半夏泻心汤药物血清对ICC线粒体膜电位与[Ca~(2+)]i的影响

目的:观察半夏泻心汤对小鼠Cajal间质细胞(Interstitial Cells of Cajal,ICC)线粒体膜电位与细胞内Ca2+浓度的影响。方法:制备大鼠含半夏泻心汤药物血清,体外分离培养ICC,用药物血清处理ICC,作用24h后,采用ICC特异的c-kit抗体进行免疫荧光测定,利用激光共聚焦显微扫描技术和特异性荧光探针标记线粒体膜电位及[Ca2+]i。结果:半夏泻心汤药物血清能提高ICC线粒体膜电位,降低ICC[Ca2+]i。结论:半夏泻心汤可能通过提高ICC线粒体膜电位,降低ICC[Ca2+]i以促进胃肠运动。     

舒胃汤对功能性消化不良大鼠小肠ICC细胞IP3R，RyR表达的影响

目的:通过观察舒胃汤对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)模型大鼠小肠Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)中IP3受体(inositol 1,4,5-triphosphate receptor,IP3R),Ry受体(ryanodine receptor,RyR)蛋白及mRNA表达的影响,从钙离子通道调节角度探讨舒胃汤对FD的治疗作用及机制。方法:取Wistar大鼠15只,随机分成空白组、模型组与舒胃汤组(30.68 g·kg~(-1))。模型组与舒胃汤组按复合病因造模法处理21 d复制FD模型,灌胃给药14 d后取血制备含药血清。取2~3周Wistar乳鼠小肠平滑肌原代ICC细胞,传代培养后分为空白血清组(A组),模型血清组(B组),舒胃汤5%含药血清组(C组),舒胃汤10%含药血清组(D组),舒胃汤15%含药血清组(E组)。待细胞融合至60%~80%时分别加入对应组别血清,继续孵育24 h。提取细胞蛋白及总RNA,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测IP3R,RyR蛋白表达,实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)检测IP3R,RyR mRNA表达。结果:Western blot检测发现,与A组比较,B组IP3R-1,IP3R-2,IP3R-3,RyR-1,RyR-2,RyR-3蛋白表达均明显降低(P0.01);与B组比较,D,E组IP3R,RyR蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01)。Real-time PCR检测发现,与A组比较,IP3R,RyR mRNA表达均明显降低(P0.01);与B组比较,D,E组IP3R,RyR mRNA表达明显升高(P0.01)。结论:舒胃汤可通过上调FD模型大鼠小肠ICC细胞内IP3R,RyR蛋白及mRNA表达,发挥对功能性消化不良疾病的治疗作用。     

半夏泻心汤对脓毒症大鼠肠道机械屏障的保护作用研究

目的观察半夏泻心汤对脓毒症大鼠肠道机械屏障的保护作用,并初步探讨其相关机制。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、脓毒症组和半夏泻心汤组。采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症大鼠模型。对照组只开腹后关腹,其他操作相同。半夏泻心汤组在成模时开始灌胃中药。对照组和脓毒症组在成模时灌胃生理盐水。成模后72 h处死大鼠,留取血清和肠道组织标本进行组织病理学评价,检测血清内毒素、D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)含量以及组织TNF-α、IL-10的基因表达。结果半夏泻心汤组大鼠肠道组织病理损伤情况较脓毒症组明显减轻。半夏泻心汤组血清内毒素、D-乳酸、DAO、TNF-α含量均较脓毒症组显著减少,而IL-10含量较脓毒症组显著增加(P<0.05)。半夏泻心汤组肠道组织TNF-α的基因表达水平较脓毒症显著降低,而IL-10的基因表达水平较脓毒症显著增加(均P<0.05)。结论半夏泻心汤能减轻炎症反应,对脓毒症大鼠肠道机械屏障具有保护作用,其机制可能是通过上调IL-10表达和抑制TNF-α表达实现的。     

半夏泻心汤及不同配伍组对慢性胃炎大鼠ICC细胞相关受体表达和钙内流的影响

目的研究半夏泻心汤及各配伍组对胃肠道运动相关受体及Cajal间质细胞(ICC)内Ca~(2+)浓度的影响,探究半夏泻心汤调节慢性胃炎胃肠道功能的作用机制。方法建立寒热错杂型慢性胃炎大鼠模型。大鼠随机分为正常组、模型组、全方组、苦降组、辛开组、甘补组以及阳性药组,灌胃给药7 d。对胃组织进行HE染色观察病理变化,RT-qPCR技术和Western blot法分别测定5-HT4、AchE、DA2、c-kit的mRNA和蛋白表达,免疫荧光法检测蛋白共表达位置及表达量,荧光探针Fluo-4-AM标记Ca~(2+),检测各组Cajal间质细胞中Ca~(2+)浓度变化情况。结果各药物组能不同程度改善大鼠慢性胃炎症状,提高5-HT4、AchE和c-kit的mRNA和蛋白的表达,降低DA2的mRNA和蛋白的表达。全方组调节5-HT4、AchE和c-kit的mRNA以及5-HT4和DA2蛋白表达的效果更显著。5-HT4、DA2、AchE和c-kit出现共表达,共表达部位在细胞膜。各药物组能不同程度降低Cajal间质细胞内Ca~(2+)的荧光强度,以全方组效果更为显著。结论半夏泻心汤及各个配伍组可通过调节5-HT4、DA2、AchE和c-kit的表达,降低Cajal间质细胞内的Ca~(2+)浓度,抑制Cajal间质细胞钙超载,防止Cajal间质细胞兴奋节律失常,从而调节胃肠道运动,改善大鼠慢性胃炎的症状。     

半夏泻心汤人含药血清对HP感染GES-1细胞TGF-β/Smad信号通路的影响

目的:探讨半夏泻心汤人含药血清对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)感染人胃黏膜上皮GES-1细胞转化生长因子-β(TGF-β)/信号转导蛋白(Smad)信号通路的影响,以揭示该方治疗消化性溃疡可能的作用机制。方法:GES-1细胞分为空白组,HP感染模型组,健康人血清组,雷贝拉唑血清组,用药前血清组,10%半夏泻心汤血清组,20%半夏泻心汤血清组。除空白组外,其余各组均接种HP造成幽门螺杆菌感染模型,采用雷贝拉唑、半夏泻心汤含药血清及用药前、健康人血清进行干预,24 h后收集细胞及其上清液,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖情况;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测Smad2/3,Smad7,TGF-β1及磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3),磷酸化Smad7(p-Smad7)蛋白的表达。结果:与空白组比较,HP可明显抑制GES-1细胞的增殖,降低GES-1细胞内Smad2/3,TGF-β1及p-Smad2/3蛋白表达,增加Smad7及p-Smad7蛋白表达(P0.05,P0.01);与HP感染模型组比较,雷贝拉唑血清组及10%,20%半夏泻心汤血清组可明显降低HP对GES-1细胞增殖的抑制,增加GES-1细胞内Smad2/3,TGF-β1,p-Smad2/3蛋白表达,并明显降低Smad7,p-Smad7蛋白表达(P0.05,P0.01);与用药前血清组比较,加入雷贝拉唑、半夏泻心汤含药血清后均可降低HP对GES-1细胞增殖的抑制,其中雷贝拉唑血清组及20%半夏泻心汤血清组可增加GES-1细胞内Smad2/3,TGF-β1,p-Smad2/3蛋白表达,降低Smad7,p-Smad7蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:半夏泻心汤能够减轻HP诱导GES-1细胞的损伤,促进GES-1细胞增殖,治疗HP相关性消化性溃疡,提高溃疡愈合质量,其机制可能与其调控TGF-β/Smad信号通路有关。     

针刺对术后大鼠Cajal间质细胞和胃肠激素的影响

目的:探讨针刺调节术后胃肠动力的作用机制。方法:30只SD大鼠随机分为正常组、模型组(结肠吻合术)和针刺组。针刺组术后予针刺双侧足三针(足三里、三阴交、太冲)。观察食欲及排便情况,治疗结束后行核素胃排空试验,采用放射免疫法检测血浆胃动素、血清胃泌素含量,取胃起搏区组织和结肠组织免疫组化法检测c-kit阳性Cajal间质细胞(ICC)的变化。结果:与正常组比较,模型组胃排空减慢,血浆胃动素水平下降,结肠组织c-kit阳性ICC减少(P<0.05或P<0.01)。针刺组较模型组胃排空加快,血浆胃动素水平升高,结肠组织c-kit阳性ICC增加(P<0.01或P<0.05)。血清胃泌素和胃起搏区ICC表达三组间比较无显著性差异(P>0.05)。结论:针刺能促进术后胃肠运动功能的恢复,其作用机制可能与调整血浆胃动素水平和促进受损部位c-kit阳性ICC恢复有关。     

桃红四物汤对溃疡性结肠炎大鼠SCF/c-kit通路及Cajal间质细胞的影响

目的探讨桃红四物汤(THSWT)对溃疡性结肠炎(UC)大鼠干细胞因子(SCF)/酪氨酸蛋白激酶受体(c-kit)通路及Cajal间质细胞(ICC)的影响。方法将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、THSWT低剂量组(50 mg/kg)、THSWT中剂量组(100 mg/kg)、THSWT高剂量组(200 mg/kg)、柳氮磺吡啶组(0.3 g/kg),每组10只。除假手术组外,其余各组大鼠均利用结肠炎诱导剂(TNBS)溶液建立UC模型,按照各组给药剂量给予相应药物处理后,采集大鼠腹腔主动脉血及结肠组织;以苏木精-伊红(HE)染色检测各组大鼠结肠组织病理变化并对大鼠进行病理学评分;用透射电镜观察大鼠结肠组织ICC超微结构;以酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠腹腔主动脉血清SCF水平;免疫荧光法检测大鼠结肠组织c-kit阳性ICC的表达;以Western blot免疫印迹法检测大鼠结肠组织中SCF、c-kit蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠出现血便、黄色稀便、精神萎靡、反应迟钝、蜷缩扎堆等症状,并伴有体质量增长缓慢、脱毛、毛色暗黄等;结肠组织出现明显充血、淤血,肌层、肠黏膜变薄,结肠组织损伤评分及疾病活动指数(DAI)评分显著升高,结肠组织ICC数量较少且结构模糊;腹主动脉血清中SCF含量显著降低,结肠组织c-kit阳性ICC的荧光强度显著减弱,SCF、c-kit蛋白表达显著降低(P0.05)。与模型组比较,THSWT低、中、高剂量组,柳氮磺吡啶组大鼠结肠组织病理损伤、ICC结构、结肠组织损伤评分及DAI评分有不同程度的缓解,血清中SCF含量显著升高,结肠组织c-kit阳性ICC的荧光强度显著增强,SCF、c-kit蛋白表达显著升高(P0.05),THSWT各组呈剂量依赖性。THSWT高剂量组与柳氮磺吡啶组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 THSWT可缓解UC大鼠的结肠组织损伤,可能是通过激活SCF/c-kit通路、保护ICC结构完整性实现的。     

抗纤灵方药物血清对骨髓来源成纤维细胞表型转化的影响

目的探讨抗纤灵方对肾间质纤维化(RIF)的作用机制。方法将抗纤灵方煎至含生药3.2g/ml、福辛普利0.33mg/ml给大鼠灌胃,正常组给予等量蒸馏水灌胃,分别制备抗纤灵方血清、福辛普利血清和正常血清。用DMEM培养基稀释血清,分为正常血清组、福辛普利组、抗纤灵组、转化生长因子-β1(TGF-β1)组、TGF-β1+福辛普利组和TGF-β1+抗纤灵组。体外培养大鼠肾组织骨髓来源的成纤维细胞(FBS),采用酶联免疫吸附法和双重荧光定量法检测骨髓来源的FBS表型转化标记物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)及其mRNA表达。结果 TGF-β1组α-SMA、CollagenⅠ及α-SMAmRNA、CollagenⅠmRNA表达水平较正常血清组明显增强(P<0.05或P<0.01),TGF-β1+福辛普利组和TGF-β1+抗纤灵组α-SMA、CollagenⅠ及α-SMAmRNA、CollagenⅠmRNA表达水平均低于TGF-β1组(P<0.05或P<0.01)。结论抗纤灵方药物血清可以通过抑制骨髓来源的FBS的表型转化拮抗RIF。     

半夏泻心汤有效组分甘草酸对幽门螺杆菌相关性胃炎胃黏膜保护作用和对TNF-α影响的研究

目的:探讨半夏泻心汤有效组分甘草酸对幽门螺杆菌相关性胃炎胃黏膜保护作用的机制和对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法:小鼠幽门螺杆菌液灌胃造模,造模成功后,正常组和模型组,采用等体积的生理盐水灌胃;全方组和甘草酸组分别给予相应的药物治疗。观察各组小鼠胃黏膜的改变及血清中TNF-α含量的变化。结果:半夏泻心汤全方组和甘草酸组治疗后炎性细胞浸润程度明显减轻,全方组和甘草酸组均幽门螺杆菌转阴率提高,血清TNF-α含量降低,与模型组比较,差异有非常显著性或显著性意义(P<0.01,P<0.05)。结论:半夏泻心汤及其有效组分甘草酸可减轻胃黏膜的炎症反应,降低血清TNF-α的含量,半夏泻心汤对胃黏膜具有保护作用,甘草酸为其有效组分之一,其作用途径是降低血清TNF-α的含量。     

止消通脉宁干预转化生长因子-β1诱导人肾小管上皮细胞表型转化的研究

目的观察止消通脉宁药物血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)表型转化的影响,并探讨其机制。方法将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养并分为空白对照组、TGF-β1诱导组(TGF-β110 ng/mL)、空白血清对照组(TGF-β110 ng/mL+10%空白血清)、干预1组(TGF-β110 ng/mL+10%低剂量止消通脉宁药物血清)、干预2组(TGF-β110 ng/mL+10%中剂量止消通脉宁药物血清)、干预3组(TGF-β110 ng/mL+10%高剂量止消通脉宁药物血清)。药物干预24 h后,免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达。在24、48、72 h应用酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和纤连蛋白(FN)的含量。结果正常HK-2细胞表达E-cadherin,不表达α-SMA,经TGF-β1刺激后细胞表型发生转变,E-cadherin的表达明显减弱,α-SMA表达明显增强,且ColⅠ、ColⅢ和FN的分泌明显增加,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。止消通脉宁药物血清干预后α-SMA表达明显减弱,E-cadherin表达明显增强;同时抑制了ColⅠ、ColⅢ和FN的分泌,与TGF-β1诱导组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论止消通脉宁在一定程度上能够抑制人肾小管上皮细胞表型转化,减少细胞外基质成分的分泌,具有防治肾间质纤维化的作用。     

加味半夏泻心汤治疗胃食管反流病30例临床观察

目的:观察加味半夏泻心汤治疗胃食管反流病临床疗效。方法:将符合诊断的60例患者随机分为治疗组30例和对照组30例。两组均予以常规制酸,护胃治疗。治疗组在对照组基础上予以加味半夏泻心汤口服。两组均7d为1疗程。观察两组治疗前后症状积分、实验室指标及毒副反应情况。结果:治疗组较对照组能明显改善症状,实验室指标亦有显著疗效(P>0.05),且未见明显不良反应。结论:加味半夏泻心汤治疗胃食管反流病安全、有效,值得临床推广应用与更深入研究。     

半夏泻心汤治疗58例胃食管反流病临床疗效评价

目的：考察半夏泻心汤治疗胃食管反流病的临床疗效。方法：将116例GERD患者随机分为治疗组与对照组各58例,两组患者均严格进行生活方式及饮食等方面的严格控制,其中治疗组采用半夏泻心汤含加味治疗,对照组采用传统方法应用西药进行治疗。结果：治疗后,两组患者的症状积分与治疗前比较均具有统计学意义（P〈0.05）,且治疗组的改善程度显著优于对照组（P〈0.05）;治疗组总有效率为93.1%,对照组总有效率为72.4%,治疗组显著优于对照组,比较有统计学意义（P〈0.05）。结论：半夏泻心汤对CERD临床症状积分具显著改善作用,且总有效率显著高于西药治疗,本方法值得在临床推广应用。     

半夏泻心汤及其拆方抗幽门螺杆菌作用的研究

目的:探讨半夏泻心汤及其拆方抗Hp的作用.方法:运用琼脂扩散法、液体稀释法定性和定量检测半夏泻心汤及其拆方对Hp的抗菌作用 结果:在琼脂扩散法中,半夏泻心汤组对Hp抗菌作用优于辛温组和甘温组,差异有统计学意义(P＜0.05);半夏泻心汤组略优于苦寒组,差异无统计学意义(P＞0.05).在液体稀释法中,半夏泻心汤对Hp的最低抑菌浓度(MIC)与最低杀菌浓度(MBC)均为15.63mg/mL;辛温组和苦寒组对Hp的最低抑菌浓度(MIC)与最低杀菌浓度(MBC)均分别为62.50 mg/mL、31.25mg/mL.均在实验检测的浓度范围内(1.95 mg/mL ～ 250.00 mg/mL).结论:半夏泻心汤有较明显的抗菌作用,其中起优势作用的药物以苦寒药为主.     

半夏泻心汤加减治疗消化性溃疡的临床观察

目的:观察半夏泻心汤加减对消化性溃疡胃十二指肠黏膜的保护和修复作用。方法:将90例消化性溃疡患者随机分为半夏泻心汤组和常规治疗组,半夏泻心汤组45例,常规治疗组45例。观察两组疗效。结果:半夏泻心汤组愈合率77.77%,常规治疗组愈合率73.33%,两组愈合率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在消化性溃疡治疗过程中,半夏泻心汤通过寒热并用、补泻兼施起到综合调节的作用,进而促进溃疡愈合,复发率低,毒副作用小。     

半夏泻心汤联合莫沙必利治疗功能性消化不良疗效 及对患者血浆胃动素水平的影响

摘要 目的:探讨半夏泻心汤联合莫沙必利治疗功能性消化不良（FD）的临床疗效及其对患者血浆胃动素水平的影响。方法:选择98例FD患者为研究对象,随机分为两组,每组49例。对照组患者予莫沙必利治疗,观察组在此基础上联合应用半夏泻心汤治疗,比较两组患者临床疗效及治疗前后中医症状积分、血浆胃动素水平的变化。结果:观察组治疗后总有效率较对照组明显升高（93.88%和79.59%）,差异有统计学意义（P＜0.05）;观察组患者治疗后胃脘胀满、纳差、嗳气、恶心呕吐等症状积分分别为（1.4±0.7）分、（1.4±0.4）分、（1.1±0.2）分、（0.9±0.3）分,对照组分别为（2.5±0.8）分、（2.6±0.6）分、（1.7±0.3）分、（1.7±0.3）分,明显低于治疗前,且低于对照组 (P＜0.05);血清胃动素水平在两组患者均升高明显,且其水平在观察组明显高于对照组（P＜0.05）。结论:半夏泻心汤联合莫沙比利对FD患者有较好的治疗作用,可增加胃动素的释放,进而明显改善患者临床症状,提高临床疗效。     

半夏泻心汤对幽门螺杆菌毒力因子影响的实验研究

目的：通过检测半夏泻心汤对幽门螺杆菌主要毒力因子CAGA、VacA和y-GGT的mRNA表达量的影响,探求半夏泻心汤抗幽门螺杆菌的作用机制。方法：采用琼脂稀释法进行抑菌实验,观察半夏泻心汤对幽门螺杆菌的抑菌效果;运用分子生物学技术RT—PCR检测半夏泻心汤对幽门螺杆菌的主要毒力因子CAGA、VacA和y-GGT的mRNA表达量的影响．结果：半夏泻心汤对幽门螺杆菌的最低抑菌浓度即MIC值为25mg／mL;受试幽门螺杆菌的主要毒力因子CAGA、VacA和y-GGT的mRNA表达量在半夏泻心汤的影响下均明显下调。结论：半夏泻心汤抗幽门螺杆菌相关性胃肠道疾病的作用机制与半夏泻心汤时幽门螺杆菌的直接抑制作用以及对其主要毒力因子CAGA、VacA、y-GGT的毒力作用的削弱密切相关。     

半夏泻心汤联合腹针治疗胃食管反流病的临床疗效观察

目的：探究对胃食管反流病患者应用半夏泻心汤联合腹针进行治疗的临床效果。方法：选自本院2010年-2012年收治的胃食管反流病患者共100例,以随机的方式分为对照组与观察组,每组50例。对照组患者接受半夏泻心汤加味进行治疗,观察组患者则在对照组患者接受治疗基础上联用腹针。结果：相对于对照组患者,观察组患者的临床治疗效果更具有优越性,对比具有统计学意义（P〈0.05）。结论：对胃食管反流病患者应用半夏泻心汤联合腹针进行治疗能够有极为突出的临床治疗效果。     

半夏泻心汤加味治疗寒热错杂证慢性萎缩性胃炎的疗效观察

目的：探讨半夏泻心汤加味治疗寒热错杂证慢性萎缩性胃炎的临床疗效。方法：80例门诊及住院寒热错杂证CAG患者80例随机分为两组,观察组40例患者给服经验方半夏泻心汤;对照组40例给予西医常规治疗,维酶素片7片/次,猴头健胃灵胶囊4片/次,3次/d。两组均连续治疗12周后复查胃镜以判断疗效。结果：两组患者治疗后临床症状均有不同程度的改善（P<0.05或0.01）,其中观察组胃脘痞满、隐痛、嗳气等症状改善较对照组更加显著（P<0.05）;观察组治愈率、有效率分别为52.5%、90.0%,较对照组明显提高（P均<0.05）。结论：半夏泻心汤加味治疗寒热错杂证慢性萎缩性胃炎疗效理想,值得临床推荐应用。     

半夏泻心汤治疗胃食道反流病的临床观察

目的：探讨半夏泻心汤治疗胃食道反流疗效及应用价值。方法：选择我院治疗的胃食道反流患者116例作为研究对象,采取随机数字表法分为观察组和对照组,每组58例,对照组给予西医常规治疗,观察组在对照组基础上联合半夏泻心汤治疗,观察两组临床疗效。结果：观察组患者总有效率高于对照组,经统计学分析比较,差异具有统计学意义（P〈0.05）。观察组治疗后泛酸、烧心、胸痛症状积分降低程度优于对照组,经统计学分析比较,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：采用半夏泻心汤治疗胃食道反流病疗效可靠,明显改善患者临床症状及体征,值得在临床上大力推广使用。