时间60min;蜜麸炙白芍较佳,蜜麸比例为麦麸:蜂蜜:水=10∶5∶1;酒润后麸炒白芍较佳,用酒量为12%。结论:优选出的炮制方法能有效保证白芍中指标性成分含量,为制定其饮片的质量标准以及临床应用提供依据。     

基于指纹图谱和多成分含量测定的白芍与炒白芍标准汤剂质量差异性研究

该研究通过测定白芍与炒白芍标准汤剂的出膏率、多成分含量、指纹图谱,比较二者质量的差异性。建立17批白芍炮制前后标准汤剂的UPLC指纹图谱,同时测定没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷的含量,对白芍与炒白芍标准汤剂峰面积进行独立样本t检验和正交偏最小二乘判别分析。白芍与炒白芍标准汤剂的出膏率无明显差异,炮制后标准汤剂中芍药内酯苷的平均含量增加了0.26%,没食子酸、儿茶素、芍药苷、苯甲酰芍药苷的平均含量分别降低了13.04%,27.94%,10.30%,18.79%。白芍标准汤剂指纹图谱标定了14个共有峰,炒白芍标准汤剂指纹图谱标定了16个共有峰,峰1与峰3为炮制后新增的色谱峰,其中峰3为5-羟甲基糠醛;独立样本t检验和正交偏最小二乘判别分析结果表明峰1、峰3、峰11、峰15是区分白芍与炒白芍标准汤剂关键的化合物,研究表明该方法可用于白芍与炒白芍标准汤剂、颗粒剂等制剂过程中各工序的量值传递和质量控制研究,同时为白芍生品与炮制品相关制剂的鉴别提供参考。     

白芍饮片质量研究

目的：探讨白芍炮制过程中,饮片芍药苷含量及其差异的分布。方法：炒白芍、酒白芍及白芍片的中试生产,以HPLC测定样品芍药苷的含量。结果：亳芍,杭芍及川芍药材的芍药苷平均含量分别为0.97%,1.01%和0.88%；白芍片分别为0.91%(亳芍), 0.70%(杭芍)和0.41%(川芍); 炒白芍为0.725%(亳芍), 0.30%(杭芍), 0.22%(川芍); 酒白芍为0.91%(亳芍), 0.35%(杭芍), 0.21%(川芍)。结论：加工批次之间的饮片的芍药苷含量差异均低于10%,略高于亳芍、杭芍及川芍药材之间的差异, 说明在白芍的质量控制中,加工程序和工艺参数与对药材的控制同等重要。     

不同炮制方法对白芍中芍药苷含量的影响

目的考察不同炮制方法对白芍中芍药苷含量的影响。方法应用清炒、酒炙、醋炙3种炮制方法加工白芍饮片，采用HPLC法测定各种炮制品中的芍药苷含量。结果各炮制品中芍药苷含量由高到低依次为：生白芍〉炒白芍〉酒白芍〉醋白芍。结论不同炮制方法对白芍中芍药苷含量有较大影响。     

HPLC波长切换法建立白芍甘草药对醇提物指纹图谱的研究

目的:建立不同批次白芍甘草药对醇提物的指纹图谱。方法:采用HPLC法,Diamonsil(钻石)C18ODS(200mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈-0.1%磷酸水梯度洗脱,波长切换,流速为1.0 m L/min。结果:建立了白芍甘草药对醇提物的指纹图谱,其指标性成分甘草酸含量显著升高,芍药内酯苷、芍药苷略有降低。结论:白芍甘草药对配伍后有效成分含量增加,其醇提物的指纹图谱相似度较好。     

加工炮制对白芍化学成分的影响

[目的]研究加工炮制对白芍化学成分的影响。[方法]通过HPLC法对经过切制、清炒、酒炙三种方法加工炮制过的白芍中芍药苷、苯甲酸、苯甲酰白芍苷的含量进行测定,以此为标准进行判断。[结果]切制白芍中三种测定成分均为最高,清炒制白芍次之,酒炙白芍最少。[结论]鉴于以上结果,切制白芍对白芍化学成分的影响最小。     

白芍饮片标准汤剂质量标准研究

目的:制备白芍饮片标准汤剂,并进行质量标准研究。方法:以水为溶剂,以标准化工艺制备标准汤剂,采用UPLCDAD法测定芍药苷含量,并进行转移率、出膏率计算及指纹图谱研究。结果:10批次白芍样品制成的标准汤剂中芍药苷含量为1.69~2.60 mg/m L,转移率为60.47%~85.16%,平均转移率为71.62%,标准偏差为8.74%。出膏率范围为19.00%~26.50%,平均出膏率为21.89%,标准偏差为2.51%。指纹图谱共有峰11个,确认5个,分别是:氧化芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷。结论:本方法处理样品简单,重复性好,可用于白芍标准汤剂的制备及质量标准研究。     

白芍炮制方法研究

目的：探讨不同年限和不同炮制方法对白芍中芍药苷含量的影响,为临床选择最佳采摘时机和炮制方法提供依据。方法：分别将1年生和2年生白芍采用生品炮制和熟品炮制方法进行炮制,然后采用高效液相色谱法的外标法测定样品中芍药苷的含量。结果：1年生生品白芍中芍药苷的含量为（6.01±0.47）%,1年生熟品白芍中芍药苷的含量为（5.78±0.42）%,组间比较差异具有统计学意义（t=3.369,P〈0.05）。2年生白芍中芍药苷的含量为（5.82±0.39）%,2年生熟品白芍中芍药苷含量为（4.91±0.36）%,组间比较差异具有统计学意义（t=7.931,P〈0.05）。结论：生品炮制白芍中芍药苷含量较高。     

赤芍与白芍的药理作用比较

目的:对赤芍和白芍的80%乙醇提取物及其脂溶性成分和水溶性成分进行药理活性比较,为阐明其药效物质奠定基础。方法:以二甲苯致小鼠耳肿胀法和醋酸致小鼠腹腔毛细血管渗出法比较赤芍和白芍的抗炎作用;以血液流变学指标和ADP诱导血小板聚集比较赤芍和白芍的活血化瘀作用。结果:赤芍与白芍的提取物及其脂溶性和水溶性成分均有不同程度的抗炎以及抑制血小板聚集作用,均有明显延长部分凝血活酶时间的作用,而均无明显延长凝血酶原时间的作用。结论:白芍总提物对抑制炎性水肿和炎性渗出均有很好的效果,而在抑制血小板聚集方面,赤芍总提物的作用明显优于白芍总提物。     

白芍高效液相色谱指纹图谱的研究

目的研究白芍的高效液相色谱指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。方法利用HPLC方法,梯度洗脱,测定了21批白芍样品。色谱条件为:Hypersil C18柱(4.6 mm×200 mm,5μm),流速1.0 ml/min,柱温25℃,流动相A为乙腈;流动相B为0.05%磷酸水,流动相A梯度洗脱(95%~65%乙腈),分析时间为60 min,时间为0,15,25,60 min,A(%)为95%,86%,86%,65%。结果21批白芍样品获得包括芍药苷(7号峰)在内的14个共有峰。聚类分析和相似度分析结果一致。结论白芍的指纹图谱特征性及专属性强,可用于全面控制白芍的质量,确保每批产品的均一性。     

基于特征图谱结合色彩图像技术的白芍与炒白芍差异研究

目的 通过超高效液相色谱法（UPLC）特征图谱、色度值,比较白芍与炒白芍的差异。方法 采用UPLC建立白芍药材与炒白芍的特征图谱,并采用SIMCA 14.0软件进行主成分分析（PCA）、正交偏最小二法乘-判别分析（OPLS-DA）;采用色差仪获取白芍药材与炒白芍的色度值（L^*、a^*、b^*）,获取色差范围。结果 白芍药材的UPLC特征图谱共标定15个共有峰,炒白芍的UPLC特征图谱共标定17个共有峰。PCA共提取4个主成分,累积方差贡献率为86.7%,15批白芍药材与炒白芍在OPLS-DA模型中分类聚集明显。色彩图像分析中炒白芍与白芍药材的色差值（△E^*）为8~20,白芍药材的b^*_白芍为1~7,炒白芍的b^*_炒白芍为9~21。结论 该方法稳定、可靠、精密度高、重复性好、色彩图像分析简单直观,可量化炮制程度,并为炮制品质量控制研究提供参考。     

赤芍与白芍抗血小板凝集作用的UPLC-MS代谢组学初步研究

目的:利用代谢组学方法研究赤芍和白芍的抗血小板凝集功能及对大鼠内源性代谢物的影响.方法:赤芍和白芍各给药6d后,观察赤芍和白芍对大鼠血小板凝聚功能的影响,并采用超高效液相色谱-电喷雾质谱(UPLC-MS)技术分析大鼠血清代谢物指纹图谱,采用偏最小二乘判别分析法研究给药组与正常组之间的代谢物组差异,寻找可能的生物标识物.结果:连续给予赤芍和白芍提取物6d后,能显著降低大鼠血小板最大凝集率水平,且赤芍组与白芍组组间有明显差别(P<0.01).α-酮戊二酸、苹果酸、白细胞三烯A4、前列腺素E2、前列腺素F2.等内源性生物标识物对于表征赤芍、白芍的抗血小板凝聚作用具有重要的作用.结论:代谢组学研究可以深人探讨赤芍和白芍的抗血小板凝聚机制.     

白芍中芍药苷的提取方法研究

目的：建立中药白芍中芍药苷的提取方法。方法：以芍药苷为指标，用高效液相色谱法进行分析测定，系统考察不同溶剂、不同提取方式对芍药苷提取率的影响，并用正交试验法进一步优选提取条件。结果：用7倍量80％乙醇回流提取2次(每次2h)的提取方法可以获得较高的芍药苷提取率。结论：溶剂种类和提取方式对白芍中芍药苷的提取效率有较大影响。     

Comparative pharmacokinetic study of paeoniflorin after oral administration of decoction of Radix Paeoniae Rubra and Radix Paeoniae Alba in rats

An investigation was designed and conducted to compare the pharmacokinetics difference of paeoniflorin after oral administration of the extracts of Radix Paeoniae Rubra and Radix Paeoniae Alba to rats on separate occasions. Quantification of paeoniflorin in rat plasma was achieved using a simple and rapid HPLC method for pharmacokinetic study. After oral administration of decoctions of Radix Paeoniae Rubra and Radix Paeoniae Alba, paeoniflorin was absorbed and reached a maximum concentration of 3.69 ± 1.46 and 1.46 ± 0.29 (p < 0.05) μg/ml at 1.67 ± 0.43 and 0.80 ± 0.35 h (p < 0.05), respectively. Compared to the AUC (18.85 ± 7.54 μg h/ml) after oral administration of the paeoniflorin solution, a smaller AUC (10.61 ± 1.51 μg h/ml, p < 0.05) and a larger AUC (24.89 ± 7.41 μg h/ml) of paeoniflorin after oral administration of the decoctions of Radix Paeoniae Alba and Radix Paeoniae Rubra were obtained, respectively. There were statistically significant differences in pharmacokinetic parameters of paeoniflorin including the t_max, C_max, AUC, t_1/2, CL, and V_d among the animals orally administered the decoctions of Radix Paeoniae Rubra and Radix Paeoniae Alba. In particular, the parameters of t_max, C_max, and AUC of paeoniflorin were remarkably increased (P < 0.05, P < 0.001) when oral administering paeoniflorin in the decoctions of Radix Paeoniae Rubra, but t_1/2, V_d, and CL were decreased (P < 0.05 or P < 0.01), in comparison of the decoction of Radix Paeoniae Alba.     

赤芍和白芍抗炎作用的UPLC-MS代谢组学初步研究

目的:通过比较赤芍和白芍对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的影响及内源性代谢物分析,探讨赤芍和白芍抗炎作用的异同.方法:建立角叉菜胶致大鼠足趾肿胀动物模型,观察赤芍和白芍的抗炎作用.基于超高效液相色谱-电喷雾质谱(UPLC-MS)比较赤芍和白芍给药后大鼠血清代谢物指纹图谱,采用偏最小二乘判别分析法研究给药组与正常组之间的代谢物组差异,寻找可能的生物标识物.结果:赤芍和白芍提取物在0.5～1h对大鼠角叉菜胶致足趾肿胀均有较好的抑制作用,在2～3h仅赤芍提取物有较好的抑制作用.前列腺素F2a,前列腺素E3,白细胞三烯A,前列腺素E2;谷胱甘肽等内源性生物标识物对于表征赤芍、白芍的抗炎作用具有重要的作用,且发现赤芍和白芍均可影响机体内前列腺素F2a和前列腺素E3的水平,但赤芍和白芍给药组间有显著性差异,提示二者发挥抗炎作用机制有一定差异.结论:代谢组学初步研究结果与传统药理试验结果有相关性,为进一步深人探讨赤芍和白芍的作用机制异同奠定基础.     

赤芍与白芍的化学成分含量比较研究

 目的通过对不同产地赤芍和白芍主要化学成分的含量测定及比较，进一步完善芍药野生品与栽培品药材的质量控制标准。方法采用高效毛细管电泳法(HPCE)的胶束电动色谱(MEKC)分离模式，测定了16个产地20个赤、白芍样品中的4个有代表性的活性成分：芍药苷、苯甲酸、D-儿茶素和没食子酸，并比较各成分之间的比例关系。结果①野生芍药根(赤芍)中芍药苷含量大于6％，D-儿茶素含量高于0.05％。未加工的栽培芍药根中芍药苷含量小于6％，未检测到D-儿茶素。在同样条件下，加工后的栽培芍药根(白芍)中芍药苷含量下降了37%～56%，仍未检测到D-儿茶素，苯甲酸的变化最大，下降达83%～92%。②内蒙古多伦赤芍与大、小兴安岭所产赤芍在化学成分的种类和含量上存在差异。③不同产地、特别是道地与非道地的白芍药材之间，化学成分的比例有所不同。结论运用HPCE技术，可以快速准确地对野生与栽培芍药根的活性成分差异进行定量分析。从而为区别同为芍药来源的赤芍和白芍的临床应用提供实验依据。     

白芍药材UPLC特征指纹图谱研究

目的:建立白芍药材的UPLC特征指纹图谱分析方法,为快速评价白芍药材的质量,完善白芍的质量控制方法提供依据.方法:采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm × 100 mm,1.8 μm),流动相乙腈-0.05%磷酸水溶液,检测波长230 nm.结果:建立了白芍药材的UPLC特征指纹图谱共有模式,标定了15个共有峰,指认了其中5个共有峰,15批白芍药材的相似度为0.891～0.9960结论:该方法快速,可用于评价白芍药材质量.     

炮制工艺对白芍中芍药苷的影响

目的考察毫白芍、杭白芍和川白芍及其不同炮制品中芍药苷的含量变化，为研究不同炮制工艺对白芍临床作用的影响提供依据。方法采用RP—HPLC法测定三种不同规格白芍及其相应四种炮制品中芍药苷的含量，色谱柱：SHI—MADZUVP—OOS（150mm×4．6mm，5μm）；流动相：乙腈-0．1％磷酸水溶液（16：84）；流速：1．0ml／min；柱温：25℃；检测波长：230nm。结果三种不同规格药材中芍药苷的含量为：毫白芍、杭白芍和川白芍分别为3．30％、3．14％和2．50％；白芍药材、白芍片、酒白芍、炒白芍和醋白芍中芍药苷的含量依次为2．98％、2．73％、2．69％、2．50％、2．48％。结论芍药苷（C23H28O11）含量：毫白芍〉杭白芍〉川白芍；药材〉白芍片≈酒白芍〉炒白芍≈醋白芍。