益气通痹合剂抗胶原诱导的关节炎大鼠关节滑膜血管新生作用的研究

目的:探讨益气通痹合剂抗风湿的作用及其机制。方法:以Ⅱ型胶原加完全弗氏佐剂诱导的关节炎(CIA)大鼠为类风湿性关节炎模型,通过对关节滑膜病理改变、大鼠右后足关节影像学评估及对血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-1、2、3、9(MMPs)在不同处理大鼠血清中的表达,探讨该制剂的治疗效果。结果:益气通痹合剂组的滑膜组织新生血管明显减少,与模型组比较差异显著(P<0.05),关节影像学有改善;模型组大鼠血清VEGF、MMPs活性表达明显升高,益气通痹合剂组起下调作用。结论:益气通痹合剂能改善模型大鼠的病理学及影像学改变,并通过下调大鼠血清中VEGF、MMPs的表达而抑制CIA大鼠关节滑膜的血管新生功能。     

清痹片对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织病理学改变的影响

目的:观察清痹片对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠滑膜组织病理形态学的影响。方法:光镜下对CIA大鼠滑膜炎性细胞浸润、滑膜细胞进行评分,观察其组织形态学的改变。结果:CIA模型组大鼠关节滑膜炎细胞浸润明显;而清痹片各给药组及尼美舒利组其病理改变较模型组明显减轻(P<0.05)。模型组大鼠组织形态学改变明显:关节滑膜高度增生,呈乳头状突起,细胞排列不规则,可见大量的炎性细胞浸润等;而各给药组组织形态学改变显著减轻。结论:清痹片能有效减轻CIA大鼠滑膜组织的病理形态学改变,对RA滑膜增生及关节破坏有一定的抑制作用。     

通痹颗粒对胶原性关节炎大鼠Wnt信号通路DKK1、β-catenin表达的影响

目的:观察通痹颗粒对胶原性关节炎(CIA)大鼠Wnt信号通路Dickkopf1(DKK1)和β-连环蛋白(β-catenin)表达的影响。方法:将40只健康SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药物组和通痹颗粒组。除空白组外,其余各组用牛Ⅱ型胶原诱导CIA大鼠模型。造模成功后,通痹颗粒组每日予通痹颗粒20g/kg灌胃,阳性药物组每日予雷公藤多苷片2.4mg/kg灌胃,其余组灌胃等量生理盐水,各组均每日灌胃1次,连续用药14d。比较各组大鼠治疗前后关节炎指数、关节肿胀度变化,治疗后滑膜病理学改变和血清DKK1、β-catenin表达情况。结果:治疗前和治疗第7、14天,与空白组大鼠比较,其余各组大鼠关节炎指数和关节肿胀度均显著增加(P0.01,P0.05)。治疗第7、14天,各治疗组关节炎指数和关节肿胀度均显著低于本组治疗前和模型组治疗同时期(P0.05),且治疗第14天时数值低于第7天(P0.05,P0.05)。空白组滑膜组织未增厚,滑膜细胞整齐排列,未观察到血管增生和炎症细胞浸润;模型组滑膜组织明显增厚,细胞排列紊乱,血管明显增生,大量炎症细胞浸润;各治疗组滑膜组织略微增厚,细胞排列较整齐,少量炎症细胞浸润,其中阳性药物组观察到血管轻度增生。与空白组比较,其余各组大鼠血清DKK1和β-catenin均显著升高(P0.05);与模型组比较,各治疗组大鼠血清DKK1和β-catenin水平明显降低(P0.05)。结论:通痹颗粒可以显著改善CIA大鼠关节滑膜的炎症反应,提示通过Wnt/β-catenin信号通路下调DKK1和β-catenin表达,从而防止异常血管增生及滑膜的炎症细胞浸润,可能是通痹颗粒治疗CIA的机制之一。     

清络通痹颗粒对胶原关节炎大鼠的保护作用及机制研究

目的:观察清络通痹颗粒(QLT)对胶原关节炎(CIA)大鼠的影响及机制。方法:建立CIA大鼠模型,观察清络通痹颗粒对CIA大鼠抗Ⅱ型胶原(CⅡ)抗体、外周血和腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子(TNF-α)水平、滑膜细胞凋亡和关节摄片等指标的影响。结果:清络通痹颗粒三个剂量组大鼠血清抗CⅡ抗体水平较模型组均有不同程度降低;清络通痹颗粒7.2,14.4g/kg剂量组大鼠血清和PMΦTNF-α的含量较模型组明显降低;清络通痹颗粒7.2,14.4 g/kg可明显促进CIA大鼠滑膜细胞的凋亡;CIA大鼠后肢关节摄片可见关节周围软组织肿胀明显,严重骨密度降低,关节腔间隙增宽,关节严重破坏,而清络通痹颗粒7.2,14.4g/kg给药的大鼠上述症状不同程度明显减轻。结论:一定剂量的清络通痹颗粒可调节CIA大鼠免疫功能紊乱,诱导滑膜细胞凋亡和抑制骨质破坏,其机制可能与抑制炎症性细胞因子TNF-α的过度分泌有关。     

益肾蠲痹丸对Ⅱ型胶原致关节炎大鼠踝关节组织病理改变的影响及其机制研究

目的观察益肾蠲痹丸对II型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的治疗作用及对踝关节组织病理改变的影响,并探讨益肾蠲痹丸治疗类风湿性关节炎(RA)与血管内皮生长因子(VEGF)的相关性。方法通过建立CIA大鼠模型,观察益肾蠲痹丸对CIA大鼠足肿胀的治疗作用,对踝关节局部组织病理形态损伤的治疗作用,用免疫组化方法检测滑膜组织中VEGF的表达水平,利用基因芯片技术测定外周血淋巴细胞、肝组织中的VEGF的基因表达情况。结果益肾蠲痹丸高、中、低剂量组大鼠踝关节肿胀程度明显减轻,与模型组比较差异显著(P0.05、0.01、0.001)。益肾蠲痹丸高、中、低剂量组与模型组比较,滑膜细胞增生减轻,滑膜组织充血水肿明显减轻,血管增生和浸润炎细胞数量减少,血管翳形成显著减少,纤维组织形成减少,软骨与骨组织破坏程度减轻。益肾蠲痹丸高、中剂量组与模型组比较滑膜组织中VEGF表达明显降低(P0.05、0.01),低剂量组滑膜组织中VEGF表达亦有下降趋势。益肾蠲痹丸高、中剂量组能显著下调肝组织中VEGF-B基因的表达(fold change1.5)。结论益肾蠲痹丸对CIA大鼠有显著治疗作用,能明显减轻大鼠踝关节肿胀程度,显著抑制CIA大鼠组织病理改变,能显著下调滑膜组织中VEGF的表达和肝组织中VEGF-B基因的表达,从而减少肝组织、滑膜组织中VEGF的量,抑制滑膜组织中血管翳的形成,减少对关节软骨和骨组织的破坏。     

敦煌消痹定痛酊对胶原诱导性大鼠关节炎模型TNF-a、IL-1和IL-6影响的实验研究

目的:研究敦煌消痹定痛酊治疗类风湿性关节炎的部分作用机制,探讨其对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型关节液中肿瘤坏死因子a(TNF-a)和白介素-1(IL-1)及白介素-6(IL-6)含量的影响。方法:建立胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型,用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测关节液中TNF-a、IL-1和IL-6含量。结果:敦煌消痹定痛酊能显著降低CIA大鼠关节液中TNF-a、IL-1和IL-6的含量。结论:提示敦煌消痹定痛酊对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节炎具有一定抑制作用,可通过降低大鼠关节液中的TNF-a、IL-1和IL-6含量,从而抑制滑膜细胞的增生,缓解炎性细胞的浸润,减轻关节滑膜的炎症。结果表明:敦煌消痹定痛酊能显著降低CIA大鼠关节液中TNF-a、IL-1和IL-6的含量。提示该制剂对CIA大鼠关节炎具有一定抑制作用。     

清络通痹颗粒对胶原关节炎大鼠滑膜炎的影响

目的：探讨清络通痹颗粒对胶原性关节炎大鼠滑膜细胞的影响及机理。方法：建立胶原性关节炎大鼠（CIA）模型，同时设正常对照组。给药自第7天始，持续21天。取滑膜，检测滑膜细胞增殖能力和滑膜细胞分泌TNF-α的量。结论：一定剂量的清络通痹颗粒可抑制CIA大鼠滑膜细胞的过度增生，这与其调节与滑膜增生相关的细胞因子有关。     

痹宁颗粒对CIA大鼠血清IL-6、IL-10含量的影响

目的:观察痹宁颗粒对型胶原诱导性关节炎(Collagen-Induced Arthritis,CIA)大鼠血清中IL-6、IL-10含量的影响,探讨痹宁颗粒治疗类风湿性关节炎的作用机理。方法:于实验的第20天随机抽取造模大鼠每组2只,进行关节滑膜病理组织观察,确认CIA大鼠模型制作成功,并用酶免法测定用药后各组大鼠血清中IL-6、IL-10的含量。结果:经过治疗各用药组大鼠精神状态、活动、摄食等均有恢复,且痹宁颗粒组大鼠血清中IL-6的含量明显降低与痹颗粒组及甲氨蝶呤组相比均有显著性差异(P<0.05);痹宁颗粒组大鼠血清中IL-10的含量与甲氨蝶呤比较无明显差异(P>0.05);结论:痹宁颗粒对CIA大鼠的一般状况及局部关节肿胀均有改善,其作用机理可能与调节血清IL-6、IL-10等炎症介质的含量有关。     

清痹合剂治疗类风湿关节炎的实验研究

目的:观察不同浓度的清痹合剂及清痹合剂+甲氨蝶呤(MTX)对大鼠佐剂性关节炎的影响及小鼠镇痛试验的观察。方法:1.皮下注射完全弗氏佐剂使大鼠关节致炎,复制RA大鼠模型。给药组分别以不同浓度的清痹合剂灌胃,观察大鼠的一般情况,右后足踝关节直径及足跖厚度变化;并对右后足踝关节滑膜进行病理观察。2.给各组小鼠灌以不同浓度的清痹合剂1h后,以0.6%醋酸生理盐水给小鼠按0.01ml/g体重腹腔注射,观察各组小鼠的扭体反应,记录20min内小鼠扭体次数。结果:清痹合剂高、中浓度对佐剂性关节炎肿胀有抑制作用(P0.05,P0.01),其中中浓度+MTX组对炎症抑制作用最为突出(P0.01);清痹合剂与小剂量的MTX联合治疗,具有减轻滑膜充血、水肿、肉芽肿形成,抑制血管翳的形成。清痹合剂能减少醋酸致痛的小鼠扭体次数(P0.05,P0.01)。结论:清痹合剂对大鼠佐剂性关节炎有明显的消炎、镇痛作用,能很好协同小剂量MTX抑制滑膜血管翳的形成。     

金藤清痹颗粒对胶原诱导性类风湿关节炎大鼠滑膜血管新生的影响

目的：观察金藤清痹颗粒对胶原诱导性类风湿关节炎（CIA）大鼠滑膜血管新生的治疗作用并探讨其作用机制。方法：取60只SD大鼠随机分为空白组，模型组，甲氨蝶呤组，金藤清痹颗粒低、中、高剂量组等6组。以免疫诱导方法建立CIA大鼠模型，每天灌胃1次，空白组和模型组予以等量生理盐水灌胃，共28 d。采用小动物超声影像系统检测各组大鼠右下肢膝关节滑膜增生程度评分与增生面积；酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清中白细胞介素-6（IL-6）、IL-17、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平；苏木精-伊红染色法观察大鼠关节滑膜病理改变；免疫组织化学法检测大鼠关节滑膜组织血小板-内皮细胞黏附分子31（CD31）与血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR2）表达水平。结果：与空白组比较，模型组CIA大鼠右膝关节滑膜区域面积和滑膜增生评分显著增加（P<0.01）；大鼠关节滑膜组织也出现显著病理性改变；血清炎症介质水平升高，同时CD31、VEGFR2表达也显著升高（P<0.01）。与模型组比较，金藤清痹颗粒各剂量组均能明显减小CIA大鼠滑膜增生面积（P<0.01），金藤清痹颗粒高剂量组大鼠超声滑膜评分显著降低（P<0.01）；金藤清痹颗粒中、高剂量可明显改善大鼠关节滑膜组织病理变化，显著降低IL-6、IL-17、TNF-α水平（P<0.01），关节滑膜组织CD31、VEGFR2表达也出现一定程度下降（P<0.01）。结论：金藤清痹颗粒能够通过改善CIA大鼠关节滑膜血管新生抑制类风湿关节炎病理进展，达到减轻关节损伤的作用，其机制可能与抑制炎症介质分泌，降低CD31、VEGFR2表达有关。     

蓬草除痹汤对CIA大鼠滑膜组织病理形态学的影响

目的观察蓬草除痹汤对胶原诱导型关节炎大鼠(CIA)滑膜组织病理形态学的影响。方法建立牛Ⅱ型胶原蛋白诱导大鼠类风湿性关节炎模型,随机分为蓬草除痹汤高、中、低剂量组、雷公藤组及空白组,各组连续给药6W,观察对滑膜组织病理学改变,进行评分,从滑膜细胞增生、纤维组织增生、炎性细胞浸润和巨噬细胞浸润4个方面评价大鼠关节滑膜的病理学变化。结果蓬草除痹汤中、高剂量组及雷公藤组对滑膜组织的病理学改变与模型组比较有显著差异(P<0.05或P<0.01)。结论蓬草除痹汤可以降低CIA大鼠滑膜的病理学评分,抑制滑膜细胞增生、纤维组织增生、炎性细胞浸润和巨噬细胞浸润。     

(九王)痹片对大鼠佐剂性关节炎踝关节组织病理损伤的抑制作用

目的 研究(九王)痹片对热杀死结核分枝杆菌(Mtb)诱导的SD大鼠佐剂性关节炎踝关节组织病理损伤的抑制作用.方法 除正常组外,其余各组大鼠用Mtb与矿物油混悬液一次性经尾根部皮下注射,建立Mtb诱导的佐剂性关节炎大鼠模型.将模型大鼠随机分为模型对照组(生理盐水2 mL)、(九王)痹片高、低剂量组(3.2,1.6 g/kg),正清风痛宁组(4.25 mg/kg),正常对照组给予生理盐水2 mL.每天灌胃给药1次,连续4周.给药结束后,取大鼠踝关节进行病理检查,观察大鼠踝关节滑膜、软骨、关节腔、周围软组织炎症反应等组织病理改变情况,进行综合评分.结果 与模型对照组比较,(九王)痹片能够显著抑制炎症细胞的浸润和滑膜增生,减轻软骨损伤程履(P<0.05).结论 (九王)痹片对实验性类风湿关节炎的滑膜及关节软骨具有较好的保护作用.     

姜黄对胶原诱导性关节炎大鼠抗炎作用的研究

目的研究姜黄对胶原诱导性关节炎大鼠的作用,并初步探讨其作用机制。方法随机将40只大鼠分为正常对照组、胶原诱导性关节炎模型组(CIA模型组)、阳性对照组及姜黄组(Curcuma-CIA组)。除正常对照组外,余各组采用足趾部皮内注射胶原乳液免疫建立CIA模型。造模3周后开始分组给药,Curcuma-CIA组以姜黄100%水煎液灌胃,阳性对照组给予地塞米松水溶液,正常对照组、CIA模型组等量生理盐水灌胃。观察各组大鼠一般情况、关节肿胀程度、滑膜组织病理特征,EIA法检测血清前列腺素E2(PGE2)表达水平等指标。结果造模后,模型大鼠的踝关节肿胀明显,与正常对照组比较,有显著性差异(P0.01);给药2周后,Curcuma-CIA组与CIA模型组比较踝关节肿胀程度减轻,有统计学意义(P0.05);HE病理切片显示,Curcuma-CIA组较CIA模型组大鼠滑膜组织充血明显减轻,炎性细胞浸润减少。PGE2检测结果显示姜黄能减少造模大鼠血清中PGE2的含量。结论成功建立胶原诱导性关节炎大鼠模型;姜黄对CIA模型大鼠滑膜组织炎症有抑制作用,能够减轻肿胀,减少滑膜组织炎性细胞浸润,其作用机制可能与抑制炎症介质PGE2的表达有关。     

通痹灵、雷公藤多甙及青藤碱对实验性关节炎大鼠滑膜组织病理影响的比较研究

目的 :研究通痹灵、雷公藤多甙及青藤碱对Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠关节炎模型(CIA)滑膜组织病理的影响。方法 :滑膜组织常规脱水、包埋、制片、HE染色 ,观察炎性细胞浸润、纤维组织增生、滑膜细胞增生及巨噬样A型细胞增生情况。结果 :通痹灵组CIA大鼠滑膜组织的炎性细胞浸润、纤维组织增生和巨噬样A型细胞明显受抑制。四种细胞病理改变的总积分与造模组比较有非常显著的差异。结论 :通痹灵治疗类风湿性关节炎的机理可能与抑制炎性细胞浸润、纤维组织增生和巨噬样A型细胞增生有关。     

虎威通痹汤对佐剂关节炎大鼠IL-23/IL-17炎症轴的影响

目的:观察虎威通痹汤对佐剂关节炎大鼠IL-23/IL-17炎症轴的影响。方法:将40只雄性 SD 大鼠随机分为对照组、模型组、虎威通痹汤组、甲氨蝶呤组,每组10只。虎威通痹汤组、甲氨蝶呤组分别给予相应药物灌胃,对照组和模型组予等体积0.9%氯化钠溶液。干预28 d后,比较各组大鼠足跖肿胀程度、关节滑膜组织病理学形态及血清IL-23、IL-17、IL-6、TNF-α表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠足跖肿胀度增加,关节滑膜损伤明显,血清IL-23、IL-17、IL-6、TNF-α水平上调。与模型组比较,虎威通痹汤组大鼠足跖肿胀程度减轻,滑膜损伤改善,血清IL-6、TNF-α、IL-17、IL-23水平下调。与甲氨蝶呤组比较,虎威通痹汤组血清IL-23、IL-6水平降低,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:虎威通痹汤可减轻佐剂关节炎大鼠炎症反应,改善滑膜组织损伤,其机制可能与抑制IL-23/IL-17炎症轴有关。     

蚁附蠲痹颗粒对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织病理形态学的影响

目的:观察蚁附蠲痹颗粒对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织中病理形态学的影响。方法:光镜下对佐剂性关节炎大鼠滑膜炎性细胞浸润、滑膜细胞、滑膜纤维组织增生评分,观察其组织形态学的改变。结果:佐剂性关节炎模型大鼠关节滑膜炎细胞浸润、增生明显。而蚁附蠲痹颗粒各给药组其病理改变较模型组明显减轻(P<0.05)。模型组大鼠组织形态学改变明显:关节滑膜衬里层细胞明显增厚,炎性细胞浸润,血管翳组织侵蚀骨组织等;而给药组组织形态学改变显著减轻。结论:蚁附蠲痹颗粒能有效减轻类风湿性关节炎对滑膜组织病理形态学的改变。     

独活寄生汤及其配方颗粒对胶原诱导型关节炎大鼠滑膜组织病理学变化的影响

目的:研究独活寄生汤及其配方颗粒对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠滑膜组织病理学改变的影响。方法:70只SD大鼠随机分为正常组、模型组、MTX治疗组、独活寄生汤配方颗粒和饮片汤剂治疗组。采用皮下注射牛Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂制成实验性关节炎(CIA)模型。分别灌胃给药5周后,采集各组大鼠滑膜组织,观察其组织形态学的改变,进行病理分级和评价。结果:与正常组比较,模型组大鼠关节滑膜炎细胞浸润、滑膜细胞和纤维组织增生显著增多(P0.01);与模型组比较,MTX治疗组滑膜组织形态学病理改变明显著减轻(P0.01),独活寄生汤配方颗粒与饮片汤剂治疗组病变也有明显减轻(P0.05),但二者之间无显著性差异。结论:独活寄生汤及其配方颗粒均能有效地抑制CIA模型大鼠滑膜组织的病理改变,两者之间无显著性差别。     

蚁附蠲痹颗粒对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织中Caspase-3表达的影响

目的:观察蚁附蠲痹颗粒对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织中Caspase-3表达的影响,探讨蚁附蠲痹颗粒治疗类风湿性关节炎的分子作用机制。方法:经计算机摄像系统采样后,采用Biomias计算机图像处理分析软件对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织中信号强度进行分析,得出Caspase-3阳性染色面积及积分光密度值。结果:佐剂性关节炎模型组大鼠滑膜组织中Caspase-3表达(阳性总面积、积分光密度)较空白组明显的增高(P<0.05);阳性组和蚁附蠲痹颗粒高、中、低剂量组较空白组和模型组均显著增高(P<0.01)。结论:蚁附蠲痹颗粒使凋亡反应的效应者(Caspase-3)在滑膜组织中表达增强,促进细胞凋亡是其发挥治疗作用的一个重要环节。     

壮药龙钻通痹方对胶原诱导型关节炎大鼠血清及滑膜Fas/FasL系统的影响

目的观察壮药龙钻通痹方对胶原诱导型关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠血清及滑膜Fas/FasL系统的影响。方法 60只雄性Wistar大鼠随机选取10只作为正常对照组,其余50只采用牛Ⅱ胶原蛋白与弗氏不完全佐剂混合液诱导制作CIA模型,造模后分为模型组,甲氨蝶呤组(MTX组),壮药龙钻通痹方高、中、低剂量组(简称壮药高、中、低剂量组),每组10只。模型组灌服生理盐水,MTX组按0.27mg/100g大鼠体重灌胃MTX溶液,每周1次,灌胃4周;壮药高、中、低剂量组分别予以壮药龙钻通痹方汤剂(4.32、2.16、1.08g/mL)灌胃,每日2次,灌胃30日。HE染色观察滑膜形态变化;ELISA法定量检测干预后大鼠血清、滑膜组织匀浆液Fas/FasL的表达。结果正常组中为正常滑膜细胞,模型组中滑膜细胞增殖明显,下层脂肪细胞减少或变形,成纤维细胞增多,伴有淋巴细胞及单核细胞浸润;MTX组及壮药低、中、高剂量组较模型组明显改善。与正常组比较,模型组血清及滑膜组织Fas表达升高,血清FasL表达降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,MTX组、壮药中、高剂量组血清及滑膜组织Fas表达降低,MTX组、壮药低、中、高剂量组血清及MTX组、壮药中、高剂量组滑膜组织FasL表达升高(P0.05,P0.01);与MTX组比较,壮药低剂量组血清及壮药低、中剂量组滑膜组织Fas表达升高,壮药高剂量组血清及滑膜组织Fas表达降低,壮药低、中剂量组血清及滑膜组织FasL表达降低,壮药高剂量组血清及滑膜组织FasL表达升高(P0.05,P0.01)。结论调节Fas/FasL系统介导的细胞凋亡机制,减缓类风湿关节炎的病理反应可能是壮药龙钻通痹方控制与治疗类风湿关节炎的作用机制之一。     

清络通痹颗粒对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞的影响

目的探讨清络通痹颗粒对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞的影响.方法建立佐剂性关节炎(AIA)大鼠模型,同时设正常对照组.自第7天开始给药,持续21 d.取滑膜,检测滑膜细胞增殖能力和滑膜细胞分泌IL-1的量.结果清络通痹颗粒7.2、14.4 g/kg可明显抑制AIA大鼠的滑膜细胞增殖反应(P＜0.01).结论一定剂量的清络通痹颗粒可抑制AIA大鼠滑膜细胞的过度增生,这与其调节与滑膜增生相关的细胞因子有关.